AKTA ready全自动工业层析系统
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
1、使用前,根据自己所要分离蛋白的性质确定所需的分离柱及缓冲液,打开计
算机及仪器,但不要急于打开软件,等计算机与仪器连接再打开软件,此过程大约需要3-5分钟。
2、将纯水先抽滤脱气,使用?0.45μm的滤膜,,然后选择流路连到机器上,先洗泵,然后给机器一个流速和压力。
选择的最高压力须小于柱子所能承受的压力极限。
3、将柱子连接到仪器上,接柱子时,须等进液管中的液体出来,将柱子的一头与进液管通过接头连接,先不要拧的太紧,等液体从柱子的另一头流出,再用接头将其与出液管相连拧紧,再将进液管端拧紧,这样防止柱子中进入气泡,影响分离效果。
4、柱子接上后,换上配好的缓冲液,须抽滤脱气,用缓冲液平衡至仪器的各条基线都平后,再上样。
5、上样时,必须通过滤膜过滤,0.22μm,,具体上样体积视样品浓度而定,采用
不同的上样环上样。
6、仪器使用完毕,切记要用纯水清洗泵和柱子,洗柱直至各条基线都平为止,防止盐和粒子结晶于泵和柱子使机器报废。
若长期不用,再用20%的乙醇清洗系统和
柱子,防止泵和柱子生长微生物,这一步非常重要,。
7、仪器的PH计每隔一段时间,一个月,须校准一次。
紫外流动池也需定期清洗,三个月,。
生物技术中心仪器管理人,李红兵
2006年10月15日。
akta层析系统参数
AKTA层析系统参数1. 介绍AKTA层析系统是一种高效且可靠的分离技术，用于生物分子的层析纯化。
层析系统参数是指在使用AKTA层析系统时需要设定的一系列参数，包括流速、洗脱梯度、柱温等。
正确设置这些参数能够保证分离效果和纯化纯度。
在本文中，我们将详细探讨AKTA层析系统参数的选择和优化，帮助您合理使用该系统并取得最佳的分离效果。
2. 流速参数流速是指液相在层析柱中的通过速率。
流速参数的选择对于分离效果和纯化纯度有很大的影响。
2.1 比线速度比线速度是流速参数的常用表示方法，其定义为单位时间内液相通过层析柱截面积的体积。
一般来说，比线速度越大，分离效果越好，但可能会降低纯化纯度。
建议在初始实验阶段采用较低的比线速度，然后根据样品的性质和分离需求逐步调整。
2.2 线速度线速度是流速参数的另一种表示方法，其定义为单位时间内液相通过层析柱的线性距离。
线速度与比线速度之间存在线性关系，可以相互转换。
3. 洗脱梯度参数洗脱梯度是指在层析过程中逐渐改变洗脱缓冲液的成分，以实现分离目标。
洗脱梯度参数的选择对分离效果和纯化纯度起着至关重要的作用。
3.1 起始缓冲液起始缓冲液是指开始层析时的溶液组成。
一般来说，起始缓冲液的性质应与待纯化物质相似，以提高分离效果。
如果待纯化物质溶解在缓冲液中，可以选择与之相同或类似的缓冲溶液。
3.2 洗脱缓冲液洗脱缓冲液是指在层析过程中使用的溶液，通过改变洗脱缓冲液的成分来实现分离目标。
选择合适的洗脱缓冲液需要考虑待纯化物质的亲和性和纯化纯度要求。
3.3 洗脱梯度洗脱梯度是指在层析过程中逐渐改变洗脱缓冲液的组成。
一般来说，采用线性梯度或者非线性梯度都可以实现分离效果。
线性梯度容易操作，但纯化纯度可能相对较低；非线性梯度可以提高纯化纯度，但操作难度较大。
根据实验要求和待纯化物质的特性选择合适的洗脱梯度。
4. 柱温参数柱温是指在层析过程中控制的柱子温度。
柱温参数的选择对于柱子的稳定性和分离效果有一定影响。
AKTAprime操作规程 范本
昆山市工业技术研究院小核酸生物技术研究所有限责任公司ÄKTAprime 全自动层析仪操作规程操作步骤：1.开机：先启动电脑，等电脑启动完成后打开AKTAprime主机电源。
2.点击桌面上的Primeview图标进入层析监视界面。
3.将A/B管道分别放入0.45um/0.22um过滤去离子水中。
4.在AKTAprime主机操作界面按上下键选择Manual Run进入操作菜单界面。
5.选择“Set Pressure Linit”设置系统压力上限，选择“Set Flow Rate”设置流速，选择“Start Run运行。
6.按下操作面板上的“Pause/Cont.”暂停运行。
7.将A/B管道分别放入0.45um/0.22um过滤buffer中。
8.重复操作步骤4—5。
9.按下操作面板上“end”按钮，结束运行。
10.安装层析柱，将层析柱上下管道分别接入AKTA相对应的接口。
11.选择“Set Flow Rate”设置流速，选择“Set Pressure Linit”设置层析柱压力上限，选择“Start Run”运行，开始平衡层析柱。
12.将样品用注射器推入样品环中，选择“Manual Run—Set Inject valvePos--Injection”命令开始进样，等样品全部层析柱后切换“Injection”到“Load”状态。
13.选择“Manual Run—Set Gradient/concentration”命令设置洗脱梯度。
14.洗脱完成后按下控制面板“end”按钮结束层析方法。
15.双击桌面“PrimeView Evaluation”图标，进入Evaluation界面，在Manual run中找到刚才运行的色谱图，选择菜单栏“File—Save As..”命令保存。
