血磷浓度检测试剂盒说明书 可见分光光度法
组织及血液酸性磷酸酶(ACP)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
组织及血液酸性磷酸酶（ACP）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2130规格：50T/24S产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体30mL×1瓶，4℃避光保存，变成蓝绿色不能使用。
标准品：液体1mL×1支，2μmol/mL酚标准液，4℃保存。
临用前蒸馏水稀释至0.5μmol/mL备用。
产品说明：ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸，常见于巨噬细胞的溶酶体内。
ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
在酸性环境中，ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚，苯酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应生成红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510nm吸光度增加速率，来计算ACP活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃、10000rpm离心10min，取上清液待测。
血液可直接用于测定，如果浓度高的话，用提取液稀释。
二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长到510nm，蒸馏水调零。
2.试剂一置于37℃水浴中预热30min以上。
试剂名称（μL）测定管对照管空白管标准管蒸馏水--100-0.5μmol/mL标准品---100上清液100---试剂一200200200200试剂二200200200200混匀后置于37℃水浴中保温15min试剂三600600600600上清液-100--混匀后于510nm测定吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。
三、ACP活性计算：1.按蛋白浓度计算活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。
总磷实验-仪器 药品
总磷测定（钼酸铵分光光度法）所需试剂及仪器1。
试剂1。
1 硫酸(H2SO4)ρ=1.841.2 (1+1）硫酸:取（1.1)硫酸与水等体积混合1。
3 过硫酸钾（K2S2O8)，50g/L溶液：将5g过硫酸钾（K2S2O8）溶于水并稀释至100ml。
1。
4抗坏血酸（C6H8O6），100g/L溶液:溶解10g抗坏血酸（C6H8O6）于水中,并稀释至100ml.此溶液储于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周.如不变色可长时间使用。
1.5 钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100ml水中。
溶解0。
35g酒石酸锑钾[KSbC4H4O7·1/2H2O]于100ml水中,在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300ml（1+1）硫酸（1。
2)中，然后再加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。
此溶液储于棕色瓶中，在冷处可保存二个月.1.6 磷标准储备溶液：称0.2179g于110℃干燥2小时在干燥器中放冷的磷酸二氢钾（KH2PO4）,用水溶解后转移至1000ml 容量瓶中.加入大约800ml水,加5ml硫酸（1。
2)用水稀释至标线,摇匀。
1.7 磷标准使用液：将10.00ml的磷标准溶液（1。
6)移至250ml容量瓶中,用水稀释至标线，混匀.2 仪器2.1 医用手提式蒸汽消毒器或一般压力锅(1。
1—1。
4kg/cm2)2.2 50ml具塞（磨口）比色管2。
3纱布和棉线2.4分光光度计2。
5 30mm比色皿备注：试剂仪器清单试剂1。
硫酸2.过硫酸钾(K2S2O8）3.坏血酸（C6H8O6）4。
钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O]5.酒石酸锑钾［KSbC4H4O7·1/2H2O］6.磷酸二氢钾（KH2PO4）仪器1.医用手提式蒸汽消毒器或一般压力锅（1。
1-1。
