人肺炎支原体IgGMPIgG试剂盒使用方法

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支原体试检测剂盒使用说明书(中文版)

支原体检测试剂盒使用说明书1.试剂：支原体检测试剂盒由武汉源深生物科技有限公司提供。

2.实验方法:巢式PCR的方法检测支原体污染：A.待检细胞汇合率在90％以上时取100 µL细胞上清液到离心管内B.95o C孵育5分钟C.短暂高速离心15秒钟左右D.试剂盒里的组份：引物混合物(Primer Mix) 20 µL阳性对照DNA (Positive Control DNA) 15 µL阴性对照(Internal Control DNA) 20 µL巢式PCR一共需要做2轮PCR，本检测方法不受其他来源（如所培养细胞）DNA的影响，不但提高了检测的灵敏度，同时也提高了特异性。

(1)第一轮PCR:PCR 混合物：向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。

E.热循环程序：将准备好的PCR管放入PCR仪，运行如下程序。

PCR 混合物：向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。

F. 热循环程序：将准备好的PCR 管放入PCR 仪，运行如下程序。

试验结果：2％琼脂糖凝胶电泳，TBE 缓冲液，PCR 产物及Marker 均点样10µL ，于50V 下电泳1hr ，EB 染色15min ，紫外灯下观察。

电泳结果见下图：图中泳道M 为DNA Marker ，1和2为待检测细胞系的第一轮PCR 产物 (1st )，3和4为待检测细胞系的第二轮PCR 产物 (2nd ), 其中1、3为阳性对照管PCR 产物，2、4为阴性对照PCR 产物。

阳性对照管在200bp 左右，和300-400 bp 处各有一条带，证明本次实验准确可靠 (不同的支原体Mycoplasma, such as M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. hominis, M. arthritidis, M. hyopneumoniae and Acholeplasma laidlawii 的保守区的片段长度不一，大概在200-400 bp 之间)。

肺炎支原体测试试剂盒使用

肺炎支原体测试试剂盒使用肺炎支原体是一种引起肺炎的病原体，可以导致呼吸道感染和肺部疾病。

肺炎支原体测试试剂盒是一种用于检测肺炎支原体感染的工具，它通过检测病原体的核酸来确认感染。

本文将介绍肺炎支原体测试试剂盒的使用方法和注意事项。

使用方法1.准备工作：将试剂盒从冰箱中取出后，将其适应室温放置30分钟，确保试剂盒内的试剂恢复到室温。

2.样本采集：使用专业的采样套装，采集患者的呼吸道样本。

一般可以选择咽拭子或者痰液样本作为采集物。

注意采集样本时要注意卫生，避免污染。

3.样本处理：将采集到的样本转移到试剂盒提供的管子中。

根据使用说明书的要求，将样本与提供的稀释液混合，充分混匀。

4.核酸提取：根据试剂盒提供的方法，进行核酸提取。

将样本与试剂混合，经过一系列处理步骤，将病原体的核酸提取出来。

5.PCR扩增：将提取的核酸加入PCR反应管中，根据试剂盒提供的PCR扩增方案进行扩增。

PCR扩增是将少量的核酸扩增成大量可检测的数量，以便进行后续的分析。

6.结果分析：将PCR扩增产物放入试剂盒提供的分析设备中，根据设备的提示进行操作。

设备会根据PCR扩增的结果判断样本中是否存在肺炎支原体，通常会给出阳性或阴性结论。

注意事项1.操作规范：使用试剂盒前，务必阅读说明书并按照要求操作。

严格遵循操作规范，确保结果的准确性。

2.样本采集：采集样本时，注意避免污染和交叉感染。

使用采样套装中的工具，并按照说明进行操作。

3.试剂保存：试剂盒中的试剂应妥善保存，避免暴露于阳光直射或高温环境。

注意试剂的保质期，过期的试剂可能会影响测试结果。

4.设备操作：在使用设备进行分析时，注意正确操作，遵循设备操作说明。

保持设备的清洁和维护，以确保结果的准确性。

5.结果解读：根据设备给出的结果，判断样本是否携带肺炎支原体。

阳性结果表示样本中存在肺炎支原体感染，阴性结果表示未检测到感染。

结论肺炎支原体测试试剂盒是一种有效的工具，用于检测肺炎支原体感染。

肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒胶体金法作业指导书

肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒胶体金法作业指导书1 目的建立肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒（胶体金法）作业指导书，确保生产过程处于受控状态。

