细菌耐药表型的检测_检验科工作经验
检验科微生物室多重耐药的检测及分析
检验科微生物室多重耐药的检测及分析微生物室是医院中一个非常重要的部门，它负责对临床样本进行微生物学检验，为医生提供临床诊断和治疗方案的参考。
在微生物室工作的人员需要对微生物有着深入的了解，并且需要具备丰富的实验技能和经验。
而在微生物室工作中，多重耐药菌的检测和分析是一项重要的工作，下面我们就来详细介绍一下检验科微生物室多重耐药的检测及分析。
一、多重耐药菌的定义多重耐药菌是指对多种抗生素产生耐药性的细菌，也被称为多药耐药菌或超级细菌。
它们通常是由于长期大量使用抗生素、抗菌药物或不合理使用抗生素等原因导致的，对人类健康构成了严重的威胁。
二、多重耐药菌的检测方法1. 细菌培养及鉴定在微生物室中，通过对临床样本进行细菌培养和鉴定，可以确定患者体内的细菌种类及其数量，为后续的药敏试验提供了基础数据。
常用的培养基有大肠杆菌菌落计数培养基、金黄色葡萄球菌培养基等。
2. 药敏试验药敏试验是指将分离出的细菌接种在含有不同抗生素的琼脂板上，观察菌落的生长情况以及对抗生素的敏感性。
通过药敏试验可以确定细菌对各种抗生素的耐药性，为临床治疗提供参考依据。
3. PCR技术PCR技术是一种常用的分子生物学技术，可以对细菌进行基因检测，包括耐药基因的检测。
通过PCR技术可以快速准确地检测出细菌是否携带耐药基因，为临床用药提供了有力的支持。
4. 质谱技术质谱技术是一种高灵敏度、高分辨率的分析技术，在微生物室中常用于对微生物的鉴定和分析。
通过质谱技术可以直接对细菌中的代谢产物进行分析，从而判断细菌的耐药情况。
5. 流式细胞术流式细胞术是一种高通量的细胞分析技术，可以对样本中的细胞进行快速、精确地检测和分析。
在微生物室中，流式细胞术可以用于细菌的数量统计以及对耐药菌的筛选。
三、多重耐药菌的分析方法1. 耐药基因分析通过PCR技术和质谱技术可以对细菌进行耐药基因的分析，从而确定细菌对抗生素的耐药性。
通过对耐药基因的分析可以了解细菌的耐药机制，为临床治疗提供了重要的参考依据。
医院感染科护士对多重耐药菌的检测与防治经验总结
医院感染科护士对多重耐药菌的检测与防治经验总结随着医疗技术的不断发展，抗生素的广泛使用，多重耐药菌（Multidrug-Resistant Organisms，MDROs）的产生和传播日益成为全球范围内关注的焦点。
多重耐药菌对常用的抗生素具有广泛的耐药性，使得感染防控和治疗面临巨大挑战。
一、多重耐药菌的检测1. 提高病原学检测能力：病原学检测是确诊多重耐药菌感染的关键。
我们需要加强与微生物实验室的合作，确保病原菌的准确检测和鉴定。
此外，我们还需要关注实验室检测技术的更新和发展，及时了解和掌握新的检测方法。
2. 强化护理人员培训：护理人员是病原学检测的执行者，需要熟练掌握各种采样方法、注意事项以及标本运送流程。
通过定期培训和考核，提高护理人员在感染防控方面的知识和技能。
3. 加强病例讨论：病例讨论是提高诊断和治疗水平的重要途径。
我们应积极参与病例讨论，分享临床经验，提高对多重耐药菌感染的识别和诊断能力。
二、多重耐药菌的防治1. 严格执行隔离措施：对于确诊或疑似多重耐药菌感染的患者，应严格执行接触隔离制度。
我们需要做好个人防护，避免交叉感染。
同时，加强病房环境的清洁与消毒，降低病原菌的传播风险。
2. 合理使用抗生素：抗生素的合理使用是防治多重耐药菌感染的关键。
我们需要密切关注患者的感染情况和药物敏感试验结果，协助医生选择合适的抗生素。
此外，我们还应关注抗生素的使用规范，避免不必要的抗生素使用和滥用。
3. 提高患者免疫力：患者的免疫力是抵御感染的重要防线。
我们需要关注患者的营养状况，合理搭配饮食，提高患者的免疫力。
同时，及时发现并处理患者的并发症，降低感染风险。
4. 加强健康教育：患者和家属的配合对于防治多重耐药菌感染至关重要。
我们需要加强对患者和家属的健康教育，提高他们的感染防控意识，确保感染防控措施的落实。
5. 积极参与感染防控：作为感染科护士，我们应积极参与感染防控工作，加强与临床科室的沟通和协作，共同提高医院感染防控水平。
检验科微生物室多重耐药的检测及分析
检验科微生物室多重耐药的检测及分析多重耐药是指微生物对两种或两种以上不同种类的抗菌药物具有耐药性的情况。
这种现象极大地加大了细菌感染的治疗难度，给临床医疗工作带来了极大的困扰。
对多重耐药的检测和分析显得尤为重要。
多重耐药的检测一般可以分为两个方面：一是从耐药菌株的培养和分离中的检测，二是从临床样本中的检测。
从耐药菌株的培养和分离中检测多重耐药主要步骤如下：将可能存在的耐药菌株分离出来并进行培养；通过药敏试验，测定该菌株对各种抗菌药物的敏感性；如果该菌株对两种或两种以上的不同种类抗菌药物具有耐药性，则可以确定该菌株为多重耐药菌株。
还可以通过检测该菌株所携带的耐药基因，来进一步确认多重耐药的存在。
从临床样本中检测多重耐药，则需要对患者的临床样本进行相应的检测。
通常采用的方法有传统的药敏试验和分子生物学方法。
传统的药敏试验通过将临床样本中的细菌分离出来并进行培养，然后通过药敏试验，测定其对不同种类抗菌药物的敏感性。
分子生物学方法则通过检测样本中的耐药基因来确定多重耐药的存在。
多重耐药菌株的检测分析可以为临床提供重要的参考依据。
通过检测多重耐药菌株，可以选择有效的抗菌药物，减少无效治疗导致的费用和时间浪费，并且避免对药物的滥用从而避免耐药菌株的进一步传播。
多重耐药菌株的检测还可以为疫苗研发提供重要的数据，提高疫苗的治疗效果。
多重耐药菌株的检测和分析具有重要的临床意义。
通过准确的检测和分析，可以为临床医疗工作提供重要的参考依据，避免无效治疗和滥用抗菌药物。
对于多重耐药的检测和分析需要引起更加重视，并不断完善和提高检测技术的准确度和可靠性。
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析微生物室是医院检验科的重要部门，负责对临床样本中的微生物进行检测和分析。
微生物室中最重要的工作之一就是对多重耐药菌的检测及分析。
多重耐药菌是指对多种抗生素产生耐药性的细菌，它们对临床治疗构成了严重的挑战。
本文将详细介绍微生物室对多重耐药菌的检测及分析过程。
一、样本采集在进行多重耐药菌的检测和分析前，首先需要收集临床样本。
临床样本通常包括血液、尿液、痰液、脑脊液等。
这些样本可能携带有各种病原微生物，包括多重耐药菌。
在样本采集过程中，需要严格遵守无菌操作规范，以避免外部细菌的污染。
采集到的样本需要迅速送至微生物室进行后续的检测分析。
二、细菌培养在微生物室中，对多重耐药菌的检测首先需要进行细菌培养。
培养是指将临床样本中的微生物在含有营养物质的培养基上进行培养繁殖，从而得到足够数量的微生物以供后续的检测。
在培养过程中，需根据临床样本的特点选择合适的培养条件，比如温度、氧气浓度等。
培养时间通常为24-48小时，确保细菌有足够的时间生长繁殖。
三、药敏试验细菌培养后，接下来需要进行药敏试验。
药敏试验是通过将不同抗生素涂抹于培养基上，观察细菌在不同抗生素下的生长情况，以确定细菌对各种抗生素的敏感性。
对多重耐药菌的检测就是要通过药敏试验来确定这些细菌对哪些抗生素存在耐药性。
通常会对常用的抗生素进行测试，比如青霉素、庆大霉素、头孢菌素等。
通过药敏试验的结果，可以为临床治疗提供重要参考，避免对耐药菌使用无效的抗生素。
