磷脂与胆固醇资料

磷脂的相变温度发布时间：2012-05-28 14:04 点击次数： 520磷脂的相变温度磷脂相变温度是组成磷脂的酰基链由晶态向液态过渡时的温度。

处于相变温度时，酰基链活动性增强，脂质体膜通透性提高。

磷脂的相变温度对脂质体膜稳定性有重要参考意义。

在制备脂质体时，应充分考虑脂质体的保存条件、体内过程、药物释放行为等，选择具有适宜相变温度的磷脂。

信息来源于艾韦特网站：磷脂纳米载药系统发布时间：2012-11-01 15:52 点击次数： 87磷脂纳米载药系统磷脂：因其具有无毒、无刺激、以及优良的理化性质，被广泛应用于各种新型纳米载药系统。

脂肪乳：以磷脂为乳化剂的水包油乳剂。

以肠外营养或药物输送为目的，目前有多个产品上市，技术成熟。

脂质体：以磷脂双分子层为基础结构的脂质体药物递送体系，近年来被大量用于抗肿瘤药物和核酸类药物的载体。

有数个上市的产品，但技术难度比较大。

磷脂-胆盐混合胶束：磷脂可降低胆盐的CMC值，提高载药量，且工艺简单成熟。

制剂以注射液或冻干粉为主。

磷脂-聚合物胶束：相对于普通的聚合物胶束，磷脂-聚合物胶束载药量更高；而相对于单纯的表面活性剂胶束，磷脂-聚合物胶束热力学和动力学都更加稳定。

DSPE-MPEG2000已获临床应用，其作为胶束使用的药物制剂处于临床试验阶段。

磷脂-药物复合物：该体系可使难溶性药物实现静脉给药，也可用于提高口服给药的生物利用度，并在一定程度上降低药物的毒副作用。

目前较多的应用领域是口服的天然活性成分保健品。

应用：阳离子脂质体；细胞转染试剂常用阳离子脂质常用辅助脂质辅助脂质主要有磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰胆碱（PC）、胆固醇（Chol）等。

二油酰基磷脂酰乙醇胺（DOPE）是应用最广的一种辅助脂质。

膜脂质主要由磷脂、胆固醇和少量糖脂构成。

在大多数细胞的膜脂质中，磷脂占总量的70%以上，胆固醇不超过30%，糖脂不超过10%。

磷脂中含量最多的是磷脂酰胆碱，其次是磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺，含量最少的是磷脂酰肌醇。

磷脂、胆固醇和糖脂都是双嗜性分子。

磷脂分子中的磷酸和碱基、胆固醇分子中的羟基以及糖脂分子中的糖链等亲水性基团分别形成各自分子中的亲水端，分子的另一端则是疏水的脂肪酸烃链。

这些分子以脂质双层的形式存在于质膜中，亲水端朝向细胞外液或胞质，疏水的脂肪酸烃链则彼此相对，形成膜内部的疏水区。

膜脂质双层中的脂质构成是不对称的，含氨基酸的磷脂（磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇）主要分布在膜的近胞质的内层，而磷脂酰胆碱的大部分和全部糖脂都分布在膜的外层。

[3]磷脂分子的流动性受着一些因素的影响，主要影响因素有：①温度：在一定温度下，磷脂分子从液晶态(能流动具有一定形状和体积的物态)转变为凝胶状(不流动)的晶态。

这一能引起物相变化的温度称为相变温度。

当环境温度在相变温度以上时，细胞膜磷脂分子处于流动的液晶态；而在相变温度以下时，则处于不流动的晶态。

细胞膜磷脂分子相变温度越低，细胞膜磷脂分子流动性就越大；反之，相变温度越高，细胞膜磷脂分子的流动性也就越小。

②细胞膜磷脂分子的脂肪酸链：饱和程度高的脂肪酸链因紧密有序地排列，因而流动性小；而不饱和脂肪酸链由于不饱和键的存在，使分子间排列疏松而无序，相变温度降低，从而增强了膜的流动性。

