上海交通大学微生物实验实验四培养基的使用特点和微生物接种方法
微生物常用的接种方法
微生物常用的接种方法微生物的接种是微生物学实验中的一个重要步骤，它是将微生物从一个培养基转移到另一个培养基的过程。
接种方法的选择对于微生物的培养和研究具有重要意义。
下面将介绍一些微生物常用的接种方法。
一、平板接种法。
平板接种法是将微生物接种在培养基的表面上，通过接种棒或铅笔头的方式在培养基表面画线或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，通常用于分离和计数微生物。
在进行平板接种时，需要注意接种的均匀性和细菌数量的控制，以避免产生过多或过少的菌落。
二、液体接种法。
液体接种法是将微生物接种在含有营养物质的液体培养基中，通过摇床或振荡器进行培养。
这种接种方法适用于培养需要大量微生物的情况，如大规模生产微生物菌种或进行微生物代谢产物的生产。
在进行液体接种时，需要注意培养液的搅拌速度和通气情况，以保证微生物的充分生长和代谢。
三、斜面接种法。
斜面接种法是将微生物接种在倾斜的培养基表面上，通过接种棒或铅笔头的方式在斜面上画线或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行斜面接种时，需要注意斜面的倾斜角度和接种的均匀性，以保证微生物的充分生长和代谢。
四、深层接种法。
深层接种法是将微生物接种在含有固体琼脂的试管或培养瓶中，通过接种棒或铅笔头的方式在琼脂表面插入或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较低的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行深层接种时，需要注意琼脂的固化温度和接种的深度，以保证微生物的充分生长和代谢。
五、滴播接种法。
滴播接种法是将微生物接种在含有营养物质的琼脂平板上，通过滴管或移液器滴播微生物悬液，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行滴播接种时，需要注意滴播的均匀性和微生物悬液的浓度，以保证微生物的充分生长和代谢。
总结，微生物的接种方法多种多样，选择合适的接种方法对于微生物的培养和研究具有重要意义。
上海交通大学-环境微生物-微生物的基因重组
转导的遗传物质
供体菌染色体DNA 任何部位或质粒
完全转导或流产转导
噬菌体DNA及供体菌 DNA的特定部位
受体菌获得供体菌DNA 特定部位的遗传特性 转导频率较普遍转导增 加1000倍(10-4)
转导的后果
转导频率
受体菌的10-7
普遍性转导
转化过程
TRANSFORMATION direct uptake of biologically active DNA fragments
细菌转化
以反向遗传学 的角度来确定 未知基因的功 能。
基因变异使基 因功能的丧失， 应用于重组 DNA技术和细 胞内同源重组。
反向遗传学
反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。 经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究 生命的发生与发展规律。 反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础 上，通过对靶基因进行必要的加工和修饰，如定点突变、 基因插入/缺失、基因置换等，再按组成顺序构建含生物 体必需元件的修饰基因组，让其装配出具有生命活性的 个体，研究生物体基因组的结构与功能，以及这些修饰 可能对生物体的表型、性状有何种影响等方面的内容。
Genetic Recombination
一、原核微生物的基因重组
1. 转化 (Transformation)
2. 转导 (Transduction)
3. 接合 (Conjugation)
4. 原生质体融合 (Cytoplasmic fusion )
5. 溶源性转换 (Lysogenic conversion)
细菌的多重营养缺陷型杂交
实验
接合现象的发现和证实
微生物接种操作方法
微生物接种操作方法
微生物接种操作方法一般包括以下步骤：
1.准备培养基：按照培养菌种的需求准备合适的培养基。
通常需要将培养基均匀地倒入培养皿中，待其凝固。
2.选择菌株：在无菌操作的情况下，选择一株菌株接种。
菌株需要在一个菌液培养基中培养，直到其成长到一定程度。
3.适当稀释：在接种前，应依据所需菌群数量，将培养基适当稀释一些（通常是1000倍），以防菌群增长过快的情况。
4.接种：接种时，取适量菌株，用烧杯、披露环或接种针等工具将微生物接种于培养基上。
5.培养：将培养皿放置在适宜的培养条件下，如适宜的温度、湿度和氧气等，等待菌群的生长。
6.观察：观察微生物的生长情况，并根据其形态特征、生长速度、代谢特征等进行鉴定。
7.保存：根据需要，将不同种类的微生物进行保存。
常见的方法包括低温保存、
冷冻保存或干燥保存等。
注意事项：
1.选择适宜的培养基，以保证微生物的生长和繁殖。
2.操作时应严格无菌，防止其它微生物污染。
3.在接种前，应对培养皿、烧杯等工具进行高温、紫外线或化学消毒处理。