四、分子生物学检测除了传统的培养和药敏试验外，现代的微生物室还可以利用分子生物学技术来进行多重耐药菌的检测。
分子生物学检测可以更快速、更准确地确定细菌的种类和耐药基因的存在。
比如PCR（聚合酶链式反应）技术可以检测细菌在基因水平上的特征，快速确定细菌是不是多重耐药菌，以及其具体的耐药基因类型。
这种检测方法在临床诊断中具有重要的意义，可以帮助医生更准确地选择治疗方案，避免对耐药菌的误用。
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析1. 引言1.1 背景介绍微生物室是医院中重要的检验科室之一，负责对各类致病菌进行检测及分析。
随着抗生素的广泛使用，耐药菌的检测问题也日益凸显。
多重耐药菌是指对多种不同类别的抗生素呈现耐药性的细菌，其对人类健康产生的威胁不容忽视。
对微生物室中的多重耐药菌进行检测及分析，对于及时发现并控制这些耐药菌的传播至关重要。
在医院感染控制中，多重耐药菌已成为一项严重的公共卫生问题。
很多医院出现了多重耐药菌暴发，给患者的治疗带来了很大的困难。
对微生物室中的多重耐药菌进行检测及分析，可以及时采取相应的预防和治疗措施，减少医院感染的发生率，有效维护患者的健康。
通过检测及分析多重耐药菌的方法，可以为医院感染管理提供重要的参考依据。
对多重耐药菌的研究也有助于深入了解细菌的耐药机制，推动抗生素的合理使用。
【请继续阅读正文部分】。
1.2 研究目的本研究的目的是为了探究检验科微生物室中多重耐药菌的检测及分析方法，从而提高对多重耐药菌的监测和控制能力。
具体研究目的包括：1. 建立一套可靠的样本采集和处理流程，以确保样本的质量和准确性；2. 探索多种耐药菌的检测方法，包括传统培养法、分子生物学方法和质谱技术等，从而提高检测的准确性和快速性；3. 研究多重耐药菌的分析方法，包括对耐药菌的药敏试验、耐药基因检测和流行病学分析等，为临床治疗提供参考依据；4. 分析实验结果，探讨多重耐药菌的流行病学特征和影响因素，为预防和控制多重耐药菌提供科学依据。
通过本研究，将为多重耐药菌的检测和防治提供新的思路和方法，为保障公共卫生安全做出贡献。
1.3 研究意义微生物室多重耐药菌的检测及分析在临床医学中具有重要的意义。
多重耐药菌的检测可以帮助医生及时选择有效的抗菌药物，避免对患者造成不必要的伤害和延误治疗的风险。
多重耐药菌的分析可以揭示耐药菌的分布规律和流行趋势，为制定更科学合理的感染控制措施提供重要依据。
对多重耐药菌的深入研究也有助于加强对抗菌耐药性的监测和管理，推动抗菌药物的合理使用，防止抗药菌株的进一步传播和扩散。
细菌耐药表型检测方法剖析
金属β-内酰胺酶的表型检测方法
2.亚胺培南+EDTA法(IMP+EDTA) （1）将待测菌株按常规药敏纸片K-B法操作均匀涂布于M-H 平板上。 （2）在M-H平板上贴一片亚胺培南(10ug/片) 纸片，在距亚 胺培南纸片中心1.5cm处贴无菌空白纸片一片，将0.5M EDTA 10ul 均匀浸注于空白纸片上，35℃孵育18-24h。 （3）结果观察：若两片纸片抑菌圈有协同作用，则为阳性， 即产金属β-内酰胺酶。
五、肠杆菌科碳青霉烯霉筛选和确证 （2009年CLSI:M100-S19.APPB.124）
1.如果菌株对碳青霉烯类药物表现为“I”或“R”没必 要再去检验该酶，（医生通常不会选用“I”或“R” 的药物），但主要以感染控制为目的检验该酶。 2.什么是碳青霉烯酶？ 一类能水解或灭活碳青霉烯类抗生素的酶，如： KPC（肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶）. • 碳青霉烯类抗生素 －Doripenem（目前无CLSI折点） －厄他培南 －亚胺培南 －美洛培南
（3）双纸片协同确认试验： 头孢他啶（ 30μg/ 片）与头孢他啶（ 30μg ） / 克位维 酸（10μg） 头孢噻肟（ 30μg/ 片）与头孢噻肟（ 30μg ） / 克拉维 酸（10μg）两纸片抑菌圈相比≥5mm即为ESBLS。 （ 4） E-test法（浓度梯度法）：由瑞典 AB Biodisk 公司研究生产，广洲贝肯公司经销。试条中的三代 头孢菌素或氨曲南的 MIC≥2μg/ml 即可疑为 ESBLS 。
附：鉴定卡他球菌方法
1.40%KNO3浸湿滤纸条，贴于羊(马)血平板上，周 围点种待测菌，如果菌落周围出现大的绿色环 ， 即为阳性。 2.丁酸酯酶检测法：购买丁酸酯酶检测纸片(梅里埃 公司生产)，涂细菌于纸片上，如几分钟内出现绿 色为阳性。
细菌耐药性监测工作总结
细菌耐药性监测工作总结
细菌耐药性是当前全球性的公共卫生问题，严重威胁着人类健康和生命安全。
为了及时监测和控制细菌耐药性的情况，各国纷纷开展了细菌耐药性监测工作。
在这篇文章中，我们将总结一下细菌耐药性监测工作的一些重要成果和经验。
首先，细菌耐药性监测工作需要建立完善的监测体系。
这个体系应该包括从样本采集到实验室检测再到数据分析和报告的全过程，确保监测结果的准确性和可靠性。
同时，监测工作还需要与临床医疗机构和公共卫生部门进行密切合作，及时共享监测数据和信息，以便及时采取控制措施。
其次，细菌耐药性监测工作需要关注多种细菌和多种抗生素的耐药情况。
除了常见的耐药细菌如金黄色葡萄球菌和大肠杆菌外，还需要关注一些罕见的细菌和新型的耐药机制，以便及时采取相应的控制措施。
同时，监测工作还需要关注不同地区和不同人群的耐药情况，以便制定针对性的防控策略。
最后，细菌耐药性监测工作需要及时发布监测结果和预警信息。
一旦发现某种细菌或某种抗生素的耐药情况出现变化，就需要及时向社会公众和医疗机构发布预警信息，提醒大家加强防控措施，避免细菌耐药性的进一步传播和扩散。
总之，细菌耐药性监测工作是一项重要的公共卫生工作，需要各国政府和医疗机构的共同努力。
只有及时监测和有效控制细菌耐药性，才能保障人民的健康和生命安全。
细菌耐药性检测方法
细菌耐药性检测方法1、细菌耐药表型检测：判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据NCCLS标准，通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和E试验的抑菌圈直径、MIC值和IC值获得。
也可通过以下方法进行检测：（1）耐药筛选试验：以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验，临床上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、万古霉素中介的葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌及氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌等。
(2)折点敏感试验：仅用特定的抗菌药物浓度（敏感、中介或耐药折点MIC)，而不使用测定MIC时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性，称为折点敏感试验. （3）双纸片协同试验:双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。
