实验十四 干化学试带法尿液检查【精品-ppt】

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尿液化学检验 ppt课件

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尿pH一过性↑.
②生理活动:运动,饥饿,出汗,应急,夜间入睡呼吸
变慢→体内酸性代谢产物↑→pH↓.
7
一、 尿酸碱度测定(urine acidity)
(五)临床意义
(2)病理变化: ①酸性尿:酸中毒,高热,慢性肾炎,白血病,
糖尿病酮症酸中毒,低钾血症,痛风 ②碱性尿:碱中毒,呕吐,尿路感染,Ⅱ型肾
小管性酸中毒,原发性醛固酮增多症
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(二) 尿蛋白定性检查
表5-7 试带法检测的干扰因素及评价
干扰因素
评价
标本因素 尿pH>9,可假阳性;尿pH<3,可假阴性。最适尿pH 5~6,故必要时可先调标本pH值。尿液新鲜。
食物因素 尿酸碱度与摄入食物有系,检查前1天应避免单一摄入 过多肉类或蔬菜、水果,进食应均衡
药物因素 假阳性:服奎宁、奎宁丁、嘧啶等或尿中含聚乙烯、 吡咯酮、洗必泰、磷酸盐、季胺盐消毒剂 等,尿呈强碱(pH≥9.0)。
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一、 尿酸碱度测定(urine acidity)
(五)临床意义
(3)药物影响:
①NaHCO3,K2CO3,枸橼酸钠→碱化尿液→防止酸 性结晶(尿酸及胱氨酸)形成;促进酸性药物排泄.
②氯化钙(铵、钾)、稀盐酸→酸化尿液→防止碱性 结晶(磷/碳/草酸钙)形成;促进碱性药物排泄;预防细 菌生长.
③溶血时口服NaHCO3碱化尿液→促进溶解及排泄 Hb.
尿液化学检验
Chemical examination of urine
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一、尿酸碱度测定(urine acidity)
(一)测定原理
1.试带法:
模块有甲基红(pH4.6-6.2),溴麝香草酚蓝 (pH6.0 - 7.6). 变色范围:黄5.0-绿7.0-蓝9.0,仪器或肉 眼判读

实验室尿液检查 ppt课件

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尿糖定性检查

检查方法
班氏定性试验 ■ 尿糖试纸条法


参考值

定性:阴性
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显微镜检验

对尿液离心后对其沉淀物中的细胞、管型、 参考值(玻片法)
红细胞:
白细胞:
结晶等有形成分进行的检查

■ ■ ■
0~3个/HP
0~5个/HP
上皮细胞:少量扁平上皮细胞和移行上皮细胞
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上皮细胞

肾小管上皮细胞:肾实质已有损害
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一、尿 量


正常尿量:

1000-2000/24小时 多尿(polyuria)>2500ml/ 24h
尿量异常

暂时性
饮水过多、应用利尿剂、输液过多
多 尿
病理性
尿崩症、糖尿病、 急性肾衰竭多尿期等
8

尿量异常
■ ■
少尿(oliguria)<400ml/ 24h 无尿(anuria)<100ml/ 24h
肾前性
休克、严重脱水 急性肾小球肾炎、急性肾衰竭 少尿期、慢性肾衰竭 尿路梗阻
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少 尿
肾性 肾后性
二、外 观

正常

淡黄色或枯黄色透明液体

异常
■ ■
无色:尿崩症、糖尿病、饮水过多 淡红色或红色 (肉眼血尿 )

尿中含血液>1ml/L

肾结核、肾和尿路结石、肾肿瘤、急性肾小
球肾炎、泌尿系统感染等
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一般检验
■ ■ ■
新鲜尿液10-100ml 女性避开月经期,男性避免精液的污染 不要初段尿液

实验十四干化学试带法尿液检查(精)

实验十四干化学试带法尿液检查(精)

