三氯蔗糖成品的检测方法

薄层层析板：涂有0.25mm厚度的Merk硅胶60或其他等效物质。
9.2试剂
对氨基苯甲醚、邻苯二甲酸、甲醇、甘露糖醇、果糖。
9.3实验步骤
显色剂的制备：将1.23g对氨基苯甲醚（有毒害性）和1.66 g邻苯二甲酸溶于100 mL甲醇中。将溶液存放在暗处并冷藏，如果溶液退色则已失效。
标准溶液A的制备：称取10g甘露糖醇（精确至0.001g），用水溶解后，移入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
A管：吸取含铅量相当于指定种金属限量的铅标准溶液（不低于10ug铅）于50mL纳氏比色管中（如试样经处理，须同时吸取与试样液等量的试剂空白液），加水至25mL，混匀，加1滴酚酞指示液，用6mol/L稀盐酸或1mol/L稀氨水调节pH至中性（酚酞红色刚褪去），加入pH3.5的乙酸盐缓冲液5mL，混匀，备用。
标准溶液B的制备：分别称取10g甘露糖醇（精确至0.001g）和0.04g果糖（精确至0.0001g），移入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。
试样液的制备：称取2.5g试样（精确至0.001g），用5mL甲醇溶解后，转移至10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。
取标准溶液A、标准溶液B和试样液各5μL，分别在同一块薄层层析板的不同位置进行点样，将每份溶液分5次(每次1μL)点于板上，每次点样之间要待样点干燥后再继续点，3份样点的面积要基本相同，点样完毕后用显色剂喷雾后于100℃±2℃烘箱中加热15min，加热后立即在阴暗背下观察层析板，试样液的色斑呈色不应深于标准溶液B的色斑呈色。
式中：
X1——试样中三氯蔗糖的含量，%；
AU——试样液色谱主峰面积的平均值；
MS——称取三氯蔗糖标准品质量，g；
P——三氯蔗糖标准品的含量，%；
AS——标准溶液色谱主峰面积的平均值；
MU——称取的试样质量，g；
实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。
3.4注意事项
a)系统适应性为重复注入标准溶液两次，所得响应面积的RSD不大于2.0％。
计算公式：
【α】=50*α/(2*m)+0.1*(T-20)
其中：α—所测得旋光度；
m—样品质量
T—测定条件下的温度
两次平行测定结果不超过0.5%，取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果。
4.4注意事项
a)使用前调试仪器先要开电源开关，预热约30分钟；
b)样品的测试温度要控制在室温20℃±0.5℃；
物料名称
三氯蔗糖
测试项目
色泽、组织状态、气味、含量、比旋光、水分、灼烧残渣、水解物、相关物、甲醇、砷、重金属、鉴别、PH、颗粒度、堆积密度、三苯氧磷、细菌总数、霉菌酵母菌、铅、溶液的颜色和澄清度、口感
1色泽、组织状态
1.1仪器
洁净的白搪瓷托盘
1.2试剂
无
1.3实验步骤
取20g样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在相同的自然或照明光线下，观察其色泽和组织状态。
标准溶液的制备：准确吸取2.0mL甲醇，置于100mL容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。移取1.0mL该溶液，置于100mL容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。
试样液的制备：称取约2g试样（精确至0.001g），用内标溶液溶解，移入10mL容量瓶中，用内标溶液定容至刻度，摇匀。
在10.3参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，进样量为0.2μL，重复进样一次，计算出每次进样甲醇峰面积与内标物峰面积的比值。
试样液的制备：称取约0.1500试样（精确至0.0001g），溶于预先准确称取的49.0000g纯水中，所得溶液用0.45μm滤膜过滤，滤液备用。
测定
在3.3参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样液进行测定，进样量为60 μL，重复进样一次，计算出其主峰面积平均值。
ห้องสมุดไป่ตู้计算结果
X1=AU*MS*P/（AS*MU）*100
B管：取一支与A管所配套的纳氏比色管，加入10mL-20mL（或适量）试样液，加水至25mL，混匀，加1滴1%酚酞指示液，用6mol/L稀盐酸或1mol/L稀氨水调节pH至中性（酚酞红色刚褪去），加入pH3.5的乙酸盐缓冲液5mL，混匀，备用。
9.4注意事项
a)如果标准溶液A的点样点变黑，说明层析板加热时间过长，需重新制备；
b)对氨基苯甲醚是有毒物质，操作时注意不要和皮肤接触；
10甲醇
10.1仪器和设备
气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器。