若指示药敏纸片在朝向阿莫西林/克拉维酸方向有抑菌圈扩大现象（协同），说明测试菌产生超广谱β—内酰胺酶（4)药敏试验的仪器化和自动化:全自动细菌鉴定及药敏分析仪如：Vitek—2、BD-Pheonix、Microscan等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的MIC值。
2．β—内酰胺酶检测：主要有碘淀粉测定法（iodometric test）和头孢硝噻吩纸片法（nitrocefin test）.临床常用头孢硝噻吩纸片法，β—内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。
如β—内酰胺酶阳性，表示上述细菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药；表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素(包括氨基、羧基和脲基青霉素)耐药。
3．耐药基因检测：临床可检测的耐药基因主要有：葡萄球菌与甲氧西林耐药有关的MecA 基因,大肠埃希菌与β-内酰胺类耐药有关的blaTEM、blaSHV、blaOXA基因，肠球菌与万古霉素耐药有关的vanA、vanB、vanC、vanD基因.检测抗菌药物耐药基因的方法主要有：PCR扩增、PCR-RFLP分析、PCR—SSCP 分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术、自动DNA测序4．特殊耐药菌检测（1）耐甲氧西林葡萄球菌检测：对1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤10㎜，或其MIC≥4цg/ml的金黄色葡萄球菌和对1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤17㎜，或MIC≥0。
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析近年来，多重耐药菌的出现给医疗卫生工作带来了巨大的挑战。
如何对多重耐药菌进行检测和分析已经成为检验科微生物室中重要的课题。
本文将介绍检验科微生物室多重耐药菌的检测方法及分析。
一、多重耐药菌的定义以及检测方法多重耐药菌（Multidrug-resistant organisms, MDROs）是指耐受多种药物的病原菌，其治疗难度和治疗费用都要高于普通病原菌。
检验科微生物室检测多重耐药菌的方法通常有三种：1.常规细菌培养和药敏试验常规的细菌培养和药敏试验是最常用的多重耐药菌检测方法。
该方法是将患者样本（如血液，尿液，呼吸道分泌物等）放入培养基中进行培养，然后观察细菌的形态和生长情况，并对其敏感性进行药敏试验。
2.分子生物学分子生物学是一种快速、准确，特异性强的多重耐药菌检测方法。
该方法是利用PCR 技术对菌种特异性基因进行扩增，从而检测出多个不同的多重耐药菌。
3.质谱法二、多重耐药菌的分析检验科微生物室对多重耐药菌进行分析的主要方法就是对不同的菌株进行鉴定和药敏试验。
1.鉴定检验科微生物室通过鉴定来确定病原菌的种类和群体，从而为治疗方案的制定提供基础数据。
其中，鉴别多重耐药菌的方法是通过对其形态、染色、生物学及生化特性等方面进行分析，最终确定不同的菌株。
2.药敏试验药敏试验是多重耐药菌分析中的重要环节。
检验科微生物室通过药敏试验分析细菌对不同药物的敏感性情况，最终确定治疗方案。
一般采用圆片扩散法和微量稀释法进行药敏试验。
三、结论综上所述，检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析是非常重要的。
检验科可以通过常规细菌培养和药敏试验、分子生物学以及质谱法等多种方法对多重耐药菌进行检测，从而确诊病原菌种类及药敏试验结果，并确定最佳的治疗方案。
通过这些方法，可以及时识别多重耐药菌，有效控制传染病的传播，为病人的治疗提供良好的保障。
检验科微生物室多重耐药的检测及分析
检验科微生物室多重耐药的检测及分析近年来，随着广谱抗生素的普遍应用，许多病原微生物不断产生多重耐药现象，严重影响了治疗效果和临床结果。
因此，对于多重耐药的检测和分析是非常必要的。
本文将介绍检验科微生物室在多重耐药检测方面的方法和流程，以及对耐药菌株的分析和应对策略。
第一步：标本采集和制备标本采集是多重耐药检测中的第一步，它对于后续检测结果的准确性具有至关重要的作用。
在采集样本时需要注意消毒处理、避免干扰因素等。
不同类型的标本采集方法也各有不同，例如，血液标本采集需要使用无菌技术，尿液标本需先进行预处理等。
采集标本后，应按照规定制备样本。
第二步：病原菌培养样本制备完成后，病原菌培养是多重耐药检测的第二步。
病原菌培养需要考虑培养基的种类、温度、时间等因素，以保证病原菌的生长和培养状态符合检测标准。
同时，不同类型的标本病原菌的培养需要采取不同的方法，如血液标本需要进行血样培养，而分泌物标本则需要进行液体培养。
培养完成后，需要进行纯化和鉴定，并选取分菌株进行下一步检测。
第三步：药敏试验药敏试验是多重耐药检测的核心环节。
药敏试验是通过检测病原菌对不同抗生素的敏感性，判断耐药菌株并确定其所需的治疗方案。
药物敏感性试验的方法主要有盘扩散法、微量稀释法、E-test法等。
其中，盘扩散法是最为常用的方法，其原理是将不同抗生素板放置在培养基上，然后在培养基表面均匀涂敷病原菌，通过比对不同药物的抑菌现象，确定菌株的抗药性质。
药敏试验完成后，需要根据结果进行解读，并制定合理的治疗计划。
第四步：分子生物学检测分子生物学检测是多重耐药检测的新兴技术。
它可通过PCR、基因芯片等方法，对不同的耐药基因进行检测和鉴定。
分子生物学检测的方法不仅能够快速检测出菌株中的耐药基因，还能够对多重耐药菌株作进一步的分析和研究。
第五步：数据分析和应对策略完成检测后，需要对数据进行分析。
数据分析是多重耐药检测的最后一步，目的是确定菌株的耐药情况，并根据实验结果制定相应的应对策略。
细菌耐药表型的检测方法
（5）大肠沿着菌株划线的生长表明碳青霉烯水解酶的产生。
6.改良的Hodge试验：检测碳青霉烯酶活性的 表型试验，在检测KPC方面有>90％的敏感 性/特异性，检测其他碳青霉烯酶时敏感性/ 特异性不定（如：低水平的金属酶）。
7. 改良Hodge试验的质量控制(2009年 CLSI:M100-S19.APPB.124)： 随患者菌株 每天检测。
＊＊NA：不可用（本试验不适用于筛查）
4.什么时候做改良Hodge试验？
• 如果头孢噻肟、头孢他啶和 /或头孢曲松全部“R”。
• 注：头孢比肟对于碳青霉烯酶产生株的结果是不稳定的。
•
MIC（μg/ml) 抑菌圈(mm)
• 厄他培南 2
19-21
• 亚胺培南＊ 2-4
NA ＊＊
• 美洛培南 2-4
16-21
（3）35℃孵育18-24h，如克林霉素出现扁平或凹 陷的抑菌环为阳性。
D-Test试验耐药表型判断
耐药机制
红霉素 克林霉素 基因型
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泵出(MS)
R
S
MSRA
核糖体基因诱导变异 （ermC为主）
(iMls) R
D-Test(+)
核糖体基因结构变异 (cMLS) R
※三维水相试验方法的改进(M-H平板打孔[2mm]扩散法).