2 范围适用于肺炎衣原体MOMP抗体IgG检测试剂盒（胶体金法）相关工序的操作者。

3 职责3.1 操作人员应严格执行本作业指导书。

3.2 生产主管负责监督检查。

3.3 质检部质检员负责抽查执行情况。

4 工作内容4.1 生产工艺流程图※★注：※ 关键过程 ★ 特殊过程4.2 作业内容4.2.1 胶体金制备（柠檬酸三钠还原法）氯金酸（HAuCl4）水溶液放入三角瓶内加热至沸腾→加热柠檬酸三钠溶液→混匀，搅拌煮沸10至15分钟→待胶体金溶液颜色由蓝→紫→红，冷却即可。

4.2.2 金标抗体（反应膜）制备以0.1M碳酸钾溶液调胶体金溶液pH8.0-9.0→加入抗人IgG单抗，15分钟后加入聚乙二醇→离心，调532nm测OD值5～10，方阵滴定法选定标记工作浓度→用无纺布浸湿胶体金溶液，干燥、平整，检测。

4.2.3 金标抗体反应膜质检将制备好的金标抗体反应膜按5‰比例抽检，与标准反应膜匹配组装成品，同时与标准成品作如下对照检测：a) 符合率：样品稀释液、阴性质控血清无假阳性，阳性质控血清均呈阳性；b) 反应强度：+/+++（阳性反应线/阴性反应线）；c) 反应时间：30s～5min。

确认合格后才能转入下一工序。

4.2.4 NC反应膜制备亲和性高分子硝酸纤维素膜→活化处理12小时→用水洗5次，每次20分钟→室温干燥后→取纯化Cpn重组MOPP抗原和兔鼠IgG抗体溶于10%CS中，浓度均为2mg/ml，用Cpn重组MOPP抗原在NC膜上包被肺炎衣原体抗体阳性检测线→用兔抗鼠IgG抗体在NC膜上包被对照线→干燥后，用BS液封闭，H2O 清洗后，室温干燥，备用。

4.2.5 NC反应膜质检4.2.5.1 常规图形模式检测：将制备好的反应膜按5‰比例抽检，与标准金标抗体反映膜匹配组装成品，同时与标准成品对照检测；观察阳性、阴性包被线及本底，要求图形规则程度均匀，无遗漏或重复包被。

肺炎支原体抗体

简易卡一.【肺炎支原体抗体（IgG）检验方法】1.将待测血清样本和试剂盒，恢复至室温（20～37℃）.2.取出反应板，于反应板孔中滴入血清二滴，静置，待血清完全吸入.3.在20分钟内观察反应板孔中现象.三.【单纯疱疹检验方法】1.用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min 离心10-15分钟，分离血浆.2.取出反应板，用吸管吸取样本垂直加入，2-3滴.3.15分钟内观察反应板孔中现象.七.【革兰氏染色的检验方法】目的：1.涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液器吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用移液器分别吸取10ul金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌位于待检品的两侧（中间要有足够的空间），分别作为阴阳性对照。

用无菌接种环将液滴涂布成均匀的薄层，涂布面不宜过大。

2.干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯火焰高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。

3.固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉得烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。