16.方法运行完毕后，用0.45um/0.22um过滤后的去离子水冲洗管道。
17.当电导和PH降至中性时换上20%乙醇冲洗管道，直到将所有管道充满乙醇为止。
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程一、目的：为了确保蛋白纯化层析系统操作的准确性、稳定性和安全性，保证实验结果的可靠性，制定本操作规程。
二、适用范围：本操作规程适用于实验室内的AKTA蛋白纯化层析系统操作。
三、操作流程：1.准备工作：(1)预热：打开系统电源，预热至设定温度（一般为室温）。
(2)洗涤缓冲液：根据实验要求，制备所需的洗涤缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(3)净化缓冲液：根据实验要求，制备所需的净化缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(4)样品：根据实验要求，制备所需的样品。
2.系统配置：(1)连接仪器：将系统中的各个模块连接好，包括色谱柱、注射器、检测器等。
(2)配置方法参数：根据实验要求，在系统内设置合适的流速、梯度洗脱条件等相关参数。
3.样品处理：(1)样品加载：将样品注入到加载注射器中，通过样品加载阀注入到色谱柱中。
(2)洗脱：根据实验要求，设置梯度洗脱条件，将混合物中的目标蛋白纯化。
4.系统清洗：(1)注射器清洗：每次实验结束后，将注射器从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
(2)色谱柱清洗：每次实验结束后，将色谱柱从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
5.系统关闭：(1)关闭电源：关闭系统电源，断开电源线连接。
(2)清洗系统：将系统中的各个模块用水冲洗干净，保持干燥。
(3)整理工作台：将使用过的耗材整理归位，清理工作台。
四、操作注意事项：1.操作前应仔细阅读操作手册，了解仪器的基本原理和操作要点。
2.操作时要穿戴实验室个人防护用品，避免吸入或接触有害物质。
3.在操作过程中，要严格按照实验要求进行，避免操作失误。
4.定期检查系统的运行状态，保证系统正常工作。
5.操作完成后，要及时清洗和整理仪器，保持仪器的干净和完好。
五、风险控制与安全措施：1.使用过程中，注意避免溶液飞溅引起的伤害，避免溶剂和化学品的吸入或接触。
2.避免电源短路或其他电气故障引起的意外事故。
AKTAexplorer100 操作入门
AKTAexplorer层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍1 系统组件(1) 泵 Pump系统泵：(system pump)双泵（A、B泵），缓冲液及大体积样品输送。
上样泵：(sample pump)样品输送。
(2) 阀 Valve三通阀：(SV-903)两个。
分别位于两个系统泵前，用于缓冲液输送管道(A1/A2, B1/B2)切换。
七通阀：(INV-907)两个。
1. 上样阀(sample valve)，用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时废液管 (waste) 切换；2. 流向切换阀(flow direction valve)，用于层析柱流向切换(downflow/upflow)。
八通阀：(一个IV-908位于泵前，低压阀门；四个PV-908，位于泵后，高压阀门)共五个。
1. 缓冲液选择阀(buffer valve A1)，通过A1管可选择八个不同缓冲液；2. 样品选择阀(sample valve)，可选择7个上样样品；3. 柱位阀(column position)，两个，同时切换可选择七个柱位；4. 出口阀(outlet valve)，选择收集出口。
(3) 收集器 Fraction分段收集。
(4) 其它组件梯度混合器(mixer)、柱前过滤器(on line filter)、紫外检测仪(UV-900) 、pH 电导仪 (pH/C-900 内含温度计)等。
2 系统功能系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。
(1) 缓冲液pH及梯度配制(a)梯度制备 (Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。
(b)自动缓冲液pH及梯度制备 (BufferPrep)根据所用缓冲液配方，分别将A1、A2、B1、B2放入相应的溶液，由A泵及其三通阀调配缓冲pH，由B泵及其三通阀调配梯度。
AKTApurifier 层析操作规程
AKTApurifer层析仪操作规程
1、打开电脑和显示器，打开层析仪电源，等待仪器自检完成后，点击电脑桌
面上的UNICORN软件，输入用户名和密码进入软件控制系统。
2、系统清洗：依次用水和缓冲液。
A管放入A缓冲液中，B管放入B 缓冲