⑽尿红细胞(RBC)或血红蛋白(Hb):采用过 氧化物酶法。血红蛋白中亚铁血红素具有弱的过 氧化物酶样作用,以催化H2O2作为电子受体使色 原(常用的有邻联甲苯胺、氨基比林、联苯胺等) 氧化呈蓝绿色,其颜色的深浅与血红蛋白成正比。 ⑾尿维生素C(VitC):采用还原法。试剂模块中 含有2,6-二氯酚靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸 二氢钠和磷酸氢二钠,维生素C能还原氧化型染 料,而使指示剂发生由绿或深蓝至粉红色的颜色 变化,颜色的深浅与VitC含量成正比。也有采用 VitC和作为色素原的磷钼酸反应,形成钼蓝的原 理。
⑵比密(SG):采用离子交换pH指示剂法。尿液中电解 质释放出的阳离子与试带中的离子交换体中的H+交换, 释放出的H+与酸碱指示剂反应,根据指示剂显示的颜色 (蓝、绿及黄)可换算尿液中的电解质浓度,以电解质浓 度来代表密度,从而得出比密值。 ⑶尿蛋白(PRO):采用 pH指示剂蛋白误差法。试剂模 块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统和表面 活性剂。在pH3.2时,溴酚蓝电离、带负电荷并释放H+, 带负电荷的溴酚蓝与此时带正电荷的蛋白质(白蛋白)生 成复合物,导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H+,当超 过缓冲范围时,指示剂发生颜色改变(黄、绿及蓝),变 色程度与蛋白质含量成正比。
(5)肾移植病人发生免疫排斥时尿液中出现大量 淋巴细胞,但由于其胞质无中性粒细胞酯酶,干 化学试带法检测白细胞阴性。 (6)白细胞检测时出现干化学试带法“阳性”而 镜检“阴性”的结果,可能与尿液在膀胱贮存时 间过长、中性粒细胞中被破坏后其酯酶释放到尿 液中有关。红细胞出现此类结果可能是因为红细 胞在尿液中被破坏,无完整红细胞(血红蛋白释 放),或尿液中含高活性不耐热的触酶。对于后 者,可将尿液煮沸冷却后再测试,验证和排除 “假阳性法。尿液中含 有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐,如尿液 中含有大肠埃希菌等具硝酸盐还原酶的细菌时, 可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,亚硝酸盐与芳香胺 的重氮化反应形成重氮盐,随后发生偶联反应, 形成红色重氮色素。 ⑺尿胆红素(BIL):采用偶氮法。在强酸性介质 中,胆红素与试带上的二氯苯胺重氮盐起偶联作 用,生成红色偶氮化合物。

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临床意义
•生理性蛋白尿
•功能性蛋白尿 •直立性蛋白尿 •摄入性蛋白尿 •老年性蛋白尿 •妊娠性蛋白尿
临床意义
• 病理性蛋白尿
1. 肾前性蛋白尿
2. 肾性蛋白尿
①肾小球性蛋白尿
②肾小管性蛋白尿
3. 肾后蛋白尿
临床意义
• 肾前性蛋白尿---溢 出性蛋白尿
–血液中低分子量蛋白 质如血红蛋白、肌红 蛋白、本周氏蛋白等 增加超出肾小管重吸 收能力
b) 中毒性肾间质性肾 病 ②苯、四氯化碳有 机溶剂 ③抗生素 ④中草药:马兜铃、 木通
c)器官移植
马 兜 铃
①重金属中毒
混合性蛋白尿
• 肾脏病变累及肾小球和肾 小管,由此产生的蛋白尿 称为混合性蛋白尿
• 标题
–1非选择性肾小球性蛋白尿伴游 离轻链; –2肾小管性蛋白尿伴游离轻链 –3生理性蛋白尿 –4混合性蛋白尿 –5选择性肾小球性蛋白尿
干化学法---指示剂蛋白质误差原理
3,3‫׳‬,5,5′-四 溴苯酚磺酰酞
1909年Soerensen 发现
尿蛋白试剂带组成及特性
试带法检测尿蛋白的干扰因素
仅作为过筛实验
不同PH对尿蛋白的影响
青霉素对蛋白质测定影响
大剂量青霉素滴注后对试带法 测定尿蛋白的影响
5~6h后检测尿蛋白
加热醋酸法测定尿蛋白
尿液蛋白质
尿液蛋白质检查
•健康人尿中的蛋白质含 量甚微 (30~130mg/24h), •当尿液中蛋白质 >100mg/L或 150mg/24h时,蛋白定 性为阳性,称为蛋白尿
尿蛋白定性检测方法
1.加热乙酸法
2.磺基水杨酸法
3.干化学试带法
干化学法
• PH指示剂蛋白质误差 原理,1909年Soerensen 发现 • 成分 1. 主要酸碱指示剂溴酚 蓝(PH阈值3.2) 2. 柠檬酸缓冲系统 3. 表面活性剂 • 1971年日本生产对白蛋 白、球蛋白、本周氏蛋 白均反应 • 1993年生产出免疫学方 法

