中草药对大肠杆菌体外抑菌试验
14种中药乙醇提取物对大肠杆菌的体外抑菌试验
MH 肉汤培养液院MH 肉汤粉末 7.5g袁 加入装 有 250mL 蒸馏水的锥形瓶中加热煮沸溶解并搅 拌袁121℃高温灭菌 20min 后备用遥 冷却后 4℃冷 藏备用遥 1.2.2 菌液的制备 取冷冻保存的塑料冻存管袁立即放置在 38~40 ℃ 水浴中快速复苏并适当摇动遥 直到内部结冰完全 溶解为止袁一般约 50~100s袁开启塑料冻存管袁吸 取菌液移植于麦康凯琼脂培养基上袁37 ℃恒温培 养 18~24h遥 挑取该麦康凯琼脂培养基上的单个菌
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落接种至另一麦康凯琼脂培养基上进行菌种复
圆园17 年第 5 期（总第 198 期）
上袁室温干燥 5min 后袁用无菌打孔器打孔袁以无
苏遥 采用平板计数法进行细菌计数袁勾取平板上 菌落 1~2 个袁 置于 MH 肉汤中袁37 ℃恒温振荡培
在人和家畜的生活环境中存在着各种细菌袁 而长期使用化学药物会导致药物毒副作用尧细菌
试 耐药性尧 药物残留所致的畜产品安全等问题袁且 验 抗生素渐渐不能满足畜产品无公害化生产的要 研 求遥 而中草药是我国特有的中医药理论和实践的 究 产物袁价格低廉袁药源广泛袁具有广泛的发展潜
力袁它主要是通过调整机体功能状态来实现抗菌 作用[1]遥 大部分中草药具有毒副作用小尧无残留尧 无耐药性的特点[2]袁中药作为替代化学药物解决 药残和抗药性的重要途径袁越来越受到重视遥 为 了寻求抗菌作用强的药物袁我们对十四种中药进 行了体外抑菌试验遥 1 材料与方法 1.1 试验材料
金银花等8种中草药的体外抑菌试验
仅对 葡 萄球 菌 有 一 定 抑 菌 作 用 ， 边 莲 仅 对 金 色 葡 萄 球 菌有 一定 抑 菌作 用 ， 黄 鹌 菜 、 花蛇 舌 草 、 半 而 白 马齿 苋 对 上 述 ５
种细 菌 未 见 抑 菌作 用 。
关键 词 中草 药
体 外 抑 菌试 验
最 小 抑 菌 浓 度
文 章 编 号 ：０ ７ ９ ５ （ ０ ８ ０ — ０ ９ ０ １ｏ — １７ ２ｏ ） １０ ０ — ２
１ ． 试 验 菌 株 ２
管 中 ， 次倍 比稀 释 至 第 ７管 ， 匀 后 自第 ７管 弃 依 混 去 １ｍＬ 。此 时 ， 中药液 含 量 比依 次为 １１ ，／０ 管 ／０ １ ， ２
１ ０ １ ０ １１０ １ ２ ，／４ ， ８管不加 药物 为对 ／ ，／ ，／６ ，／ ０ １ ０ 第 ４ ８ ３ ６
室 提 供并 鉴 定 。将上 述 菌种 接种 于 营养 肉汤 中 ， 置 于３ ７℃恒 温培 养箱 中培养 ２ ， ４ｈ ４℃保 存备 用 。
１３ 培 养 基 制 备 ．
营养 肉汤 、 营养 琼脂 按常 规方 法制 备 ．２ １ １℃高
压灭 菌备 用 。
１ ． 供 试 中 药 药 物 敏 感 性 测 定 ４
３ ７℃恒温 箱 中培养 ２ ， ４ｈ 观察 结果 。抑 菌 圈直径 小 于 １ ｍ 为耐 药 ，０ １ ０ｍ １～ ５ｍｍ为 中度 敏感 ，大于 １ ５ ｍ 为高度 敏感 。 ｍ
１ 最 小 抑 茵 浓 度 （ Ｉ ） 最 小 杀 菌 浓 度 （ Ｃ） ． ５ ＭＣ 和 ＭＢ
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兽 药 与饲料 添加剂 ２０ 年第 １卷第 ， ０８ ３ 嬲
金 银 花 等 ８种 中草 药 的体 外 抑 菌试 验
8种中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验_向双云
10
8 种中草药对大肠杆菌的体外 MIC 测定结果 黄芩 + + ++ ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ 黄连 － － － + ++ ++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ 黄柏 + + ++ ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ 鱼腥草 穿心莲 五味子 － + － － － + ++ ++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ + ++ ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ － － － + + ++ +++ ++++ ++++ ++++ 连翘 － + ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ 艾草 － － － － + + + ++ +++ ++++ ++++
几种中药方剂对猪大肠杆菌的抑菌效果观察
几种中药方剂对猪大肠杆菌的抑菌效果观察摘要：为考查中药对大肠杆菌的抑菌效果，选取了白头翁、黄连、黄柏等二十余种常见清热解毒、抗菌类药物，进行抑菌试验；分别采用了体外纸片扩散法及体内小白鼠实验，通过观察扩散情况与小白鼠致死及发病情况，考查其对大肠杆菌的抑菌效果。
结果显示，23种中药水提取液中，黄芩、白头翁、黄连对大肠杆菌的体外抑菌效果最强，可以为临床应用提供理论基础；其次是金银花、黄柏、菊花、陈皮、白芍、栀子、五倍子等；而石榴皮、土茯苓、木香、艾叶这几种中草药对大肠杆菌几乎没有抑制作用。
由复方1：菊花、五倍子、石菖蒲、黄芩，与复方2：大黄、黄芩、石菖蒲和金银花，合二为一组成的复方组合对体内外抑菌效果较为显著。
可能是几种不同的中药成分在对大肠杆菌作用过程中产生协同促进作用；而由地榆、白头翁、土茯苓组成的复方7，以及黄连、白头翁、木香和甘草组成的复方8，抑菌效果并不明显，这与代谢过程中的相互抑制作用有关；综合以上，黄芩、白头翁、黄连，以及由石菖蒲、五倍子、黄芩、菊花组成的复方，或由石菖蒲、黄芩、大黄、金银花组成的复方可以为临床应用提供参考。
关键词：中药；大肠杆菌；复方；抑菌效果；小白鼠猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的一类传染性疾病的总称。
