常用显色剂配制

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常用显色剂配制

一、通用显色剂

1.碘,检查一般有机物。碘蒸气对很多化合物显黄棕色。

在一个密闭的玻璃缸内予先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和,将薄层或纸层放入缸内数分钟即可显色。有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可以提高显色的灵敏度。2.硫酸:通用。

浓硫酸:水(1:10),或10%硫酸的乙醇溶液。

3.四唑兰试剂:还原性物质在室温或微加热时显紫色。

溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液

溶液II:6N氢氧化钠溶液

临用前溶液I和溶液II等量混合。

4.铁氰化钾—三氯化铁试剂:还原性物质显蓝色,再喷2N盐酸溶液,则蓝色更深。

二、生物碱显色剂

1.改良碘化铋钾试剂:生物碱和某些含氮化合物显橙红色。

取7.3克碘化铋钾,冰醋酸10毫升,加水60毫升。

2.碘—碘化钾试剂:生物碱显棕褐色。

碘1克和碘化钾10克溶于50毫升水中,加热,加冰乙醇2毫升,用水黧到100毫升。3.硅钨酸试剂(沉淀试剂)

5克硅钨酸溶于100毫升水中,加盐酸至PH2左右。

4.苦味酸试剂(沉淀试剂)

1克苦味酸溶于100毫升水中。

5.鞣质试剂(沉淀试剂)

1克鞣酸加乙醇1毫升溶解后,再加水至10毫升。

6.王水浓盐酸:硝酸(1:3)

三、苷类显色剂

1.糖的检出试剂

(1)苯胺—邻苯二甲酸试剂:喷后105~110℃烤10分钟,糖显红棕色(检测还原糖)[注]苯胺—邻苯二甲酸试剂的制备:苯胺0.93克,邻苯二甲酸1.66克,溶于水饱和正丁醇100ml中。

(2)α—萘酚—硫酸试剂:喷后100℃烤3—6分钟,多数糖呈蓝色,鼠李糖呈橙色。[注]试剂制备:15%α—萘酚乙醇溶液21ml,浓硫酸13ml,乙醇87ml及水8ml混合后使用。(3)Fehing试剂:本品分甲液与乙液,应用时取等量混合,检查还原糖。