所以细胞膜也具有流动性。

脂肪酸链的长度对细胞膜磷脂分子的流动性也有影响：随着脂肪酸链的增长，链尾相互作用的机会增多，易于凝集(相变温度增高)，流动性下降。

③胆固醇：胆固醇对细胞膜磷脂分子流动性的调节作用随温度的不同而改变。

在相变温度以上，它能使磷脂的脂肪酸链的运动性减弱，从而降低细胞膜磷脂分子的流动性。

而在相变温度以下时，胆固醇可通过阻止磷脂脂肪酸链的相互作用，缓解低温所引起的细胞膜磷脂分子流动性剧烈下降。

④卵磷脂/鞘磷脂比值，比值越高，膜流动性越大⑤脂双层中嵌入的蛋白质越多，膜流动性越大除以上因素外，细胞膜磷脂分子与膜蛋白的结合程度、环境中的离子强度、pH值等都会影响细胞膜磷脂分子的流动性。

膜脂的流动是造成细胞膜流动的主要因素，概括起来，膜脂的运动方式主要有四种。

①侧向扩散（lateral diffusion）；②旋转运动（rotation）；③伸缩运动（flex）；④翻转扩散（transverse diffusion），又称为翻转（flip-flop）⑤左右摆动⑥旋转异构运动膜蛋白的运动由于膜蛋白的相对分子质量较大，同时受到细胞骨架的影响，它不可能象膜脂那样运动。

主要有以下几种运动形式：①随机移动有些蛋白质能够在整个膜上随机移动。

移动的速率比用人工脂双层测得的要低。

②定向移动有些蛋白比较特别，在膜中作定向移动。

例如，有些膜蛋白在膜上可以从细胞的头部移向尾部。

③局部扩散有些蛋白虽然能够在膜上自由扩散，但只能在局部范围内扩散。

相变性随着环境条件的变化，脂质分子的晶态和液晶态是互变的；磷脂性状磷脂的性状与来源、生产工艺、纯度及保存条件都有关系。

纯度低的天然磷脂为液体或膏状，颜色较深，为棕黄色。

纯度越高，颜色变浅。

达到80%左右纯度的卵磷脂为浅黄色，采用冻干工艺的产品为膏状固体，采用喷干工艺的产品为粉末状。

天然磷脂很难做到非常高的纯度，目前，我国有批文的卵磷脂中以上海艾韦特的蛋黄卵磷脂PC-98T纯度最高，PC纯度可达到98%以上，产品为白色粉末。

天然磷脂不饱和度高，因此无论使用或贮存多么小心，多少都会有氧化发生，其结果就是极易吸水，暴露在空气中迅速变色、变粘。

天然磷脂会有一种特殊的腥味。

合成磷脂纯度一般都能达到90%以上，因此均为白色粉末状固体，吸水性和气味都比天然磷脂小的多，甚至无味。

有些试剂级的磷脂会以有机溶液的形式贮存和出售，有利于磷脂保存和使用中的稳定性。

使用Presome ACD-1生产阿霉素脂质体的方法及产品评价使用Presome ACD-1生产阿霉素脂质体的方法及产品评价——一种简易和稳定的DOXIL生产方法生产步骤：称量Presome ACD-1（HSPC:CHO:MPEG2000-DSPE=3:1:1 w/w）。

Presome ACD-1 粉末状，性状稳定，定量操作精确。

称量好的Presome ACD-1中加入250mM (NH4)2SO4缓冲液，并于60℃水浴下水合，形成粒径约1μm的寡室脂质体。

水合过程只需稍加振荡或搅拌，15min左右完成水合。

水合后的脂质体分别用0.2μm、0.1μm、和0.08μm的聚碳酸酯膜挤出5次。

可得到粒径约100nm的单室脂质体。

采用高压均质法，过程将更加简单、快速。

2-8℃下，采用蔗糖溶液对整粒后的脂质体溶液透析，移除外水相中的(NH4)2SO4。

透析后的脂质体浓度可以达到50mg/ml。

60℃下，阿霉素与脂质体温孵30min，梯度法载入，最后以0.1N HCl或NaOH调至6.5。

产品评价：药物包封率：100%。

离心法，取下层脂质体采用HPLC法检测。

粒径分布：100.9±0.9nm PDI 0.048±0.0043Zeta 电位：-27.1±0.7mv （9%蔗糖溶液）Malvern Nano-ZS产品组成：HPLC法检测。