根据猪的生理特性、日龄的增长及免疫状态等特征的不同，导致疾病的发生也存在一定的差异性。
常见的猪大肠杆菌病有以下三种：仔猪黄痢、仔猪白痢和猪水肿病。
1 材料与方法1.1 试验材料（1）试验动物健康的小白鼠和疑似患有大肠杆菌病的病猪（2）试验试剂麦康凯琼脂培养基粉、蛋白胨、牛肉浸膏、琼脂、氯化钠溶液、氢氧化钠溶液,超纯水，所有试剂均为分析纯及以上纯度。
（3）试验药物参考《全国中草药汇编》选取了具有清热解毒、抗菌、消炎等疗效的中草药二十余种，具体为：白头翁、黄连、黄柏、秦皮、黄芩、栀子、香附、穿心莲、石菖蒲、五倍子、菊花、大黄、金银花、艾叶、马齿苋、甘草、郁金、诃子、白芍、地榆、石榴皮、土茯苓、木香，以上中药材均购自吉林大药房，所有药物经鉴定均符合生药质量标准。
黄芩等六种中草药的体外抑菌试验
ｓ ｎ ｉ ｖ ｅ ｎ ｃ ｌｓａ ｎ ｎａ ａ ｃ ｍａ ａ Ｅ． ｏ ｉ ６ ａ ｄ Ｅ． ｏｉ４ ｒ ｏ ｅ ｓ ｉ ｅｔ ｔ ｅ ｖ ｌ ｎ ｓ ｅ ｓ ｉ ｅｔ ｓ ｍｅ ｅｏ ｉｅ ａ ｄ ａ ｔ ｎ ａ ｒ ． ｃ ｌ ２ ｎ ｃ ｌ ０ ｗｅｅ ｎ ｔ ｎ ｉ ｖ ｏ ｏ ｈ ｒｆ ｅ Ｃ ｌ ｅ ｅ ｔ ｏ ｓ ｔ ｉ Ｉ ｉ ｈ ｒ ａ ｄｃ ｎ ｓｅ ｃ ｐ ｋ ｌ ａ ． ｅｂ ｌ ｍｅ ｉ ｉｅ ｘ ｅ ｔ ｕ ｌ ｐ ｓ ｃ Ｋｅ ｙｗｏ ｄ ：Ｃｈｎ ｓ ｈ ｒ ａ ｍｅ ｉ ｉｅ ｉ ｉ ｏａ ｔ ａ ｔｒａ ｔ ｓ ａ ｔ ａ ｔｒａ ｅ ｆｃ ｒｓ ｉ ｅ ｅ ｅｂ ｌ ｄ ｃｎ ； ｎｖ ｔ ｎ ｉ ｃ ｅｉ ｌｅ ｔ ｎ ｉ ｃｅ ｉ ｌ ｆｅ ｔ ｒ ｂ ； ｂ
ａ Ｉ ｗｅ ｅｂ ｔ ｅ ｎ ｌ４０ａ ｄ １ １ ．Ｉ ｗａ ｏ ｒ ｔ ｌ ｅ ｓｔｖ ｏ ｓ ａ ｕ ｍ ｅｉ ａ ｕ ｉ ｅ ｄ ｔ ｌ ｎｄｔ Ｍ Ｃ ｒ ｅｗ ｅ ／ ｈｅ ｎ ／０ ｔ ｓｍ ｄｅａ ｅｙ ｓ ｎ ｉｉｅｔ ｏｌｎ ｍ ａ ｒｃ ｎ ｍ ｍ ｌ ｒａ ｈｅＭ Ｃ ｌ ｎ
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２ ・ 兽 医临床 ６
广东畜牧兽 医科技 ２ｌ ＃ （ 鲞 塑 ｏｏ ￣ 笠
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黄芩 等 六种 中草 药 的体 外 抑 菌 试 验
王德 成 ，张翠婷 （ 莞市黄江 兽 医站 ，广 东 东莞 东 ５３ ７ ２ ７ ０）
摘 要：应 用平板打孔法和试管两倍稀释法检测 了本地常见清热型 中草药黄芩 、青葙子、五 色梅 、一 点红 、鸡蛋花、少花龙葵等对 沙门氏菌和大肠杆 菌的抑制作用 。结果表 明：沙 门氏菌对黄芩 、一点红和
中 图分 类 号 ：￥ ５ ． ５ ８ ３ ７ 文 献 标 识码 ：Ａ 文章 编 号 ：１ ０ — ５ ７（０１ ） ６ ０ ２ — ２ ０ ５ ８ ６ ２ ０ ０ — ０６ ０
5味中药对鸡大肠杆菌的体外抑菌试验
5味中药对鸡大肠杆菌的体外抑菌试验李国旺;赵恒章;苗志国【摘要】为中药防治鸡大肠杆菌病的临床实践提供科学依据,采用常规的琼脂平板培养法、药敏试验的滤纸片法等,选取黄连、连翘、紫花地丁、黄芩和白头翁5味中药对鸡致病性大肠杆菌进行了体外抑菌试验.结果表明:5味中药对鸡大肠杆菌均有一定的抑菌效果,其中,黄连的抑菌直径为15.5 mm,抑菌活性最强;白头翁、连翘和紫花地丁次之,分别为14.0 mm、13.0 mm和12.2 mm;黄芩的抑菌活性较弱,为10.1 mm.黄连、白头翁抑菌效果较好,可在临床上应用.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2010(038)010【总页数】3页(P141-143)【关键词】中药;鸡大肠杆菌;抑菌作用【作者】李国旺;赵恒章;苗志国【作者单位】河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003【正文语种】中文【中图分类】S852.61+2鸡大肠杆菌病是指由埃希氏大肠杆菌的某些致病性菌株引起的鸡的多种疾病的总称，是威胁我国禽类养殖业的重要传染病之一。
鸡大肠杆菌病临床有多种表现形式，其中以急性败血型、卵黄性腹膜炎和生殖器官损害较常见，危害性也最为严重。
由于大肠杆菌病病原血清型复杂且抗药菌株的不断出现，给该病的防治带来很大困难，造成禽类的大批发病和死亡，给畜牧业造成巨大的经济损失。
而中药因为成分多样，其在禽类疾病防治上的疗效优势越来越明显，且中药的有多种成分和生物活性物质，兼有药物和营养的双重作用等特点。
采用黄连、连翘、紫花地丁、黄芩和白头翁5味中药体外抑菌的试验方法，检验其对鸡致病性大肠杆菌的抑菌效果，从而为临床应用提供一定的基础依据。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 药物黄连、连翘、紫花地丁、黄芩和白头翁5味中药，购于新乡市药材公司。
1.1.2 动物 18～20g的试验用小白鼠20只，购于新乡医学院实验动物中心。
中药复方对猪大肠杆菌的体外抑菌活性研究
２ ｏ １ ３年第 １ 期（ 总第 １ ７ ｏ期 ）
６ ２ ． ５ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ 。 而 复方 ２ 、 复方 ６和复 方 ７抑菌 效 果不
明显 ， ＭＩ Ｃ值和 ＭＢ Ｃ值相 对 较高 。 ２ ． ２管 碟法 测定 各 复方 中药 的体 外抑 菌试 验 结 果
２ 。 Ｏ ｍ ｌ ， 于第一管中加入灭菌 的受试复方 中药水提 物２ ． ０ ｍ ｌ ， 混匀后取 出 ２ ． ０ ｍ ｌ 放人第 ２管中 ， 依次 梯度稀释直 到第 ９ 管取出 ２ ． ０ ｍ ｌ 弃去 ， 第ｌ ０ 管不 加药物 ， 作为 阳性对 照 ， 第ｌ ｌ 管加受试复方 中药
水提物 ２ ． ０ ｍ ｌ ， 混匀后取 出 ２ ． ０ ｍ ｌ 弃去 ， 不加细菌 ，