4kg/cm2）2.50ml具塞（磨口）比色管3.纱布和棉线4.分光光度计5.30mm比色皿。
分光光度仪测量总磷的方法
分光光度仪测量总磷的方法《分光光度仪测量总磷的方法：超有趣秘籍大放送》嘿，小伙伴们！今天我要像分享超级宝藏一样，把分光光度仪测量总磷的方法告诉你们。
这就像是一场奇妙的化学探险，跟着我走准没错。
首先呢，咱们得采集样本。
你可别小看这个步骤，就好比你要做一道绝世好菜，得先选好食材一样。
总磷样本可以从各种水体里采集，像湖水啊、河水啊，甚至是你家鱼缸里的水（要是你好奇你家鱼儿生活的水质有没有足够的磷的话）。
采集的时候要用干净的采样器具哦，要是带着脏东西进去，那就像是炒菜的时候锅没洗干净，整道菜都要毁了。
把水样采集到一个干净、干燥的容器里，这就是我们的“宝贝原料”啦。
接下来就是预处理水样。
这一步有点像给食材去腥切配。
我们要向水样里加入适量的硫酸，硫酸就像是一个超级严格的管理员，它的作用是把水样里的各种形态的磷转化成正磷酸盐。
这时候你得小心点加硫酸，就像给菜放盐一样，少了没效果，多了那可就糟糕啦。
我曾经有一次，脑子一抽，硫酸加得有点猛，结果那水样就像被施了魔法一样，变得乱七八糟，后来只能重新采样，真是个惨痛的教训啊。
然后呢，我们要加入抗坏血酸和钼酸铵。
抗坏血酸就像是个小助手，钼酸铵呢则像是个关键的魔法师。
它们两个和正磷酸盐一结合，就会发生神奇的化学反应，生成一种蓝色的络合物。
这个过程就像是一群小伙伴在开派对，大家一见面就组合在一起，变成了一种新的东西。
这个蓝色络合物可是我们测量总磷的关键哦。
现在就轮到分光光度仪上场啦。
这个仪器就像是一个超级精密的眼睛，它能看到我们肉眼看不到的东西。
先把分光光度仪预热一下，这就好比运动员上场前要热身一样。
预热好了之后，把含有蓝色络合物的水样放到仪器的比色皿里。
比色皿要擦得干干净净的，要是有污渍就像你戴着脏眼镜看东西一样，测出来的数据肯定不准。
在分光光度仪上选择合适的波长。
对于测量总磷产生的蓝色络合物来说，一般是在700纳米左右的波长下进行测量。
这就像你调收音机找对频率才能听到清楚的广播一样，波长选错了，得到的数据就会像喝醉了酒的人走路，歪歪扭扭完全不对。
无机磷测定试剂盒(磷钼酸盐法)产品技术要求zhongshengbeikong
无机磷测定试剂盒（磷钼酸盐法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中无机磷的浓度。
1.1规格液体双剂型试剂1(R1)：80mL×2，试剂2(R2)：36mL×2，校准品：2mL×1；试剂1(R1)：60mL×2，试剂2(R2)：27mL×2，校准品：2mL×1。
液体型试剂1(R1)：100mL×2，试剂2(R2)：10mL×1，校准品：2mL×1 1.2规格划分说明根据净含量划分规格。
1.3主要组成成分1.3.1 液体双剂型试剂盒由试剂1（R1）液体、试剂2（R2）液体和校准品液体组成。
1.3.1.1 试剂1（R1）液体表面活性剂硫酸 0.36mol/L1.3.1.2 试剂2（R2）液体钼酸铵 3.5 mmol/L硫酸 0.36 mol/L氯化钠 150 mmol/L1.3.1.3 校准品：水基质（1个浓度）磷酸二氢钾校准品定值范围 1.03 mmol/L～1.55mmol/L（每批定值）1.3.2 液体型试剂盒由试剂1（R1）液体、试剂2（R2）液体和校准品液体组成。
1.3.2.1 试剂1（R1）液体钼酸铵 1.06 mmol/L硫酸 0.446 mol/L1.3.2.2试剂2（R2）液体吐温-801.3.2.3 校准品：水基质（1个浓度）磷酸二氢钾校准品定值范围 1.03 mmol/L～1.55mmol/L（每批定值）2.1 外观液体双剂型试剂盒中各组件的外观应满足：a) 试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；b) 试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；c)校准品应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
液体型试剂盒中各组件的外观应满足：a) 试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；b) 试剂2（R2）应为淡黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；c)校准品应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
总磷检测实验试剂配制方法
总磷检测实验试剂配制方法所需试剂配制方法是否完成钼酸铵分光光度法水质总磷检测500mL硫酸(H2SO4)（1＋1）取250mL浓硫酸缓慢倒入150ml水中，冷却后倒入500ml容量瓶中，用水冲洗烧杯后倒入容量瓶定容至500mL。