液中，进样阀4，5出口管和收集阀的废液出口接到废液瓶中，在System control窗口下，点击Manual打开pump菜单，选择PumpWashPurifier命令，指定冲洗液入口，执行。
样品环的清洗用注射器从进样阀3号位推入缓冲液，反复几次。
3、手动控制：在运行前设定Alarm & Mon 中的报警压力。
缓冲液平衡柱，
用注射器从进样阀3入口推入过滤好的样品，着路在样品环中。
待基线稳定后，在flowpath菜单中injectValve选择切换到inject状态上样，并在Alarm & Mon菜单中选autozeroUV 将紫外调零，上样后转换到load状态，进行样品的洗脱操作。
4、自动控制：先在Method Edit窗口中编辑好方法，然后用注射器从进样阀
3入口推入过滤好的样品着路在样品环中，在System control的窗口中直接按Run，调出编辑好的程序，按照提示将它运行。
5、纯化结束后，用水和20％乙醇依次清洗管路和保存。
如果用泵上样品，
运行PumpWashPurifier命令，将上样品的入口选中，并放置在1MNaOH 中，运行30min，然后用缓冲液，水和20％乙醇依次清洗和保存管路。
AKTApure层析系统
肽的纯化中 • 客户定制的系统可随着您的研究需要的发展轻松的升级 • 系统设计理念来源于公认的 ÄKTA avant，可靠性值得信赖 • UNICORN 6 软件提供简单、直观和灵活的预编程方法模板
和系统控制，可简化您的工作 • 可用于所有 GE Healthcare 实验室规模层析柱
图 1. ÄKTA pure 是一种用于蛋白质、肽和核酸在实验室规模的可靠纯化的 灵活层析系统。
用于层析柱夹和设备连接的多轨道位于仪器的前部和一侧。 仪器顶部的缓冲液托盘提供容器和收集瓶的存放区域。仪 器的控制面板显示系统的状态，并且可以通过触摸按钮进 行运行操作（暂停 / 继续）。
基 本 配 置 的 系 统 仅 重 48 kg， 选 择 所 有 选 配 组 件 时 重 53 kg。相对低的重量使它能够更简单地被放置在实验台上， 系统尺寸使它可以更方便地安装在标准的层析冷柜中，用 于不稳定样品的纯化。
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5
150
A280 nm
A214 nm
125
A340 nm 23
5000 4000
以便使方法继续到下一步而气泡不会进入流路或层析柱。
A280 nm and A340 nm (mAU) A214 nm (mAU)
AKTA层析系统
UNICORN软件的安装向导功能可对流路进行自动安装和功能性检测。自动安装向导可以确保 UNICORN已经通过第三方机构的独立审记，根据FDA 21 CFR Part 11以及cGMP要求生产设
结果的可重复性和放大操作
ÄKTAready系统可进行工艺放大和小规模生产。用户可在实验室规模下进行工艺参数的确定 用于ReadyToProcess层析柱的介质也有单独包装的层析介质供选择。通过Pre药品生产企业在设备投入生产应用前得到法规资格认证。ÄKTAready层析系统
图2.（a）ÄKTAready流路配置。（b）ÄKTAready系统上空气陷阱的位置（c）温度探头，电
• 产品文档 - 提供接触料液管路的详细材质信息，并具有完整的可溯源性，包括USP VI认证以 • ÄKTAready流路法规支持文件（RSF）- 提供生产工艺以及可析出化合物的安全评价报告。 • 验证文件 – ÄKTAready系统中集成了流路的一整套功能测试操作方案。每个流路组件中同时 • FastTrak Validation™ - 提供各种完备的文档资料和现场认证等专家服务。
AKTA操作说明
一、ÄKTApure层析仪简明操作规程1、开机打开仪器的主电源，打开电脑电源。
待仪器自检完毕（主机控制面板白灯常亮）。
双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2、准备工作溶液和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤（样品也可高速离心后取上清使用）。
缓冲液需在使用前用低频超声脱气15 min。
3、清洗及管道准备首先将A1管道入口放入平衡缓冲液（binding buffer）中，将B1管道入口放入洗脱缓冲液（elution buffer）中，在system control窗口点击工具栏内的manual，选择execute manual instructions→pump →pump A wash和pump B wash，选中A1和B1入口，点击execute。
泵洗完成后自动停止。
4、安装层析柱在manual instructions里选择pump→system flow，输入流速1 ml/ml，insert；选择Alarms→alarm pre column pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。
待Injection Valve的1号位管道流出溶液后，将管路接入柱子的上端，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道，连上紫外流动池。