AmpC酶新的检测方法
4.质粒型AmpC酶三联纸片方法的检测 （1）将标准菌株ATCC 25922按常规药敏纸片K-B法
操作均匀涂布于M-H平板上。 （2）在M-H平板中心贴一片头孢西汀(30ug/片) 纸片，
在纸片边缘贴有待测菌的纸片（纸片上含20ul， PH8.0，1M Tris-0.1MEDTA）。 （3）另一侧边缘贴有产AmpC酶菌的纸片（同上）。 （4）35℃孵育18-24h，如待检菌出现扁平或凹陷的 抑菌环为阳性。
细菌耐药性监测工作总结
细菌耐药性监测工作总结
细菌耐药性是当今世界面临的严重问题之一，对公共卫生和临床治疗都造成了
极大的挑战。
为了及时掌握细菌耐药性的情况，制定有效的防控措施，细菌耐药性监测工作显得尤为重要。
在过去的一段时间里，我们开展了大量的细菌耐药性监测工作，现在我来对这些工作进行总结。
首先，我们建立了完善的细菌耐药性监测体系，包括了样本采集、实验室检测、数据分析等多个环节。
通过这一体系，我们能够及时、准确地获取各类细菌的耐药性情况，为后续的防控工作提供了有力的支持。
其次，我们对不同类型的细菌进行了耐药性监测，包括了革兰氏阳性菌、革兰
氏阴性菌等。
通过监测，我们发现了一些细菌对某些抗生素产生了耐药性，这为我们及时调整治疗方案提供了重要的依据。
此外，我们还对不同地区、不同医疗机构的细菌耐药性情况进行了比较分析。
通过这些比较，我们发现了一些地区或机构的细菌耐药性较高，这提示我们应该加强对这些地区或机构的监测和防控工作。
最后，我们将监测结果及时向相关部门和医疗机构通报，并提出了一些建议和
措施，希望能够引起足够的重视，加强对细菌耐药性的防控工作。
综上所述，细菌耐药性监测工作是一项重要的公共卫生工作，它能够帮助我们
及时了解细菌耐药性的情况，制定有效的防控措施。
我们将继续加强这项工作，为保障公众健康作出更大的贡献。
细菌耐药表型的检测_检验科工作经验
细菌耐药表型的检测_检验科工作经验细菌耐药表型的检测（一）1. 葡萄球菌1.1 对β-内酰胺类药物1.1.1 耐药机制葡萄球菌对β-内酰胺类药物的耐药至少有三种不同的机制。
①产生添加的青霉素结合蛋白PBP2a；②大量产生灭活药物的β-内酰胺酶；③内源性的PBP被修饰（modified intrinsic PBPs，MOD-SA）降低了与药物的亲和力。
PBP2a由mecA基因编码，这个基因可能源自枯草杆菌，它所编码的PBP2a不但不与β-内酰胺类药物结合，而且能替代几种PBPs的功能，在细胞壁的合成中发挥转肽酶作用。
带有mecA 基因的菌株可以是同质性的，在体外药敏试验中均表现耐药；也可以是异质性的，在体外试验中仅1/104-108个菌表现耐药。
大量产生β-内酰胺酶引起的耐药，是由于酶打开药物中的β-内酰胺环，使药物失去了与靶位（PBP）结合的能力，也称做药物被灭活。
MOD-SA型耐药是由于葡萄球菌原有的PBP1、2、4被修饰后降低了β-内酰胺类药物的亲和力。
表13-1 耐β-内酰胺类药物的葡萄球菌的苯唑西林表型分类苯唑西林mecA基因机制borderlinea耐药抑制剂作用β-内酰胺类交叉耐药其它药物交叉耐药R(同质性) + PBP2a - - + +R(异质性) + PBP2a ±- + +S - 产生β-内酰胺酶增加+ + - -R/S - PBP1、2、4被修饰+ - - -a：borderline耐药表型：稀释法中，苯唑西林MIC在2-8ug/ml 之间，无明确终点；扩散法抑菌圈直径10-13mm，边缘不整齐。
b：表示可以有例外情况1.1.2 实验室检测β-内酰胺酶检测采用酸法、碘法和头孢噻吩（nitrocefin）法3种方法任一种均可。
苯唑西林耐药性检测NCCLS推荐用琼脂筛选法。
我们的具体方法是配制含40g/L NaCl 的MH琼脂（加水量为应加量的9/10），高压灭菌后分装试管每管9ml，加盖无菌橡皮胶塞后4℃保存。
检验科微生物室多重耐药的检测及分析
检验科微生物室多重耐药的检测及分析随着抗生素的广泛使用和滥用，多重耐药菌的出现已成为医疗界面临的重要难题。
为了有效地控制和预防多重耐药菌的传播，及时发现和识别这些菌株至关重要。
因此，涉及该领域的微生物检测成为了检验科中的重要一环。
多重耐药菌的检测方法通常包含两个主要步骤：细菌培养和药敏试验，这对于临床检验科来说是一个老生常谈的话题。
另外，使用分子生物学技术，如PCR方法可以快速、精准地检测出菌株中存在哪些基因。
在实际应用中，涂片法是最基本的方法之一，常用于血液、尿液等样本中微生物的检测。
此外，还可以采用涂布培养法、PCR法、质谱法等技术进行多重耐药菌的检测。
在多重耐药菌的药物治疗方面，通常采用联合用药是较为有效的方法。
对于单个抗生素的耐药菌，可根据药敏试验结果，选用敏感的抗生素进行治疗。
但在临床实践中，对于多重耐药的菌株，往往要使用多种抗生素进行联合治疗。
维持合理的抗菌药物使用，合理使用联合用药，严格控制抗生素的使用范围、剂量和时限，以及加强环境卫生和个人卫生的管理，这些都是有效地防控多重耐药菌传播的关键。
中华医学会感染病学分会建议：在医疗机构，尤其是重症监护室等高风险科室设立感控小组，制定科室感控策略和标准操作规程，建立多重耐药菌感染预防和控制长效机制等防范措施。
总之，检验科微生物室在多重耐药菌的检测及分析方面发挥着重要作用。
只有加强经验积累，不断学习并更新技术、完善分子生物学等微生物学技术手段，才能提高多重耐药菌的检测率和灵敏度，更好地开展细菌培养和药敏试验，并做好多重耐药菌检测相关数据的统计和分析，为临床治疗和防控工作提供更加实用、可靠的数据支持，更好地服务于人民健康。
检验科微生物室多重耐药的检测及分析