500mL广口瓶保存。
1mol/L硫酸将27.2mL浓硫酸加入到200mL水中，搅拌冷却后，倒入500容量瓶中，用水冲洗烧杯后倒入容量瓶定容至500mL。
500mL广口瓶保存。
1mol/L氢氧化钠溶液20g氢氧化钠溶于水并稀释定容至500mL容量瓶中。
500mL广口瓶保存。
6mol/L氢氧化钠溶液120g氢氧化钠溶于水并稀释定容至500mL容量瓶中。
500mL广口瓶保存。
过硫酸钾：50g／L溶液将5g过硫酸钾(K2S2O8)溶解干水，并稀释定容至100mL容量瓶。
250mL细口瓶保存。
抗坏血酸：100g／L溶液溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中，并稀释定容至100mL容量瓶。
250mL细口瓶保存。
钼酸盐溶液溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100mL水中。
溶解0.35g酒石酸锑钾KSbC4H4O7· 1H2O]于100mL水中。
在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL硫酸（1+1）中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。
定容至500mL容量瓶。
贮存于棕色试剂瓶中，4℃保存。
浊度-色度补偿液混合两个体积硫酸（1+1）和一个体积抗坏血酸溶液（100g／L）。
使用当天配制。
磷标准贮备溶液称取0.11g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH2PO4)，用水溶解后转移至500mL容量瓶中，加入大约400mL水、加2.5mL硫酸(1+1) 用水稀释至标线并混匀。
500mL棕色瓶保存。
1.00mL此标准溶液含50.0μg磷。
本溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月。
磷标准使用溶液将10.0mL的磷标准储备液转移至250mL容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。
磷含量的测定(钼酸铵分光光度法)
产品质量检测说明书------缓蚀阻垢剂JF-296pH值的测定1仪器和设备酸度计：精确值单位，配有饱和甘汞参比电极、玻璃测量电极或复合电极。
2 分析步骤将药剂稀释成1%的水溶液待用，将稀释后试样倒入250mL烧杯中，将电极侵入溶液中，在已定位的酸度计上读出pH值。
密度的测定1仪器和设备⑴密度计：分度值为cm3。
⑵恒温水浴：温度控制在（20±1）℃。
⑶玻璃量筒：250mL。
⑷温度计：0~50℃，分度值为1℃。
2 分析步骤将试样注入清洁、干燥的量筒内，不得有气泡，将量筒置于20℃的恒温水浴中。
待温度恒定后，将清洁、干燥的密度计缓缓地放入试样中，其下端应离筒底2cm以上，不得与筒壁接触。
密度计的上端露在液面外的部分所占液体不得超过2~3分度。
待密度计在试样中稳定后，读出密度计弯月面下缘的刻度（标有读弯月面上缘刻度的密度计除外），即为20℃试样的密度。
药剂中总磷含量的测定--钼酸铵分光光度法1主题内容与适用范围本标准需将药剂精确稀释10000倍，测定水中的总磷含量，以计算药剂中的总磷含量。
本标准规定了水中总磷含量的规定。
本标准适用于含~50mg/L水中磷含量的测定。
2方法提要在酸性溶液中，用过硫酸钾作分解剂，将聚磷酸盐和有机膦转化为正磷酸盐，正磷酸盐与钼酸盐反应生成黄色的磷钼杂多酸，再用抗坏血酸还原成磷钼蓝，于710nm 最大吸收波长处分光光度法测定。
[]O H NH O PMo H H PO H MoO NH O H KSvOC 244012242424122424)(12644++−−−−→−+++-+-[]523434012210686O Mo MoO PO H O PMo H O H C ⋅⋅−−→−- 3试剂和材料本标准所用的试剂和水，再没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水。
磷酸二氢钾（GB1274）硫酸（GB625）：1+35硫酸溶液（1份硫酸，35份水）抗坏血酸（HG3-536）：20g/L ；称取10g 抗坏血酸，精确至，称取乙二胺四乙酸二纳(GB 1401) ，精确至溶于200mL 水中，加入甲酸（HG 3-1296），用水稀释至500mL ，混均，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）。
无机磷测定试剂盒(磷钼酸盐法,液体Ⅰ型)产品技术要求zhongshengzhongkong