5、开始纯化：1）选择检测波长，Monitors→Wavelength→UV1, UV2, UV3 (可以只打开一个波长) 等待柱子平衡好了（观察UV、COND、pH的数值和变化趋势）就可以准备上样。
此时将紫外调零，选择Monitors →auto zero UV，exectue。
2）用样品环上样：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injectionValve的3号位推入, 上样后不要取下注射器。
在manual instructions里选择flowpath→injection Valve→inject，execute。
AKTA全自动层析仪(AKTA Purifier)操作规程
AKTA全自动层析仪（AKTA Purifier）操作规程1.开机打开主机和电脑电源，待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮不闪烁），双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2.准备流动相和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45 um的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。
当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈，甲醇），需在使用前用低频超声唾弃10 min。
3.清洗管道及装柱3.1首先将A1管道放入平衡液或banding buffer中，将B1管道放入高盐溶液中或elutionbuffer中，再system control窗口点击manual → pump → pump wash basic，选中A1，B1管道为ON，点击execute。
泵清洗程序会自动运行至结束。
3.2选择manual → pump → flow rate，输入流速为1 mL/min，点击insert；选择manual →alarm＆mon → alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），点击insert，点击execute。
将进样阀的1号位管道接入柱子的柱头（用几滴管道中流出的液体润湿，防止空气进入），稍微拧紧后将柱子下端的堵头卸掉，直接拧入紫外流动池或连接管道（可用柱子中流出的液体润湿接头，防止空气进入）。
4.手动运行4.1平衡柱子平衡好了（观察电导COND及pH的数值曲线走稳了），此时将紫外调零：选择manual → alarm＆mon → autozero，点击execute，就准备上样了。
4.2上样4.2.1用样品环上样：将样品吸进注射器，推掉气泡，从进样阀的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍），不要取下注射器，选择manual →flowpath → injectionValve → inject，点击execute。
4.2.2用样品泵上样（AKTA explorer系统）：将样品置于Sample Valve 1号位（可以选8个不同的位置），点击manual → pump → Direct Load_960输入进样流速和体积，点击execute。
AKTAprocess全自动生产系统
表 1. 系统规格
系统规格 6 毫米内径，聚丙烯 7.7 毫米内径，不锈钢 10 毫米内径，聚丙烯 9.4 毫米内径，不锈钢 20.4 毫米内径，聚丙烯 22.1 毫米内径，不锈钢 紫外波长范围 pH 范围 电导范围 密封保护级别，柜体及 电气 电气标准
系统参数 4-180 升/小时 4-180 升/小时 13-600 升/ 小时 13-600 升/ 小时 45-1800 升/小时 45-1800 升/小时 单波长 (280 nm) 或多波长 0-14 1-200 mS/cm NEMA 4X/IP 56 UL 508A, EN 61010-1
系统规格系统规格系统参数6毫米内径聚丙烯77毫米内径不锈钢10毫米内径聚丙烯94毫米内径不锈钢204毫米内径聚丙烯221毫米内径不锈钢4180升小时4180升小时13600升小时13600升小时451800升小时451800升小时单波长280nm或多波长0141200mscmnema4xip56紫外波长范围ph范围电导范围密封保护级别柜体及电气电气标准ul508aen610101最大操作压力pp610204毫米不锈钢7794毫米不锈钢221毫米6巴最大40摄氏度10巴最大40摄氏度6巴最大40摄氏度操作温度环境温度230摄氏度聚丙烯系统460摄氏度4060度时最大耐压3巴不锈钢系统480摄氏度4060度时最大耐压3巴6080度最大耐压1巴12058501670长宽高使用溶液使用溶液尺寸详情请与通用电气中国医疗集团各办事处联系香港办事处香港九龙旺角亚皆老街8号朗豪坊办公大楼12楼电话85221006314传真85221006338北京办事处北京市经济技术开发区永昌北路1号电话01058069403传真01067871162邮编100176上海办事处上海市虹桥开发区兴义路8号万都中心2401室电话0215257465067337传真02152081282邮编200336广州办事处广州市建设六马路33号宜安广场1212室电话020836338286796167956传真02083634302邮编510060成都办事处成都市新华大道文武路42号新时代广场12层ac单元电话02886782581传真02886782582邮编610017网站