冰箱保存备用 。 １ ． ２ 方 法 １ ． ２ ． １ 药液的煎制 ： 每个组方按 比例 混合 ， 称 取 适量装人三角烧瓶 中， 加ｌ Ｏ 倍量水浸泡 ２ ｈ ， 电炉 加 热微 沸 ２ ｈ ， ８层 纱 布 过 滤 ，药 渣 再 加 ８倍 量 水 煮沸 １ ｈ ， 过滤后 合并 ２ 次滤液 ， 离心过滤 、 浓缩至 终浓度为 １ ｇ ／ ｍ ｌ 。 凋ｐ Ｈ ７ － ３ ， 分装 ， 高压灭菌 ， ４ 冰 箱保存备用 。 １ ． ２ ． ２ 菌液制备 ：菌种接种于普通琼脂培 养基 上， ３ ７ ￣ Ｃ 培养 ２ ４ ｈ ， 挑取典型菌落接种于新鲜肉汤
由表 ２可 以看 出 ， 复方 １ 和 复 方 ３的平 均 抑 菌 圈 直 径 相 对 较 大 ，分 别 为 １ ５ ． ２ ０ ｍｍ 和
１ ７ ． ９ ９ ｍ ｍ， 抑菌强度均为 中敏 ； 其他几个复方 抑菌
3种中草药体外抑菌疗效比较的实验研究
3种中草药体外抑菌疗效比较的实验研究【摘要】目的研究秦皮、黄莲、黄柏3种中草药对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒沙门菌、绿脓杆菌和链球菌等菌的抗菌能力。
方法用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等5种菌进行受试,并且使用常见的中药药敏,进行打孔的办法来对这三种中草药水煎药剂的抑菌圈进行大小测定。
结果测定后发现这3种中草药对5种受试菌能够产生不同程度的抑制能力,其中黄莲对这5种受试菌抑菌效果是最佳的,秦皮稍微差一些,黄柏是当中最差的。
结论进行体外实验能够对受试菌产生程度不同的抑制作用。
【关键词】中草药;体外抑菌疗效;比较实验研究我院对黄莲、秦皮和黄柏3种中草药对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等5种细菌实行体外的抑菌性实验,现报告如下。
1 资料与方法1.1 实验材料①菌种:链球菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等均是由学校的微生物实验室来进行提供的;②中草药:均从武汉市购买的;③试剂:营养琼脂是由杭州天和微生物试剂有限公司生产的。
1.2 实验方法1.2.1 中草药药液制备使用传统煎煮法分别对黄柏、秦皮、黄莲等这三种中草药5 g稍微进行粉碎以后,使用纱布来包好,制作成单睐煎剂。
制法:将用纱布包裹好的中草药分为三味分别盛在烧杯之中,分别加入水100 ml在实行浸泡1 h以后慢慢加热直到煮沸,使用小火10～30 min,然后过滤,将过滤后的药渣再加上大约20 ml水,按先前的办法来实行煎煮过滤,将2次煎液合并以后再进行过滤,将过滤液实行浓缩直至为5 ml,其浓度控制为1 g/ml,用瓶子装好备用。
离心3000 r/min,离心20 min以后取上清液,用50的枸椽酸钠调pH值为7.2～7.6之间,倒入无菌试管之中,8磅15 min实行灭菌,最后取出放置在4℃冰箱之中进行保存,以备使用[1]。
1.2.2 菌液制备实验菌需要从生长在营养琼脂斜面上来取,接种在液体的培养基。
在37℃中培养12 h。
经过比浊判定菌量以后,然后进行稀释到其含菌量为105～106cfu/ml的菌悬溶液可以作为实验用的目标菌液。
五种中药对仔猪白痢大肠杆菌的体外抑制试验
ｈ １ １１ 中药饮 片 黄 连 、黄 芩 、黄 柏 、苦 参 、 液 。密封 静置 １ 备用 。 ．． １２ ４ 药敏 试验 微量 移液 器移取 ２ ０Ｉ 大肠 ．． ０ ｌ ｘ 白头翁 ，均购 自沈阳市天益堂大药房 。 ８ｈ营 １ １ ２ 抗生素 药敏 片 选 取大 肠杆菌 较 为敏感 杆 菌 １ 养 肉汤培 养物 ，滴 于普通 琼脂 培养 ．． 的 ４种抗生素药敏片 ：氟哌酸 、庆 大霉 素、卡那 基 上 ，使 用灭 菌 Ｌ棒涂 布 均匀 ，盖好 平皿 静 置
ｌ 审 国 ０ ０ — ０ ＋ ＋
从试 验 的结果可看 出 ５ 中药 中 白头翁 的体 种
中图分类号 ￥５．８ ８ ８ ２ 文献标识码 Ｂ 文章编号 １ ７— ６ ２ ２ ０ ）４ ０ ５ — ２ ２ ９ ９ （０ ９０ — ０ ４ ０ ６
仔猪大肠杆菌病是 由致病性 大肠 杆菌引起 的 痢发病仔猪 的粪便 。 肠 道传染病 ，主要表现 为仔 猪黄 白痢和 水肿病 。 １ ２ 试 验 方 法 ． 其 中，仔猪 白痢 多发生 于 １～ ０日龄 ，病猪主要 １ ２ １ 仔猪 白痢 大肠杆 菌 的分 离鉴 定 Ｏ３ ．．
抑菌 活性 ，同时与 ４ 常用抗生素 的抑菌活性进 高 压 蒸气 灭 菌 ，然后 置 于 ３ 恒 温 箱 中 ４ ， 种 ７ｃ Ｃ ８ｈ
行对 比。现 将 试 验 内容 及 结 果 报 告 如 下 。 １ 试 验 材 料 与方 法 １１ 试 验 材 料 ．
使其完全干燥 。在无 菌环境下用微量移液器在上 述 ５ 安瓿 内分别加入 ５种 中药药液 ，每瓶滴加 个 药液 ０ ５ｍ ，翻 动 纸 片 ，使 各纸 片 充分浸 透药 ． ｌ ７
试验 （ 种糖微量 发酵 管 、穿刺 接种 三糖铁 培养 接
云南10种中草药水煎剂对猪源大肠杆菌体外抑菌实验
取 ｌ ｍｌ 于４ ｍｌ 规 格 已灭 菌 离 心管 内 ． 各 中药 水 煎 剂 分别 设 一孔 阴性 对 照 ，加 ｌ ｍｌ 已灭 菌 Ｌ Ｂ普 通 液 体培 养基
２ ． ４ ． ４向 每 个 离 心 管 内 加 ５ ０ ｕ ｌ细 菌 浓 度 为 １ ０ ５ 一 ｌ Ｏ ６ ｃ Ｆ ｕ ／ ｍ ｌ 的猪 大肠 杆菌 菌液
抑菌浓度（ Ｍ Ｉ （ ＝ ） 。每种中药水煎剂实验设置 ３ 个重复。
３ 实验结 果
３ ． １ 中药水 煎液 抑菌 圈 实验结 果
表 １ 牛 津 杯 法 测定 各 中草 药 水 煎剂 对 猪 大 肠杆 菌抑 茵 圈结 果
Ｔａ ｂｌ ｅｌ Ｔｈ ｅ ｂａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｏ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｃ ｃ ｉ ｒ ｃ ｌ ｅ ｏ ｆ Ｃｈｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ｈ ｅ ｒ ｂａ ｌ ｍｅ ｄｉ ｃ ｉ ｎｅ Ｗ ａ ｔ ｅ ｒ Ｄｅ ｃ ｏ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｓ ｔ ｓ ｗｉ ｎ ｅ Ｅｓ ｃ ｈｅ ｒ ｉ ｃ ｈｉ ａ ｃ ｏ ｌ ｉ ｗｈｉ ｃ ｈ ｗａ ｓ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ ｔ ｈ ｅ ｏ ｘ ｆ ｏ ｒ ｄ ｃ ｕ ｐ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ
点 。供 试菌 为 猪 大肠杆 菌 Ａ Ｔ Ｃ Ｃ ２ ９ ５ ２ ２ 。 购 于广 东
临 床症 状 。猪 场 饲 养环 境 不 良、 消 毒不 规 范 及 猪 肠 杆菌 病 主要 表 现 为仔 猪 黄痢 、 仔 猪 白痢 和 猪水
肿 病回 。大 肠杆 菌 的血清 型众 多 ． 疫 苗 免疫 效果 不
猪 大 肠 杆 菌 病 是 由致 病 性 大 肠 杆 菌 引起 的 猪 的
一
１ ． １ 供试 药 品
试
中草药对羊大肠杆菌抑菌作用的试验
２ 单昧试验
２ ． １材 料 与 方 法
选用 的中药有马齿苋 、 白头翁 、 五倍子 、 甘草、 郁 金、 诃子 、 黄芩 、 大黄 、 黄连 、 桅子 、 黄柏 、 秦皮 ， 培 养 基 有ｓ Ｓ 培养基 、 麦康凯培养基 、 Ｍ — Ｈ培养基 ， 所用仪器 有优普超纯水 机 、 恒温水浴锅 、 电热 恒 温 培 养 箱 、 高
方剂 ， 为 中草药 防制 羊大肠 杆 菌病 提 供 直接依 据 。
１羊大肠杆 菌病及其治疗药物概 况
随着 大 型集 约 化 畜牧 业 的 发展 ，病 原 性 大 肠 杆 菌 对 养殖 业 所 造 成 的危 害 日益 加 剧 。致 病 性 大 肠 杆 菌 可引起人 和多种动物 发病 ， 如羊 、 仔猪 、 犊牛、 幼
难度和弊端 ，某些化学制剂虽有抑制细菌多制 。由于我 国 的 畸 些 疾 病 治疗 方 面存 在 疗 ；
养殖技术顾 问 ２ ０ １ ３ ． ４ 在 某
要成 分为马齿苋 、 甘草、 郁金 ， 组方三 主要 成分为黄
速低 温离 心 机 、 超 净 工作 台 。
２ ． ２ 试 验 方 法 将 中草药 分 别取 ５ ０克 置 于砂 锅 内 ， 经 蒸馏 水 浸
质量 ， 增加饲养效益 。本试验通过对 １ ２ 种中草药水 煎提取物抑菌活性 及不 同组方的临床试验研究 ， 筛 选 出对 大 肠 杆菌 敏 感 的药 物 及 对 大肠 杆 菌 病 有效 的
将 单 味 中 草药 不 同浓 度 的 提取 液 制 备 的药 敏 片
置于 ｓ ｓ培养基 、麦康凯培养 基 、 Ｍ — Ｈ培养基上 ， 置 ３ ７ ℃温 箱 中培 养 １ ４ ～ １ ６小 时后 观 察其 抑 菌 环 大 小 并 测定。
中草药对畜禽致病性大肠杆菌体外抑菌效果试验
中草药对畜禽致病性大肠杆菌体外抑菌效果试验龚争;唐响响;刘硕【摘要】目的:探讨中草药提取物对皖北地区分离的23株畜禽致病性大肠杆菌的体外抑菌效果.方法:采用水煎煮方法,分别提取单味中药板蓝根、蒲公英、甘草及复方中草药B、E有效部位,以琼脂扩散法分别测定其抑菌圈大小及最小抑菌浓度(MIC),考察每种提取物抑菌效果.结果:蒲公英提取物对4种禽源大肠杆菌有抑菌作用,抑菌圈直径在10~15 mm,甘草对2种禽源大肠杆菌有抑菌作用,抑菌圈直径小于10 mm,复方B、复方E的水提物对6种猪源大肠杆菌有很好抑菌作用,抑菌圈直径在15~20 mm,对5种禽源大肠杆菌有抑菌作用,抑菌圈直径在10~20 mm,蒲公英、复方B和复方E的最小抑菌浓度(MIC值)在0.031~0.063 g/mL.结论:单味中草药对猪源致病性大肠杆菌无抑菌作用,对禽源大肠杆菌有一定的抑菌效果;而复方中草药对部分畜禽大肠杆菌具有较好的抑菌效果,对禽源大肠杆菌的抑菌效果优于单味中药且具有广谱性.【期刊名称】《安徽科技学院学报》【年(卷),期】2017(031)003【总页数】5页(P1-5)【关键词】中草药;畜禽致病性大肠杆菌;抑菌作用;最小抑菌浓度【作者】龚争;唐响响;刘硕【作者单位】安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳 233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳 233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳 233100【正文语种】中文【中图分类】S858.28畜禽大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的常见传染病之一，对养殖业的危害越来越严重。
多年实践表明，不同地区致病性大肠杆菌的优势血清型往往有差别，即使同一地区，不同养殖场的优势血清型也不尽相同，其许多血清型可引起多种家畜、家禽发病。
为控制该病，养殖企业普遍、大量和不合理投入抗生素，导致临床上产生严重的抗药性，且到了难以控制的地步[1]，近些年，出现超强耐药、多重耐药性大肠杆菌，使大肠杆菌病的治疗变得十分困难[2]。
关于筛选抗耐药性大肠杆菌的中草药抑菌实验
关于筛选抗耐药性大肠杆菌的中草药抑菌实验中草药作为我国特有的中医药理论与实践的产物，对细菌有一定的抑制作用，以其低毒、无药物残留、耐药性发生率低的独特优势，被广泛地应用于临床上，用来治疗各种感染性疾病。
因此中草药的抑菌效果研究是目前医学研究的主要方向之一，我们通过筛选有效抑菌实验抑制耐药性大肠杆菌生长，为选择敏感中草药治疗耐药性大肠杆菌引起的疾病奠定基础。
1 材料与方法1．1 材料：（1）中药：黄芩购自广西一心药业百色连锁店。
（2）菌种：耐药性大肠杆菌由右江民族医学院微生物学教研室分离、鉴定、保存。
经青霉素和红霉素的标准药敏纸片（购自杭州天和生物有限公司）测定为耐药。
（3）试剂：M-H培养基、NS购自杭州天和生物有限公司。
（4）其他材料：滤纸、培养皿、棉签等购自杭州天和生物有限公司。
1．2 方法1.2.1 煮沸法提取药液[1]：黄芩50 g加水过药面，文火煎煮，煎煮时间第一次1.5 h，第二次40 min，第三次30 min。
将3次药液合并后浓缩为100 ml（相当于每毫升0.5 g生药），再取第一次浓缩液10 ml，将其浓缩为5 ml的二次浓缩液（相当于每毫升1.0 g生药）。
将第二次浓缩液保存备用。