[课件]尿液干化学分析PPT

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尿液干化学 分析
第一章 、尿液干化学检验质量 控制
一、分析前的质量管理规范 二、分析中的质量管理规范 三、分析后的质量管理规范
一、分析前的质量管理规范
(一)、人员资质与培训
1.操作人员上岗应取得卫生行政部门颁发的相应的 资格证书。 2.操作人员应定期参加本专业的继续教育培训并取 得学分,参加各级临检中心组织专业学习班、质 控培训班、研讨会。 3.操作人员上岗前必须仔细阅读仪器说明书,了解 仪器的测定原理、操作校正。 4.必须了解所用试带各膜块反应原理、注意事项、 药物干扰可出现的异常以及参考范围等。
质控分析程序图
1.用 质 控 物 进 行 质 控 在 质 控 范 围 内
开 始 进 行 标 本 测 定
超 出 质 控 范 围
进 行 第 二 步
质控分析程序图
2.检查质控物是否失效、是否正确储存、是否污染 是这些问题 没有明确说明
使用新的质控物重新试验
尿液标本的保存
(2) 化学防腐剂:①甲苯或二甲苯:按每100ML尿液加
入 0.5ML ,使其成一薄层,可防止细菌污染,通常用 于尿化学成分的保存。②甲醛:每100Ml尿液加40% 甲醛0.5Ml,可抑制细菌生长并固定尿中有形成分,但 不适用于具有还原性醛基的化学成分(如糖、17—羟皮 质类固醇)检查。③盐酸:于留取标本前加入10 ML浓 盐酸于容器内,(叮嘱病人防腐剂放入后的防护),收 集的标本可用于17—羟皮质类固醇、17—酮类固醇、 儿茶酚胺等测定。④麝香草酚:每100ML尿加入麝香 草酚<0.1g,用于检查尿中化学成份及细菌的防腐剂。
2.收集尿液容器的要求
(1)送检尿标本容器上应有标签,并注明病人的姓 名、科别、床号、收集标本的时间及检测项目。 (2)容器只限一次性使用,应清洁,不含有干扰实 验的物质;如作细菌培养,应用无菌瓶。 (3)容器至少容纳30ML尿液标本,开口不<4Cm, 底部要宽,以防止尿液溅出。 (4)对于儿科患者,特别是新生儿,可使用小型、 特殊的容器。