4.尽量减少接种时对培养基的破坏和干扰，以保证生长情况的准确观察。
5.保存时应先进行初步鉴定，以免与其它菌群混淆。
保存时选用适宜的保存条件。
培养基的接种实验步骤
培养基的接种实验步骤培养基的接种实验步骤其实一点都不复杂，大家只要按照一定的流程来，基本上就能顺利完成。
要说这个培养基，简单来说，就是一个供微生物生长的“豪华套餐”，微生物通过它能得到生长所需的营养，就像我们吃饭一样，养分都能吸收得很棒。
不过，在实验中，这个“豪华套餐”可不是随便谁都能吃的。
它可得经过精心的准备，接种过程得小心谨慎，稍不注意，可能就会给微生物“添乱”了。
怎么做呢？你跟着我一起来看，保证你马上能搞懂。
咱们得准备好一切。
培养基得先做好，装进培养皿或者试管里。
如果是固体培养基，那就像是煮粥时加点“凝胶”让它定型；如果是液体培养基，那就像是给小家伙们准备了一碗“汤”。
这些培养基得一锅一锅地做，讲究卫生，啥细菌、杂质都得“打发”掉，不能有一点马虎。
培养基放进去后，记得得搞清楚，管子、皿子要消毒，毕竟你要是碰上不速之客，谁都不开心，不是？然后，咱们接种这步就开始了。
别以为随便一捻就行，这里面可有学问呢。
接种环就是关键中的关键！这环，就像是我们拿筷子夹菜一样，得稳准狠。
你得把接种环放到火焰上烧一下，烧到红红的，像个小火把一样的。
这样做是为了杀死接种环上可能有的细菌，确保万无一失。
接种环冷却了，就可以开始操作了。
切记，一定要让接种环待在空气中冷却，不然小心烧到自己，热乎乎的环可是有点危险的。
咱们把要接种的微生物弄好。
一般来说，你可能从琼脂平板上取，或者从液体培养基里取，甚至有时候可能从环境样本中取。
你把接种环轻轻地接触微生物，记得，不要太猛，慢慢地接触就行，别让细菌散落得四处乱跑。
拿好了微生物后，别着急，还是得保持冷静，先放在目标培养基上，稳稳当当地转动接种环，或者画个小圈圈，让微生物均匀分布在培养基表面。
别小看这个过程，控制力度、转动的角度，都是技术活儿。
然后，接下来的步骤也是至关重要的，咱们要给这些微生物提供一个“五星级的环境”，让它们在培养基里开心长大。
这个时候，最好是把接种好的培养基放进温箱里。
微生物接种的实训报告
通过本次微生物接种实训，旨在掌握微生物接种的基本原理和操作方法，提高对微生物实验技术的实际操作能力，培养严谨的科学态度和良好的实验习惯。
二、实训时间2023年X月X日三、实训地点实验室微生物实验室四、实训器材与试剂1. 器材：无菌操作台、接种环、接种针、酒精灯、试管、培养皿、镊子、剪刀、试管架、培养箱等。
2. 试剂：牛肉膏蛋白胨培养基、生理盐水、无菌水、酒精、碘酒等。
五、实训内容1. 无菌操作台的准备- 在无菌操作台表面铺上无菌纸，确保操作台面无菌。
- 检查酒精灯火焰是否稳定，确保操作安全。
2. 微生物接种操作- 将待接种的微生物样品进行初步处理，如研磨、稀释等。
- 将接种环在酒精灯火焰上灼烧至红热，待冷却后进行接种。
- 采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。
- 将接种后的平板倒置放置在培养箱中，根据微生物的生长特性设置合适的培养温度和时间。
3. 观察与记录- 观察微生物的生长情况，包括菌落形态、颜色、大小等。
- 记录菌落生长的详细情况，包括生长时间、生长速度等。
1. 准备工作- 检查无菌操作台、酒精灯、接种环等器材是否准备齐全。
- 检查培养基、试剂是否在有效期内。
2. 无菌操作- 按照无菌操作规程进行操作，避免微生物污染。
3. 接种操作- 使用接种环取适量微生物样品。
- 将接种环在酒精灯火焰上灼烧至红热，待冷却后进行接种。
- 采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。
4. 培养与观察- 将接种后的平板倒置放置在培养箱中，根据微生物的生长特性设置合适的培养温度和时间。
- 定期观察菌落生长情况，并做好记录。
七、实训结果与分析1. 菌落生长情况- 观察到接种的微生物样品在平板上成功生长，形成了明显的菌落。
- 菌落形态、颜色、大小等特征与理论预期相符。
2. 结果分析- 通过本次实训，成功掌握了微生物接种的基本原理和操作方法。
- 提高了无菌操作技能，培养了严谨的科学态度和良好的实验习惯。
八、实训体会通过本次实训，我深刻认识到微生物接种操作的重要性。
实验微生物接种技术讲解
实验微生物接种技术讲解实验微生物接种技术讲解微生物包括：细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，与人类关系密切。
以下是小编为大家整理的实验微生物接种技术讲解，仅供参考，希望能够帮助大家。
实验微生物接种技术讲解1一、目的：学习微生物工作的基本接种方法，建立纯培养技术中的“无菌”概念，掌握无菌操作技术。
二、原理：所谓接种就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌，并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。
本实验要求严格进行无菌操作，一般是在无菌操作台或在实验室内火焰旁进行。
根据不同的实验目的和培养方式，可以采用不同的接种工具和接种方法。