4.初染：在涂片薄膜上滴加革兰氏结晶紫试剂1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

5.水洗：斜置载玻片，用洗瓶小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

6.媒染：取1-2滴革兰氏碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

7.水洗：斜置载玻片，用洗瓶小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

8.脱色：斜置载玻片，滴加革兰氏脱色剂脱色，至流出的脱色剂不现紫色为止，大约需时20-30S，随即水洗。

9.复染：在涂片薄膜上滴加革兰氏番红精复染剂1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

10.水洗：斜置载玻片，用洗瓶小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

11.干燥：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下观察。

肺炎支原体IgM说明书

肺炎支原体抗体（ IgM ）检测试剂盒（胶体金法）说明书【产品名称】肺炎支原体抗体（IgM ）检测试剂盒（胶体金法）【包装规格】40 人份 /盒或 20 人份 / 盒（详细规格见试剂盒包装标签）【预期用途】定性检测人血清中的肺炎支原体IgM 抗体，可用于支原体肺炎的协助诊疗。

【查验原理】本品应用间接法的胶体金标志免疫斑点渗滤原理，质控线采纳双抗夹心的胶体金标志免疫斑点渗滤原理。

该试剂盒里的斑点反响板上的微孔滤膜固相有肺炎支原体P1 蛋白抗原斑点，当待检测的血清中含有肺炎支原体IgM 抗体时，与微孔滤膜上的肺炎支原体P1 蛋白抗原抗原形成复合物，胶体金标志的羊抗人IgM 抗体与上述抗原抗体复合物联合，形成肉眼可见的红色斑点，即为阳性结果，不然为阴性结果。

微孔滤膜上的质控线含有羊抗人IgM 抗体，当待测血清加入后，人血清中的IgM 抗体与质控线上羊抗人IgM 抗体形成复合物，胶体金标志的羊抗人IgM 抗体再与上述复合物联合，形成肉眼可见的红色质控线。

【主要构成成份】1.斑点反响板： 40 块（或 20 块），每块斑点反响板主要由含固相肺炎支原体P1 蛋白抗原斑点的硝酸纤维膜和吸水纸构成。

2.试剂 A： 1 瓶，约 10ml （或 5 ml），无色澄清溶液，主要成份为PH7.4PBS 缓冲液、吐温－20、硫柳汞（ 0.1%）。

3.试剂 B： 1 瓶，约 8ml（或 4ml），深红色澄清溶液，主要成份为胶体金标志的羊抗人IgM 抗体、牛血清白蛋白、硫柳汞（0.1%）。

【储藏条件及有效期】试剂盒一般采纳冷链运输，并采纳最迅速的运输方式，缩短运输时间；冬季运输应注意防备制品冻结。

试剂盒储藏条件为2℃～８℃，有效期为8 个月。

【样本要求】1.本试剂盒产品仅合用于对血清样本的检测，其余样本（如，胸腹水、脑脊液、尿液等）未经过产品预期用途的有关研究，不合用于本产品的检测。

2. 样本收集：采纳静脉血于干净离心管中，不加任何抗凝剂、保护剂，置于37℃水浴 20～ 30 分钟（或置室温 1 小时以上），待纤维蛋白原充足凝结后离心（4000 转/ 分， 5～ 10 分钟）分别血清。

人肺炎支原体抗体（MP-Ab）酶联免疫分析试剂盒说明书

人肺炎支原体抗体（MP-Ab）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人MP-Ab，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人组织匀浆、血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中MP-Ab含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗MP-Ab抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗MP-Ab抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的MP-Ab呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。

2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

肺炎支原体免疫球蛋白(Ig)M检验在呼吸道感染患儿中的应用价值林茂坡

肺炎支原体免疫球蛋白(Ig)M检验在呼吸道感染患儿中的应用价值林茂坡发布时间：2023-07-10T08:36:09.674Z 来源：《药物与人》2023年7期作者：林茂坡[导读] 探讨在呼吸道感染患儿的诊断中进行肺炎支原体免疫球蛋白常熟市梅李人民医院 215500摘要：目的：探讨在呼吸道感染患儿的诊断中进行肺炎支原体免疫球蛋白（Ig）M检验的应用效果。

方法：选取2021年12月到2022年12月我院收治的1078例呼吸道感染患儿，将其按性别、年龄以及发病季节进行分组，所有患儿均进行IgM抗体检验，分析检验结果。