akta层析系统操作入门
AKTAbasic层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍1 系统组件(1) 泵 Pump系统泵：(system pump)双泵（A、B泵），缓冲液及大体积样品输送。
上样泵：(sample pump)样品输送。
(2) 阀 Valve七通阀：(INV-907)两个。
1. 上样阀(sample valve)，用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时废液管 (waste) 切换；2. 流向切换阀(flow direction valve)，用于层析柱流向切换(downflow/upflow)。
(4) 其它组件梯度混合器(mixer)、紫外检测仪(UV-900) 。
2 系统功能系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。
(1) 缓冲液pH及梯度配制(a)梯度制备 (Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。
(2) 层析柱柱顶连接进样（七通）阀1号口，柱后连接紫外流通池。
(3) 上样上样阀上样：将样品储存在样品环(Sample loop)，再由阀门切换将样品带入层析柱；系统泵上样：由系统泵将样品泵入层析柱。
(4) 收集 (选购)收集器收集：设置收集体积(Frac size)，可自动按条件收集。
二开机程序1 开启电脑；2打开AKTAbasic电源；3启动UNICORN软件，输入用户名( User name) 和密码(Password)，默认用户(default) 密码为 default，待AKTA自检结束后，在system control窗口中显示系统准备就绪（Instruments are ready) 。
三 UUNICORN 软件简介Unicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：Main: 1. 系统关闭(Quit Program)和退出、登陆(Log on/off)；2. 系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志等；3. 文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；4. 方法组编辑(MethodQueues)，将几个方法组合在一起，依次运行。
AKTA操作流程
蛋白层析纯化系统FPLC：全称为快速蛋白液相色谱（Fast protein liquid chromatography）操作流程：1.打开全自动交流稳压器的电源2.打开FPLC或purifier 100的电源，系统立即进行自检3.打开电脑电源4.双击unicon4.12图标，输入用户名和密码，进入系统窗口。
ÄKTA层析软件有四个窗口：UNICORN Main Menu、Method Editor、System Control、Evaluation。
如使用程序运行，在Method Editor窗口里编方法设置各种参数(详见注意事项)；如使用手工运行，在System Control窗口里设置各种参数。
5.接入层析柱。
如需低温操作，可通冷凝水6.注入样品，运行程序或手工运行7.试验结束，先用水冲洗柱子，再用20%乙醇保存柱子，然后拆除柱子，不得带入气泡。
取下后放回原位。
保存系统及层析柱8.关机：仔细检查完毕，确信用过的所有管道都已经充满20%乙醇后，退出ÄKTA层析软件各窗口，脱出UNICORN软件，关闭电脑9.关闭系统电源注意事项：技术指标注意事项：1. 报警压力参数设置：所有程序运行和手动运行中，必须首先设定报警压力（使用预装柱，编程时由软件自动设定）。
压力值参阅层析柱及填料说明书，取较小的一个最大耐受压力。
我们实验室的层析柱如XK16/70Superdex75、200、DEAE-FF等柱子的警报压力均为0.3MPa。
Sephacryl-200、Sephacryl-300的警报压力为0.2MPa。
2.紫外灯：如果只是平衡层析柱，关闭紫外灯。
FPLC通过FPLC系统主机关闭；Purifier 通过软件lamp off关闭。
一般在上样前或前15min打开紫外灯。
3.层析柱的连接：层析柱是玻璃的，一定要轻拿轻放。
层析柱特别是凝胶过滤柱不能有气泡进入，将柱子接入系统时，可在柱子一端接带有液体的注射器，用手推，将气泡排出，同时，给系统一定流速，保证没有气泡的情况下将柱子连入系统。