检验科微生物室多重耐药的检测及分析随着全球经济和人口的增长，各种传染性疾病的风险也在不断增加。
多重耐药菌的出现成为了当今医疗领域的严重问题。
多重耐药，是指细菌对两种或两种以上抗菌药物具有耐药性的现象。
这种现象已成为当前预防和治疗感染性疾病的主要挑战。
为了解决这一问题，检验科微生物室进行了多重耐药的检测及分析。
一、检测标准细菌的药敏试验是微生物室中最常用的检测方法之一。
它通过检测细菌对不同抗菌药物的敏感性来判断其耐药程度。
当前，临床上常用的药敏试验有扩散法、微量浓度梯度法、离子色谱法等。
在多重耐药细菌的检测中，微生物室多采用微量浓度梯度法，它可以更准确并且更快速地检测出多重耐药细菌。
二、检测过程（一）样本的收集和处理微生物室收到的样本主要为血液、尿液、呼吸道分泌物等。
每个样本被进行标本预处理（如培养基筛选、清洗和平衡）之后被分配至不同的孔中。
每个孔位，以高浓度的药物开始浓度梯度，通过液体复合物、进料机、印刷机等进行药物加注。
经过一段时间的培养（通常为16至48小时），检验科会检查每种药物的最小抑制浓度（MIC）。
（二）药物抑制浓度的读取和解释MIC是指药物对细菌的最低抑制浓度。
通过检测各药物的MIC，可以判断细菌对这种药物的敏感性。
MIC小说明对该药物更为敏感，大则说明对该药物更为耐药。
多重耐药细菌具有对多种不同药物的耐药性，因此它们的每种药物的MIC都较高。
一般而言，通过药物与细菌的MIC比较，就能够较为准确地判断这种细菌的耐药性。
MIC比较时需要注意：MIC 更低的药物，可通过更低浓度抑制或杀灭菌株；反之，则需要更高的浓度。
（三）结果分析多重耐药细菌对多种药物具有耐药性，因此它们的MIC值通常都较高。
一般而言，如果一株细菌在3种或3种以上药物中的MIC值都较高，则可以判断其为多重耐药细菌。
对于多重耐药菌，医生需要选择对应的治疗方案。
多重耐药的现象日益严重，已成为当前预防和治疗感染性疾病的主要挑战。
细菌耐药表型的检测方法
四、金属β-内酰胺酶的表型检测方法
1.头孢他啶+2-巯基丙酸法(CAZ+NCA) （1）将待测菌株按常规药敏纸片K-B法操作均匀涂布于M-H平 板上。 （2）在M-H平板上分别贴两片头孢他啶(30ug/片)纸片，纸片 中心相距2.5cm,将其中一片头孢他啶纸片上加3ul 2-巯基丙 酸，35℃孵育18-24h。 （3）结果观察：若加有2-巯基乙酸的头孢他啶纸片抑菌圈大 于单个头孢他啶的抑菌圈（≧4mm），则为阳性，即产金 属β-内酰胺酶。
附：鉴定卡他球菌方法
1.40%KNO3浸湿滤纸条，贴于羊(马)血平板上，周 围点种待测菌，如果菌落周围出现大的绿色环 ， 即为阳性。 2.丁酸酯酶检测法：购买丁酸酯酶检测纸片(梅里埃 公司生产)，涂细菌于纸片上，如几分钟内出现绿 色为阳性。
金属β-内酰胺酶的表型检测方法
2.亚胺培南+EDTA法(IMP+EDTA) （1）将待测菌株按常规药敏纸片K-B法操作均匀涂布于M-H 平板上。 （2）在M-H平板上贴一片亚胺培南(10ug/片) 纸片，在距亚 胺培南纸片中心1.5cm处贴无菌空白纸片一片，将0.5M EDTA 10ul 均匀浸注于空白纸片上，35℃孵育18-24h。 （3）结果观察：若两片纸片抑菌圈有协同作用，则为阳性， 即产金属β-内酰胺酶。
耐药机制 红霉素 克林霉素 基因型 ―――――――――――――――――――――――
泵出(MS) 核糖体基因诱导变异 （ermC为主） 核糖体基因结构变异 （ermA为主） R (iMls) (cMLS) S R R MSRA D-Test(+) R
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七、其它耐药表型检测 1.MRSA，MRCNS 2.VRE 3.PRP 4.泵出机制：美平/泰能（MIC）≥1
检验科微生物室多重耐药的检测及分析
检验科微生物室多重耐药的检测及分析多重耐药是指细菌对多种抗生素产生耐药性的现象。
随着抗生素的广泛应用，细菌逐渐发展出对抗生素的耐受能力，导致常规治疗变得无效。
对多重耐药的检测及分析成为了科研和临床的重要课题。
多重耐药的检测方法主要有以下几种：药敏试验、分子生物学方法和质谱技术。
药敏试验是目前常用的检测方法之一。
它通过将不同的抗生素加入培养基中，观察菌落的生长情况，以判断细菌对抗生素的敏感性。
药敏试验需要较长的培养时间，且对于一些人工困难培养的菌株或多重耐药细菌的检测不够敏感，因此在临床应用中有一定局限性。
分子生物学方法是一种新兴的检测技术。
PCR和实时荧光PCR是常用的方法之一。
通过PCR扩增细菌的相关基因，如耐药基因和药物靶点基因，可以检测细菌的耐药性。
实时荧光PCR可以实时监测PCR反应的进程，提高检测的准确性和灵敏度。
核酸杂交和基因芯片等技术也可以用于多重耐药的检测。
质谱技术是一种基于质量差异的检测方法。
它通过将细菌生物样品直接喷雾为微粒，利用质谱仪检测样品中药物抗性基因或耐药蛋白的质量差异，以实现对多重耐药的检测。
质谱技术具有高通量、高灵敏度和高特异性的优点，但仪器设备昂贵，操作复杂，需要专业的训练。
对于多重耐药的分析，主要是分析细菌的耐药机制和其所携带的耐药基因。
现有的耐药基因数据库和耐药机制研究可以为分析提供重要的依据。
还可以通过比较不同菌株的耐药表型和基因组序列，分析不同菌株之间的耐药差异和演化趋势。
需要指出的是，在多重耐药的检测和分析中，还应考虑到细菌的生境和传播途径，以及抗生素的使用和管理等因素。
只有全面了解细菌的耐药机制和传播途径，才能采取相应的措施，有效地遏制多重耐药的蔓延。
多重耐药的检测及分析是一个复杂而重要的课题。
