常见大肠杆菌菌株的基因型

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大肠杆菌基因型及遗传符号说明系列一DXY

大肠杆菌基因型及遗传符号说明系列一DXY

大肠杆菌基因型及遗传符号说明系列一点击次数:982 作者:佚名发表于:2009-09-27 00:00转载请注明来自丁香园来源:丁香园实验室的一般大肠杆菌拥有4288条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp (基因Ⅷ)。

E.coli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。

利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。

具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。

分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec等1966年提出的命名原则,采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态,除非在基因型上另外注明。

大肠杆菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966):一、一般规则:1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成3个小写斜体字母来表示。

例如:D NA Adenine Methylase→dam。

2、不同的基因座,其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同,其表示方法是在3个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。

例如:Recombination→recA、recB、recC。

3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。

如supE44(sup基因座E的44位突变)。

如果不知道几个等位基因中哪一/几个发生了功能性突变,则用连字符“ -”代替大写字母,如trp-31。

4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。

这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。

其基因符号应与基因座的表示符号明显区别,符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内;质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。

大肠杆菌基因工程菌常用类型

大肠杆菌基因工程菌常用类型

1、大肠杆菌DH5a菌株DH5a是世界上最常用的基因工程菌株之一。

由于DH5α是DNA酶缺陷型菌株,有利于基因克隆,保存质粒,但该菌株的蛋白酶没有缺陷,表达的蛋白容易被降解,因此通常不作为表达菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12、大肠杆菌BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)3、大肠杆菌BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr4、大肠杆菌JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株。

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]5、大肠杆菌TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

细菌菌株基因型及基因符号说明

细菌菌株基因型及基因符号说明

大肠杆菌基因型及遗传符号说明前言:实验室的一般大肠杆菌拥有4288条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp(基因Ⅷ)。

E.coli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。

利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。

具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。

分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec等1966年提出的命名原则,采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态,除非在基因型上另外注明。

大肠杆菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966):一、一般规则:1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成3个小写斜体字母来表示。

例如:DNA Adenine Methylase→dam。

2、不同的基因座,其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同,其表示方法是在3个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。

例如:Recombination→recA、recB、recC。

3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。

如supE44(sup基因座E的44位突变)。

如果不知道几个等位基因中哪一/几个发生了功能性突变,则用连字符“-”代替大写字母,如trp-31。

4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。

这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。

其基因符号应与基因座的表示符号明显区别,符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内;质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。

大肠杆菌菌株类型

大肠杆菌菌株类型

大肠杆菌菌株类型
大肠杆菌有多种菌株类型,其中一些是常用于科研和工业应用的典型菌株,比如DH5a和BL21(DE3)。

此外,大肠杆菌也有一些特殊的病型,这些病型主要根据大肠杆菌的感染性状进行分类,包括肠道致病性的大肠杆菌(EPEC)、肠道产毒素性的大肠杆菌(ETEC)、肠道侵袭性的大肠杆菌(EIEC)、肠道出血性的大肠杆菌(EHEC)和肠集聚性的大肠杆菌(EAEC)。

此外,还有一些新近发现的菌株,如肠产志贺样毒素同时具有一定侵袭力的大肠杆菌(ESIES)。

以上信息仅供参考,如有需要,建议查阅专业生物书籍或文献。

大肠杆菌的基因型-概述说明以及解释

大肠杆菌的基因型-概述说明以及解释

大肠杆菌的基因型-概述说明以及解释1.引言1.1 概述大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌,属于肠道菌群中的重要成员。

