各种常用显色剂及其配制方法

各种常用显色剂及其配制方法

碘

适用于不饱和或者芳香族化合物

配制方法：在100ml广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅胶

高锰酸钾

适用于含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛

配制方法：1.5gKMnO4+10gK2CO3+1.25mL10%NaOH+200mL水.使用期3个月

磷钼酸(PMA)

广谱

配制方法：10gof磷钼酸+100mL乙醇

紫外灯

适用于含共轭基团的化合物，芳香化合物

硫酸铈

生物碱

配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液

氯化铁

苯酚类化合物

配制方法：1%FeCl3+50%乙醇水溶液.

桑色素(羟基黄酮)

广谱,有荧光活性

配制方法：0.1%桑色素+甲醇

茚三酮

适用于氨基酸

配制方法：1.5g茚三酮+100mLof正丁醇+3.0mL醋酸

二硝基苯肼(DNP)

适用于醛和酮

配制方法：12g二硝基苯肼+60mL浓硫酸+80mL水+200mL乙醇

香草醛(香兰素)

广谱

配制方法：15g香草醛+250mL乙醇+2.5mL浓硫酸

溴甲酚绿

适用于羧酸，pKa<=5.0

配制方法：在100ml乙醇中，加入0.04g溴甲酚绿，缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液，刚好出现蓝色即至。

钼酸铈

广谱

配制方法：235mL水+12g钼酸氨+0.5g钼酸铈氨+15mL浓硫酸

茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1

广谱

配制方法：135乙醇+5mL浓硫酸+1.5mLof冰醋酸+3.7mL茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.

茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2

适用于萜烯，桉树脑(cineoles),withanolides,出油柑碱(acronycine)

配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)

胺类物质常用的是：

（1）磷钼酸显色剂：磷钼酸5%-10% 乙醇溶液，淡黄色，久置变为浅绿色，不影响使用。浸板或喷板，加热，浅黄色背景，还原性物质显蓝绿色斑点，如果斑点太浓，可能显深黄色。（2）CAM显色剂:钼酸铵9.6g,硫酸铈0.4g,10%硫酸水溶液200ml,混匀，极淡的黄色溶液，棕色瓶密闭保存，喷板，加热，白色背景，还原性物质显深蓝色斑点。

显色的方法各种各样，主要根据化合物的性质选择不同的显色方法。许多关于植物有效成分提取与分离的书上都有介绍，通用的有碘、硫酸乙醇、香草醛－硫酸等，当然还有许多专用的显色剂，如：溴甲酚绿使有机酸显黄色，三氯化铁使酚羟基显蓝色，碘化铋钾使生物碱显桔黄色.....

显色剂化合物

苯胺邻苯二甲酸酯碳水化合物，糖类

溴甲酚绿羧酸

二甲氨基苯甲醛氨基酸，多肽

磷钼酸苯酚类

若丹明类酯类

TLC 常用显色剂

zhangwei_suda 发表于: 2007-6-29 10:58 来源: 化学吧

TLC 常用显色剂

1、生物碱

（1）沉淀反应——碘化汞钾试剂→白色或浅黄色沉淀

碘化铋钾试剂→橘红色沉淀

碘—碘化钾试剂→浅棕或暗棕色沉淀

硅钨酸试剂→浅黄或黄棕色沉淀

磷钨酸试剂→浅黄色沉淀

磷钼酸试剂→白色或淡黄色沉淀

苦味酸试剂→黄色结晶或非结晶形沉淀

鞣酸试剂→棕黄色沉淀

氯化金试剂→黄色结晶

氯化铂试剂→白色结晶

雷氏铵盐→红色无定形沉淀

（2）薄层层析检查：吸附剂——碱性氧化铝（Ⅲ级，干法铺板）

硅胶G（稀碱湿法铺板）

展开剂——氯仿：甲醇

显色——UV；碘化铋钾

2、氨基酸、多肽、蛋白质

（1）加热沉淀试验：加热煮沸→混浊或沉淀（蛋白质）

+5%H2SO4（不加热）→混浊或沉淀

（2）双缩脲反应：+40%NaOH，1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色（多肽、蛋白质）

（3）茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液→蓝或蓝紫色（氨基酸、多肽、蛋白质）（4）吲哚醌反应：+吲哚醌试液→各种颜色（氨基酸）

（5）Millon反应：+Hg，H2NO2 →红色（蛋白质分子中有酪氨酸组成）

（6）Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸→各色（蛋白质分子中有色氨酸组成）（7）氨基酸的薄层层析检查：吸附剂——硅胶G

展开剂—— n-BuOH，n-BuOH：HAc：H2O

显色剂——0.25%茚三酮试液→紫红色斑点

3、有机酸

（1）PH试纸检查

（2）溴酚兰试液：喷洒→蓝色背景黄色斑点

（3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或酸性氧化铝

展开剂—— C6H6：EtOH

显色剂——0.1%溴酚兰试液→黄色

4、酚类和鞣质

（1）FeCl3试剂：+1%FeCl3试液→蓝、暗绿或蓝紫色

（2）三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒→蓝色斑点

（3）香草醛-盐酸试剂：喷洒→红色（间苯二酚、间苯三酚）

（4）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠→红色

（5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或纤维素

展开剂—— n-BuOH：HAc：H2O；15%HAc

显色剂——1% FeCl3试液

1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液→蓝、绿或黑色

鞣质与酚类的区别：+明胶——沉淀

上清液 +1%FeCl3试液→蓝、暗绿或蓝紫色

5、糖和苷

（1）斐林试剂：+硫酸铜、酒石酸钾钠——砖红色沉淀（还原糖）

（—）+1%HCl +NaOH 沉淀（苷元）

△30min 上清液（+）（多糖、苷）

（2）Molish反应：+α-萘酚-浓硫酸→紫红色环

（3）银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水→银褐色（还原糖）

（4）薄层层析检查：：吸附剂——硅胶G或纤维素

展开剂—— n-BuOH：Pd：H2O；15%HAc

显色剂——苯胺-邻苯二甲酸

6、皂苷

（1）泡末试验：振摇→大量持续性泡末

+0.1M HCl 二管泡末高度相同（三萜皂苷）

+0.1M NaOH 碱管高于酸管（甾体皂苷）

（2）溶血试验：+2%红血球悬浮液→溶血

（3）Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸——紫红色（三萜皂苷）

黄-红-紫-污绿（甾体皂苷）

7、甾体