无机磷测定试剂盒（磷钼酸盐法，液体Ⅰ型）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中无机磷的浓度。
1.1规格液体双剂型试剂1（R1）：60mL×2，试剂2（R2）：27mL×2；试剂1（R1）：80mL×2，试剂2（R2）：36mL×2。
1.2规格划分说明根据净含量划分规格。
1.3主要组成成分试剂盒由试剂1（R1）液体和试剂2（R2）液体组成。
1.3.1 试剂1（R1）液体表面活性剂硫酸 0.36mol/L 1.3.2 试剂2（R2）液体钼酸铵 3.5 mmol/L硫酸 0.36 mol/L 氯化钠 150 mmol/L 2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：a) 试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；b) 试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在波长340nm处（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.800。
2.4准确度测定GBW(E)080186，相对偏差应不超过±10％。
2.5分析灵敏度对应于浓度为1.5mmol/L的无机磷所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.250～0.600的范围内。
2.6重复性重复测试高、中、低浓度样本，变异系数（CV）应≤5%。
2.7批间差测定血清样本，批间差（R）应≤6%。
2.8线性范围在[0.1，5.0]mmol/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在（1.0，5.0]mmol/L范围内，线性相对偏差应不超过±10％；在[0.1，1.0]mmol/L范围内，线性绝对偏差应不超过±0.1mmol/L。
2.9稳定性2.9.1效期稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为24个月。
试剂有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
无机磷(P)测定试剂盒(磷钼酸盐法)产品技术要求sainuopu
无机磷（P）测定试剂盒（磷钼酸盐法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中磷的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂：1×20ml；2×60ml；3×40ml；4×60ml；4×400ml；2×30ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂：无色澄清液体。
校准品：无色至浅黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.4。
2.4 分析灵敏度测定浓度为1.62mmol/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.3，0.9）范围内。
2.5 线性范围在（0.2，4）mmol/L线性范围内，线性相关系数r应不小于0.996。
在[2，4）mmol/L范围内的线性相对偏差应不大于±10%；在（0.2，2）mmol/L范围内的线性绝对偏差应不大于±0.2 mmol/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于5%。
2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。
2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至核工业北京化工冶金研究院生产的有证参考物质（GBW(E)080186）。
2.10 稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。
分光光度法测定磷的含量(精)
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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分 光 光 度 法 测 定 磷 的 含 量
在线答疑：yanjie0001@ S54y@
90.5 问题讨论
(1)实验中为什么要用新配置的抗坏血酸和SnCl2溶 液? (2)标准曲线为什么会是一条通过坐标原点的直线?