它在自然界和人体内广泛存在,并且具有广泛的基因型多样性。

这使得大肠杆菌成为了微生物遗传学和进化生物学领域的研究模型。

在大肠杆菌中,基因型是指该菌株拥有的基因组合和基因的分布情况。

大肠杆菌的基因型可以通过不同的方法进行分类和鉴定。

目前主要的分类方法包括单核苷酸多态性分析、基因片段分析和全基因组测序等。

通过这些方法,我们可以更全面地了解大肠杆菌的基因型组成和种群结构。

大肠杆菌的基因型在其功能和特点方面具有重要意义。

大肠杆菌是一种典型的益生菌,它在人体内具有多种有益作用,包括帮助消化吸收、维持肠道稳定性和参与免疫调节等。

不同基因型的大肠杆菌可能具有不同的功能特点,比如某些基因型可能携带耐药基因或致病因子,导致感染和疾病的发生。

因此,对大肠杆菌基因型的研究有助于我们深入了解其功能机制和生态适应能力。

总之,大肠杆菌作为一种常见的菌株,其基因型具有多样性和重要性。

通过研究大肠杆菌的基因型,我们可以深入探索其功能特点和生态适应能力,进一步促进微生物遗传学和进化生物学的研究。

未来,我们可以通过结合多样的研究方法和技术,进一步挖掘和解析大肠杆菌基因型的奥秘,并探索其在人体健康和疾病中的作用。

文章结构是指文章部分之间的逻辑关系和组织,它有助于读者理解文章的内容和思路。

本文的结构如下:1. 引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的2. 正文2.1 大肠杆菌的基因型分类2.2 大肠杆菌基因型的功能和特点3. 结论3.1 大肠杆菌基因型的重要性3.2 未来研究的方向文章结构部分是为了描述本文的组织结构,它有助于读者了解文章的内容安排和逻辑关系。

在本文中,我们首先介绍引言部分,包括概述、文章结构和目的。

在概述中,我们简要介绍了大肠杆菌的基因型。

在文章结构中,我们明确了本文的结构和章节安排,帮助读者理解文章的整体框架。

细菌基因型及其基因符号1102

细菌基因型及其基因符号1102

大肠杆菌基因型及遗传符号说明前言:实验室的一般大肠杆菌拥有4288条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp(基因Ⅷ)。

E.coli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。

利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。

具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。

分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec等1966年提出的命名原则,采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态,除非在基因型上另外注明。

大肠杆菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966):一、一般规则:1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成3个小写斜体字母来表示。

例如:DNA Adenine Methylase→dam。

2、不同的基因座,其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同,其表示方法是在3个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。

例如:Recombination→recA、recB、recC。

3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。

如supE44(sup基因座E的44位突变)。

如果不知道几个等位基因中哪一/几个发生了功能性突变,则用连字符“-”代替大写字母,如trp-31。

4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。

这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。

其基因符号应与基因座的表示符号明显区别,符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内;质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。

常用大肠杆菌感受态的区别

常用大肠杆菌感受态的区别

常用大肠杆‎菌感受态J‎M109,DH5a,BL21等‎的区别1:DH5a菌‎株DH5a是‎一种常用于‎质粒克隆的‎菌株。

E.coli DH5a在‎使用pUC‎系列质粒载‎体转化时,可与载体编‎码的β-半乳糖苷酶‎氨基端实现‎α-互补。

可用于蓝白‎斑筛选鉴别‎重组菌株。

基因型:F-,φ80dl‎a cZΔM‎15,Δ(lacZY‎A-argF)U169,deoR,recA1‎,endA1‎,hsdR1‎7(rk-,mk+),phoA,supE4‎4,λ-,thi-1,gyrA9‎6,relA1‎2:BL21(DE3) 菌株该菌株用于‎高效表达克‎隆于含有噬‎菌体T7启‎动子的表达‎载体(如pET系‎列)的基因。

T7噬菌体‎R NA聚合‎酶位于λ‎噬菌体DE‎3区,该区整合于‎B L21的‎染色体上。

该菌适合表‎达非毒性蛋‎白。

基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)3:BL21(DE3) pLysS‎菌株该菌株含有‎质粒pLy‎s S,因此具有氯‎霉素抗性。