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指直立姿势时出现蛋白尿而卧位时尿蛋白 消失,且无血尿、高血压、水肿等异常表现, 又称直立性蛋白尿
常见于青春发育期少年, 部分病人经肾活检发现可有轻微的组织 学异常, 轻型肾炎和肾炎恢复期也可呈直立性蛋 白尿。
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(三)蛋白质(PRO )
⑻体位性蛋白尿 临床常用直立试验进行检查,方法: 令患者排空膀胱、留尿。然后取直立位,后枕及
尿蛋白定性试验常为+---+++,定量常在1— 3.5g/24h;
可见各种肾小管间质疾病,如间质性肾炎、慢 性肾盂肾炎;
全身性疾病同时侵犯肾小球和肾小管,如狼疮 性肾炎、糖尿病肾病等。
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(三)蛋白质(PRO )
⑷溢出性蛋白尿 肾小球滤过及肾小管重吸收均正常,但由于血中有
异常蛋白质产生增多,如Ig轻链或急性溶血时的游离血 红蛋白、肌肉损伤时的肌红蛋白、急性白血病溶血酶增 高等。这些小分子蛋白质,可经肾小球滤出,超过肾小 管吸收能力,在尿中出现而产生蛋白尿,称为溢出性蛋 白尿。
临床意义
高比重 1:机体丢失水分
高热、脱水、呕吐、腹泻、周围循环衰竭等致 血容量不足 2:急性肾炎,蛋白尿 3;糖尿病
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(二)比重(SG)
注意事项
1:尿糖可以使比重增高,可达1.040以上 但干化学法受此影响较小。
2:若浓度过高,还是有影响SG的测定 尿糖>1000mg/L 尿蛋白1000-5000mg/L
2 多聚电解质 含有随尿液中离子的浓度而解离的
酸性基团,尿液中离子浓度越高酸性基团(氢
离子浓度)解离越多,使指示剂 变色,进而换
算成尿液的比重值
12
(二)比重(SG)
正常参考范围 1 正常成人普通饮食通常保持在 1.015----1.025

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• 正常人:4~7/HPF可偶见一个红细胞 。
• 肉眼血尿:每升尿液中含血量超过1ml,肉眼可见 到不同程度混浊红色的尿液。
• 显微镜血尿:血液含量在0.1%以下,外观无血色, 镜下红细胞平均≥3/HPF的尿液。
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血尿分类
• 均一红细胞血尿:RBC外形及大小正 常,形态较为一致。
• 非均一红细胞血尿:RBC大小不等, 呈两种以上的多形性变化。
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胆红素、尿胆原
• 一项或两项结果出现阳性,一般表示肝胆系 统疾病,如病毒性肝炎、肝硬化、溶血性疾 病胆石症、胆管癌等。另外还可用于黄疸 型疾病的鉴别断:肝细胞性黄疸尿胆红素和 尿胆原都为阳性;而溶血黄疸只有尿胆原为 阳性;阻塞性黄疸只有尿胆红素呈性。
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PH、比重、维生素
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九、血红蛋白BLD
• 原理:采用红细胞类过氧化物酶法。血红蛋白中的 亚铁血红素具有过氧化物酶样作用,可以催化过氧 化氢放出新生态氧,进一步氧化指示剂而产生颜色 变化。
• 方法学评价:高浓度维c对试验有抑制作用,导致结 果偏低或假阴性;浓缩尿或高蛋白尿也可减低反应
的敏感性。清洗剂如次氯酸盐和尿道中细菌产生
尿液干化学及沉渣 镜检
原理、影响因素和临床意义
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1
一尿干化学概述
• 1956年美国人发明了以葡萄糖氧化酶和过 氧化物酶为基础检测葡萄糖的第一条“浸 入即读”的干化学试纸。发展到今天已经 成为一次可以测十几个项目的多联试纸带。 检测手段也由目测发展到半自动、全自动。 具有快速、简便、用量少的优点,但是同 时也存在着影响因素多,检测不精确等缺 点。
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维生素C对干化学检测项目的干扰
检测项目
隐血/血红 蛋白 胆红素
亚硝酸盐
葡萄糖
干扰试验项目所需尿抗坏 血酸浓度(mg/ L)
反应物
≥90
试剂膜块浸渍的H2O2
≥250 ≥250 ≥500
试剂膜块浸渍的重氮 盐
反应过程中产生的重 氮盐
反应过程中产生的 H2O2
人绒毛膜促性腺激素
人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin, hCG)是由胎盘合体滋养细胞分泌的一种具有促进性腺发 育的糖蛋白激素
浆细胞白血病
白或轻链、重链片段
阵发性睡眠性血红蛋白尿
尿中出现大量游离血红 蛋白
急性肌肉损 心肌梗死、挤压综合征,横纹 尿中出现大量肌红蛋白,

