《妊娠生物化学检验》PPT课件

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鞘磷脂是肺表面活性物质的次要 成分,几乎所有鞘磷脂都来自于 不成熟的肺。
羊水L/S常随妊娠期延长而增 加,与胎儿肺成熟度密切相关。
L/S>2.0、DSPC>5mg/L提 示肺成熟。
母亲有糖尿病,L/S>3、 DSPC>10 mg/L, 才提示肺成 熟。
在多胎妊娠,对每个胎儿
羊膜腔均应取样。
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• 肺成熟度组合试验
脐血/静脉血胆红素
60%的足月胎儿及80%的早产胎儿可出现一过性 高胆红素血症。
出生后第1天内血清胆红素>50mg/L,或血清胆 红素每天升高>50mg/L,均应寻找病理原因。
2. 母体血清蛋白及肝功能变化
总蛋白可↓1g/L α1、α2及β-球蛋白则缓慢逐渐↑ IgG逐渐↓,IgD ↑ 肝脏合成转运蛋白增多: 皮质醇结合球蛋白↑ 甲状腺素结合球蛋白↑ 性激素结合球蛋白↑ 肝功能实验:ALP ↑2倍多
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3.母体肾功能的改变
肾血浆流量及GFR增加; 尿素及肌酐浓度将轻度增加; 血清尿酸浓度水平高于非妊娠期; 孕妇肾糖阈降低可导致糖尿。 孕妇及胎儿代谢产物增加
游离hCGα亚基 游离hCGβ亚基 游离的缺口型hCG
α和β亚基组成。
存在形式:未修饰hCG二聚体降解物。
清除:肝脏和肾脏进行。
作用:在妊娠的前几周维持卵巢黄体的分泌功能,以支
持早期胚胎发育的需要。
人类绒毛膜促性腺 激素蛋白结构示意图
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➢分泌动态 自末次月经第一天算起约40天hCG迅速增加, 孕8~10周达高峰,12周后迅速下降,直至分娩末期一 直保持低水平;约产后5~6天转阴性。 ➢生物活性 维持黄体继续发育,黄体肿大,甾体激素分 泌增加 ,有利于妊娠的继续。
胚胎最先产生胚胎型血红蛋白。 随后被胎儿血红蛋白(HbF)取代。 第1个三月期末HbF可升高至90%左右,其余10%为 HbA。 第36周后HbF下降。 HbF对氧的亲和力较HbA为高。
5. 胆红素
胎儿循环中的胆红素浓度均较低。 存在快速有效的跨胎盘胆红素转移机制。
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第二节 常用妊娠期相关疾病的生物化学检测指标
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2)人类胎盘催乳素(HPL)
产生 合体滋养层细胞 结构 单链多肽类激素,含190个氨基酸残基
MW 22.279 kD 与生长激素有96%同源性。 与催乳素有67%同源性。
分泌动态 受孕后3周即可在绒毛内测出,孕5~8 周用放免法在母血内测出hPL,随妊娠进展hPL持续 增加至妊娠末期母血中hPL浓度与胎盘大小成正比。 作用 催乳 代谢调节 促进生长 促黄体生成