1.2.2 自制药敏纸片：制作直径6 mm的滤纸纸片，高压灭菌后烘干，然后把滤纸片浸泡于第二次浓缩液中过夜，60 ℃烘干箱烘干，无菌保存备用。
1.2.3 K-B法药敏试验[2]：(1)按每1000 ml蒸馏水称取Muller-hinton Agar 38 g配备M-H琼脂，按每个平皿(直径9 mm)25 ml进行分装。
(2)将孵育16～24 h 的菌种分别接种生理盐水试管中，校正浓度至0.5麦氏标准(相当于 1.0×108 CFU/ml)。
(3)用无菌棉签拭蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多余菌液后在M-H 琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1周。
(4)平板在室温下干燥3～5 min后用无菌镊子将药物纸片紧贴于琼脂表面，置35 ℃孵育16～18 h。
中草药对动物大肠杆菌体外抑菌试验步骤
中草药对动物大肠杆菌体外抑菌试验步骤选用27种不同的中草药制剂（煎剂、挥发油、蒸馏液），以平板稀释法和纸片法对同一株肉鸡源的大肠杆菌进行体外抑菌试验。
其试验结果表明，有14种中药对此株大肠杆菌有不同程度的抑制作用。
试验还表明中药制剂的配方工艺不同，其抑菌的效果亦有不同。
一、实验用材料方法1 材料（1）试验菌株肉鸡源大肠杆菌（安徽技术师范学院动物科学系预防兽医教研室提供）。
（2）培养基普通营养琼脂、麦康凯琼脂。
按常规方法制备。
（3）单味中药金银花、防风、板蓝根、白芷、连翘、杏仁、射干、辛夷、贯众、羌活、荆芥、藿香，中草药的煎制与蒸馏由安徽技术师范学院中药实验室完成，每毫升相当于1 g生药。
（4）复方中药银射煎液、麻杏射防煎液、羌藿连防煎液、辛芷荆煎液、辛芷荆蒸馏液、银射蒸馏液、羌藿连防蒸馏液、麻杏射防蒸馏液，每毫升相当于1 g生药。
2。
方法（1）大肠杆菌对中药（单味、复方）敏感性的体外试验-平板稀释法。
取1 ml原药液为第1支试管；在第2支试管中分别加入0.5 ml原药液和0.5 ml生理盐水以倍比稀释法稀释至第4支试管；第5支试管为无药对照管。
先分别把药液倒入无菌的平皿中，后倾入60℃无菌普通营养琼脂或麦康凯琼脂，并迅速混合均匀，制成平板。
以无菌的涂抪棒蘸取试验用细菌均匀涂抪于平板表面，置37℃培养箱内培养24 h，后观察结果。
（2）在第1支试管加入8 ml原药液，第2支试管加入4 ml原药液，第3支试管加入2 ml原药液，第4支试管加入1 ml原药液，第5支试管为无药对照管，在第2支试管至第5支试管中分别加入4 ml、6 ml、7 ml及8 ml生理盐水；按照1 2 1 1项方法制成平板，涂抪细菌后置37 ℃的培养箱中培养24 h后，观察并记录结果。
（3）大肠杆菌对中药（单味、复方）的敏感性试验——纸片法将筛选出的对大肠杆菌有明显抑制作用的复方、单味中药制剂分别制成药敏纸片，测定抑菌圈的大小。
中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验
养殖与饲料2019年第07期饲料营养•29•中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验董晓龙1孙越1张立永2赵月平$李子平2刘海斌21.华北理工大学药学院，河北唐山063210;2.河北北方学院牧业研究所，河北宣化075131摘要选取28种中草药，研究其对4种大肠杆菌菌株(血清型0^、血清型0机、血清型0込血清型0计0翅)的体外抑菌效果，抑菌圈的直径越大，抑菌效果越好。
本试验筛选了抑菌效果较好的10种中草药，分别是秦皮、厚朴、黄苓、苦参、黄连、穿心莲、马齿觅、鱼腥草、白头翁和大青叶。
关键词中草药;鸡;慢性呼吸道病中草药含有丰富的维生素、矿物质以及皂昔、多糖、生物碱等成分，具有一定抗菌消炎作用，因此，生产绿色、安全、性能稳定的中药制剂来预防、治疗大肠杆菌疾病已是一种趋势。
本试验选择单味中草药对大肠杆菌进行体外抑菌试验,以期为治疗大肠杆菌的中药制剂的配制提供理论参考。
1材料1.1中草药的选购中草药黄苓、黄连、穿心莲、大青叶、厚朴、秦皮、金银花、白术、木香、甘草、黄茯、黄柏、茯苓、白芍、当归、马齿觅、鱼腥草、梔子、大黄、赤芍、白头翁、知母、苍术、葛根、石榴皮、板蓝根、蒲公英和苦参，均购自张家口医药公司。
1.2试验菌株坝上长尾鸡鸡源大肠杆菌株1号(血清型0(、2号(血清型OJ、3号(血清型0Q、4号(血清型01+0148)o 2方法2.1单味中药药敏片试纸条的制备取黄苓、黄连、穿心莲、大青叶、厚朴、秦皮、金银花、白术、木香、甘草、黄茯、黄柏、茯苓、白芍、当归、马齿觅、鱼腥草、梔子、大黄、赤芍、白头翁、知母、苍术、葛根、石榴皮、板蓝根、蒲公英和苦参采用水煎煮法进行提取，制成含生药量为1g/mL的药敏片试纸条,4七冰箱中保存备用。
2.2培养基的制备将60七无菌麦康凯琼脂倒入无菌平皿中,制成平板，然后将平皿置121覽蒸汽高压20min灭菌,4七冰箱中保存备用。
2.3单味中药对大肠杆菌的体外抑制活性试验取宜径为0.5cm的灭菌滤纸片在单味中药的原药液中浸泡1h,取出备用。
中草药提取物体外抑菌活性比较
肉汤 培养 物 腹 腔 接 种 于 ｌ 健 康小 白 鼠 ，每 只 ０２ ０只 ．ｍＬ小 ２２ 中 草药 有 效 成分 的提 取 －
白鼠死 后 ， 菌取 心 血 分 离细 菌 ， 片 ， 兰 氏染 色 ， 检 。 无 涂 革 镜
针 对 各 药 不 同 的化 学 有 效 成 分 ， 别 设 计 了对 黄连 、 芩 、 分 黄 白头 翁 、 秦皮 、 四季 青 、 铁苋 菜 、 苦参 和穿 心 莲 中活 性 成 分 的 提 取
３讨 论
精子是有生命界限的 ，当温度下降至 １ ７℃以下保存时 ， 精 子的代谢慢慢的会降到很低 ， 极大的降低精子的能量消耗 ， 延长
了精 子 的 寿命 ， 当时 间过 长 时其 活力 会 下降 。 受 胎 率及 产 仔 数 跟 精 子 的 数 目与 活力 的关 系非 常密 切 ， 当
普通营养琼脂培养基 ， 一般选用 Ｌ Ｂ琼脂培养基。 营养琼脂按 说明， 溶化高压灭菌， 冷却 ４ 左右倒板 ， ５ 厚度为 ４ ｍｍ冷却备用。
１ ． 菌液 制 备 ．６ ２