三、实验材料：斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒等。
四、操作步骤（一）无菌操作菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行，接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。
用前先清洁好卫生，再进行消毒处理。
可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用，或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。
操作者的手应先用肥皂洗净，再用酒精棉球消毒；整个操作过程都要靠近酒精灯火焰；接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌；棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上；不能有跑、跳等力度大的动作，以免引起空气大振动而增加染菌机会。
（二）接种方法（1）斜面接种：从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。
此法用于好气性微生物的接种。
左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。
用右手先将棉塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或直线。
图1.斜面接种示意图（2）液体接种：由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三角瓶等）中的方法。
操作与上法基本一致，只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。
实验四培养基的分装与细菌的接种
课程名称：微生物学检验技术授课专业：医学检验学时：2学时实验四培养基的分装与细菌的接种一、实验目的1．掌握液体、半固体、固体培养基的分装；2．掌握细菌在液体、半固体、固体培养基上的接种。
二、实验物品接种环，接种针，酒精灯，试管架，无菌试管，无菌平板，菌种等三、实验内容㈠培养基的分装所有物品均应在使用前严格进行灭菌，在使用过程中不得与未经灭菌的物品接触.⒈固体培养基的分装：将灭菌的培养基熔化后冷却约至50℃，以无菌操作倾注于灭菌平板内，自然愈合，水平旋转，待冷凝固后翻转。
注意：倾注平板时切勿将皿盖完全开启，以免细菌落入。
新制的平板水分较多，不利于细菌的分离，可将平板倒扣37℃30分钟使其表面干燥。
2.液体、半固体培养基的分装：先开试管塞（小塞）再开三角烧瓶塞子（大塞），瓶口（管口）通过火焰2-3次，分装量为试管容量的1/3。
半固体培养基要趁热直放。
注意：无菌试管和烧瓶，于开塞后及盖塞之前，口部应通过火焰3次，以杀死可能附着管口或瓶口的细菌。
开塞后的管口及瓶口应尽量靠近火焰，试管及烧瓶应尽量平放，切忌口部向上和长时间暴露于空气中。
㈡细菌的接种与分离方法基本程序：灭菌接种环/针→待冷→沾取细菌→进行接种→灭菌接种环/针⒈接种环和接种针是接种细菌的必备工具，由镍锘合金或白金丝制成，接种环直径约2-4mm，一个合格的接种环是正圆形，连接端没有空隙，接种针长约50-80mm。
两端连接有一绝缘体的金属棒。
接种针与接种环在使用前要在酒精灯的火焰上灭菌后使用接种环——固体培养基和液体培养基的接种接种针——半固体培养基的接种⒉接种与分离技术根据标本的来源，培养目的及所用培养近的种类，采用不同的接种方法⑴平板划线法对于混有多种细菌的临床标本或其他培养物，经过划线接种到固体培养基表面，划线起到分散作用，一般经18-24小时培养后可得到单个菌落，供细菌计数和纯培养用（挑选单个菌落，转移至另一培养基中，生长出来的细菌均为纯种，称为纯培养），分离纯培养是从临床标本中检查鉴定细菌非常重要的第一步，只有先从含有多种杂菌的标本中分离出目的菌纯培养，才能进一步对目的菌予以鉴定和研究①（曲线划线法）此法多用于含细菌量不多的标本或咽拭，棉拭等标本的细菌分离培养方法：先将标本或培养物涂于平板1/5处，然后用接种环自标本涂擦处开始，向左右两侧划开并逐渐向下移动，连续划成若干条平行线。
微生物的接种以及菌落和抗生素抑菌现象的观察(实验)-沪科版生物拓展型课程教案
微生物的接种以及菌落和抗生素抑菌现象的观察（实验）——沪科版生物拓展型课程教案实验目的1.掌握微生物的接种方法；2.观察不同微生物的菌落形态特征；3.了解抗生素抑菌现象。
实验材料1.培养基（营养琼脂、培养平板、葡萄糖琼脂、牛肉膏汁琼脂等）；2.动物模型；3.火柴棒或抽线器；4.吸管；5.无菌培养皿。
实验步骤实验一：微生物接种1.消毒液将动物模型表面消毒；2.用火柴头或抽线器取出一小块细菌样本并放入营养琼脂平板中；3.用吸管将菌液均匀地涂抹在琼脂平板上；4.拧紧涂抹盖裔，倒置培养皿，放入恒温培养箱；5.培养48小时后，观察菌落。
实验二：菌落观察1.看到形成的菌落后，用气锅钳取出一小块菌落；2.将其移到葡萄糖琼脂平板或牛肉膏汁琼脂平板上；3.在实验后，观察菌落的形态特征。