药脂比：DOXIL 0.125; 产品0.122膜厚度：2.1nm冷冻电镜：单室脂质体，药物在内水相中结论：采用Presome ACD-1制备的阿霉素脂质体与DOXIL质量相近，过程简单，不使用有机溶剂，适合规模化生产。

胆固醇在脂质体中的应用胆固醇可调节磷脂双分子层膜的流动性，使膜通透性降低，减少药物渗漏。

同时可使脂膜维持一定柔韧性，增强脂质体囊泡抗击外部条件变化的能力。

并对磷脂的氧化有一定保护作用，制备普通载药脂质体，胆固醇是必须的添加物，用量一般为CHO:PC=0.3~1（摩尔比）。

因PC 和药物的不同，存在胆固醇的最佳用量。

在一定范围内，脂质体的粒径、氧化稳定性、物理稳定性与胆固醇添加量成正相关，超出范围时，超过膜负荷，会造成部分脂质体破裂。

另外，胆固醇的添加会对膜相变温度有一定影响，临界值以内使相变温度降低，临界值以上，使相变温度升高。

温敏脂质体有特殊的动力学特征，为了降低相变温度时的稳定性，迅速释放药物，可不添加胆固醇。

卵磷脂是什么卵磷脂是一种以磷脂酰胆碱为主要成分的多种磷脂的混合物，USP NF将其定义为不溶于丙酮的磷脂混合物。

19世纪最先发现存在于蛋黄中，因此命名为卵磷脂（lecithin），后来发现这样的磷脂混合物同样存在于大豆中。

现在为了区别来源，通常分为蛋黄卵磷脂（lecithinor egg lecithin），和大豆卵磷脂（soybean lecithin）两类，但是很多时候统一称为卵磷脂，不能区分，甚至有时候将磷脂酰胆碱也简称为卵磷脂。

事实上，不同来源、纯度的卵磷脂化学组成、用途差别很大，CAS都不相同。

Lecithin的CAS 为8002-43-5，定义为所有动植物组织中的磷脂酰胆碱，可做润滑剂、乳化剂、食品添加剂；大豆卵磷脂CAS号为8030-76-0，为大豆中提取的磷脂混合物，主要用于保健品、药物非注射剂，蛋黄卵磷脂CAS号为93685-90-6，定义为提取自蛋黄的磷脂混合物，主要用于注射级药物辅料。

因此，当我们拿到某一卵磷脂时，一定要弄清楚其来源、纯度和组成，再决定如何应用。

卵磷脂是什么卵磷脂是一种以磷脂酰胆碱为主要成分的多种磷脂的混合物，USP NF将其定义为不溶于丙酮的磷脂混合物。

19世纪最先发现存在于蛋黄中，因此命名为卵磷脂（lecithin），后来发现这样的磷脂混合物同样存在于大豆中。

现在为了区别来源，通常分为蛋黄卵磷脂（lecithinor egg lecithin），和大豆卵磷脂（soybean lecithin）两类，但是很多时候统一称为卵磷脂，不能区分，甚至有时候将磷脂酰胆碱也简称为卵磷脂。

事实上，不同来源、纯度的卵磷脂化学组成、用途差别很大，CAS都不相同。

Lecithin的CAS为8002-43-5，定义为所有动植物组织中的磷脂酰胆碱，可做润滑剂、乳化剂、食品添加剂；大豆卵磷脂CAS号为8030-76-0，为大豆中提取的磷脂混合物，主要用于保健品、药物非注射剂，蛋黄卵磷脂CAS号为93685-90-6，定义为提取自蛋黄的磷脂混合物，主要用于注射级药物辅料。

因此，当我们拿到某一卵磷脂时，一定要弄清楚其来源、纯度和组成，再决定如何应用。

相变温度：脂质体的物理性质与介质温度有密切关系，当温度升高时脂质体双分子层中的疏水链可从有序排列变为无序排列，从而引起一系列变化。

如膜厚度减小，流动性增加，产生由胶晶态(固态)向液晶态的转变等。

转变温度称为相变温度，它取决于磷脂的种类。

如脂质体膜由两种以上磷脂组成，它们各有特定的相变温度，在一定条件下它们可以同时存在不同的相。