血浆皮质醇↑
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• 甲状旁腺素
妊娠早期孕妇血浆PTH水平降低,妊娠中晚期逐 渐升高。
• 甲状腺激素甲状腺功能处于正常状态
hCG↑具TSH样活性
→→ → E2↑
甲状腺分泌T3、T4 ↑ 肝合成TBG ↑
FT3、FT4不变
• 其他 催乳素分泌增加达10倍。 黄体生成素(LH)和卵泡刺激素( FSH) 分泌↓。 甲状腺激素(TSH)基本维持不变。
促红细胞生成 刺激醛固酮分泌。
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3)胎盘分泌的甾体激素
种类:孕酮和雌激素。 产生:孕酮:胎盘利用母体的胆固醇合成。
雌激素:胎盘从中间产物17-羟孕酮合成 E1、E2、E3。 作用:维持子宫内膜的正常形态和功能、充足血 供并为分娩做准备。
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(三)羊水(amniotic fluid) 充满于羊膜内的液体
4.母体脂代谢变化
妊娠期由于激素水平变化 →导致妊娠期发生高脂血症
5.母体糖代谢变化
妊娠妇女常发生糖尿症 妊娠极早期就可出现尿糖排泄量增加
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6.妊娠期的母体内分泌改变
• 孕酮
妊娠早期,人类绒毛膜促性腺激素刺激黄体产生 孕酮,中晚期,主要由胎盘产生足够孕酮。
• 肾上腺皮质激素
皮质醇结合球蛋白↑ 皮质醇代谢清除↓
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病例分析
患者孕70天,尿HCG(+),B超显示宫内未见胎 囊(70天正常能见,一般还能胎芽),一侧输卵管增 粗,不能排除宫外孕,血HCG6756ng/ml,三日后复 查HCG98456ng/ml,又三日复查125446ng/ml,B超显 示宫外孕,可见心跳,行腹腔镜手术治疗。
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二、雌三醇(E3)
低E3水平:妊娠毒血症、无脑畸形、胎盘 硫酸酯酶缺乏、唐氏 综合征、18三体综合征等。 3天内E3水平平均下降30%~50%预示可能对胎儿产生危害。 母体血清或尿E3超过参考范围的上限提示双胞胎的可能。
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三、胎儿纤维连接蛋白(fFN)
阴道分泌物 fFN检测主要用于检测早产 高危妊娠妇女,高水平的fFN预示即将分娩
妊娠的生物化学检验
Major Objectives
了解 妊娠期母体的代谢改变和内分泌改变; 妊娠与相关疾病的生物化学检验。
熟悉 正常妊娠和异常妊娠;孕妇的健康评价; 新生儿代谢特点。
掌握 正常和异常妊娠的生物化学检验; 胎儿的健康评价;新生儿疾病筛查。
重点 母体血清及尿液hCG的检测; 母体血清hPL 的检测;羊水的检测。
FSI>0.47为肺成熟。 实验必须在20~25℃ 下进行,温度过高或过低 都会影响泡沫的稳定性。
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3.荧光偏振(FPA)
用已二烯(DPH)作为荧光染料, 结果以荧光偏振值报告。
用NBD-PC或PC-16 ,结果以磷 脂/清蛋白(mg/g)报告。
FPA是目前最普遍使用的定量方 法,比测定L/S比率更加精确。
荧光偏振值<260mP提 示肺明显成熟,>290mP提 示肺不成熟。
羊水中血液污染>0.5%,
会降低P值结果。以<230mP
为明显成熟、>290mP为不
成熟 。
磷脂/清蛋白(mg/g)临
界值是70mg/g清蛋白 。
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4. 薄层小体计数
表面活性物质颗粒从2~20fl 之间。使用血细胞计数仪的 血小板通道,可以对羊水中 薄层小体微粒直接进行计数 测定。
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3.肺功能
胎儿肺脏发育包含两个方面
胎儿肺脏的形态学发育 肺表面活性物质的合成、储存和释放。
肺表面活性物主要有
高饱和脂肪酸卵磷脂。 磷脂酰甘油。 表面活性蛋白:可加速使表面活性物在肺泡气-液界面
新成单分子层。
表面活性物可避免末端呼吸树的塌陷,减少呼吸起始相 使肺扩张所需压力。
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4.血红蛋白
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(二)胎儿生物化学变化
1.肝功能
胎肝含有大量的造血细胞。 妊娠后极早期胎肝是主要的造血器官。 卵黄囊及胎肝产生甲胎蛋白。 胎儿肝脏发育不完全成熟→新生儿可出现生理性黄疸。
2.肾功能
胎儿水、电解质平衡主要靠胎盘完成。 胎儿虽然肾功能不完善,也不会出现水、电解质紊乱。 胎儿出生后,肾脏功能就完全成熟。
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2.胎盘激素妊娠期雌激素75%~95%来源于胎儿-胎盘复合体
蛋白类激素 hCG、胎盘催乳素(placental lactogen, PL)等 甾体类激素(steroids hormone) 孕酮(P)、雌酮(E1)、雌二醇(E2)和雌三醇(E3) 等
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1)人类绒毛膜促性腺激素
产生:合体滋养层细胞。 结构:糖蛋白 MW:37.9 kD
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不转运
大多数蛋白质;甲状腺素;母体IgM、 IgA;母体和胎儿红细胞
限制性被动运 输
被动运输
跨细胞膜主动 运输
受体介导的细 胞摄取
游离甾体类化合物;甾体类硫酸盐; 游离脂肪酸 分子量≤5kD、脂溶性物质; 氧、二氧化碳;钠、氯、尿素、乙醇 等 葡萄糖;多种氨基酸;Ca2+
母体IgG、胰岛素、低密度脂蛋白
异位妊娠诊断
异位妊娠妇女与同孕龄妇女相比,hCG水平 较低。只有50%的异位妊娠妇女尿妊娠实验为 阳性。
48小时内血清hCG升高幅度<60%。 异位妊娠妇女血清血清孕酮水平较低
滋养层疾病诊断
葡萄胎患者尿hCG可达到300000U/日,术后1 月内尿hCG逐渐下降,90%的患者在3个月内尿 hCG可变为阴性。葡萄胎清除不全、绒癌发生 等患者,尿hCG在下降后又继续上升。