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
待显色完全后在分光光度计上测定不同浓度的标准磷溶液的吸光度制作磷的标准曲线再测得待测溶液的吸光度便可在工作曲线查出待测溶液的磷含量
实验90 分光光度法测定磷的含量
90.1 实验目的
(1) 掌握分光光度计的工作原理及使用方法。
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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(2) 掌握抗坏血酸-氯化亚锡显色法测定磷含量原理。
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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分 光 光 度 法 测 定 磷 的 含 量
在线答疑：yanjie0001@ S54y@
使溶液呈深蓝色。蓝色的深浅与磷的含量成正比。 磷 含 量 为 0.5 ～ 2.0 mg·L-1 时 服 从 朗 伯 - 比 尔 定 律 。 SiO32- 会 干 扰 磷 的 测 定 ， 它 也 与 钼 酸 铵 生 成 黄 色 的 H3[Si(Mo2O7)6] ，并被还原为钼蓝，但可加酒石酸来控
测磷数据表（标液浓度20.0 mg·L-1 P2O5)
试 液
1 V(20.0 mg· L-1 P2O5)/mL V(去离子水)/mL 2%抗坏血酸用量/滴 V(4%盐酸钼酸铵溶液)/mL 0.5%SnCl2用量/滴 定容体积/mL P2O5含量/(mg· L-1) 吸光度A 0.00 25 10 5 5 50.00 2 1.00 25 10 5 5 50.00
无机磷检测试剂盒(紫外分光光度比色法)
仅供科研版本号：180912 无机磷检测试剂盒(紫外分光光度比色法)【产品组成】【保存条件】4℃，避光,6个月【产品概述】血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-两种磷酸根阴离子组成，上述阴离子在在不同的pH环境下能快速相互转换。
在pH7.4血清中，二者浓度比例为1:4；在酸中毒环境下二者浓度约为1:1；在碱中毒环境下二者浓度比例为1:9；在pH4.5尿液中浓度比例为100:1。
WHO推荐的常规检测方法为比色法，我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法，亦可采用紫外分光光度法。
无机磷检测试剂盒(紫外分光光度比色法)无需处理样本，利用无机磷不钼酸铵结合生成磷钼酸铵，通过分光光度计直接检测325～340nm处吸光度，根据公式计算出无机磷含量。
紫外分光光度法优点在于：操作简单、快速、稳定；缺点在于：易受溶血、黄疸、脂血的干扰。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断戒其他用途。
【使用方法】1、(选做)制备样品：①□浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Pi的检测。
②细胞戒组织样品：取恰当细胞戒组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。
③高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Pi，可以使用ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织戒细胞内的Pi含量。
2、制备磷标准工作液：取适量的磷标准(1mg/ml)，按磷标准(1mg/ml)：磷标准稀释液=1：24的比例稀释，即获得磷标准(1.292mmol/L)。
4℃保存，用于Pi的检测。
3、制备Pi显色工作液：取适量的Pi Assay buffer和钼酸铵显色液，等量混合，24h内使用。
4、Pi检测：按下表操作。
南京森贝伽生物科技有限公司网址：/第1页光度值。
分光光度计测定磷的含量
分光光度计测定磷的含量〖实验目的〗：掌握抗坏血酸-氯化亚锡显色法测定磷含量的原理。
掌握分光光度计的使用方法。
〖实验用品〗：仪器：721型分光光度计、容量瓶、吸灵管、移液管、滴管。
药品：4%盐酸钼酸铵溶液：称取40克钼酸铵（A.R.）溶于600ml 浓HC1中，慢慢加入400ml 水，混匀。
溶液中HC1的浓度为7.2摩尔每升。
2%抗坏血酸溶液：称取0.5克抗坏血酸（A.R.）溶于25ml 去离子水中（新配）。
0．5% SnCl 2 溶液：称取0.2克SnCl 2 （A.R.），用浓HC1溶解，加去离子水稀释到40ml （新配）。
标准磷溶液：称取KH 2PO 4 （A.R.） 于100ml 烧杯中，用少量去离子水溶解，定量转入250ml 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
此溶液每毫升含P 2O 5 1.0mg 。
吸取上述标准磷溶液5ml 于250ml 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