用接 种 环 分别 蘸 取 纯 化 的 细 菌 ，于 培 养 皿 中 划线 培养 以得 到单 个 菌 落 ； 接 种 环挑 取 单 个 菌 落 接 种 于 ２ｍ Ｂ培养 液 内 ， 用 ＬＬ 由上 表 可 得 出 ， 酸 黄 莲 素 纯 品 、 芩 苷 纯 品 、０１白头 翁 硫 黄 ３： 提 取 物 、０１秦 皮 提 取 物 、０１四季 青 、０１ 苋 菜 提取 物 、０１ ３： ５： ３ ：铁 ２： 苦 参 提 取物 、和 ２ ：穿 心 莲提 取 物 对 仔 猪致 病 性 大肠 杆菌 均 有 ０１
１ ． 原 的分 离与 鉴 定 ． １病 ２
１材料 与方 法
板蓝根、野菊花、金银花和甘草及复合提取液对鸡大肠杆菌的体外抑菌试验
科技 创新
板蓝根 、野菊花 、金银花和甘草及复合提取液 对鸡大肠杆菌的体外抑菌试验
◎姜源明 俸祥仁 赵 武 陆忠础
采 用平板琼脂打 洞扩散 法，拟 以板蓝根、金 银花、野菊花和甘 草为 原料的提取液及其组合液对 大肠杆 茵抑 茵效果进行 了试验研 究。结果表 明 ：与单一原料提 取液的抑 菌作用相比 ，板蓝根 、金银 花、野 菊花和甘 草的复合提取液对 大肠杆 茵具有较 强的抑制作 用。 通过正 交试验得 出最 佳抑 茵作 用的配方是板蓝根 ：金 银花 ：野 菊花 ：甘草为 １ ． ０ ｇ ／ ｍｌ 法
材料 ： 板蓝根、金银花、野菊花、甘草 （ 购于南宁市药材站 ） ： 蛋 白胨 、营养琼脂、牛肉浸膏、氯化钠、雏鸡 （ ７日龄 ） 、大肠杆 复合提取液对大肠杆 菌的体外抑菌试验 。由表 ３可知野菊花 菌菌株 （ 临床分离株 Ｅ ｃ ｏ ｌ ｉ ．０ １ ｏ 提 取 液 浓度 对 抑 菌 圈 直径 的影 响 最 大 ，其 次 为板 蓝 根 ，再 次金 银 方 法 ：药 液 的 制备 。 花 ：复合提取液抑茵效果最佳 的浓度配 比为板蓝根 １ ． Ｏ ｇ ／ ｍｌ 、金银 板蓝根提取液的制备。取板蓝根 ｌ Ｏ Ｏ ｇ ，加 １ ０ ０ ０ ｍｌ的蒸馏水 花 １ ． ０ ｔ ｆ ｍｌ 、野菊花 ２ ． Ｏ ｇ ／ ｍｌ ，甘草 ０ ． ５ ｇ ／ ｍｌ 。甘草对细菌的影响较 水煎 （ 第一次 １ ． ５小时， 第二次 １ 小时 ） ， 合并两次板蓝根水煎液 ， 小 ，其主要作用在于协调相互问的作用 ，从中药君、 臣、佐 、使 然后将板蓝根水煎液浓缩至药液浓度 ｌ ｇ ／ ｍｌ ，真空抽滤得滤液。 的投药 习惯考虑也可选择复合提取液浓度配 比为板蓝根 １ ． ０ ｇ ／ ｍｌ 、 野菊 花 提 取 液 的制 备 。取 野 菊 花 ｌ Ｏ Ｏ ｇ ，加 ５ ０ ％乙醇 （ 无 水 分 金 银 花 １ ． Ｏ ｇ ／ ｍ１ ．野 菊 花 ２ ． ０ ｇ ／ ｍｌ ，甘 草 １ ． ０ ｇ ／ ｍｌ 。 析纯配制 ） 浸泡 １ ２小时，８ ０ ℃水浴热浸提 ４小时 ，滤去残渣 ， 滤 表 ３ 复合提取液对大肠杆菌抑菌正交试验结果 液用文火浓缩至 １ ０ ０ ｍｌ（ 即ｌ ｍｌ相当于 ｌ ｇ） ，调节 Ｐ Ｈ 值至 ７ ． ０ ， 试 验 编 号 板 蓝 根 金 银 花 野 菊 花 甘 草 ｛ ｌ 备用 。 —— ———Ｔ——— ——・ —— —— 一 金银花提取液的制备。取金银花 ｌ Ｏ Ｏ ｇ ，破碎后置于磨 口圆底 烧瓶 中，加 ７ ０ ％乙醇 （ 无水分析纯配制 ）热回流浸提 ，用调 温电 热套加热至微沸状态 ，热回流 ２次 （ 第一次 Ｉ小时 ，第 二次 ０ ． ５ 小时 ） ，得 浸 提液 备 用 。 甘草提取液的制备。 称取甘 草粉末 １ ０ ０ ｇ ， 加入蒸馏水 １ ０ ０ ０ ｍｌ 在沸水浴中提取 ３次 ，滤去甘草渣 ， 合并提取液 ，离心得上清液 ， 不同单味药对大肠杆菌 的抑菌作用存在差异。试验 中四种药 减 压 浓 缩至 １ ０ ０ ｍｌ ，真 空抽 滤 得 滤液 备 用 。 大肠杆菌菌液制备与浓度 测定 。菌种复壮后 ，采用平皿表面 物体 外抑菌试验中发现板蓝根、金银花、野菊花和甘草均具有较 强 的抑 菌 效 果 ，但 三 者 之间 无 显著 差 异 。 活菌计数法确定菌液浓度 ，使细菌原液浓度达 ９亿个／ ｍｌ 。 不同组方对大肠杆菌 的体外抑菌作用存在差异。不同组方由 复合 提取液 的配制。按 照正交设计法确 定各提取液 组合的 浓度 ， 将上述 ４种提取液按表 Ｉ的方案分别进行组合 ， 灭菌 ， 备 ４种单味药进行 组方，结果不同组 方对大肠杆 菌的抑菌作用有差 异 ，综合从开发复合制剂效果、生产成 本及传统用药习惯等角度 用。 ． Ｏ ｇ ／ ｍｌ ：１ ． Ｏ ｇ ／ 抑菌试验。采用琼脂打洞扩散法。分Ｉ Ｉ Ｉ ｉ 取茵落于 无菌生理 考虑 ，建议以板蓝 根 ：金银 花 ：野菊 花 ：甘草 为 １ ：２ ． ０ ｇ ／ ｍｌ ：１ ． Ｏ ｇ ／ ｍｌ 作为指导用药方案。 盐水中混匀 ，配制成 １ ０ ６个／ ｍｌ 菌悬液 （ 比浊法配制 。吸取 Ｉ ： ５ ０ ｍｌ 的稀释菌液 Ｉ ｍｌ 注入直径为 ９ ｃ ｍ 的灭菌培养皿 中， 每个菌种加入 （ 作者单位 ：１ ． 广 西兽医研究所 ；２ ．（ 通讯作者 ） 广西百朋种畜 场 ；３ ．广 西 南 宁 市 动 物 卫 生 监 督 所 ）
单味中药对鸡大肠杆菌体外的抑菌试验
有 很 好 的抑菌 效 果 ；黄 连 、蒲 公英 、知 母 、苦
参、黄柏 和麻黄有一定的抑菌效果 ；决 明子 、千 ［１程太平 ， ５ ］ 杨晓林 ， 勇． 李 复方乌梅汤对 禽大 肠杆菌病 里 光 无 抑 制 作 用 。详 见 表 ２ 。 的 防 治试 验 『． 兽 医 医 药杂 ，０ ６ ２ ３ — ３ Ｊ中 ］ ２ ０ ， ：２ ３ ．
２ 结 果 与 分 析 ２ １ 鸡 ０型大 肠杆 菌 组 ．
地榆 、连 翘 、黄 芩 、
黄 连 、知 母、ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ参 提取 物对 鸡 ０ 型大肠 杆 菌均 有 很好 的抑菌效 果 。蒲 公英 、金银花 、千里光 、
表 １ 不同药物对鸡大肠杆菌 Ｏ 型 的抑菌结果 注 ：一 表 示无抑菌浓 度、 “” 无抑菌 圈 ； ＃” “ 表示浑
３ ℃温 箱 内培 养 ２ ， 观 察 细 菌 生 长 情 况 ， 同 ７ ４ｈ