肌溶解综合征等
严重者可致急性肾衰
酶类增高
急性单核细胞性白血病、胰腺 尿溶菌酶或尿淀粉酶增


2、尿糖
⑴ 定义:
正常人尿内含糖量很少,定性试验阴性。 当 尿 糖 水 平 达 50mg/dl 时 , 此 时 定 性 检 测 尿 糖为阳性,称为糖尿,一般指葡萄糖尿。 当 血 糖 超 过 8.88mmol/L 时 , 尿 糖 增 加 , 此 时的血糖水平临床上常称为肾糖阈值,可看做 是部分肾单位重吸收功能达到饱和时的血糖浓 度。
微小病变性、轻微病变 性肾病综合症
非选择性 肾小球滤过膜 丧失功能
>1-5
IgG、IgA、IgM、 C3、ß2-M、清蛋白
高分子量 >68 000
肾小球肾炎、 糖尿病肾病
肾小管性 肾小管对正常滤过的 <2 血浆蛋白重吸收障碍
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
ß2-M、溶菌酶
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⑴酸碱度(pH):采用pH指示剂法。用甲基红 (pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH6.0~7.8)两种 指示剂适量组合成为复合pH试剂模块,其呈色范围 为pH4.5~9.0,颜色发生橙红、黄绿及蓝色变化。
⑵比密(SG):采用离子交换pH指示剂法。尿液中电解 质释放出的阳离子与试带中的离子交换体中的H+交换, 释放出的H+与酸碱指示剂反应,根据指示剂显示的颜色 (蓝、绿及黄)可换算尿液中的电解质浓度,以电解质浓 度来代表密度,从而得出比密值。
⑹尿亚硝酸盐(NIT):采用偶氮法。尿液中含 有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐,如尿液 中含有大肠埃希菌等具硝酸盐还原酶的细菌时, 可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,亚硝酸盐与芳香胺 的重氮化反应形成重氮盐,随后发生偶联反应, 形成红色重氮色素。
⑺尿胆红素(BIL):采用偶氮法。在强酸性介质 中,胆红素与试带上的二氯苯胺重氮盐起偶联作 用,生成红色偶氮化合物。
实验十四 干化学试带法尿液检查
【目的】 掌握尿液检查干化学试带的反应原理和使 用注意事项。 【原理】 1.试带构成 在长条形塑料片上每隔一定距离(约 2mm)有一正方形试剂模块(5mm×5mm),其中 有两块集中在试纸条一端,分别是空白模块尿液颜 色参比模块,可作为对照使用;其余模块分别含有 相应干式化学试剂(图5-25)。试剂中的碘酸盐可破 坏VitC等还原性物质,消除VitC中的碘酸盐可破坏 Vit C等还原性物质,消除VitC对其他反应的干扰; 若不含碘酸盐,试纸条将增加Vit C检测模块,以便 对Vit C干扰项目的质控和校正。
⑷尿葡萄糖(GLU):采用葡萄糖氧化酶法。尿 液中葡萄糖在试带中葡萄糖氧化酶的催化下,生 成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。在有过氧化物酶的 情况下,以过氧化氢为电子受体使色素原(邻甲 联苯胺、碘化钾等)氧化而呈色。色素原不同, 呈色可为蓝色、红褐色或红色。
⑸尿酮体(KET):采用亚硝基铁氰化钠法。检 测尿酮体的模块中主要含有亚硝基铁氰化钠,可 与尿液中的乙酰乙酸、丙酮产生紫色反应。其对 乙酰乙酸的敏感性为50~100mg/L,对丙酮为 400~700mg/L,不与β-羟丁酸起反应。
2.注意试带保存条件 尿试带应根据厂家推荐的条
件(如温度、暗处等)保存,在有效期内使用。不 应将试带放在直射光下照射或暴露在潮湿环境中, 应保存在厂商提供的容器中,不可更换保存容器。
3.规范操作
(1)试带从冷藏冰箱中拿出后,待平衡至室温再 打开盛装的筒盖。一次只取所需要量的试带,并 应立即将瓶盖盖好。多余试带不得放回原容器中, 更不应该合并各瓶的试带。