随着科技的进步和研究的深入，相信在未来会有更多更准确的方法和策略来应对多重耐药问题。
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析
多重耐药菌（MDR）是指对两种或两种以上不同类别的抗菌药物耐药的细菌。
由于MDR 菌株对多种常用抗生素具有耐药性，导致临床治疗难度增加，病情加重，甚至危及患者生命。
对MDR菌株的及时检测和分析显得十分重要。
多重耐药的产生机制主要包括基因突变、质粒传播、表达耐药基因等。
对MDR菌株的
检测及分析需要从基因层面和表型特征两方面进行。
2. 基因测序：对PCR扩增出的耐药基因产物进行测序，可以进一步确定基因序列，从而了解基因突变情况，分析MDR菌株的耐药机制。
3. 实时荧光定量PCR：利用基因的拷贝数目与荧光信号强度之间的关系，测定耐药基因的丰度，从而定量检测MDR菌株的存在。
二、表型分析
1. 传统药敏试验：通过将MDR菌株与不同种类的抗生素接触，观察生长情况，判断菌株对不同抗生素的耐药性。
2. 最小抑菌浓度(MIC)测定：通过测定MDR菌株对不同种类抗菌药物的最低有效浓度，评价菌株的耐药情况。
3. 磁珠芯片技术：将含MDR菌株的培养物与一系列抗生素标记的磁珠混合，在磁场作用下，耐药菌株被磁珠捕获，可通过检测磁珠上标记的抗生素类型，来判断菌株对抗生素
的耐药性。
通过基因检测和表型分析可以全面了解MDR菌株的耐药机制。
还需注意与临床实际情
况相结合，包括病人的临床表现、临床应用抗菌药物等因素，以便制定合理的治疗方案。
检测和分析MDR菌株的耐药性对于指导临床合理用药、制定感染控制措施具有重要意义。
在MDR菌株的防控工作中，特别是在医院、养老院等医疗场所应采取相应的防范措施，加强感染控制，减少多重耐药的发生。
检验科微生物室多重耐药的检测及分析
检验科微生物室多重耐药的检测及分析近年来，随着多种抗生素大规模的应用，导致了耐药菌的不断出现，而且不断发展着，已成为全球医学界普遍关注的问题。
因此，如何预防和控制多重耐药菌病菌的传播，已成为医学领域中的一项重要任务。
近年来，微生物检验技术的快速发展促进了人们对耐药性的认识和对治疗和预防控制的掌握，为临床治疗和预防控制提供了可靠的技术保障。
本文将介绍检验科微生物室中多重耐药检测的方法及分析。
1. 材料及方法1.1 检测菌株的分离从临床标本或环境中分离出疑似多重耐药菌株，进行纯化和鉴定。
对于分离的耐药菌株，应先进行基本的细菌学鉴定，并进行生化特性分析和16S rRNA序列分析，确定其物种和属于哪一类菌群。
1.2 药敏试验使用不同规格的纸片法、药敏仪法和MIC测定法进行多重耐药菌的药敏试验，检测菌株的耐药性状况并获取药物敏感性结果。
1.3 分子生物学检测方法使用PCR技术检测耐药菌株中的ARGs和MGEs基因，如ESBLs、AmpC β-lactamases 等，确定耐药机制，从而进行群体分析和传播链的剖析。
2. 结果及分析通过对多重耐药菌的核酸提取、PCR扩增和限制性酶切鉴定，确定该细菌菌株为耐药菌。
对于分离的耐药菌株，应对其物种和属于哪一类菌群进行细菌学鉴定。
可通过荧光PCR、MALDI-TOF质谱技术和16S rRNA序列分析等方法进行鉴定。
选择适当的药敏试验方法，如文盘扩散或E-test, 对菌株药敏性进行检测。
根据CLSI 或EUCAST指南，对菌株药物敏感性进行分析，并根据敏感性、中介敏感和耐药性各项指标，确定菌株的药物敏感性结果。
同时，对临床上经常使用的药物进行监测，从而为合理使用提供参考。
使用PCR技术鉴定菌株中ARGs和MGEs等相关基因，如ESBLs、AmpC β-lactamases 等，对于菌株的耐药机制进行确定化。
可采用RPA、LAMP和数字PCR等方法，对于ARGs和MGEs基因进行快速检测。
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析
检验科微生物室多重耐药菌的检测及分析近年来，随着抗生素的广泛使用和滥用，多重耐药菌的问题越来越严重。
多重耐药菌指的是对不同种类抗生素同时产生耐药性的细菌，这种细菌对治疗带来了巨大挑战，极大地增加了治疗难度和病死率。
因此，对多重耐药菌的及时检测及鉴定非常重要。
检验科微生物室是进行多重耐药菌检测的重要部门，下面将介绍多重耐药菌检测的具体流程及分析。
多重耐药菌检测的流程1. 样品采集和送检：首先，需要采集患者相应部位（如咽喉、肠道、尿液等）的样品，通常采取刮拭、采血、切片等方式，并将样品送往检验科微生物室。
2. 细菌分离和鉴定：将样品进行细菌培养和分离，常用的培养基有常规培养基如血琼脂、Eosin Methylene Blue (EMB)、MacConkey等以及选择性培养基如MRSA SCREEN Agar, Cetrimide Agar等；细菌鉴定包括形态、生理代谢、生化反应等方法，以确定细菌种类。
3. 药敏试验：将已鉴定的细菌接种于药敏试验板上，添加不同浓度的抗生素，观察菌落生长情况，以确定对哪些抗生素产生了耐药性。
4. PCR检测：利用PCR技术对细菌基因进行检测，以检测多重耐药菌的特异基因及其是否携带质粒等。
5. 质控与报告：根据质控标准，对检测结果进行分析和报告，包括菌种、药敏结果及耐药基因检测结果等，并将结果及时上报至相关部门。
1. 多重耐药菌的检测结果应尽可能全面和准确，需要仔细观察和鉴定样品中的细菌种类，并进行药敏试验，以确定其药物耐药性。
2. PCR检测是确定菌株是否携带多重耐药基因的关键技术，需要对PCR技术进行优化和验证，可有效降低检测假阳性和假阴性率。
3. 多重耐药菌的检测结果需根据临床情况进行分析和解读，制定有针对性的治疗方案。