结果：男童阳性检出率低于女童，P＜0.05；0-1岁组患儿阳性率最低，11-14岁组患儿阳性率最高，P＜0.05；冬季组阳性检出率较低，秋季组阳性率较高，P＜0.05。

结论：在儿童呼吸道感染的检验中通过肺炎支原体IgM具有较高的检验价值，可结合患儿性别、年龄以及发病季节给予针对性的治疗，建议推广并应用。

关键词：儿童；呼吸道感染；肺炎支原体IgM；检验价值呼吸道感染是儿科临床发病率较高的疾病，小儿正处于发育阶段，肺部发育不完善，局部的黏膜免疫功能较低，呼吸道比较狭窄与短效，抵抗外来病毒与细菌侵袭的能力较弱，极容易发生呼吸道感染[1]。

临床研究发现小儿呼吸道感染的主要因素是肺炎支原体感染，具有较强的传染性，多见于儿童群体，秋冬季是呼吸道感染的高发季，患儿出现呼吸道感染会表现是无力、咳嗽、发热、肺炎等，若未早期干预，病情进一步发展可引发中枢神经感染，严重影响患儿的健康生长发育，因此，采取有效手段早期诊断并给予针对性治疗对改善患儿预后有重要的意义[2]。

随着临床检验技术的不断完善，在小儿呼吸道感染诊断中采用血清学抗体检验取得较高的成效，肺炎支原体IgM是重要的指标之一，本次研究着重分析在呼吸道感染患儿的诊断中进行肺炎支原体IgM检验的应用效果，汇报如下。

1 资料与方法1.1一般资料选取2021年12月到2022年12月我院收治的1078例呼吸道感染患儿，将其按性别分成男童组（n=575）、女童组（n=503）；按年龄分成0-1岁组（n=33）、2-4岁组（n=432）、5-7岁组（n=409）、8-10岁组（n=158）、11-14岁组（n=46）；按发病季节分成春季组（n=99）、夏季组（n=137）、秋季组（n=402）、冬季组（n=440）。

MP核酸检测试剂盒说明书

肺炎支原体（MP）核酸检测试剂盒（PCR荧光法）说明书【产品名称】通用名称：肺炎支原体（MP）核酸检测试剂盒（PCR荧光法）英文名称：PCR-Fluorescence Detection Kit for Mycoplasma Pneumonia【包装规格】32人份/盒【预期用途】本产品用于定性检测痰液或咽拭子中的肺炎支原体核酸。

肺炎支原体（）是人类支原体肺炎的病原体，主要经飞沫传染，潜伏期2～3周，支原体肺炎的临床表现和胸部X线检查并不具特征性，单凭临床表现和胸部X线检查无法做出诊断。

若要明确诊断，需要进行病原体的检测。

而病原体核酸检测是目前最为直接的检测手段。

适应症：由肺炎支原体感染引起的肺炎等疾病。

【检验原理】本试剂盒选用肺炎支原体（MP）保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对肺炎支原体核酸的自动化检测。

注: 不同批号试剂盒中各组份不可以互换。

【储存条件及有效期】试剂-20℃可保存12个月。

【适用仪器】ABI7300、ABI7500荧光PCR扩增仪。

【样本要求】1. 标本：痰液及咽拭子。

2. 采集器：应当选用国家批准生产的一次性使用的咽拭子，拭子应当包括洁净海绵头、PP杆、PP杆与海绵头应连接牢固，经无尘清洗包装。

3. 采集：样本采集具体方法请参考《微生物标本采集手册》一书。

a. 自然咳痰法以晨痰为佳，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入痰盒中，标本量应大于等于1ml。