⑽尿红细胞(RBC)或血红蛋白(Hb):采用过 氧化物酶法。血红蛋白中亚铁血红素具有弱的过 氧化物酶样作用,以催化H2O2作为电子受体使色 原(常用的有邻联甲苯胺、氨基比林、联苯胺等) 氧化呈蓝绿色,其颜色的深浅与血红蛋白成正比。
⑾尿维生素C(VitC):采用还原法。试剂模块中 含有2,6-二氯酚靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸 二氢钠和磷酸氢二钠,维生素C能还原氧化型染 料,而使指示剂发生由绿或深蓝至粉红色的颜色 变化,颜色的深浅与VitC含量成正比。也有采用 VitC和作为色素原的磷钼酸反应,形成钼蓝的原 理。
(2)试带与尿液的反应时间需严格遵循产பைடு நூலகம்说明 书的规定,操作中注意切勿触摸试带上的反应检 测模块。
(3)试带浸入尿液标本的时间应在1~2s,所有试 剂模块,包括空白和参比模块,要全部渗入尿液 中,试带上过多的尿液标本应去除干净。
4.结果分析 (1)尿液干化学测定结果与传统湿化学法存在差
异。 (2)必要时,试带法干化学检测尿液结果应做确
(6)白细胞检测时出现干化学试带法“阳性”而 镜检“阴性”的结果,可能与尿液在膀胱贮存时 间过长、中性粒细胞中被破坏后其酯酶释放到尿 液中有关。红细胞出现此类结果可能是因为红细 胞在尿液中被破坏,无完整红细胞(血红蛋白释 放),或尿液中含高活性不耐热的触酶。对于后 者,可将尿液煮沸冷却后再测试,验证和排除 “假阳性”结果。
2.检测项目 尿液的酸碱度(pH)、比密(SG)、 蛋白质(PRO)、葡萄糖(GLU)、酮体(KET)、 胆红素(BIL)、尿胆原(URO)、 亚硝酸盐 (NIT)、白细胞(LEU/WBC)、红细胞 (RBC/ERY)或隐血(Hb)、维生素C(Vit C), 一个或多个检测内容可组成不同的组合。
3.试带反应原理
⑻尿胆原(URO):采用①醛化反应法:在强酸 条件下尿胆原和对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应, 生成樱红色缩合物。②偶氮法:在强酸条件下尿 胆原和对-四氧基苯重氮四氟化硼发生重氮盐偶联 反应,生成胭脂红色化合物。
⑼尿白细胞(LEU):采用中性粒细胞酯酶法。 中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和 有机酸,吲哚酚可进一步氧化形成靛蓝,或吲哚 酚和重氮盐反应生成紫色重氮色素。
⑶尿蛋白(PRO):采用 pH指示剂蛋白误差法。试剂模 块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统和表面 活性剂。在pH3.2时,溴酚蓝电离、带负电荷并释放H+, 带负电荷的溴酚蓝与此时带正电荷的蛋白质(白蛋白)生 成复合物,导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H+,当超 过缓冲范围时,指示剂发生颜色改变(黄、绿及蓝),变 色程度与蛋白质含量成正比。
证试验。 (3)尿液干化学试带检查仅是一个过筛手段,适
用于健康普查和疾病筛选,不能完全替代尿液有 形成分显微镜检查,特别是蛋白质、白细胞、红 细胞、亚硝酸盐中任一项阳性,必须进行人工镜 检。 (4)尿液干化学测试结果应与理学、显微镜检查 结果相结合,互相印证才能为临床提供有价值的 信息。
(5)肾移植病人发生免疫排斥时尿液中出现大量 淋巴细胞,但由于其胞质无中性粒细胞酯酶,干 化学试带法检测白细胞阴性。
【操作】 1.混匀尿液 2.浸湿试带 3.沥去多余尿液 4.比色与分析 5.报告方式
【注意事项】
1.熟悉试带特性 必须了解所用试带各膜块反应原
理、药物干扰以及参考范围等,掌握试带检测每一 成分的敏感度和特异性。很多中间环节和干扰因素 都可影响颜色变化而导致假阳性或假阴性。同一检 测项目,不同厂家所用的色素原可能不同,因此存 在显色差别
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