此溶液为含P 2O 5 20.0mg/L 的标准磷溶液。
材料：待测磷溶液（约1mg ·L -1）。
〖实验原理〗：测定试液中的微量磷，常用钼蓝比色法。
根据所用还原剂的不同，钼蓝法一般可分为氯化亚锡法和抗坏血酸法2种。
氯化亚锡法灵敏度高，室温下可迅速显色，但颜色稳定时间短（仅5分钟到20分钟），且容易受Fe 3+的干扰。
抗坏血酸钼蓝法具有颜色稳定时间长，Fe 3+干扰小等优点，但室温下反应速度慢，且不完全，必须用沸水浴加热，操作步骤繁琐。
若用抗坏血酸-–氯化亚锡比色法，即在加入SnCl 2前，先加入少量抗坏血酸，不但可以消除大量Fe 3+的干扰，增加稳定性，并能在室温下迅速显色。
磷酸盐在酸性溶液中与钼酸铵作用，生成黄色钼磷酸，其反应如下：()[]O H O Mo P H H MoO PO 267272434102712+===+++--该种黄色化合物遇到还原剂，如抗坏血酸、SnCl 2等，可被还原成钼蓝配合物，使溶液呈深蓝色。
总磷检测实验试剂配制方法
所需试剂
配制方法
是否完成
钼酸铵分光光度法
水质总磷检测
500mL硫酸(H2SO4)（1＋1）
取250mL浓硫酸缓慢倒入150ml水中，冷却后倒入500ml容量瓶中，用水冲洗烧杯后倒入容量瓶定容至500mL。500mL广口瓶保存。
1mol/L硫酸
将27.2mL浓硫酸加入到200mL水中，搅拌冷却后，倒入500容量瓶中，用水冲洗烧杯后倒入容量瓶定容至500mL。500mL广口瓶保存。
抗坏血酸：100g／L溶液
溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中，并稀释定容至100mL容量瓶。250mL细口瓶保存。
钼酸盐溶液
溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100mL水中。溶解0.35g酒石酸锑钾KSbC4H4O7· 1H2O]于100mL水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL硫酸（1+1）中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。定容至500mL容量瓶。贮存于棕色试剂瓶中，4℃保存。
浊度-色度补偿液
混合两个体积硫酸（1+1）和一个体积抗坏血酸溶液（100g／L）。使用当天配制。
磷标准贮备溶液
称取0.11g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH2PO4)，用水溶解后转移至500mL容量瓶中，加入大约400mL水、加2.5mL硫酸(1+1)用水稀释至标线并混匀。500mL棕色瓶保存。1.00mL此标准溶液含50.0μg磷。本溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月。
1mol/L氢氧化钠溶液
20g氢氧化钠溶于水并稀释定容至500mL容量瓶中。500mL广口瓶保存。
6mol/L氢氧化钠溶液
120g氢氧化钠溶于水并稀释定容至50Hale Waihona Puke mL容量瓶中。500mL广口瓶保存。
无机磷检测试剂盒(紫外分光光度比色法)
无机磷检测试剂盒(紫外分光光度比色法)简介：血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由H 2PO 4-和HPO 42-两种磷酸根阴离子组成，上述阴离子在在不同的pH 环境下能快速相互转换。
我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法，亦可采用紫外分光光度法。
Leagene 无机磷检测试剂盒(紫外分光光度比色法)无需处理样本，利用无机磷与钼酸铵结合生成磷钼酸铵，通过分光光度计直接检测325～340nm 处吸光度，根据公式计算出无机磷含量。
紫外分光光度法优点在于：操作简单、快速、稳定；缺点在于：易受溶血、黄疸、脂血的干扰。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 (选做)制备样品：① 浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Pi 的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Pi 的检测。
高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Pi ，可以使用ddH 2O 稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计 算单位蛋白重量组织或细胞内的Pi 含量。
2、 Pi 检测：按下表操作。
编号 名称TC1033 100T Storage试剂(A): 磷标准(1mg/ml) 1ml 4℃ 试剂(B): 磷标准稀释液 2ml 4℃ 试剂(C): Pi Assay buffer 100ml RT 试剂(D): 钼酸铵显色液 100ml 4℃ 避光 试剂(E): ddH 2O 2mlRT 使用说明书1份加入物( ml)空白管 标准管 测定管 ddH 2O0.07 — — 磷标准工作液(1.292mmol/L) — 0.07 — 待测样品—0.07Pi显色工作液 2.0 2.0 2.03、混匀，室温静置，分光光度计340nm处检测，比色杯光径1.0cm，以空白管调零，读取各管吸光度值。