PLysS‎含有表达T‎7溶菌酶的‎基因,能够降低目‎的基因的背‎景表达水平‎,但不干扰目‎的蛋白的表‎达。

该菌适合表‎达毒性蛋白‎和非毒性蛋‎白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS‎,Camr4:JM109‎菌株该菌株在使‎用pUC系‎列质粒载体‎进行DNA‎转化或用M‎13 phage‎载体进行转‎染时,由于载体D‎N A产生的‎L acZa‎多肽和JM‎09编码的‎L acZΔ‎M15进行‎α-互补,从而显示β‎-半乳糖苷酶‎活性,由此很容易‎鉴别重组体‎菌株基因型:recA1‎,endA1‎,gyrA9‎6,thi-1,hsdR1‎7,supE4‎4,relA1‎,Δ(lac-proAB‎)/F’[traD3‎6,proAB‎+,lacIq‎,lacZΔ‎M15]5:TOP10‎菌株该菌株适用‎于高效的D‎N A克隆和‎质粒扩增,能保证高拷‎贝质粒的稳‎定遗传。

大肠杆菌克隆菌株TOP10和DH5α的比较

大肠杆菌克隆菌株TOP10和DH5α的比较

大肠杆菌克隆菌株TOP10和DH5α的比较大肠杆菌克隆菌株是一种经过基因工程改造的细菌,可以用于转化和扩增外源DNA,如质粒、文库或表达载体。

不同的克隆菌株具有不同的特性,如转化效率、抗性、突变、表达水平等。

本文将比较两种常见的大肠杆菌克隆菌株:TOP10和DH5α,分析它们的优缺点和价格。

TOP10的优缺点TOP10是一种来源于大肠杆菌K12的菌株,具有mcr/mrr突变,可以克隆甲基化的DNA,如真核基因组DNA。

它的基因型如下:•Top10:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupGTOP10的优点主要有以下几个方面:•高转化效率:TOP10具有高达10^9 cfu/µg DNA的转化效率,这意味着它可以获得更多的重组菌株,提高克隆的成功率。

•低突变率:TOP10具有recA1突变,可以抑制同源重组,保持质粒的序列完整性。

•高稳定性:TOP10具有endA1突变,可以阻断内切核酸酶的表达,减少质粒DNA的降解。

它还可以在不含抗生素的培养基中维持质粒的复制。

•广泛的耐药性:TOP10具有多种抗性基因,如rpsL (StrR)、nupG等,可以使用多种抗生素进行筛选。

•高数据一致性:TOP10具有高度的基因组稳定性和质粒保留性,可以保证实验的可重复性和可靠性。

TOP10的缺点主要有以下几个方面:•高成本:TOP10的价格相对较高,可能超出一些实验室的预算。

•低表达水平:TOP10不适合用于蛋白表达,因为它缺乏一些必要的表达因子,如DE3溶原菌、T7 RNA聚合酶等。

•低兼容性:TOP10不适合用于一些特殊的载体,如含有重复序列的慢病毒载体和其它逆转录病毒载体,因为它可能会发生质粒的重组或缺失。

DH5α的优缺点DH5α是一种由Messing在1975年从大肠杆菌K12菌株中构建而成的菌株,具有mcr/mrr突变,可以克隆甲基化的DNA,如真核基因组DNA。

宿主菌

宿主菌

菌株名称说明JM109甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选DH5a甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选XL1-Blue甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选,生长速度稍慢,容易制备感受态细胞XL10-gold甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选,更适合大载体的高效转化,生长速度快Stbl3甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选,对于不稳定的片段克隆效果好一些常见大肠杆菌菌株的基因型1:DH5a 菌株常用于质粒克隆的菌株。

使用pUC 系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR ,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA ,sup 2:BL21(DE3) 菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET 系列)的基因。

T7噬菌体RNA 聚合酶位于λ 噬菌体基因型:F-,ompT , hsdS (rBB-mB -),gal , dcm (DE3)3:BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒pLysS ,因此具有氯霉素抗性。

PLysS 含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达基因型:F-,ompT hsdS (rBB-mB -),gal , dcm (DE3,pLysS ,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC 系列质粒载体进行DNA 转化或用M13 phage 载体进行转染时,由于载体DNA 产生的LacZa 多肽基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi -1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac -proAB )/F’[traD36,proAB+,5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA 克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC), φ80 ,lacZΔM15,△lac Ⅹ74, recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)76976:HB101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB -),recA13,ara -14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,l7:Top10F'菌株带lacIq ,需加IPTG 诱导表达克隆于lac 启动子后的外源基因,用于蓝白斑筛选时,需加入IPTG 和 X-Gal 。