多胎妊娠、无脑畸形和脊柱裂等。
3.羊水功能
➢ 保护胎儿 利于胎儿活动、缓冲可能的伤害并维持恒温。
➢ 保护母体 减少胎动引起的不适感 4.羊水检查 了解胎儿性别、胎儿成熟度、诊断某些遗传性疾
病,羊水检查在临床应用越来越多。
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二、妊娠期母体及胎儿生物化学改变
妊娠期母体主要代谢改变是血容量、血液成分及生物化学改变, 肾脏功能也发生相应改变。
肺成熟度组合试验同时测定L/S 比率、饱和卵磷脂在总卵磷脂中 的比率以及磷脂酰甘油和磷脂酰 肌醇在总磷脂的比率。
通过冷丙酮沉淀法将高度饱和 的卵磷脂与低饱和卵磷脂分离, 以便确定饱和的卵磷脂在总卵磷 脂中的比率。
L/S>2.0、PG在丙酮沉 淀部分中所占比率>3%提示 肺成熟 。
将酸性PG和PI从卵磷脂 中分离出来,其提供的L/S
卵磷脂/鞘磷脂比值(L/S) 双饱和磷脂酰胆(DSPC)
磷脂酰甘油 泡沫稳定性实验
荧光偏振法 薄层小体计数
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标本的收集和处理
超声导引经腹壁或阴道穹隆膜穿刺羊膜腔 采集羊水
离心除去残渣
立即测定
4℃冷藏
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1.羊水卵磷脂/鞘磷脂比率和双饱和磷脂 酰胆碱
肺表面活性物质的最主要活性 成分是DSPC,约占卵磷脂的 85%。在羊水中的浓度随着妊 娠期的延长而增加。
比率更加准确。
PG>2.0μmol/L时,提
示胎儿成熟 。
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2.泡沫稳定性指数
羊水中肺表面活性物质达 到足够浓度时,能够形成一 个高度稳定的膜,从而支撑 泡沫的架构。但乙醇能将该 类物质从膜中除去。
在固定体积的未稀释 羊水中,逐渐增加乙醇量并 混合,在羊水能支持泡沫稳 定的情况下,记录所需乙醇 的最大体积。
当fFN为阴性(≤50ng/ml)时,在此后 7~14天生产的可能性极小,fFN检测的阴性
预示值高达99%。
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四、胎肺成熟度检测(FLM)
FLM主要通过生物化学或生 物物理的方法检测来源于胎 肺的表面活性物质成分。主 要包括:用生物化学方法对 羊水特异性的表面活性剂相 关磷脂定量,或用生物物理 方法分析羊水中表面活性成 分的表面活性效应。
1.羊水的来源
早期:由母体血清通过胎膜进入羊膜腔的透析液,类似
于细胞外液。
中期:胎儿尿可能为羊水重要来源。钠离子浓度和渗透压降
低尿素、肌酐和尿酸浓度增加羊水表面活性蛋白质增加。 2.羊水量 随妊娠时间而不同
10周——30ml 20周——40ml 38周——1000 足月——800ml
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➢ 羊水过少:子宫内膜生长迟缓和胎儿输尿管异常。 ➢ 羊水过多:妊娠期糖尿病、严重的Rh血型不相容、胎儿食管闭锁、
难点 胎儿肺成熟度评价实验;新生儿筛查。
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第一节 正常妊娠及相关生物化学变化 第二节 常用妊娠期相关疾病的生物化学检测指标 第三节 妊娠期相关疾病的生物化学诊断
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一、正常妊娠
1. 胚胎和胎儿的发育
2. 胎盘
3. 羊水的组成
(一) 胚胎和胎儿的发育
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妊娠分期
孕早期:0~12周 孕中期:13~27周 孕晚期:28~出生
≥55 000/μl(离心标本) 或≥60 000/μl(未离心标 本) ,提示肺成熟。
超过1%的血液污染 (V/V)能使薄层小体计数 结果降低20% 。
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Baidu Nhomakorabea
5. 胆红素
羊水胆红素
通过间断性采集羊水并检测羊水胆红素来监测胎儿 是否发生溶血性疾病。
在450nm波长下测定羊水的吸光度,吸光度的增 加幅度(ΔA450)与孕周及溶血疾病的程度具有较 好的相关性。
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(一)母体生物化学改变
1.血液学的变化 • 血容量 血容量平均增加45%,血液稀释
• 血液成分 红细胞生成增加,血红蛋白、红细 胞计数和血细胞比积降低,Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ和Ⅹ因子 增加,凝血酶原、Ⅴ和Ⅻ因子不变,Ⅺ和XⅢ因子
反而呈轻度下降
• 血沉加快(纤维蛋白原、球蛋白增加) • 血栓栓塞危险增加
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母体血清诊断指标 羊水穿刺
Rh

胎 儿




发 育 及





遗 传 异 常




的 确 定
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一、hCG与孕酮
妊娠诊断
确定妊娠最重要的标志是检测血液或尿hCG。 妊娠期前8周,母体血清hCG浓度呈对数上升,血清 hCG峰值在妊娠8~10周时出现。 测定血液hCG β亚单位可早期诊断妊娠。
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孕早期:胚胎发育 器官形成
10w左右:胎儿形成
孕中期:器官逐渐成熟 孕晚期:器官完全成熟
第一三月期 第二三月期 第三三月期
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(二)胎盘(placenta)
是胎儿与母体之间物质交换的重要器官,是胚胎与母体组织的结合体, 由羊膜、叶状绒毛与底蜕膜构成。具有多种功能。
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1.胎盘的功能
胎盘具有物质交换、代谢、分泌激素、防御以及合成 功能,是维持胎儿在子宫内营养发育的重要器官。
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