《染色体组型分析》PPT课件

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它可用于标记染色体的识别、特异融合 基因的检测、新基因定位,用全染色体 涂抹探针识别复杂的染色体结构异常。
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FISH具有其不可比拟的优点:
1.操作简便,探针标记后稳定,一次标记 后可使用二年。
2.方法敏感,能迅速得到结果。
3.在同一标本上,可同时几种不同探针。
4.不仅可用于分裂细胞染色体数量或结构 变化的研究,而且还可用于静止期细胞 的染色体数量及基因改变的研究。
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发展历史
1920年提出 三项技术促进:低渗处理
秋水仙素应用 植物凝激素应用 染色体分带技术:Q带、G带、C带、R 带、T带、N带等 FISH技术
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染色体的特征
数目 (2n=?) 长度 (绝对长度、
相对长度) 着丝粒位置
(M\SM\ST\T) 随体与次溢痕的数目、
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放射性同位素原位杂Fra Baidu bibliotek技术
原有的放射性同位素原位杂交技术存在 着较多缺点,诸如每次检验需重新标记 、 已标记的探针表现出明显的不稳定性 、 需要较长时间的曝光时间和对环境的污 染等。在观察结果时,需要较多的分裂 相进行统计学分析。此外,由于放射性 银粒和染色体聚集的不同平面,可能引 起计数上的误差等。
– inv 倒位
–t
易位
– +/- 在染色体符号前表示染色体增加或减少,在 染色体符号后表示染整理色pp体t 多出或缺少一部分 18
实验步骤
1. 计数,沿边缘剪下染色体,编号
2. 初步目测配对,分组
3. 测量长度,计算相对长度、着丝粒指数、 臂比,相同的染色体间配对
4. 将配对好的染色体排列并粘贴在纸上,每一 组下面画一横线,在两端注明起止号,并在 横线下的中部写明A-G组号,染色体从大到 小编为1-22号,性染色体单独列为一组
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实验用品
毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 人染色体放大照片
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染色体编号(人X染色体)
记述一特定带时,需
要写明4个内容:染
色体号,长短臂,区
的号序和带的号序。
这些内容按顺序写,
不用间隔或加标点。
如果某一带被再细分,
在原带号数后加一小
数点,编号原则仍按
从着丝粒往臂端序贯
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FISH的基本原理
很简单, 就是标记了荧光的单链DNA(探 针)和与其互补的DNA(玻片上的标本)退 火杂交, 通过观察荧光信号在染色体上的 位置来反映相应基因的情况.
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荧光原位杂交(FISH)
FISH技术是常规染色体分析的辅助手段。 它是用荧光素标记特异探针,与染色体 做杂交后,根据特异的荧光信号来判断 结果。
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FISH的技术特点:
FISH选用的标本可以是分裂期细胞染色 体也可以是间期细胞。间期细胞可以是 冰冻切片,也可以是细胞滴片或印片。
生物素(Biotin)地高辛(digoxigenin ), dinitrophenyl(DNP),aminoacetyl fluorene(AAF)均可用于探针标记。
编号。如1p31.2代表
一号染色体短臂3区1
带第2亚带
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核型描述
首先列出染色体总数,然后是性染色体组成, 接着列出异常的染色体数目或形态。下列统一 的命名符号:
– A-G 染色体组的名称
– 1-22 染色体编号
– X,Y 性染色体
– del 缺失
– der 结构重排的染色体
– dup 重复
大小和位置 带型分析
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各类常用实验生物和人细胞DNA含量与染 色体数目
物种
染色体数目 DNA含量(bp)
MS2 λ噬菌体
T4 枯草杆菌 大肠杆菌 啤酒酵母
果蝇 海胆 蛙 小鸡 小鼠 玉米 人
1 1 1 1 1 34 8 52 26 78 40 20 46
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3×103 5×104 5×105 2×106 4.2×106 1.4×107 1.4×108 1.6×109 4.5×109 2.1×109 4.7×109 3×109 3.2×109
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染 色 体 超 螺 旋
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染 色 体 的 大 小
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灯刷染色体(光镜观察)
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染色体观察及核型分析
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应用意义
染色体组型分析——染色体水平上的表型 可确定物种的特征,确定种属亲缘关系 分析生物物种的变异和进化过程 识别单条染色体、基因定位 临床应用(染色体疾病、产前诊断)
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思考题
请描述核型:
– 45,XY, der (14;21) (q21;q14) – 47,XY, +21
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遗生传及命分科子生学物中学实的验“新钓技术鱼新”方法(系列FI讲S座H)技 术
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发展历史
荧光原位杂交技术(fluorescence in situ Hybridization,FISH)问世于70年代后期, 其曾多用于染色 体异常的研究,近年来随 着FISH所应用的探针种类的不断增多,特 别是全COSMID探针及染色体原位抑制 杂交技 术的出现,使FISH技术不仅在细 胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学 研究,如诊断、基因定位等
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直接标记和间接标记
用生物素或地高辛标记称为间接标记, 杂交后 需要通过免疫荧光抗体检测方能看到荧光信号, 因而 步骤较多, 操作麻烦, 其优点是在信号较 弱或较小时可经抗原抗体反应扩大
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人类23对染色体
组型分析实验方法
染色体数目确定 染色体形态特征:
长度:绝对、相对 相对长度=每条染色体的长度/全套染色体长度 臂比=长臂/短臂 着丝点指数=短臂/(长+短臂) 随体的有无
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分组排队原则
着丝粒类型相同,相对长度相近的分一组 同一组的按染色体长短顺序配对排列 各指数相同的染色体配为一对 可根据随体的有无进行配对 将染色体按长 短排队,短臂向上
遗传学实验之—— 染色体组型分析
实验目的:
掌握染色体组型分析的各种数据指标 学习染色体组型分析的基本方法
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实验原理
定义:染色体组型又称核型,是指将动 物、植物、真菌等的某一个体或某一分 类群(亚种、种、属等)的体细胞内的 整套染色体,按它们相对恒定的特征排 列起来的图像。
核型模式图是指将一个染色体组的全部 染色体逐个按其特征绘制下来,再按长 短、形态等特征排列起来的图像。
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