总磷检测实验试剂配制方法
20g氢氧化钠溶于水并6mol/L氢氧化钠溶液
120g氢氧化钠溶于水并稀释定容至500mL容量瓶中。500mL广口瓶保存。
过硫酸钾：50g／L溶液
将5g过硫酸钾(K2S2O8)溶解干水，并稀释定容至100mL容量瓶。250mL细口瓶保存。
抗坏血酸：100g／L溶液
溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中，并稀释定容至100mL容量瓶。250mL细口瓶保存。
钼酸盐溶液
溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100mL水中。溶解0.35g酒石酸锑钾KSbC4H4O7· 1H2O]于100mL水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL硫酸（1+1）中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。定容至500mL容量瓶。贮存于棕色试剂瓶中，4℃保存。
磷标准使用溶液
将10.0mL的磷标准储备液转移至250mL容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。1.00mL此标准溶液含2.0μg磷。使用当天配制。
酚酞，10g／L溶液
0.5g酚酞溶于50mL95％乙醇中。
总磷检测实验试剂配制方法
浊度-色度补偿液
混合两个体积硫酸（1+1）和一个体积抗坏血酸溶液（100g／L）。使用当天配制。
磷标准贮备溶液
称取0.11g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH2PO4)，用水溶解后转移至500mL容量瓶中，加入大约400mL水、加2.5mL硫酸(1+1)用水稀释至标线并混匀。500mL棕色瓶保存。1.00mL此标准溶液含50.0μg磷。本溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月。
实验项目
所需试剂
配制方法
是否完成
钼酸铵分光光度法
水质总磷检测
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血磷浓度检测试剂盒说明书可见分光光度法
货号：BC1650
规格：50T/48S
产品内容：
试剂一：液体65mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；用前加入1.5mL蒸馏水溶解，再缓慢加405μL浓硫酸。
试剂三：粉剂×2瓶，4℃保存。
临用前配制，依次加入11mL蒸馏水充分溶解，再加入1.6mL试剂二，充分混合。
标准液：液体1mL×1支，0.5mmol/L无机磷，4℃保存。
产品说明：
血磷主要指血中的无机磷，以无机磷盐的形式存在。
血浆中钙、磷浓度关系密切，在以mg/dL表示时，二者的乘积(［Ca］×［P］)为30～40。
当(［Ca］×［P］)>40，则钙和磷以骨盐形式沉积于骨组织；若(［Ca］×［P］)<35则妨碍骨的钙化，甚至可使骨盐溶解，影响成骨作用。
血钙和血磷含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。
上述平衡受到维生素D3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。
去除血清中有机磷后，无机磷盐与钼酸铵试剂生成磷钼酸，被硫酸亚铁还原后呈蓝色，在660nm有光吸收；通过测定660nm吸光度，计算血液中磷含量。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
一、血磷浓度测定操作：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。
2.血清预处理：吸取50μL血清，加950μL试剂一，混匀后室温8000rpm，离心10min，取上清液，待测。
3.测定：
试剂名称（μL）空白管标准管测定管
标准液250
上清液250
蒸馏水250
试剂一250250250
试剂三500500500
混匀后静置10min，于660nm测定吸光度，分别记为A空白管、A标准管、A测定管。
二、血磷浓度计算：
血磷含量（mmol/L）=[C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×样品稀释倍数
=10×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
C标准液：0.5mmol/L；样品稀释倍数：（50μL血清+950μL试剂一）÷50μL血清=20；。
注意事项：
1、试剂三需临用前配制，如未用完，4℃保存，最多可使用3天；
2、测定过程中，应尽量避免溶血，因为红细胞中有机磷酯进入血清后可被酶水解而使得血清无机磷含量增
高
3、结果于40min内测定完毕。