b. 咽拭子取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，转动拭子取出粘液。

4.存放：2-8℃保存，不超过24小时；-20℃下保存，不超过3个月；-70℃下长期保存，但应避免反复冻融。

肺炎支原体抗体IgG金标检测试剂盒作业指导书

肺炎支原体抗体IgG金标检测试剂盒作业指导书4.2.6.1 反应体组装程序：a) 在S6塑料基板上贴双面胶带S5（29，48mm）二条；b) 在S5上贴反应膜S1（20mm），S1上下缘距S6上下缘各29mm；c) 在S6上贴吸水纸S3（30mm），吸水纸下缘与S1上缘交接1mm,上缘与S5的上边缘对齐；d) 在S5下端贴无纺布S2-1，其上缘压住S1下缘1mm；e) 在S2-1上平放金标抗体反应膜S4（10mm）上缘对齐；f) 在S4上平放无纺布S2-2（30mm）上下缘分别S4、S6对齐；g) 将组装成型的反应体系用电脑可调式切割机切成4.2mm测试条，装入干燥器，待包装。

4.2.6.2 成品包装：每支成品先装聚苯乙烯塑料外壳，再用镀铝膜包装加干燥剂，附说明书，打批号入库，每批留样100人份，以备复检．4.2.7 参比品制备4.2.7.1 肺支Ig-G阳性血清质控品取临床确诊肺衣病人（临床症状明显、肺炎衣原体培养阳性）血清15份，间接ELISA测定肺炎衣原体IgM抗体阳性，0D492≥0.3，混合血清加防腐剂,分装-70℃保存。

4.2.7.2 肺支Ig-G阴性血清质控品取健康人血清（体查健康，培养法和间接ELISA测定肺炎支原体IgG抗体均阴性，0D492＜0.10）15份，混合血清加防腐剂,分装-70℃保存。

4.3 成品检测产品技术要求应符合《肺炎支原体抗体IgG金标检测试剂盒》产品注册标要求。

4.3.1 外观4.3.1.1 要求a)检测条：表面应平整、无划伤、开裂、变形及污渍；检测卡各组分附着牢固、内容齐全；b) 检测卡：外壳应平整，上下盖应均匀合拢，无明显间隙；反应芯试条在外壳内应附着牢固；4.3.1.2 检验在自然光线下，用手感和目力观察方法进行检验。

4.3.2 符合率4.3.2.1 阴性符合率4.3.2.1.1要求试剂卡测试肺炎支原体IgG抗体阴性质控血清10份，假阳性判断结果不多于1份，符合率应≥90%。

支原体胶体金法说明书

支原体胶体金法说明书标题：支原体胶体金法说明书：快速、精准、简单操作一、引言支原体是一类常见的细菌，在临床诊断中起着重要作用。

为了快速、准确、简便地检测支原体，科学家们开发出了支原体胶体金法。

本说明书将详细介绍支原体胶体金法的操作步骤及注意事项，将帮助您迅速掌握该方法，提高支原体的检测准确性和工作效率。

二、实验器材准备1.支原体胶体金试剂盒；2.微量移液器及相应的移液枪；3.96孔微孔板；4.离心机；5.显微镜；6.常用的实验室用品：离心管、试管、滴管等。

三、操作步骤1.样本搜集与准备a.从患者或动物身上采集相应的样本，如咽拭子、尿液等；b.将样本转移到含有细菌培养基的管中，并均匀悬浮；c.离心样本，将沉淀反复洗涤，以去除杂质。

2.样本提取a.将处理后的样本加入到试剂盒中；b.同时加入检测对照样品；c.将试剂盒封闭，轻轻摇晃，确保样品与试剂充分混合。

3.样品检测a.将混合的样品按照说明书中指定的移液量注入到96孔板中；b.定时，置于离心机中离心；c.取下离心后的96孔板，观察孔底是否有橙黄色或红色沉淀；d.观察结果：阳性样品显示为橙黄色血清型带状，阴性样品无带状或呈红色。

四、结果判读1.阳性结果：存在橙黄色带状沉淀。

支原体感染呈阳性反应。

2.阴性结果：无橙黄色带状沉淀。

支原体未检测到。

五、注意事项1.严格按照说明书中的操作步骤进行，避免误操作；2.在处理样本时，注意无菌操作，以防污染；3.在胶体金检测过程中，严格遵循设备的使用说明，以保证结果的准确性；4.样本的保存和运输要遵循相关规定，以确保样品的完整性和质量；5.实验结束后，及时清洗实验用具，保持工作台面的清洁。