实验三：抗生素抑菌现象观察1.换取2个营养琼脂平板；2.将其中一个平板中的菌液均匀涂抹在另一个平板上；3.在其中一个培养皿上加入抗生素；4.将两个培养皿放入恒温培养箱中实验后，观察不同培养皿中菌落的变化。
实验记录实验一：微生物接种 |取样地点|微生物名称|菌落形态| |:—:|:—:|:—:| |嗓子|金黄色葡萄球菌|圆形、凸起、呈金黄色| |手指|大肠杆菌|圆形、平坦、边缘整齐| |鼻子|鼻炎链球菌|圆形、平坦、灰白色|实验二：菌落观察|菌落名称|菌落特征| |:—:|:—:| |金黄色葡萄球菌|成群分布，大小相同、呈圆形、表面光洁、发黄| |大肠杆菌|大小不一、形态不规则| |鼻炎链球菌|成对或链状出现，呈灰白色|实验三：抗生素抑菌现象观察 |培养皿|菌落形态| |:—:|:—:| |无抗生素平板|菌落较为茂密| |加抗生素平板|只有少量生长|实验分析实验结果表明，菌落形成和抗生素的抑菌作用涉及诸多因素，其中最为关键的是微生物自身特征和营养环境。
在微生物接种实验中，从不同部位采集的微生物形态差异明显。
金黄色葡萄球菌菌落颜色呈现金黄色、大肠杆菌菌落呈现大小不一、形态不规则，而鼻炎链球菌则在平板上成对或链装呈现灰白色。
微生物细菌接种培养实验报告
微生物细菌接种培养实验报告一、实验介绍微生物是指细菌、真菌、病毒、原生动物和藻类等微小生物的总称，它们在生命的整个过程中都扮演着重要的角色。
本次实验主要介绍了微生物细菌接种培养的方法和技巧，旨在帮助学生熟悉微生物实验的基本操作。
二、实验原理细菌接种培养实验是通过将细菌接种到含有营养成分的培养基中进行培养，使细菌在适宜的环境中进行繁殖。
细菌在培养基中繁殖所需要的主要营养成分有碳源、氮源、磷源和微量元素等。
根据不同的细菌，培养基的成分也不同，需要根据实验的需要加入不同的营养成分。
三、实验步骤1.准备培养基根据实验需要选择合适的培养基，加入适量的蒸馏水和其他营养成分，将培养基均匀地倒入培养皿中。
2.接种细菌取一支已经生长好的细菌，用吸管沾取适量的细菌液，滴到培养基表面。
如果需要进行斜面培养，可以用细菌接种环将细菌接种到斜面上。
3.标记培养皿在培养皿的盖子上标记好实验的日期、细菌种类等重要信息，避免混淆。
4.封闭培养皿用透明胶带将培养皿的盖子封闭，避免细菌在外界环境的干扰下生长。
5.培养将培养皿置于恒温箱中，根据需要调节恒温箱的温度和湿度。
一般情况下，细菌的培养需要3-5天的时间。
四、实验注意事项1.实验过程中要做到操作规范、注意卫生，避免细菌的污染。
2.在接种细菌前，要先消毒接种器具，避免外界环境中的细菌污染。
3.在标记培养皿时，要将重要信息标注清楚，避免混淆。
4.在恒温箱中放置培养皿时，要将不同种类的培养皿分开放置，避免细菌之间的交叉感染。
5.实验结束后，要做好实验器具和培养皿的消毒和清洗工作，避免细菌的残留和传播。
五、实验结果与分析通过培养皿的观察和细菌的生长情况，可以初步判断细菌的种类和数量。
如果细菌长成了光滑、湿润的菌落，可以说明细菌在培养基中得到了良好的生长和繁殖。
如果发现有异常生长或变异的情况，需要进行进一步的实验和分析。
六、实验总结微生物细菌接种培养实验是学生进行微生物实验的基础操作，通过本次实验，学生可以熟悉微生物实验的基本步骤和操作技巧，同时也可以了解到微生物在适宜的环境中进行繁殖的基本原理。
微生物实验中的接种分离和培养操作步骤
微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤一、目的要求1、掌握各种分离、接种方法。
2、掌握无菌操作基本环节。
二、实验说明微生物在自然界中呈混杂状态存在，要获得所需菌种，必需从中把它们分离出来。
在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。
微生物分离和纯化的方法很多，但基本原理却是相似的，即将待分离的样品进行一定的稀释，并使微生物的细胞（或孢子）尽量以分散状态存在，然后使其长成一个个纯种单菌落。
然而上述工作又离不开接种，即将一种微生物移到另一灭过菌的培养基上的过程。
三、实验材料1、恒温培养箱。
2、接种环、玻璃棒、吸管、酒精灯。
3、培养基（上次实验配制的）。
4、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌。
四、方法步骤（一）接种的操作1、斜面接种（接金黄葡萄球菌）（1）操作前，先用75%酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。
（2）将菌种管和斜面握在左手大姆指和其它四指之间，使斜面和有菌种的一面向上，并处于水平位置。
（3）先将菌种和斜面的棉塞旋转一下，以便接种时便于拔出。
（4）左手拿接种环（如握钢笔一样），以火焰上先将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。
（5）用右手的无名指、小指和手掌将菌种管和待接斜面试管的棉花塞或试管帽同时拔出，然后让试管口缓缓过火灭菌（切勿烧过烫）。
（6）将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管内抽出接种环。
（7）迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。