大肠杆菌基因型及遗传符号说明

大肠杆菌基因型及遗传符号说明

整理by raimiDICP-1816 菌株管理档案1——细菌菌株基因型及基因符号说明 1大肠杆菌基因型及遗传符号说明前言:实验室的一般大肠杆菌拥有4288 条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp(基因Ⅷ)。

E.coli 基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。

利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。

具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。

分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec 等1966 年提出的命名原则,采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态,除非在基因型上另外注明。

大肠杆菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966):一、一般规则:1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成3 个小写斜体字母来表示。

例如:DNA Adenine Methylase→dam。

2、不同的基因座,其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同,其表示方法是在3 个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。

例如:Recombination→recA、recB、recC。

3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。

如supE44(sup 基因座E 的44 位突变)。

如果不知道几个等位基因中哪一/几个发生了功能性突变,则用连字符“-”代替大写字母,如trp-31。

4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。

这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。

其基因符号应与基因座的表示符号明显区别,符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内;质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。

如何鉴定大肠杆菌BL21(DE3)和DH5α、DH10B

如何鉴定大肠杆菌BL21(DE3)和DH5α、DH10B

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)3:BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,ara Δ139Δ(ara-leu)7697,galU ,galK ,rps,(Strr) endA1,nupG6:HB101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1proetin23 (站内联系TA)BL21是原核表达菌株,DH5a一般用于克隆,如果你接单菌落的话,过夜培养后,你会看到BL21的菌落长的比DH5a大。

大肠杆菌基因型及遗传符号说明

大肠杆菌基因型及遗传符号说明

大肠杆菌基因型及遗传符号说明前言:实验室的一般大肠杆菌拥有4288条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp(基因Ⅷ)。

E.coli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。

利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。

具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。

分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec等1966年提出的命名原则,采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态,除非在基因型上另外注明。

大肠杆菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966):一、一般规则:1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成3个小写斜体字母来表示。

例如:DNA Adenine Methylase→dam。

2、不同的基因座,其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同,其表示方法是在3个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。

例如:Recombination→recA、recB、recC。

3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。

如supE44(sup基因座E的44位突变)。

如果不知道几个等位基因中哪一/几个发生了功能性突变,则用连字符“-”代替大写字母,如trp-31。

4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。

这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。

其基因符号应与基因座的表示符号明显区别,符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内;质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。

宿主菌

宿主菌

菌株名称说明JM109甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选DH5a甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选XL1-Blue甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选,生长速度稍慢,容易制备感受态细胞XL10-gold甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选,更适合大载体的高效转化,生长速度快Stbl3甘油菌,常规质粒制备的宿主菌,可进行蓝白斑筛选,对于不稳定的片段克隆效果好一些常见大肠杆菌菌株的基因型1:DH5a 菌株常用于质粒克隆的菌株。

使用pUC 系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR ,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA ,sup 2:BL21(DE3) 菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET 系列)的基因。

T7噬菌体RNA 聚合酶位于λ 噬菌体基因型:F-,ompT , hsdS (rBB-mB -),gal , dcm (DE3)3:BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒pLysS ,因此具有氯霉素抗性。

PLysS 含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达基因型:F-,ompT hsdS (rBB-mB -),gal , dcm (DE3,pLysS ,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC 系列质粒载体进行DNA 转化或用M13 phage 载体进行转染时,由于载体DNA 产生的LacZa 多肽基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi -1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac -proAB )/F’[traD36,proAB+,5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA 克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC), φ80 ,lacZΔM15,△lac Ⅹ74, recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)76976:HB101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB -),recA13,ara -14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,l7:Top10F'菌株带lacIq ,需加IPTG 诱导表达克隆于lac 启动子后的外源基因,用于蓝白斑筛选时,需加入IPTG 和 X-Gal 。