时，以无药琼 脂作 为对照 。结果判定 以无药琼脂 的细 菌生 长 记作 “ ＋ ＋ ， 中草 药 琼脂 与其 比 ＋＋ ” 较 ，细 菌生长强度越 低 ，则 “ ”越 少 ，不 长菌 ＋
则 以 “ ”表 示 。 一
２ ２ 鸡 Ｏ型大 肠杆菌 组 ． 。
相 同中草药对 不 同血
『１ 天龙 ， ２ 刘 郭世 宁， 刘钟 杰． 中草药 防治禽大肠杆菌病 的研 究进展『． Ｊ 山东家禽，０ ４ （ ）４ — ３ ］ ２ ０ ，９ ： １４ ． ｆ ３ １褚秀玲 ， 苏建青 ， 韦旭斌． 中药抗大肠杆菌病研究进 展［ ． Ｊ 安徽农业科学 ，０ ８ ３ （ １ ：０ ３ ９ ９ ． 】 ２０ ，６ ２ ）９ ９ — ０ ４ 【 ４ 】刘玉 庆 ， 晔 ， 程 川， 大肠杆 菌对 中草 药敏感 李 车 等． 性 试 验 及 其 方 法 研 究 ｆ． Ｊ 中兽 医 医 药 杂 志 ， ０ ３ １ ２ ０
几种常见中药对大肠杆菌的体内外抑菌效果
2012年第10期试验研究随着集约化养殖业的发展,禽、畜的肠道病发病率有增无减,应用抗生素和化学抗菌药防治疾病仍是主要手段,但由于使用不当,造成的环境卫生和食品安全问题已备受世人关注。
近年来致病性大肠杆菌对多种抗生素表现出耐药性,而且耐药率有逐年升高的趋势。
中药作为中华民族的传统文化遗产,在我国应用于防治人畜疾病已有几千年历史。
已经实验证实有抗菌作用的中药有100多种,而且具有抗菌谱广,不易产生耐药性,可以联合应用等优点,日益受到国内外研究者的重视。
本试验选用金银花、蒲公英、杨树花、板蓝根、穿心莲、马齿苋、黄芩、大蒜等8种常见中药,结合体内外试验观察比较其对大肠杆菌的抑菌效果,为应用于畜禽大肠杆菌病的防治提供理论依据。
1材料与方法金银花、蒲公英、黄芩、穿心莲、板蓝根、马齿苋,购于北京同仁堂药房;杨树花,大蒜由动物科技学院临床兽医实验室提供;大肠杆菌,由动物科技学院微生物实验室提供,用前进行复壮。
Ba lb/c 小鼠120只,雌雄各半,体重(20±4)g ,河南科技大学景华校区实验动物中心提供。
称取50g 黄芩,洗去泥沙,加500m L 水,浸泡30m in 后,加热至沸腾,维持30m in ,纱布过滤,将药渣再加300mL 水煮沸30m in ,纱布过滤。
合并两次滤液,浓缩至50m L(1g /m L ),离心去除沉淀,装入试剂瓶中,标记。
灭菌保存备用。
其它几种中药也用此方法提取。
采用纸片琼脂扩散法。
将复壮过的大肠杆菌调整到1×109/m L ,用灭菌棉棒蘸取菌液均匀地涂布于营养琼脂平皿表面,晾干。
将灭菌纸片(直径为0.9cm )在各中药药液中浸泡5min ,沥干,贴在琼脂表面,同时设生理盐水作为对照,置37℃培养8h 后取出,测量各纸片周围抑菌圈直径。
采用试管二倍法。
将大肠杆菌液调整到1×109/m L ,取2m L 和等体积的中药药液混合,吸取2m L 至另一试管(含2mL 菌液)混合,依次2倍稀释。
18种中草药对大肠杆菌抑菌效果的研究
18种中草药对大肠杆菌抑菌效果的研究大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌，它在人体内起着重要的生理功能，但在一些情况下，大肠杆菌也会引起感染和疾病。
抑制大肠杆菌生长的有效方法之一是利用中草药。
本文将介绍18种中草药对大肠杆菌抑菌效果的研究。
1. 陈皮（Citrus reticulata）：陈皮中含有大量的挥发油和柑橘苷，具有抗菌活性。
研究发现，陈皮对大肠杆菌有明显的抑菌作用。
2. 地黄（Radix Rehmanniae）：地黄具有消炎和抗菌的活性。
实验结果显示，地黄提取物能有效地抑制大肠杆菌的生长。
3. 金银花（Lonicera japonica）：金银花中的苦橙苷具有显著的抗菌活性。
研究表明，金银花提取物对大肠杆菌有很强的抑制作用。
4. 防风（Radix Saposhnikoviae）：防风中的香豆素类化合物具有抗菌和抗炎作用。
实验证明，防风对大肠杆菌有较强的抑制效果。
5. 荆芥（Herba Schizonepetae）：荆芥中的挥发油对大肠杆菌有很强的抑制作用。
研究显示，荆芥提取物对大肠杆菌的抑菌率高达90%以上。
6. 黄柏（Cortex Phellodendri）：黄柏中的黄酮类化合物具有抗菌活性。
实验结果表明，黄柏提取物对大肠杆菌有明显的抑制作用。
7. 牛蒡子（Fructus Arctii）：牛蒡子中的化合物具有抗菌活性。
研究发现，牛蒡子提取物能有效地抑制大肠杆菌的生长。
9. 佩兰（Eupatorium fortunei）：佩兰中的挥发油具有较强的抗菌活性。
研究显示，佩兰提取物对大肠杆菌的抑制率高达90%以上。
10. 槐花（Sophorae Flavescentis）：槐花中的黄酮类化合物具有抗菌活性。
实验证明，槐花提取物对大肠杆菌有明显的抑制作用。
11. 山楂（Crataegus pinnatifida）：山楂中的红素具有抗菌活性。
研究发现，山楂提取物能有效地抑制大肠杆菌的生长。
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中草药对大肠杆菌体外抑菌试验＊路振香时维静杨用光（安徽技术师范学院，安徽凤阳，233100）选用27种不同的中草药制剂（煎剂、挥发油、蒸馏液，以平板稀释法和纸片法对一株肉鸡源的大肠杆菌进行体外抑菌试验。
结果表明，有14种中药对此株大肠杆菌有不同程度的抑制作用。
试验还表明中药制剂的配方工艺不同，其抑菌的效果亦有不同。
关键词：中药；大肠杆菌; 抑菌作用中兽医学有着悠久的历史和丰富的应用经验，在抗生素使用以前，对保障家畜健康起着重要作用。
随着科学技术的不断发展，西药以其方便快捷的优势逐渐在临床应用中占据主导地位，但由于西药抗生素类的广泛使用，使得病原菌的抗药性日趋增强[1]，中草药作为替代抗生素解决抗药性和药残的重要方案，越来越受到重视[2-3]，尤其是近年来肉食品中的抗生素残留问题已经被提到了一定的高度，而大肠杆菌又属于多血清型和变异型强的细菌，极易产生抗药性，笔者用不同种类和浓度的中药制剂分别用平板稀释法和纸片法对大肠杆菌进行体外抑菌试验，以期筛选出具有临床应用价值的中药制剂，为畜牧业生产服务。
1材料方法1.1材料1.1.1试验菌株肉鸡源大肠杆菌（安徽技术师范学院动科系预防兽医教研室提供）。