有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。
（7）迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。
有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。
（8）接种完毕后抽出接种环灼烧管口，塞上棉塞。
微生物检验细菌的接种方法
微⽣物检验细菌的接种⽅法微⽣物检验细菌的接种⽅法 常⽤的细菌接种⽅法有平板划线分离法、斜⾯接种法、穿刺接种法、液体和半固体接种法、涂布接种法等。
下⾯是yjbys ⼩编为⼤家带来的关于微⽣物检验细菌的接种⽅法的知识，欢迎阅读。
⼀、平板划线分离法 平板划线分离法:是指把混杂在⼀起的微⽣物或同⼀微⽣物群体中的不同细胞⽤接种环在平板培养基表⾯，通过分区划线稀释⽽得到较多独⽴分布的单个细胞，经培养后⽣长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微⽣物的纯种。
有时这种单菌落并⾮都由单个细胞繁殖⽽来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。
其原理是将微⽣物样品在固体培养基表⾯多次作“由点到线”稀释⽽达到分离⽬的的。
为⽅便划线，⼀般培养基不宜太薄，每⽫约倾倒20ml培养基，培养基应厚薄均匀，平板表⾯光滑。
划线分离主要有分区划线法和连续划线法两种(如图1， A、B)。
分区划线法是将平板分四区，故⼜称四分区划线法。
划线时每次将平板转动60~70°划线，每换⼀次⾓度，应将接种环上的菌烧死后，再通过上次划线处划线; 另⼀种连续划线法是从平板边缘⼀点开始，连续作波浪式划线直到平板的另⼀端为⽌，当中不需灼烧接种环上的菌。
1)连续划线法 将琼脂平⽫半开盖倒置于培养箱内⾄⽆冷凝⽔，接种环于酒精灯外焰烧⾄红透，接种棒也要充分灼烧，最后再集中烧接种环⾄红。
轻轻摇匀待接种试管，左⼿⼿⼼托待接种试管底侧部，右⼿执接种环，右⼿⼩指拔下试管塞，于酒精灯附近将接种环伸进试管，稍候，再插⼊待接接种液中，蘸⼀下，取满⼀环，抽出、烧塞、盖盖、放回试管架。
或将接种环通过稍打开⽫盖的缝隙伸⼊平板，在平板边缘空⽩处接触⼀下使接种环冷却，然后以⽆菌操作接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。
于靠近酒精灯处打开平⽫盖约30°，右⼿将环伸进平⽫，将菌种点种在平板边缘⼀处，轻轻涂布于琼脂培养基边缘(如图2)，抽出接种环，盖上平⽫盖，然后将接种环上多余的培养液在⽕焰中灼烧，打开平⽫盖约30°伸⼊接种环，待接种环冷却后，再与接种液处轻轻接触，开始在平板表⾯轻巧滑动划线，接种环不要嵌⼊培养基内划破培养基，线条要平⾏密集，充分利⽤平板表⾯积，注意勿使前后两条线重叠，划线完毕，关上⽫盖。
微生物常用的接种方法
微生物常用的接种方法首先，最常见的接种方法之一是平板接种。
平板接种是将微生物接种在富有营养物质的平板培养基表面上，通过均匀涂抹的方式使微生物均匀分布在培养基表面。
这种方法适用于对微生物营养需求较高的情况，可以有效地促进微生物的生长和繁殖。
在进行平板接种时，需要注意使用无菌技术，避免外界的污染对实验结果的影响。
其次，液体接种是另一种常用的接种方法。
液体接种适用于对微生物生长环境有一定要求的情况，可以提供更加精确的实验条件。
在液体接种时，需要将微生物接种在含有适当营养物质的培养基中，通过摇床或培养箱等设备进行培养。
这种方法可以更好地模拟微生物在自然环境中的生长状态，对于一些特殊微生物的研究具有重要意义。
另外，还有一种常用的接种方法是斜面接种。
斜面接种是将微生物接种在培养基斜面上，通过均匀涂抹的方式使微生物均匀分布在斜面上。
这种方法适用于对微生物的形态和生长特性有一定要求的情况，可以更好地观察微生物的生长情况和形态特征。
在进行斜面接种时，需要注意斜面的倾斜角度和培养基的均匀涂抹，以保证实验的准确性和可靠性。
除了上述常见的接种方法外，还有一些其他特殊的接种方法，如深层接种、滴定接种等，它们适用于特定的研究需要，可以根据实验的具体要求进行选择和应用。
总的来说，微生物常用的接种方法包括平板接种、液体接种、斜面接种等多种形式，科研工作者可以根据实验的具体要求选择合适的接种方法。
在进行接种时，需要注意使用无菌技术，避免外界的污染对实验结果的影响。
通过合理选择和应用接种方法，可以更好地促进微生物的研究和实验，为微生物学领域的发展做出更大的贡献。
微生物接种实验报告
微生物接种实验报告
实验目的：通过将微生物接种到培养基中并观察其生长繁殖情况，了解不同微生物对不同环境条件的适应能力。
实验材料：
1. 培养基：选择常用的富含营养成分的琼脂培养基。
2. 微生物样本：选择具有不同生长特性的微生物样本，如大肠杆菌、酵母菌等。
3. 培养皿和试管：用于培养微生物的容器。
实验步骤：
1. 准备培养基：按照指定比例将培养基溶解于适量的水中，加热煮沸，然后倒入培养皿中待其凝固成琼脂。
2. 微生物接种：将选取的微生物样本分别转移到无菌的培养皿或试管中，通过划线法或滴管法进行接种。
3. 培养条件：将接种好的培养皿或试管置于合适的温度条件（如恒温箱）下，并保持适当的湿度。