对于患有多重耐药菌感染的患者，应采取更加强有力的抗生素治疗方案，并加强感染控制措施，以避免疾病扩散。
总之，多重耐药菌的及时检测和鉴定是保障公共卫生和医疗安全的关键步骤。
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细菌耐药表型的检测（一）1. 葡萄球菌1.1 对β-内酰胺类药物1.1.1 耐药机制葡萄球菌对β-内酰胺类药物的耐药至少有三种不同的机制。
①产生添加的青霉素结合蛋白PBP2a；②大量产生灭活药物的β-内酰胺酶；③内源性的PBP被修饰（modified intrinsic PBPs，MOD-SA）降低了与药物的亲和力。
PBP2a由mecA基因编码，这个基因可能源自枯草杆菌，它所编码的PBP2a不但不与β-内酰胺类药物结合，而且能替代几种PBPs的功能，在细胞壁的合成中发挥转肽酶作用。
带有mecA基因的菌株可以是同质性的，在体外药敏试验中均表现耐药；也可以是异质性的，在体外试验中仅1/104-108个菌表现耐药。
大量产生β-内酰胺酶引起的耐药，是由于酶打开药物中的β-内酰胺环，使药物失去了与靶位（PBP）结合的能力，也称做药物被灭活。
MOD-SA型耐药是由于葡萄球菌原有的PBP1、2、4被修饰后降低了β-内酰胺类药物的亲和力。
表13-1 耐β-内酰胺类药物的葡萄球菌的苯唑西林表型分类苯唑西林mecA基因机制borderlinea耐药抑制剂作用β-内酰胺类交叉耐药其它药物交叉耐药R(同质性) + PBP2a - - + +R(异质性) + PBP2a ±- + +S - 产生β-内酰胺酶增加+ + - -R/S - PBP1、2、4被修饰+ - - -a：borderline耐药表型：稀释法中，苯唑西林MIC在2-8ug/ml之间，无明确终点；扩散法抑菌圈直径10-13mm，边缘不整齐。
b：表示可以有例外情况1.1.2 实验室检测β-内酰胺酶检测采用酸法、碘法和头孢噻吩（nitrocefin）法3种方法任一种均可。
苯唑西林耐药性检测NCCLS推荐用琼脂筛选法。
我们的具体方法是配制含40g/L NaCl 的MH琼脂（加水量为应加量的9/10），高压灭菌后分装试管每管9ml，加盖无菌橡皮胶塞后4℃保存。
配制60μg/ml苯唑西林贮存液过滤除菌后分装，每管1ml，-20℃保存（冰箱结冰室-18℃左右亦可）半年内有效。
临床用前将MH琼脂隔水煮沸溶化，冷至50℃以下，先将苯唑西林贮存液加入70mm直径的平皿，再倒入MH琼脂轻晃摇匀。
将待测的金黄色葡萄球菌，调至0.5麦氏单位，点种琼脂后30℃～35℃（不可超过35℃）孵育24小时，有任何生长现象即为耐药。
本法目前只适用金黄色葡萄球菌。
纸片扩散法检测苯唑西林的耐药性，方法同常规方法基本相同。
不同处为：MH琼脂中NaCl浓度为40g/L，金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径判断标准≥13mm为敏感，11～13mm为中介，≤10mm为耐药；凝固酶阴性的葡萄球菌：≥18mm为敏感，≤17mm为耐药，注意要将平皿对着光线检查抑菌圈内是否有菌落生长。
稀释法也是在MH中加入40g/L NaCl，金黄色葡萄球菌：MIC≤2μg/ml为敏感，≥4μg/ml为耐药；凝固酶阴性的葡萄球菌，MIC ≤0.25μg/ml为敏感，≥0.5μg/ml为耐药。
1.1.3 试验药物的选择和预报性在常规工作中，葡萄球菌对β-内酰胺类药物的药敏试验，可以只检测青霉素、苯唑西林和氨苄西林/舒巴坦来判断，如果能用硝噻吩法检测快速β-内酰胺酶最好。
青霉素敏感的菌株表示对所有不耐酶的青霉素类药物如氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林、哌拉西林、替卡西林等均敏感，β-内酰胺酶阳性或青霉素耐药、氨苄西林/舒巴坦和苯唑西林敏感，表示对耐酶青霉素类药物或青霉素类/酶抑制剂的复合制剂敏感。
苯唑西林耐药的葡萄球菌即目前被称为MRS（耐甲氧西林的葡萄球菌）菌株，这种耐药类型的细菌表示对所有的β-内酰胺类药物包括青霉素类、头孢菌素类、β-内酰胺类/酶抑制剂复合制剂、卡巴配能类均耐药。
而这些药物在体外试验中可显示有活性，如果被误报给临床，可能会误导临床用药。
同时苯唑西林耐药的葡萄球菌常常对红霉素、氯林可霉素、氯霉素、四环素、复方新诺明、旧喹诺酮或氨基糖苷类耐药。
此外，苯唑西林敏感，而上述抗菌药物出现较多交叉耐药的菌株，也要考虑MOD-SA型的耐药，提示临床慎用表型为β-内酰胺类敏感的药物。
1.2 对氨基糖苷类药物1.2.1耐药机制细菌可以产生多种酶灭活氨基糖苷类药物，这种灭活作用非常复杂，它们主要分为三大类：乙酰转移酶（AAC）、核苷转移酶（ANC）和磷酸转移酶（APH）。
每一类酶中又有许多亚类可以修饰不同位置上的羟基或氨基，导致不同的耐药表型，在葡萄球菌中（也发现在肠球菌中）最重要的是aac(6’)-Ie基因，编码产生双功能酶AAC（6’）加APH（2”）。
其APH（2”）部分可以修饰庆大霉素、妥布霉素和卡那霉素，AAC（6’）部分可以修饰妥布霉素、奈替米星、卡那霉素和阿米卡星。
因此这种双功能酶实际使细菌对除链霉素以外的所有氨基糖苷类药物耐药。
有些酶能催化修饰不同的氨基糖苷类药物，但是由于酶对不同底物（药物）的米氏常数（Km）不同，其催化效率的高低使试验结果显现不同的表型。
如APH （3’）-III可以修饰卡那霉素、奈替米星和阿米卡星，但在常规药敏试验中却表现为对阿米卡星敏感，显现错误的表型，除了产生灭活酶外，在金黄色葡萄球菌中也发现由于核糖体被修饰后导致的对链霉素的耐药。
