《妊娠生物化学检验》PPT课件

FSI＞0.47为肺成熟。 实验必须在20~25℃ 下进行，温度过高或过低 都会影响泡沫的稳定性。
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3.荧光偏振(FPA)
用已二烯（DPH）作为荧光染料， 结果以荧光偏振值报告。
用NBD-PC或PC-16 ，结果以磷 脂/清蛋白（mg/g）报告。
FPA是目前最普遍使用的定量方 法，比测定L/S比率更加精确。
当fFN为阴性（≤50ng/ml）时，在此后 7~14天生产的可能性极小，fFN检测的阴性
预示值高达99%。
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四、胎肺成熟度检测（FLM）
FLM主要通过生物化学或生 物物理的方法检测来源于胎 肺的表面活性物质成分。主 要包括：用生物化学方法对 羊水特异性的表面活性剂相 关磷脂定量，或用生物物理 方法分析羊水中表面活性成 分的表面活性效应。
4.母体脂代谢变化
妊娠期由于激素水平变化 →导致妊娠期发生高脂血症
5.母体糖代谢变化
妊娠妇女常发生糖尿症 妊娠极早期就可出现尿糖排泄量增加
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6.妊娠期的母体内分泌改变
• 孕酮
妊娠早期，人类绒毛膜促性腺激素刺激黄体产生 孕酮，中晚期，主要由胎盘产生足够孕酮。
• 肾上腺皮质激素
皮质醇结合球蛋白↑ 皮质醇代谢清除↓
难点 胎儿肺成熟度评价实验；新生儿筛查。
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第一节 正常妊娠及相关生物化学变化 第二节 常用妊娠期相关疾病的生物化学检测指标 第三节常妊娠
1. 胚胎和胎儿的发育
2. 胎盘
3. 羊水的组成
（一） 胚胎和胎儿的发育
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妊娠分期
孕早期：0~12周 孕中期：13~27周 孕晚期：28~出生
≥55 000/μl（离心标本） 或≥60 000/μl（未离心标 本） ，提示肺成熟。
超过1%的血液污染 （V/V）能使薄层小体计数 结果降低20% 。
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5. 胆红素
羊水胆红素
通过间断性采集羊水并检测羊水胆红素来监测胎儿 是否发生溶血性疾病。
在450nm波长下测定羊水的吸光度，吸光度的增 加幅度（ΔA450）与孕周及溶血疾病的程度具有较 好的相关性。
肺成熟度组合试验同时测定L/S 比率、饱和卵磷脂在总卵磷脂中 的比率以及磷脂酰甘油和磷脂酰 肌醇在总磷脂的比率。
通过冷丙酮沉淀法将高度饱和 的卵磷脂与低饱和卵磷脂分离， 以便确定饱和的卵磷脂在总卵磷 脂中的比率。
L/S>2.0、PG在丙酮沉 淀部分中所占比率>3%提示 肺成熟 。
将酸性PG和PI从卵磷脂 中分离出来，其提供的L/S
脐血/静脉血胆红素
60%的足月胎儿及80%的早产胎儿可出现一过性 高胆红素血症。
出生后第1天内血清胆红素>50mg/L，或血清胆 红素每天升高>50mg/L，均应寻找病理原因。
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3.肺功能
胎儿肺脏发育包含两个方面
胎儿肺脏的形态学发育 肺表面活性物质的合成、储存和释放。
肺表面活性物主要有
高饱和脂肪酸卵磷脂。 磷脂酰甘油。 表面活性蛋白:可加速使表面活性物在肺泡气-液界面
新成单分子层。
表面活性物可避免末端呼吸树的塌陷，减少呼吸起始相 使肺扩张所需压力。
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4.血红蛋白
孕早期：胚胎发育 器官形成
10w左右：胎儿形成
孕中期：器官逐渐成熟 孕晚期：器官完全成熟
第一三月期 第二三月期 第三三月期
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（二）胎盘（placenta）
是胎儿与母体之间物质交换的重要器官，是胚胎与母体组织的结合体， 由羊膜、叶状绒毛与底蜕膜构成。具有多种功能。
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1.胎盘的功能
胎盘具有物质交换、代谢、分泌激素、防御以及合成 功能，是维持胎儿在子宫内营养发育的重要器官。
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血浆皮质醇↑
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• 甲状旁腺素
妊娠早期孕妇血浆PTH水平降低，妊娠中晚期逐 渐升高。
• 甲状腺激素甲状腺功能处于正常状态
hCG↑具TSH样活性
→→ → E2↑
甲状腺分泌T3、T4 ↑ 肝合成TBG ↑
FT3、FT4不变
• 其他 催乳素分泌增加达10倍。 黄体生成素(LH)和卵泡刺激素( FSH) 分泌↓。 甲状腺激素（TSH）基本维持不变。
2. 母体血清蛋白及肝功能变化
总蛋白可↓1g/L α1、α2及β-球蛋白则缓慢逐渐↑ IgG逐渐↓，IgD ↑ 肝脏合成转运蛋白增多: 皮质醇结合球蛋白↑ 甲状腺素结合球蛋白↑ 性激素结合球蛋白↑ 肝功能实验:ALP ↑2倍多
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3.母体肾功能的改变
肾血浆流量及GFR增加； 尿素及肌酐浓度将轻度增加； 血清尿酸浓度水平高于非妊娠期； 孕妇肾糖阈降低可导致糖尿。 孕妇及胎儿代谢产物增加
1.羊水的来源
早期：由母体血清通过胎膜进入羊膜腔的透析液，类似
于细胞外液。
中期：胎儿尿可能为羊水重要来源。钠离子浓度和渗透压降
低尿素、肌酐和尿酸浓度增加羊水表面活性蛋白质增加。 2.羊水量 随妊娠时间而不同
10周——30ml 20周——40ml 38周——1000 足月——800ml