4. 观察与记录：在适当的培养时间内，观察不同微生物在培养基上的生长情况，并记录其生长速度、形态特征等。
实验结果：
根据观察与记录，不同微生物在培养基上展示出不同的生长情况。
某些微生物可能会在较短的时间内迅速繁殖，形成密集的菌落，而其他微生物可能生长较慢或在特定环境条件下生长正常。
此外，还可以观察到微生物在培养基上形态特征发生变化的现象。
实验结论：
微生物接种实验结果展示了不同微生物对不同环境条件的适应能力和生长特性。
通过了解微生物的生长特点，可以更好地应用于工业生产、环境监测等领域，同时也对微生物的分类和鉴定有重要的参考价值。
微生物常用的接种方法
微生物常用的接种方法微生物的接种方法主要分为直接接种和间接接种两种。
1. 直接接种：直接将微生物菌株接种到所需培养基或宿主中，常见的直接接种方法包括：刷涂法、滴液法、插管法、点刺法等。
刷涂法：将微生物菌株涂布在培养基表面，常用在固体培养基上。
先将培养基倒在无菌平板上，然后用无菌棉签挑取微生物菌株，涂布在培养基表面。
然后，用无菌铂丝将涂布的微生物菌株均匀划开，使其均匀分布在培养基上。
滴液法：将微生物菌株滴加到培养基上，常用于液体培养基。
将所需培养基倒入无菌试管中，然后用移液器吸取微生物菌株悬液，滴入试管中的培养基。
插管法：适用于需要氧气的微生物。
首先将无菌棉球塞入试管底部，然后用被接种菌株液体湿润棉球，最后将试管加盖并放入适宜的环境进行培养。
点刺法：适用于菌落计数。
选取已培养的纯菌落，用精细铂丝在无菌培养基上点刺菌落，再迅速涂布在培养基上。
2. 间接接种：首先将微生物菌株培养增殖至一定量或特定状态，然后将培养液接种到所需培养基或宿主中。
常见的间接接种方法包括：液体传代接种、平板传代接种和传代接种。
液体传代接种：将微生物初代培养液添加至新的液体培养基中进行传代培养。
首先取少量初代培养液，转移到新的培养基中，然后逐渐增加培养基的体积，直至达到所需的培养体积。
平板传代接种：将微生物初代培养液均匀涂布在培养基表面，待菌落生长后，挑取单个菌落接种到新的培养基或药敏试验板中。
传代接种：通过逐步培养，将微生物菌株传代至新的培养条件。
首先从原始菌株中选取少量接种到培养基中，经过一段时间的培养后，再从这些培养物中选取一部分接种到新的培养条件中，如改变培养基成分、温度等，以适应新的培养条件。
微生物的接种方法不仅影响菌落生长、菌株纯度和培养效率，也直接影响到后续实验的结果准确性。
因此，在进行微生物实验时，需要根据实验的目的和要求选择合适的接种方法，并严格遵守无菌操作的规范，以保证实验结果的可靠性。
微生物常用的接种方法
微生物常用的接种方法
微生物的接种是微生物学实验中非常重要的一环，它直接关系到实验结果的准确性和可重复性。
在微生物学实验中，常用的接种方法有涂布法、点接法和扩散法。
首先，涂布法是微生物学实验中最常用的接种方法之一。
使用涂布法进行接种时，首先需要将待接种的微生物悬液均匀涂布在富营养培养基的表面上，然后利用消毒的玻璃棒或铲子将微生物均匀地涂布在培养基表面上。
这种接种方法适用于对微生物数量进行定量分析的实验，如菌落计数等。
其次，点接法是另一种常用的微生物接种方法。
使用点接法进行接种时，需要利用消毒的吸管或者铲子，将微生物悬液均匀地滴在富营养培养基的表面上，形成一个个小圆点。
这种接种方法适用于对微生物的单菌种分离和纯化，以及进行微生物的生长曲线实验等。
最后，扩散法是微生物学实验中常用的接种方法之一。
使用扩散法进行接种时，需要将待接种的微生物悬液均匀地涂布在富营养培养基的表面上，然后利用消毒的玻璃棒或者铲子在培养基表面上
进行扩散，使得微生物悬液均匀地分布在培养基表面上。
这种接种方法适用于对微生物的抗生素敏感性实验和微生物的产酶产毒实验等。
总之，微生物学实验中常用的接种方法有涂布法、点接法和扩散法。
不同的接种方法适用于不同类型的微生物学实验，选择合适的接种方法能够提高实验的准确性和可重复性，从而得到更加可靠的实验结果。
希望本文所述的接种方法能够对微生物学实验的进行有所帮助。
接种微生物的方法
接种微生物的方法
接种微生物的方法包括以下几种：
1. 培养基接种法：将待接种的微生物菌种移植到培养基表面或内部，通过培养基提供的营养物质和环境条件，使微生物得以生长和繁殖。
2. 涂布法：用棉签、铁圈或称量匙等将微生物菌种涂布在培养基表面，使其均匀分布，然后进行培养。
3. 针刺法：用接种针或注射针直接将微生物菌液注射到培养基内部，然后进行培养。
4. 对数稀释法：将微生物菌液按一定比例稀释后，取适量的稀释液接种到培养基上，使其逐渐稀释，从而得到不同浓度的微生物菌液。
5. 冲洗法：用适量的无菌液体（如生理盐水或培养基）冲洗微生物落或菌液，收集其中的微生物细胞，并将其转移至培养基上进行培养。
需要注意的是，以上方法只是常见的微生物接种方法，不同微生物可能需要采用不同的接种方法，具体操作要根据具体微生物的特性和实验要求来确定。
另外，在操作时一定要保持无菌状态，避免外部细菌或其他微生物的污染。
微生物的接种实验报告
微生物的接种实验报告微生物的接种实验报告一、引言微生物是一类极小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的各个环境中，对生态系统的平衡和人类健康具有重要影响。