10.2试剂
甲醇标准品（色谱纯）、色谱纯正丙醇、色谱纯吡啶。
10.3实验步骤
参考色谱条件
a)色谱柱：2.1m×4mm（内径）玻璃柱，内填充0.2mm~0.15mm聚苯乙烯型色谱固定相；或其他等效色谱柱。
b)进样时不得有气泡，并且进样速度保持匀稳推进。
4比旋光°
4.1仪器
旋光仪、容量瓶、电子天平
4.2试剂
纯水
4.3实验步骤
精确称取1g（精确至0.0001g）待测样品，用纯水溶解，定容至50ml同时做空白。先将装有空白液的试管放入样品室，将测量示数清零。然后将待测样品注入试管，同方向放入样品室，测量其旋光度。
试样处理：
称取试样5.0g置于坩埚中，加入适量硫酸浸润试样，小火碳化后，加2mL硝酸和5滴硫酸，小心加热，直到白色烟雾挥尽，移入高温中，于550℃灰化完全，冷却后取出，加2mL 6mol/L盐酸浸润残渣，于水浴上慢慢蒸发至干。用1滴浓盐酸浸润残渣，并加10mL水，于水浴上再次加热2min ，将溶液移入50mL容量瓶中，，如有必要须过滤，用少量水洗涤坩埚和滤器，洗涤液一并移入容量瓶中，混匀，每10mL该溶液相当于1.0g试样。在试样灰化同时，另取一坩埚，按上述方法座试剂空白实验。
实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的10%。
10.4注意事项
a)样品一定要称得精准；
b)所使用的烧杯、进样瓶、注射器等一定要干净无污染。
11重金属
11.1仪器
50mL纳氏比色管
11.2试剂
硝酸、硫酸、6mol/L盐酸、1mol/L盐酸、6mol/L氨水、1mol/L氨水、PH3.5的乙酸盐缓冲液、酚酞指示液、饱和硫化氢水、铅标准溶液、1%硝酸
标准溶液的制备：称取0.5g三氯蔗糖标准品（精确至0.001g），溶解于5.0mL甲醇中，此为溶液C。吸取0.5mL的溶液C，用无水甲醇定容至100mL，此为溶液D。试样液的制备：称取1.0g试样（精确至0.001g），溶解于10.0mL甲醇中。
取溶液C、溶液D和试样液各5μL，点于薄层层析板底部，将层析板置于盛有展开剂的层析缸中，待展开的溶剂前沿移至15cm时后取出薄层层析板，放置，待展开剂挥发干净后用显色剂喷雾，然后于125℃±2℃烘箱中加热10min。试样液主色斑的Rf值应与溶液C主色斑的Rf值相同，且试样液中其他色斑的呈色应不深于溶液D主色斑的呈色。
*100%
其中：
m1为坩埚+试样灼烧前的质量，g；
m2为坩埚+试样灼烧后的质量，g；
m为样品质量，g。
6.4注意事项
a)称样量必须精准；
b)加硫酸时一定要等冷却10分钟后才加，以防坩埚爆裂；
c)确保使用的坩埚是恒重的，并且一定要放在干燥器中冷却。
7PH
7.1仪器
酸度计、温度计
7.2试剂
pH=4.00，6.86, 9.18的缓冲溶液
W=(V2/V1*m*100)*100%
其中：V1—滴定纯水时消耗的卡尔费休试剂的体积，ml
V2—滴定试样时消耗的卡尔费休试剂的体积，ml
m—试样的质量，g
w—一水精制的水分
取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果。两次平行测定结果之差值不大于0.03%。
5.4注意事项
a)确保所使用的试剂在有效期内；
f)三氯蔗糖保留时间：9min左右，为确保获得所需的保留时间，必要时可以调整流动相的比例。
注：系统适用性为重复注入标准溶液两次，所得响应面积的RSD不大于2.0％。
分析步骤
标准溶液的制备：称取0.1500g三氯蔗糖标准品（精确至0.0001g），溶于预先准确称取的49.0000g纯水中，所得溶液用0.45μm滤膜过滤，滤液备用。
1.4注意事项
确保使用的取样签、取样袋干净无污染，取完样后立即扎紧袋口。
2气味
2.1仪器
留样瓶
2.2试剂
无
2.3实验步骤
三氯蔗糖倒入留样瓶中，在塑料留样瓶中嗅其味。
2.4注意事项
确保使用的取样签、取样袋干净无污染，留样瓶无污染。
3含量
3.1仪器和设备
高效液相色谱仪（配备示差折光检测器）、电子天平
3.2试剂
7.3实验步骤
样品制备：准确称取10g（精准至0.0002g）的样品于100ml小烧杯中，加90ml的纯水溶解。
开机预热30min，测量前用PH=4.00，6.86，9.18的缓冲溶液进行仪器校准，再用卷纸擦拭干，将电极插入样品，按读数键，当出现根号后，记下读数。
7.4注意事项
a)测量前一定要开机预热，并进行3点校正；
结果公式：
*100%
式中：
X——试样中甲醇的含量，%；
RU——两次进样试样液中甲醇与内标物(正丙醇)峰面积之比的平均值；
0.00158——标准溶液中甲醇的浓度×甲醇的密度×试样液的体积（2×10-4×0.79×10）
RS——两次进样标准溶液中甲醇与内标物(正丙醇)峰面积之比的平均值；
MU——称取的试样质量，单位为克（g）。
c)从溶解样品到测试的整个过程时间要短，防止样品因温度和容积变化带来测试偏差；
d)测试过程中试液不能滴漏到仪器上，测量时旋光管中的气泡要赶到球中。
5水分
5.1仪器
水分测定仪、注射器、天平
5.2试剂
无水甲醇、卡尔费休试剂、纯水