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➢ 羊水过少：子宫内膜生长迟缓和胎儿输尿管异常。 ➢ 羊水过多：妊娠期糖尿病、严重的Rh血型不相容、胎儿食管闭锁、
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病例分析
患者孕70天，尿HCG（+），B超显示宫内未见胎 囊（70天正常能见，一般还能胎芽），一侧输卵管增 粗，不能排除宫外孕，血HCG6756ng/ml，三日后复 查HCG98456ng/ml，又三日复查125446ng/ml，B超显 示宫外孕，可见心跳，行腹腔镜手术治疗。
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二、雌三醇（E3）
比率更加准确。
PG＞2.0μmol/L时，提
示胎儿成熟 。
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2.泡沫稳定性指数
羊水中肺表面活性物质达 到足够浓度时，能够形成一 个高度稳定的膜，从而支撑 泡沫的架构。但乙醇能将该 类物质从膜中除去。
在固定体积的未稀释 羊水中，逐渐增加乙醇量并 混合，在羊水能支持泡沫稳 定的情况下，记录所需乙醇 的最大体积。
母体血清诊断指标 羊水穿刺
Rh
分
胎 儿
血
析
型
肺
发 育 及
不
脏
合
的
成
遗 传 异 常
管
熟
理
度
的 确 定
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一、hCG与孕酮
妊娠诊断
确定妊娠最重要的标志是检测血液或尿hCG。 妊娠期前8周，母体血清hCG浓度呈对数上升，血清 hCG峰值在妊娠8~10周时出现。 测定血液hCG β亚单位可早期诊断妊娠。
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多胎妊娠、无脑畸形和脊柱裂等。
3.羊水功能
➢ 保护胎儿 利于胎儿活动、缓冲可能的伤害并维持恒温。
➢ 保护母体 减少胎动引起的不适感 4.羊水检查 了解胎儿性别、胎儿成熟度、诊断某些遗传性疾
病,羊水检查在临床应用越来越多。
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二、妊娠期母体及胎儿生物化学改变
妊娠期母体主要代谢改变是血容量、血液成分及生物化学改变， 肾脏功能也发生相应改变。
低E3水平：妊娠毒血症、无脑畸形、胎盘 硫酸酯酶缺乏、唐氏 综合征、18三体综合征等。 3天内E3水平平均下降30%~50%预示可能对胎儿产生危害。 母体血清或尿E3超过参考范围的上限提示双胞胎的可能。
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三、胎儿纤维连接蛋白（fFN）
阴道分泌物 fFN检测主要用于检测早产 高危妊娠妇女，高水平的fFN预示即将分娩
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2)人类胎盘催乳素（HPL）
产生 合体滋养层细胞 结构 单链多肽类激素，含190个氨基酸残基
MW 22.279 kD 与生长激素有96%同源性。 与催乳素有67%同源性。
分泌动态 受孕后3周即可在绒毛内测出，孕5～8 周用放免法在母血内测出hPL，随妊娠进展hPL持续 增加至妊娠末期母血中hPL浓度与胎盘大小成正比。 作用 催乳 代谢调节 促进生长 促黄体生成
荧光偏振值＜260mP提 示肺明显成熟，＞290mP提 示肺不成熟。
羊水中血液污染>0.5%，
会降低P值结果。以<230mP
为明显成熟、＞290mP为不
成熟 。
磷脂/清蛋白（mg/g）临
界值是70mg/g清蛋白 。
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4. 薄层小体计数
表面活性物质颗粒从2~20fl 之间。使用血细胞计数仪的 血小板通道，可以对羊水中 薄层小体微粒直接进行计数 测定。
卵磷脂/鞘磷脂比值（L/S） 双饱和磷脂酰胆（DSPC）
磷脂酰甘油 泡沫稳定性实验
荧光偏振法 薄层小体计数
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标本的收集和处理
超声导引经腹壁或阴道穹隆膜穿刺羊膜腔 采集羊水
离心除去残渣
立即测定
4℃冷藏
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1.羊水卵磷脂/鞘磷脂比率和双饱和磷脂 酰胆碱
肺表面活性物质的最主要活性 成分是DSPC，约占卵磷脂的 85%。在羊水中的浓度随着妊 娠期的延长而增加。
鞘磷脂是肺表面活性物质的次要 成分，几乎所有鞘磷脂都来自于 不成熟的肺。
羊水L/S常随妊娠期延长而增 加，与胎儿肺成熟度密切相关。
L/S>2.0、DSPC>5mg/L提 示肺成熟。
母亲有糖尿病，L/S>3、 DSPC>10 mg/L, 才提示肺成 熟。
在多胎妊娠，对每个胎儿
羊膜腔均应取样。
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• 肺成熟度组合试验
促红细胞生成 刺激醛固酮分泌。
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3）胎盘分泌的甾体激素
种类：孕酮和雌激素。 产生：孕酮：胎盘利用母体的胆固醇合成。
雌激素：胎盘从中间产物17-羟孕酮合成 E1、E2、E3。 作用：维持子宫内膜的正常形态和功能、充足血 供并为分娩做准备。
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（三）羊水（amniotic fluid） 充满于羊膜内的液体
胚胎最先产生胚胎型血红蛋白。 随后被胎儿血红蛋白（HbF）取代。 第1个三月期末HbF可升高至90%左右，其余10%为 HbA。 第36周后HbF下降。 HbF对氧的亲和力较HbA为高。