（同肠球菌详见本章2.2.1节）。
1.2.2 实验室检测及预报性对氨基糖苷类的耐药性最好检测其耐药酶。
临床可用的氨基糖苷类药物虽然并不多，但酶的种类、亚类却非常之多，因而只能在少量参考实验室进行此项工作。
目前我们只能根据常规药敏试验中的某些表现推测其可能存在的耐药机制，修改实验室结果，预测临床疗效。
下表列举了最常见的几种情况。
表13-2 葡萄球菌对氨基糖苷类药物的耐药预测表型推论机制预测耐药KmR TmS GmS AkS APH(3’) KmR TmS GmS AKI/RKmR TmR GmS AkS ANT(4’) KmR TmR GmS AkI/RGmR APH(2”)AAC(6’) 所有氨基糖苷类R（除链霉素外）Km:卡那霉素Tm:妥布霉素Gm:庆大霉素AK:阿米卡星R：耐药I：中介S：敏感1.3 对糖肽类药物已经有人报道分离到对万古霉素中等水平耐药的葡萄球菌，这种耐药的机制还不清楚，这些分离株的耐药性并非从肠球菌中获得对万古霉素的耐药基因所导致。
但是已经在实验室条件下，应用接合的方式将粪肠球菌对糖肽类药物的高水平耐药转移给金黄色葡萄球菌，采用纸片扩散法检测葡萄球菌对万古霉素的耐药，抑菌环直径≥15mm为敏感，≤14mm的菌株应该测MIC，当检验到万古霉素耐药的葡萄球菌时，应重新鉴定细菌和重复药敏试验，并送参考实验室确认。
1.4 对喹诺酮类药物喹诺酮类药物作用于细菌的DNA回旋酶（II型拓扑异构酶）和IV型拓扑异构酶，阻断了细菌的生长和分裂，起到杀菌作用。
当编码DNA回旋酶的gyrA基因和编码IV型拓扑异构酶的parC基因发生突变时，细菌产生耐药。
细菌细胞膜通透性改变也可引发耐药，这种耐药通常伴有对结构不相关药物的耐药，葡萄球菌对喹诺酮的耐药往往是parC基因的突变，这种耐药表型为对环丙沙星的耐药。
在葡萄球菌的药敏试验中，如果环丙沙星耐药，可预测氧氟沙星，左旋氧氟沙星耐药。
细菌耐药表型的检测（二）2 肠球菌2.1 对β-内酰胺类药物的耐药2.1.1 耐药机制肠球菌对β-内酰胺类药物的耐药可以是青霉素结合蛋白的改变，也可以是产生了β-内酰胺酶。
肠球菌自身的青霉素结合蛋白（PBPs）与β-内酰胺类药物的亲和力较低，青霉素对肠球菌的MIC通常≥2μg/ml，而对链球菌的MIC通常≤0.12μg/ml。
肠球菌的这种天性，表现为对β-内酰胺类药物的“相对耐药”，而肠球菌对青霉素和氨苄西林的耐药（MIC≥16μg/ml），是因为PBPs发生了改变，使亲和力进一步降低。
这种耐药性屎肠球菌（MIC 16～32μg/ml）比粪肠球菌（MIC 2～4μg/ml）更为突出。
β-内酰胺酶形式的耐药在肠球菌中非常少见，目前仅在粪肠球菌中发现产β-内酰胺酶的菌株。
2.1.2 实验室检测采用常规纸片扩散法或稀释法（肉汤稀释法或琼脂稀释法）能检测PBPs改变引起的耐药，不能检测产生β-内酰胺酶引起的耐药。
稀释法中要注意菌液浓度为107CFU/ml，比通常稀释法中的菌液浓度高100倍。
β-内酰胺酶的检测推荐使用头孢硝噻吩法（见1.1.2节）。
2.1.3 试验药物的选择及其预报性仅β-内酰胺酶阳性的肠球菌，预示对青霉素、氨苄西林、哌拉西林耐药，而对泰能、β-内酰胺类加酶抑制剂的复合药物敏感。
目前仅见到粪肠球菌β-内酰胺酶阳性报导。
血和脑脊液中分离的肠球菌检测β-内酰胺酶，可以尽早指导临床用药。
β-内酰胺类药物中选择青霉素和氨苄西林进行药敏试验即可。
β-内酰胺酶阴性、青霉素敏感的菌株对氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林以及他们与酶抑制剂的复合制剂敏感。
β-内酰胺酶阴性、氨苄西林敏感的菌株预示对氨苄西林/克拉维酸以及阿莫西林/舒巴坦敏感。
所谓对青霉素和氨苄西林“敏感”的分类，意味着对严重的肠球菌感染需要大剂量药物治疗。
青霉素、氨苄西林耐药的菌株，一般认为是PBPs改变，泰能即使敏感也应考虑耐药。
由肠球菌引起全身性严重感染（如心内膜炎等），如果对高浓度氨基糖甙类敏感，而氨苄西林耐药，应该检测氨苄西林的MIC，如果氨苄西林的MIC 16～64ug/ml，仍可以考虑与氨基糖甙类联合用药（详见下一节）。
头孢菌素类药物不宜选择进行肠球菌的药敏试验，因为其可以表现为体外试验敏感，而临床无效。
2.2 对氨基糖甙类高水平耐药2.2.1 耐药机制一般不选用氨基糖甙类单一药物治疗肠球菌感染，因为氨基糖甙类药物不易被摄入肠球菌，表现为内源性、中等水平耐药，MIC通常在8～256μg/ml。
当与作用于细胞壁的药物如青霉素、氨苄西林、万古霉素等联合用药，通过损伤细菌细胞壁，使氨基糖甙类药物进入菌体，与细菌30S核糖体亚单位结合，干扰蛋白质合成，发挥杀菌作用。
一旦出现对氨基糖甙类高水平耐药（庆大霉素的MIC≥500μg/ml，链霉素≥1000μg/ml），说明产生获得性的耐药。
此时，对链霉素的耐药是编码细菌核糖体的基因发生了突变，由于靶位的改变药物不能结合到作用部位，引起耐药；对其它氨基糖甙类药物的耐药是获得了新的基因，编码产生修饰药物的酶，使药物灭活。
2.2.2 实验室检测庆大霉素纸片含药量120μg/片，链霉素纸片含药量300μg/片，在MH琼脂上进行KB法药敏试验，两种药物的判定界点一样，即直径≥10mm为敏感，7～9mm为中介，≤6mm为耐药。
如果所测抑菌圈直径为7-9mm，表示试验无法定论，应使用琼脂筛选法或肉汤筛选法确定耐药性。
方法是配制庆大霉素含量500μg/ml的BHI肉汤或琼脂，链霉素含量1000μg/ml的BHI肉汤或2000μg/ml的BHI琼脂，肉汤法的接种菌量如标准肉汤稀释法，琼脂法接种菌量为0.5麦氏单位10ul菌液。