六、总结支原体胶体金法是一种快速、精准、简便的检测方法。

通过本说明书的指导，您可轻松掌握并运用该技术，提高支原体的检测准确性和工作效率。

我们相信，使用支原体胶体金法将为临床诊断工作带来极大的便利与准确性。

希望本说明书能为您在支原体检测方面提供帮助，感谢您的阅读。

肺炎衣原体抗体 IgG 检测试剂盒（ELISA）说明书

肺炎衣原体抗体IgG检测试剂盒（ELISA）说明书【产品名称】通用名称：肺炎衣原体抗体IgG检测试剂盒（ELISA）英文名称：SeroCP™ IgG【包装规格】96人份/盒、192人份/盒【预期用途】本试剂盒采用酶联免疫吸附法，用于定性检测人类血清中肺炎衣原体特异性IgG抗体。

本试剂盒可作为肺炎衣原体感染诊断的辅助工具。

仅用于体外诊断。

肺炎衣原体(TWAR)是一种新出现的有传染性的因子，可引起一系列临床表现，包括上呼吸道和下呼吸道感染。

衣原体肺炎感染一般是温和的、无症状的，然而，肺炎衣原体感染可能会引起一些严重的疾病如：咽炎、窦炎、急性支气管炎和社区获得性肺炎。

如果未检测出和未进行治疗，此感染可能会导致长期持久的疾病。

最新的数据显示了肺炎衣原体感染和慢性疾病的关联。

儿童感染肺炎衣原体的几率较低，到中年时感染率急剧增高，到老年时持续增高（>50%）。

样本采集的困难性和被感染部位的不易接近性严重影响直接检测方法的有效性。

因此，在直接检测方法不是很有效的情况下，血清学检测作为远端和慢性衣原体感染鉴定的非入侵性工具，常规应用于临床。

此外，特定的抗体类型的出现也能指示出疾病的状态。

早期衣原体感染的特征是在2-4周内出现IgM抗体，随后6-8周内才有IgA和IgG反应。

在急性感染肺炎衣原体后，IgM抗体在2-6个月内会消失而IgG抗体滴度会慢慢减少，而 IgA抗体趋向于迅速消失。

当怀疑衣原体初步感染时，IgM的检测有高度的诊断意义。

然而，重复和慢性感染时IgM水平是比较低的，因此如果没有检测到IgM并不排除正在感染的可能性。

对于重复感染，IgG和IgA水平升高较快，通常在1至2周内。

IgA抗体是一个可靠的原发性、慢性和再感染性的免疫学标记物。

这些抗体通常在治疗和根除衣原体感染之后快速下降并回复到基线水平。

IgA抗体滴度的维持一般被认为是慢性衣原体感染的标志。

IgG抗体维持长时间并下降较慢。

因此，IgG抗体的出现主要表示衣原体感染尚未解决。

肺炎支原体 IgG 抗体检测试剂盒酶联免疫法

①甩掉孔中的液体。②在每个孔内加入洗板液，确保孔中无气泡。③重复以上两步，洗板 5 次。④甩掉孔中的洗板液，并在纸巾上拍干至目测微孔中无残留液。收集洗板液至废液缸中，并在实验完毕后用 0.5%次氯酸钠处理。在自动洗板机上设定洗液体积 300-350l/孔，洗板次数五次。洗完后置于纸巾上拍干。
4.加入酶联物：每孔中加入酶联物 100l。 5.温育：温度：室温(20-25C) 时间：255 分钟。 6.洗板：重复步骤 3 的操作进行洗板。 7.加入显色液(TMB)：每孔中加入 TMB 100l。 8.温育：温度：室温(20-25C) 时间：10-15 分钟。 9.加入终止液：每孔加入终止液 50l 以终止反应。 10.读数：在加入终止液 30 分钟内，将微孔板置于 450nm 波长下读取每个孔的光密度值，以空白试剂作对照。【结果判定】 1.质量控制校正品、阳性对照、阴性对照的 OD 值应符合以下要求：项目阴性对照校正品阳性对照
结果阴性标本可疑标本阳性标本【参考值】
标本参考值 ≤0.90 0.91-1.09 ≥1.10
正常人群 MP IgG 抗体呈阴性(标本参考值≤0.90)，每个实验室应根据当地的实际情况建立自己的正常值参考范围。【注意事项】 1.酶标板应平衡到室温后从铝箔袋中取出，剩余的板条立即放回铝箔袋中并封好(保留铝箔袋)。 2.试剂和样本的交叉污染会导致错误的结果。 3.避免不同批次的试剂混合使用。【贮存】试剂盒应在 2-8° C 下保存。
OD值阴性 ≤0.250
OD 值范围
OD值阴性 OD值校正 ≤0.9
OD值阳性 OD值校正 ≥1Biblioteka 25OD值校正 ≥0.300
OD值阳性 ≥0.500
【试剂盒规格】 96T/盒