1.1.2 培养基普通营养琼脂、麦康凯琼脂。
按常规方法配制。
1.1.3 单味中药银花、防风、板兰根、白芷、连翘、杏仁、射干、辛夷、贯众、羌活、荆芥、藿香，每ml相当于1g生药量。
中草药的煎制与蒸馏由安徽技术师范学院中药实验室完成。
1.1.4 复方中药银射煎液、麻杏射防煎液、羌藿连防煎液、辛芷荆煎液、辛芷荆蒸馏液、银射蒸馏液、羌藿连防蒸馏液、麻杏射防蒸馏液，每ml相当于1g生药量。
1.2 方法1.2.1大肠杆菌对中药（单味、复方）敏感性的体外试验——平板稀释法[4]。
1.2.1.1取1ml原药液为第一支试管；在第二只试管中分别加入0.5ml原药液和0.5ml生理盐水以倍比稀释法稀释至第四支试管；第五支试管为无药对照，每支试管中均含有1ml不同浓度的药液。
先把药液倒入无菌的平皿中，然后倒入60℃左右的无菌的普通营养琼脂或麦康凯琼脂，并迅速混合均匀，制成平板。
然后以无菌的涂布棒蘸取细菌均匀涂布于平板表面，置37℃培养箱内培养24h后观察结果。
1.2.1.2 在第一支试管加入8ml原药液，第二支试管加入4ml原药液，第三支试管加入2ml 原药液，第四支试管加入1ml原药液，第五支试管为无药对照，在第二支试管至第五支试管中分别加入4ml、6ml、7ml及8ml生理盐水；按照1.2.1.1的方法制成平板，涂布细菌后＊项目基金：安徽技术师范学院稳定人才基金资助（批准号：YRC200316）置37℃的培养箱中培养24h后，观察并记录结果。
1.2.2 大肠杆菌对中药（单味、复方）的敏感性试验—纸片法[5]把通过前两步筛选出的对大肠杆菌有明显抑制作用的复方、单味中药制剂分别制成药敏纸片，测定抑菌圈的大小。
方法为：取直径为0.6cm的灭菌滤纸片在原药液中浸泡40min，取出备用。
在已制备好的平板中，无菌操作放置药敏纸片，每种药物贴6片，然后将平板置37℃温箱中培养24h后测定抑菌圈的大小，取其平均值。
２结果2.1 平板法抑菌试验结果当用平板稀释法检测大肠杆菌对中草药（单味、复方）的敏感性时，在低浓度下，银射煎液、麻杏射防煎液、新防风挥发油羌藿连防煎煮液辛芷荆煎煮液、银花蒸馏液、板兰根煎煮液及贯众煎煮液都有不同程度的抑菌作用；而连翘水煎液、辛夷煎煮液、射干煎煮液、羌藿煎煮液、藿香煎煮液、连翘挥发油在高浓度下对大肠杆菌的生长才有明显的抑制作用。
在低浓度下无抑菌作用的中药有：银花挥发油、辛芷荆蒸馏液、银射蒸馏液、羌藿连防蒸馏液、白芷挥发油、连翘水煎液、杏仁煎煮液。
在高浓度下无抑菌作用的有：麻杏射防蒸馏液、荆芥煎煮液、白芷煎煮液。
2 纸片法测定中草药对大肠杆菌生长的抑制作用结果见表1，从表1可以看出，单味中草药银花、贯众煎煮液、连翘水煎液、射干煎煮液、藿香煎煮液均有较强的抑菌作用，而防风挥发油煎煮液、辛夷煎煮液、板兰根煎煮液、羌活煎煮液的抑菌作用次之。
4种复方辛芷荆煎煮液、羌藿连防煎煮液、麻杏射防煎煮液及银射煎煮液都具有抑菌作用。
３小结与讨论3.1通过平板稀释法所筛选出的14种中草药（单味、复方）对大肠杆菌都具有不同程度的抑制作用。
因此，当用此14种中药进行纸片法药敏试验时都有抑菌圈出现，之所以未对平板稀释法的结果进行详尽阐述是因为其结果不易量化，评定时往往带有主观性，易产生误差而影响结果的准确性。
在此，笔者只把平板稀释法当作定性试验来筛选有抑菌作用的中草药，而把纸片法当作定量试验来具体判定中草药抑菌作用的大小。
从结果可以看出，单味中药银花蒸馏液、贯众、连翘、射干、藿香对大肠杆菌有明显的抑制作用，而其它单味中药对大肠杆菌的抑制作用较弱。
4种复方中药对大肠杆菌具有明显的抑制作用，说明药物配伍适当可提高其抑菌效果。
复方比单味中药的抑菌效果好，一方面与抑菌药物在复方中的比例有关，另一方面，与药物平板上涂布大肠杆菌的数量和方式也有影响，这与刘玉庆等[4]的观点是一致的。
表1：中草药对大肠杆菌生长的抑制作用中药制剂抑菌圈直径（cm）平均直径（cm）抑菌强度新防风挥发油0.75 0.75 0.700.70 0.80 0.80 0.75 +银花蒸馏液0.90 0.95 0.900.90 0.90 0.90 0.91 ++板兰根煎煮液0.80 0.80 0.800.80 0.75 0.65 0.77 +贯众煎煮液0.85 0.85 0.800.80 0.90 0.90 0.85 ++连翘水煎液0.80 0.80 0.800.80 0.85 0.90 0.83 ++射干煎煮液0.80 0.80 0.800.80 0.80 0.80 0.80 +辛夷煎煮液0.70 0.70 0.800.85 0.85 0.85 0.79 +羌活煎煮液0.70 0.70 0.700.80 0.85 0.90 0.78 ++藿香煎煮液0.80 0.80 0.800.85 0.85 0.90 0.83 ++连翘挥发油0.90 0.90 1.001.00 1.10 0.95 0.96 ++辛芷荆煎煮液0.90 0.90 0.900.80 0.95 0.95 0.90 +羌藿连防煎液0.80 0.80 0.800.80 0.80 0.80 0.80 ++麻杏射防煎液0.70 0.80 0.850.85 0.85 0.85 0.82 ++银射煎煮液0.80 0.80 0.800.80 0.85 0.90 0.82 ++注[5]：凡抑菌圈直径大于1.0cm者为强抑菌，用+++表示；凡抑菌圈直径为0.8-1.0cm者为抑菌，用++表示；凡抑菌圈直径小于0.8cm者为弱抑菌，用+表示。
3.2中草药的抑菌浓度是抗生素的1000倍级，这在中草药目前的炮制和使用情况下难以达到如此高的体内浓度，单味中草药难以替代抗生素，应在中草药和抗生素联合使用上进行研究，以减少耐药性和抗生素残留[4]。
3.3本次试验所用的中药成分有的为挥发油类，故在制成纸片或倒成平板时药物成分会挥发掉一部分，导致其浓度有所降低，加之药敏试纸为本实验室自己制作，由于工艺问题，薄厚可能会不太均匀，对试验结果可能会造成一定的影响，加大误差。
在试验过程中，笔者虽努力避免上述种种不利因素的影响，提高试验的准确性，但不确定因素总是存在的。
同时，本次试验所用的药品较少，细菌种类单一，本次试验所得结果仅供同行参考。
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