19尿 血 红 蛋 白 测 定(干 化 学 法)
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尿血红蛋白测定(干化学法)
1.实验原理
血红蛋白中的亚铁血红素与过氧化物酶的结构和功能相似,具有弱过氧化物酶活性,能催化过氧化氢释放新生态氧,氧化色原物而呈蓝色,借以检出微量的血红蛋白。
2.标本采集:
2.1 标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。
2.2标本种类:新鲜尿液
2.3 标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。
3.标本储存:从排出到检测应在2小时内完成,如不能及时送检或分析,应置4 ℃下
冷藏保存,但冷藏时间最长不得超过6小时。
4.标本运输:室温运输
5.标本拒收标准:细菌,经血,白带,精液,粪便污染的标本不能做测定。
6.试剂
6.1 试剂名称:urit 10A
6.2 试剂厂家桂林优利特医疗电子有限公司
6.3 包装规格:100Test/kit
6.4 试剂盒组成:试纸条:100条
6.5 试剂储存条件及有效期:储存温度为2-30℃条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。
7.仪器设备
7.1仪器名称:优利特尿液分析仪
7.2仪器厂家:桂林优利特医疗电子有限公司
7.3仪器型号:uritest—180
7.4仪器校准程序:在使用过程中,一般是两周校准一次,如超过此期限,仪器会提示
“P1ease Ca1ibrate”(请校准)。通过测定内部参比块,环境温度和光学系统的改
变都可被补偿。当条件改变都可被补偿。当条件改变很大时,比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗,仪器将打印出一个错误信息;校准条时有稳定特性的灰白色试条,这些校准条只能使用一次。校准前,应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为:在“READY— < START>”显示时,按< Calibrate>键,放上校准条。再按
8.操作步骤
8.1按
8.2约4秒钟后,显示“ Dip Strip 1”,同时绿灯闪烁,将试条侵入尿样中。
8.3当显示“ Insert Strip 1 ”,把试条放在试条托盘上,此时绿灯亮,若要人工输入颜
色,按
样也可人工输入浊度。
8.4约20秒后,显示“Dip Strip 2”,然后重复以上过程。
8.5每一个测量完成后将自动打印出结果。
9.结果判断:浅棕色为(—),浅蓝色为(+)。蓝绿色为(++),蓝色(+++),深蓝色(++++)
10.质量控制:质控尿液的应用:用人工质控尿液进行空内质控,低浓度质控液应为(+),高浓度质控液应为(+++)。
11.参考值范围:阴性
12.临床意义:
12.1 正常人尿液中无游离血红蛋白。当体内大量溶血,尤其时血管内溶血,血液中游离血红蛋白可大量增加,当超过1.0 – 1.35g/L 时,即出现血红蛋白尿。此种情况常见于血型不合输血,阵发性睡眠性血红蛋白尿,寒冷性血红蛋白尿,急性溶血性疾病等。还可见于各种病毒感染,链球菌败血症,大面积烧伤,体外循环,肾透析,手术后所致的红细胞大量破坏等。
13. 操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度高,重复性好。
14.方法局限性
14.1 试带应在干燥,避光处保存,注意有效期并避免污染。
14.2 尿液必须新鲜,以免因红细胞破坏,导致干化学式带法与显微镜检查的人为误差。
14.3 各种原因导致尿中出现红细胞,可致假阳性。
14.4 VitC 对本实验有抑制作用,可致假阴性。
14.5 尿路感染时,由于细菌产生过氧化物酶而引起假阳性。某写氧化物如漂白粉也可致假阳性。
14.6 浓缩尿,高蛋白尿可降低试带反应的灵敏度。
14.7 试带上出现绿色斑点提示为完整红细胞所致。
15.当检验系铳(仪器)不能工作时,所采取的补救措施:当检验系铳(仪器)不能工作时,可联系厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的的实验室有同类仪器,可到别的仪器先测,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台正常工作的仪器代替。
16.参考文献
16.1全国临床检验操作规程第三版