肺炎支原体检测试剂盒胶体金法

肺炎支原体检测试剂盒胶体金法背景与引言肺炎支原体是一种常见的致病菌，它是导致上呼吸道感染和肺炎的一种主要病原体。

近年来，肺炎支原体感染的发病率逐渐增加，因此早期快速的检测非常重要。

为了满足临床上对肺炎支原体的检测需求，研发出了肺炎支原体检测试剂盒胶体金法。

本文将详细介绍肺炎支原体检测试剂盒胶体金法的原理、操作步骤和优势。

原理肺炎支原体检测试剂盒胶体金法采用了胶体金免疫层析技术。

该技术利用了胶体金颗粒在溶液中的颜色变化特性，通过金标记的抗原与肺炎支原体的特异性抗体结合形成颗粒免疫复合物，从而实现对肺炎支原体的检测。

操作步骤1.样品处理：取适量标本（一般为呼吸道分泌物或咽拭子），按照说明书的要求进行预处理，如离心、加入提取液等。

2.载板处理：将处理后的样品滴加到测试载板上，一般每个孔滴加样品的量为5-10μL。

3.滴加试剂：将胶体金标记的抗原滴加到载板上，与样品中的肺炎支原体结合形成颗粒免疫复合物。

4.反应时间：根据产品说明书的要求，将载板放置在恒温箱或特定的反应时间，一般为10-20分钟。

5.结果读取：观察载板上颗粒免疫复合物的颜色变化，一般采用裸眼观察或光度计测量吸光度来判断结果。

优势1.快速检测：肺炎支原体检测试剂盒胶体金法可以在短时间内完成检测，通常只需要20分钟左右，大大缩短了检测周期。

2.简单易用：操作步骤简单，只需要少量的样品和试剂，无需复杂的实验仪器和设备，使得检测更加便捷。

3.灵敏度高：胶体金免疫层析技术具有较高的灵敏度，可以检测到低浓度的肺炎支原体，提高了检测的准确性和可靠性。

4.成本低廉：与其他检测方法相比，采用胶体金法进行肺炎支原体检测的成本较低，可以降低医疗机构的检测费用。

5.广泛应用：肺炎支原体检测试剂盒胶体金法适用于不同场景的肺炎支原体检测，可以在临床、疫情监测等多个领域得到广泛应用。

结论肺炎支原体检测试剂盒胶体金法作为一种快速、简单、灵敏度高且成本低廉的检测方法，对于肺炎支原体感染的早期诊断和疫情监测具有重要意义。

传染病实验资料--肺炎支原体IgA检测

检测结果评估
• 方法1 • 每一个试剂盒内均带有一特异标准曲线和一特异求值表图以衡量抗体活度。 • 实验过程老师提供
• 方法：用评估表格来确定抗体活性级别方法2：
• 1. 计算标准血清两个OD值的平均值，并检查其是否在给定的有效范围内。 • 2. 然后，将所得结果转入“标准血清OD范围”栏，在此进行求值。 • 3. 已测得的患者样品值通过读取“IU / ml或U / ml”来求得相应的抗体活性。例如： • 标准血清OD范围
• .9 湿盒内 ℃（±1℃）孵育分钟（±1 湿盒内37℃ 分钟（ ℃ 孵育30分钟分钟）。分钟）*。 • 10 终止反应 • 每孔内加入100微升终止液，轻微振荡微孔板以混合溶液。 • 11 读取消光度 • 以底物空白为空白对照液， 60分钟内读取 405纳米的OD值，建议参考波长范围为620 纳米-690纳米（例如650纳米）。