甲液:结晶硫酸铜6.23克,加水至100毫升。

乙液:酒石酸钾钠34.6克及氢氧化钠10克,加水至100毫升。

(4)百里酚硫酚剂:喷后120℃烤15—20分钟,多数糖在灰白色背景上显暗红色,继续加热则变成浅紫色。

百里酚0.5克及浓硫酸与毫升溶于乙醇95毫升。

2.酚类

(1)三氯化铁试剂:喷后呈溶绿色或棕红色。

5%三氯化铁水溶液或乙醇溶液。

(2)三氯化铁—铁氰化钾试剂:酚性物质呈黄色斑点。

溶液I:2%三氯化铁水溶液。

溶液II:1%铁氰化钾水溶液。

应用时溶液I和溶液II等体积混合。

(3)4—氨基安比林—铁氰化钾试剂

溶液I:2%氨基安替比林乙醇溶液

溶液II:8%铁氰化钾水溶液

使用时先喷溶液I,再喷溶液II即呈色,或再放入装有25%氢氧化铵的密闭缸中,即产生橙红—深红色。

3.蒽醌类

蒽醌及其苷本身在日光下显黄色,在紫外下则显黄红、橙色荧光,在薄层上用氨薰或喷氢氧化钾等碱溶液,则颜色变深或变色。

(1)氨气:薰后颜色加强。

(2)10%氢氧化钾甲醇溶液。

(3)3%氢氧化钠溶液或面料酸钠溶液。

(4)1%硼酸水溶液。

(5)0.5%乙酸镁甲醇溶液:喷后90℃烤5分钟呈橙红色到紫蓝色。

4.内酯、香豆素类

(1)0.5%碘—碘化钾溶液:香豆素显各种颜色,很多其他类型化合物也显色。

(2)稀氢氧化钠溶液:喷前喷后在短波长的紫光下观察荧光。

5.黄酮类

黄酮类成分在紫外光下大多数显不同颜色,用氨熏,喷三氯化铝溶液或喷氢氧人钠等碱性溶液,则颜色变深或变色。

(1)氨气

(2)10%氢氧化钠(钾)溶液

(3)1%或3%三氯化铝溶液

(4)2%乙酸镁甲醇溶液

(5)饱和的三氯化锑的氯仿溶液:100℃烤5分钟

(6)锆—构橼酸试剂

溶液I:2%氧氯化锆甲醇溶液

溶液II:2%铁氰化钾溶液

(8)罗丹明—氨试剂

溶液I:0.1%罗丹明B的4%盐酸溶液

溶液II:浓氨溶液

(9)对氨基苯碘盐溶液

溶液I:0.3%对氨基苯磺酸溶液

溶液II:5%亚硝酸钠溶液

(10)硼酸—柠檬酸试剂

溶液I:饱和硼酸的丙酮溶液

溶液II:柠檬酸丙酮溶液

先喷溶液I,再喷溶液II。

6.强心苷类

(1)碱性苦味酸试剂:显橙色或橙红色

1%苦味酸乙醇溶液与5%氢氧化钠水溶液用等量混合

(2)乙酐浓硫酸反应

乙酐:浓硫酸(2:3)加入几滴,反应液显黄→红→蓝→紫→绿反反应。

(3)三氯乙酸—氯胺T试剂

溶液I:25%三氯乙酸乙醇溶液

溶液II:3%氯胺T溶液

临用前取溶液I与溶液II按1:4混合,喷后110℃烤10分钟,紫外灯下观察荧光。(4)20%三氯化锑试剂:喷后100℃烤5分钟,日光及紫外光下观察。

7.皂苷类

(1)溶血试验:2%红血球生理盐水混悬液

(2)三氯化锑氯仿溶液:喷后90℃烤15分钟,显不同颜色。

(3)三氯乙酸—乙酸(1:2)溶液:喷后100℃烤20分钟,皆显黄色。

四、萜类、甾体类显色剂

1.香草醛—浓硫酸试剂:5%香草醛浓硫酸溶液。

2.三氯化锑试剂:25.0克三氯化锑溶于15克氯仿中。

五、挥发油显色剂

1.4—氨基安替比林—铁氰化钾试剂:酚性物质显橙红至深红色。

溶液I:2% 4—氨基安替比林乙醇溶液

溶液II:8%铁氰化钾溶液

2.碘化钾—冰乙酸—淀粉试剂:斑点显蓝色则为过氧化物。

溶液I:4%碘化钾溶液10毫升与冰乙酸40毫升混合,再加锌粉一小匙过滤。

溶液II:新鲜配制后1%淀粉溶液。

先喷溶液I,5分钟后大量喷溶液II,直喷到薄层透明为止。

六、有机酸显色剂

1.溴酚蓝指示剂:显黄色

0.04%溴酚兰乙醇溶液,用0.1N氢氧化钠溶液调至微碱性

2.溴甲酚紫—柠檬酸试剂

溴甲酚紫25毫克及柠檬酸100毫克溶于丙酮:水(9:1)混合液100毫升。

七、氨基酸、多肽、蛋白质显色剂

1.茚三酮试剂:用于氨基酸、氨及氨基糖喷后110℃加热至显出颜色。

试剂I:茚三酮0.3克溶于正丁醇100毫升中,加冰乙酸3毫升。

试剂II:茚三酮0.2克溶于乙醇100毫升中。

2.双缩脲试剂:

溶液I:1%硫酸铜溶液。

溶液II:40%氢氧化钠溶液

应用前溶液I与溶液II等量混合。

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