常用几种感受态区别

常用几种感受态区别

常用大肠杆菌感受态JM109,DH5a,BL21的区别1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)3:BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697, galU ,galK ,rps, (Strr) endA1, nupG6:HB101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-17:M110或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。

常见大肠杆菌感受态的特点和用途解析

常见大肠杆菌感受态的特点和用途解析

1:DH5a 菌株DH5a 是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用 pUC 系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argFU169, deoR , recA1, endA1,hsdR17(rk-, mk+, phoA , supE44, λ-, thi-1, gyrA96, relA12:BL21(DE3 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7启动子的表达载体(如 pET 系列的基因。

T7噬菌体 RNA 聚合酶位于λ 噬菌体 DE3区,该区整合于 BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-, ompT , hsdS (rBB-mB -, gal , dcm (DE33:BL21(DE3 pLysS菌株该菌株含有质粒 pLysS ,因此具有氯霉素抗性。

PLysS 含有表达 T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-, ompThsdS (rBB-mB -, gal , dcm (DE3, pLysS , Camr4:JM109菌株该菌株在使用 pUC 系列质粒载体进行 DNA 转化或用 M13 phage载体进行转染时,由于载体 DNA 产生的 LacZa 多肽和 JM09编码的LacZΔM15进行α-互补 ,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型 :recA1, endA1, gyrA96, thi -1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac -proAB/F’[traD36, proAB+, lacIq , lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增 ,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

大肠杆菌BL21(DE3)和DH5α、DH10B

大肠杆菌BL21(DE3)和DH5α、DH10B

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coliDH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),p h o A,s u p E44,λ-,t h i-1,g y r A96,r e l A 12:B L21(D E3)菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,o m p T,h s d S(r B B-m B-),g a l,d c m(D E3)3:B L21(D E3)p L y s S菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,o m p T h s d S(r B B-m B-),g a l,d c m(D E3,p L y s S,C a m r4:J M109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’5:T O P10菌株该菌株适用于高效的D N A克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F-,mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC),φ80,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1,a r aΔ139Δ(a r a-l e u)7697,g a l U,g a l K,r p s,(S t r r)e n d A1,n u p G6:H B101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,m t l-1,l e u B6,t h i- 1。

实验室常见大肠杆菌

实验室常见大肠杆菌

1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk ),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)3:BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB ,lacIq,lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697,galU ,galK ,rps,(Strr) endA1,nupG6:HB101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-17:M110 及SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。

最新大肠杆菌BL21和DH5α的区别(建议收藏)

最新大肠杆菌BL21和DH5α的区别(建议收藏)

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

......感谢聆听
基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)
BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

......感谢聆听
基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr
最直接的区分就是克隆菌株和表达菌株的区别
大肠杆菌DH5α做克隆或保存质粒用,BL21用来做原核表达用。

当然也有人用DH5α做表达也能表达出来。

也有人用BL21保存质粒的,但时间久了,质粒容易丢失。

你要是做原核表达的话,应该会现用前者克隆得到重组质粒,转化入后者进行表达...... 感谢聆听 ......
1 / 1 感谢聆听。

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常见大肠杆菌菌株的基因型
1:DH5a菌株
常用于质粒克隆的菌株。

使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk ),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1
2:BL21(DE3) 菌株
用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)
3:BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr
4:JM109菌株
该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株
基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB ,lacIq,lacZΔM15]
5:TOP10菌株
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697,galU ,galK ,rps,(Strr) endA1,nupG
6:HB101菌株
该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验
基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1
7:Top10F'菌株
带lacIq,需加IPTG诱导表达克隆于lac启动子后的外源基因,用于蓝白斑筛选时,需加入IPTG和X-Gal。

基因型:F'{lacIq,Tn10(TetR)}mcrA△(mrr-hsdRMS-mcrBC), ψ80 ,lacZ△M15, △lacX74, deoR, recA1, araD139, △(ara-leu), 7679, gal, λ- rpsL(strR)endA1, nupG。

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