• 3 将样品于湿盒内 ℃（±1℃）孵育分钟将样品于湿盒内37℃ ℃ 孵育60分钟分钟）。（±5分钟）。分钟 • 4 孵育后以洗液缓冲液洗涤洗涤板孔（使用自动洗板洗涤机或手工洗板）： • - 吸去或甩去洗液 • - 每孔内加入300微升洗液 • - 吸去或甩去洗液 • - 重复洗涤过程3次（共4次！） • - 将微孔板翻转过来在纸巾上拍打，使微孔中不再含有液体
0.570.6 1 其它 <0.06 IU / ml 或 U / ml <5 5-10 11-19 20-30 31-40
0.62-0.65 <0.07 0.07-0.12 0.13-0.22 0.23-0.32 0.33-0.40
• 例如：测得的标准血清平均消光度值为0.64。对其而言，结果的确定与OD值范围0.62-0.65一栏相关。由患者的OD值 0.25可得出其单位范围为20-30。

肺炎支原体IgM抗体检测SOP

肺炎支原体IgM抗体检测SOP一、检验目的规范实验室人员操作，以保证实验结果的准确性。

二、预期用途该产品用于定性检测血清、血浆或全血中的肺炎支原体IgM抗体。

是引起社区获得性呼吸道感染的主要病原体之一，可以导致支气管炎和非典型性肺炎。

主要引起人非典型肺炎、气管炎及支气管炎，多经口和呼吸道等途径传播，多发于儿童和青年人。

MP感染已占小儿呼吸道疾病30%以上，且有增加趋势。

人体感染肺炎支原体后，能产生特异性IgM和IgG抗体。

IgM 抗体出现早，一般在感染后1周出现，3~4周达高峰，以后逐渐降低。

再次感染或重复感染后，常在1-2周内出现较高水平的IgG抗体。

MP肺炎与一般呼吸道感染和肺炎的临床症状没有明显区别，MP感染早期诊断有利于MP肺炎的治疗。

血青学诊断法是临床常用的主要诊断方法之一，灵敏度和特异性适中，常用的主要有酶联免疫吸附试验和凝集试验。

三、检验原理本产品以胶体金作为指示标记，用胶体金标记抗人IgM单抗，以基因工程技术表达肺炎支原体P1蛋白抗原标被硝酸纤维素膜，应用“间接法”免疫层析技术原理，检测的肺炎支原体感染病人血清、血浆或全血中的肺炎支原体抗体IgM,在检测过程中，若样本中存在肺炎支原体抗体gM, 则肺炎支原体抗体1gM与样本吸附垫中的胶体金一抗人IgM单抗结合物形成复合物，复合物沿硝酸纤维素膜移动到检测区，与检测线上包被的肺炎支原体P1蛋白抗原结合，多余的未被结合的结合物继续移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG 抗体结合，反应膜上出现1条红色的检测线和1条红色的质控线；若样本中不存在肺炎支原体抗体IgM,则胶体金一抗人IgM单抗结合物直接沿硝酸纤维素膜移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG抗体结合，仅形成一条红色的质控线。

四、主要组成成份1、试剂盒组分包括肺炎支原体1gM抗体检测卡，样品稀释液。

1.1、检测卡主要组分：包括金标垫和硝酸纤维素检测膜，金标垫内包被有胶体金标记的抗人IgM单克隆抗体；硝酸纤维素检测膜的检测线上包被有基因工程技术表达的肺炎支原体P1蛋白抗原，质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体。