微生物的生长繁殖及其控制

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第六章

微生物的生长繁殖

及其控制

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第一节细菌的生长

一、相关概念及特点

生物个体细胞物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。生长：

繁殖：

生物个体生长到一定阶段，通过

特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。

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生长是一个逐步发生的量变过程，

繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。

在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是在单

细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系又很难划

分的过程。

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一个微生物细胞

合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。

如果同化作用的速度超过了异化作用

个体的生长

原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加

如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就

会发生繁殖，引起个体数目的增加。

群体内各个个体的进一步生长

群体的生长

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微生物生长:

在一定时间和条件下细胞数量的增加（微生物群体生长）

在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长，这一点与

研究大生物时有所不同。

个体生长→个体繁殖→群体生长

群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖

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微生物生长：

单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化

个体计数

群体重量测定

群体生理指标测定

微生物生长的测定：

评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；

评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果；

客观地反映微生物生长的规律；

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二、以数量变化对微生物生长情况进行测定（P151）

1、培养平板计数法

通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况

或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌）

2、膜过滤培养法

当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样

品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形

成的菌落进行统计。

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3、液体稀释法（ The most probable number method ）

主要适用于只能进行液体培养的微生物，或采用液体鉴别培养基进行直接鉴定并计数的微生物。

对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度

平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统

计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算

出样品中的微生物数目。

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4、显微镜直接计数法

1）常规方法：

采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接计数（计算一定容积里样品中微生物的数量）。

缺点：

不能区分死菌与活菌；

不适于对运动细菌的计数；

需要相对高的细菌浓度；

个体小的细菌在显微镜下难以观察；

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显微镜测数法

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4、显微镜直接计数法

2）其它方法：

比例计数：

将已知颗粒浓度的样品（例如血液）与待测细菌细胞浓度的样品混匀

后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。

过滤计数：

当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品

通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显

微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；

活菌计数：

采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数

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三、以生物量为指标测定微生物的生长

1、比浊法

在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度(optical density, 即O.D.)表示菌量。实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内，否则不准确。

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2、重量法

以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；

通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算

微生物群体的生物量；

测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法

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3、生理指标法

微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、

生物热等与其群体的规模成正相关。

样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显，

因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量

热计等设备来测定相应的指标。

常用于对微生物的快速鉴定与检测

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第二节

细菌的群体生长繁殖

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微生物的特点：

个体微小

肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个

单个的微生物组成的群体。

微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。

对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础

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一、分批培养

1 、分批培养的概念

采用完全封闭的容器，一次接种，静置培养。（不更换培养基的培养方法）