本实验旨在通过接种微生物的方式，观察其在不同培养基条件下的生长情况，为微生物研究提供一定的参考。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 细菌培养基：含有营养物质的琼脂培养基、大肠杆菌培养基、葡萄球菌培养基。
- 真菌培养基：含有蔗糖和琼脂的培养基。
- 病毒培养基：含有细胞培养基和病毒接种液的培养基。
- 微生物接种液：细菌、真菌、病毒接种液各一份。
2. 实验方法：- 准备好所需的培养基和接种液。
- 将细菌培养基倒入培养皿中，用接种针分别从细菌接种液中取出适量的细菌，均匀涂抹在培养基上。
- 将真菌培养基倒入培养皿中，用接种针分别从真菌接种液中取出适量的真菌，均匀涂抹在培养基上。
- 将病毒培养基倒入培养皿中，用接种针分别从病毒接种液中取出适量的病毒，滴在培养基上。
- 将培养皿密封好，放置在恒温培养箱中，保持适宜的温度和湿度。
- 观察培养皿中微生物的生长情况，记录相关数据和现象。
三、实验结果与分析1. 细菌生长情况：在琼脂培养基上，细菌呈现出白色或黄色的圆形菌落，生长迅速，菌落边缘清晰。
大肠杆菌在大肠杆菌培养基上呈现出金黄色的菌落，而葡萄球菌在葡萄球菌培养基上呈现出乳白色的菌落。
这说明不同的细菌对培养基的要求有所不同，不同的培养基能够提供不同的营养物质，从而影响细菌的生长。
2. 真菌生长情况：在含有蔗糖和琼脂的培养基上，真菌呈现出丰富的菌丝生长，形成了类似蜘蛛网状的结构。
这说明真菌对蔗糖等碳源的利用能力较强，能够迅速生长和繁殖。
3. 病毒生长情况：由于病毒需要依赖宿主细胞进行复制和生长，因此在培养基上无法直接观察到病毒的生长情况。
但我们可以通过观察宿主细胞的变化来间接判断病毒是否感染了宿主细胞。
如果宿主细胞出现异常形态、细胞质变化或细胞溶解等现象，可以初步判断宿主细胞可能受到病毒感染。
实验四细菌的接种培养法与生长现象的观察
实验四细菌的接种培养法与生长现象的观察【目的和要求】1．掌握无菌技术，建立无菌观念；明确无菌操作时注意要点。
2．掌握细菌的接种、分离培养方法和接种环的制作方法。
3．熟悉细菌生长现象的观察方法。
【试剂与器材】1．菌种：葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌等。
2．培养基：固体、半固体、液体培养基。
3．其他：温箱、酒精灯、接种环、接种针、L形玻棒、打火机、记号笔等。
【实验内容】一、细菌的接种工具1．接种环和接种针：其结构包括环（针）、金属柄、绝缘柄三部分（见图4-1）。
其中环（针）部分最佳材料为白金丝，因其受热和散热速度快，硬度适宜，不易生锈且经久耐用，但因为价格昂贵而限制了其应用。
目前实验室常用的是经济实用的300~500W电热镍鉻丝。
一般要求接种环长5~8cm，直径为2~4mm，定量接种环的容量为0.001ml。
图4-1 接种环和接种针接种环（针）在使用之前需检查镍鉻丝是否呈直线，若有弯曲，需用吸管或接种环的另一端将其压直；若环不圆，可将镍鉻丝前端放在吸管尖部缠绕一圈，再将镍鉻丝突出的部分朝内压紧。
接种环用于固体、液体培养基的接种，接种针用于半固体培养基的接种。
2．L形玻棒：由直径2~3mm的玻璃棒弯曲成L形制成。
在使用之前用厚纸包扎后置高压蒸汽灭菌，或沾取无水乙醇后在火焰上烧灼灭菌。
主要用于液体标本涂布接种。
二、细菌的接种方法1．液体培养基的接种该法主要用于细菌的增菌培养或进行细菌的生化反应。
方法：（图4-2）（1）先将接种环在火焰上烧灼灭菌，待冷却后挑取少许细菌。
（2）左手拿试管，右手持接种环，用右手其余手指将试管塞打开，试管口通过火焰烧灼灭菌。
（3）将接种环在贴近液面的管壁上上下碾磨数次，使细菌均匀分布于培养基中。
（4）将试管口灭菌后加塞，接种环烧灼灭菌后放回原处。
（5）在试管上做好标记，经35℃培养18~24h后观察结果。
图4-2 液体培养基接种法2．半固体培养基的接种该法可用于保存菌种、观察细菌的动力或进行细菌的生化反应。
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琼脂
一、用固体培养基分离纯培养
菌落（colony）： 单个（或聚集在一起的一团）微生 物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定 程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞 生长群体
众多菌落连成一片
菌苔（lawn）
无菌操作： 火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行
思考题
1、无菌操作的关键步骤包括有哪些？ 2、大肠杆菌和沙门菌在麦康凯培养基上
的菌落特征各是什么？为什么？ 3、分区划线的目的是什么？ 4、接种真菌的培养基有何特殊要求？
下次实验
请各位同学认真预习以下内容：
微生物的快速生化鉴定 水中大肠菌群的测定
待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制
1. 利用选择平板进行直接分离
牛奶平板：分离蛋白酶产生菌； 颜色反应：分离特定的菌株；
待分离的微生物的生长特 征明显不同于其它微生物
常用的选择培养基
沙门菌常用的培养基： 亚硫酸铋琼脂平板(BS): 含有煌绿、柠檬酸铋铵、亚硫酸钠、硫酸亚铁， 具有强选择性，分离沙门氏菌 HE（Heetoen)： 柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、硫代硫酸钠、麝香 草酚蓝和复红，分离肠道致病菌
3、平板划线法
二、选择培养分离
对微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化
抑制大多数其它微生物的生长； 使待分离的微生物生长更快；
没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物 生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。
三、选择培养分离
1. 利用选择平板进行直接分离
高温下培养：分离嗜热细菌； 培养基中不含N：分离固氮菌； 培养基加抗生素：分离抗性菌；
物（成
进形的
行 分 类 、 鉴 定 的
状 、 颜 色 等 ） ，
菌 落 或 菌 苔 一 般
不 同 微 生 物 在 特
重 要 依 据
可 以 成 为
都 具 有 稳
定 培 养 基
对 该 微 生
定 的 特 征
上 生 长 形
菌落的描述：形态、表面和边缘特征
同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落
一、用固体培养基分离纯培养
操作步骤
1，先将目镜测微尺装入目镜中，方法是：先拨出目镜，旋 下目镜上的透镜，然后将目镜测微尺的刻度朝下，旋好目 透镜，并装上镜筒。
2，将镜台测微尺放在载物台上，刻度朝上，观察。 3，先低倍再高倍观察，旋转目镜测微尺，使其刻度与镜台
测微尺刻度线平行。移动载物台推动器使目镜测微尺的0点 与镜台测微尺的一条刻度线重合，然后于另一端找重合线， 计算两端重合线之间目镜测微尺和镜台测微尺各有几格， 重复三次，按公式计算出目镜测微尺每格实际长度。 目镜测微尺每格长度（微米）=（镜台测微尺两重合线格数 ×10 ） /目镜测微尺两重合线格数 4，取出镜台测微尺，取酵母菌悬浮液1滴于载玻片上，盖 上盖玻片，放在载物台上，进行测量菌体的大小（测20个 菌体，求平均值）。
显微测微尺有镜台测微尺和目镜测微尺。目镜测微尺是一块 可放在目镜内的园形玻片。在玻片中央把5mm长度，刻成 100等分的小格，其目镜测微尺经过镜筒光学系统后，其每格 尺寸随镜筒长度变化而变化，也随放大倍数而变化，因此必 须选定显微镜及放大倍数。然后用已知长度的镜台测微尺来 校准，计算出物镜下接目测微尺每小格的长度。然后才可用 接目测微尺直接测量标本的长度和宽度。镜台测微尺是一中 央部分刻有精确等分线的载玻片，其每格长度为10um，是专 用于校正目镜测微尺每格长度的。
常用的选择培养基
麦康凯培养基
乳糖、胆盐，弱选择性，中性红,分离肠道致病菌 中性红指示剂 pH感应范围6.8（红色）到8.0（黄色） 分解乳糖产酸，菌落颜色呈红色 沙门氏菌、志贺氏菌不分解乳糖，菌落颜色与培养基相
同 胆盐有助于沙门氏菌的生长，抑制其他细菌 大肠杆菌？ 沙门氏菌？
克氏双糖铁
蛋白胨； 牛肉膏 ； 酵母膏 ；乳糖 ； 葡萄糖； 氯化钠 ； 柠檬酸铁铵 ；硫代硫酸钠 ； 琼脂 ；酚红为指示剂，黄色 为产酸，红色为产碱
观察克氏双糖接种后斜面、底层产酸、产气、产H2S的情 况，
大肠杆菌斜面？ 沙门氏菌斜面？
接种划线
菌种：大肠杆菌、沙门菌、青霉 采用无菌操作进行移植 学会分区划线 所有平皿和试管必须有标记 18－24小时（真菌下周观察）观察试验结
使微生物在固体培养基平板上形成单个菌落的基本方法：
1、稀释倒平板法 2、涂布平板法 3、平板培养基分离纯培养
使用较多的常规 方法，但有时涂 布不均匀！
1、稀释倒平板法
操作较麻烦，对 好氧菌、热敏感 菌效果不好！
利用L棒进行涂布
3、平板划线法
果，描述固体培养和液体培养的细菌培养 特征
步骤
两个人为一组，一个接种大肠杆菌，一个 接种沙门菌
LB液体移植 普通琼脂：分区划线 麦康凯：分区划线 LB半固体培养基：穿刺接种 克氏双糖：先穿刺后接种斜面
真菌（青霉）
接种沙保劳氏培养基
微生物大小测量原理
微生物细胞的大小是其形态特征之一，也是鉴定的依据之一。 在研究工作中有时要测定显微镜下微生物细胞的大小，使用 工具为显微测微尺。
实验四
微生物接种方法及微生物 测量方法
实验目的与要求
强调无菌操作概念，掌握无菌操作技术 掌握微生物移植、纯化的基本方法 了解不同微生物在同一培养基上的培养特征，
及同一微生物在不同培养基上的培养特征 掌握几种常用的鉴别、选择培养基的使用 了解显微测微尺的构造；掌握应用显微测微
尺测量微生物细胞大小的方法与技术
微生物培养
Culture：在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体 混合培养物：含有多种微生物的培养物； 纯培养物： 只有一种微生物的培养物；
Pure culture 通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果
纯培养技术是进行微生物学研究的基础！
一、用固体培养基分离纯培养
液体培养基； 培养基： 固体培养基； 1.5%-2.5%