AKTAbasic层析系统操作入门
AKTAbasic层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。
若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
一系统组件及系统功能介绍1 系统组件(1) 泵 Pump系统泵：(system pump)双泵（A、B泵），缓冲液及大体积样品输送。
上样泵：(sample pump)样品输送。
(2) 阀 Valve七通阀：(INV-907)两个。
1. 上样阀(sample valve)，用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时废液管 (waste) 切换；2. 流向切换阀(flow direction valve)，用于层析柱流向切换(downflow/upflow)。
(4) 其它组件梯度混合器(mixer)、紫外检测仪(UV-900) 。
2 系统功能系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。
(1) 缓冲液pH及梯度配制(a)梯度制备 (Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。
(2) 层析柱柱顶连接进样（七通）阀1号口，柱后连接紫外流通池。
(3) 上样上样阀上样：将样品储存在样品环(Sample loop)，再由阀门切换将样品带入层析柱；系统泵上样：由系统泵将样品泵入层析柱。
(4) 收集 (选购)收集器收集：设置收集体积(Frac size)，可自动按条件收集。
二开机程序1 开启电脑；2打开AKTAbasic电源；3启动UNICORN软件，输入用户名( User name) 和密码(Password)，默认用户(default) 密码为 default，待AKTA自检结束后，在system control窗口中显示系统准备就绪（Instruments are ready) 。
三 UUNICORN 软件简介Unicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：Main: 1. 系统关闭(Quit Program)和退出、登陆(Log on/off)；2. 系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志等；3. 文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；4. 方法组编辑(MethodQueues)，将几个方法组合在一起，依次运行。
AKTA层析系统
7. 用于离子，疏水层析的样品应经预实验不会在该层析条件下 样品在低盐和高盐条件下稳定不析出沉淀。
2. AKTA仪器的使用：
1.开关机
⑴开启电脑，检查电脑运行状态是否正常。
3. 常压柱子（国产）：
柱子型号
压力上 限
最大流速（装 柱）
最大流速（运 行）
其它要求
15*20 0.5M Pa 25mL/min
20mL/min
15*100 0.5M Pa 2.5mL/min
2mL/min
通常装分子筛 介质
25*20 0.5M Pa 25mL/min
20mL/min
25*40 0.5M Pa 25mL/min
0.5M Pa
25mL/min
20mL/min
快速介质，可高 流速
XXX Sepharose HP
0.3M Pa
12mL/min
10mL/min
高效介质，不耐 高压
XXX Sepharose XL
0.5M Pa
25mL/min
20mapto
0.5M Pa
25mL/min
⑵若样品量低于10mL，用上样环进样比较简便和准确。选用合 适上样环，在装柱前连接上仪器，在清洗管道时调至inject一并清 洗，并且装上层析柱后随柱子一起平衡。上样时，先在inject下插入 注射器，调至load，打入缓冲液，改为inject，上样。
⑶在仪器控制界面可通过电脑控制流速，A/B泵流速比例，上样 环状态切换，UV归零，压力上限，以及标注和定时暂停等。流速和
AKTApure层析系统
肽的纯化中 • 客户定制的系统可随着您的研究需要的发展轻松的升级 • 系统设计理念来源于公认的 ÄKTA avant，可靠性值得信赖 • UNICORN 6 软件提供简单、直观和灵活的预编程方法模板
和系统控制，可简化您的工作 • 可用于所有 GE Healthcare 实验室规模层析柱
流速：
0.5 ml/min
系统：
ÄKTA pure
选配的进样阀是为了与样品泵一起使用。它允许多达 7 个 不同样品的快速、自动进样。整合的空气传感器确保安全 和完整的上样，无需预先设定样品体积。阀门有 7 个进样 位置和一个专门的缓冲液进口，用于在样品上样前利用缓 冲溶充满样品泵，以及用于两个样品上样之间冲洗阀门和 泵。在进样过程中，当样品完全上样时空气感应器开始检测，
于使用不同大小的流动器以同时检测低浓度和高浓度蛋白。 入口选择阀 V9-IAB 在单个阀门中含有 4 个进口位置，可为
电导检测器
缓冲液自动化选择和进行基本层析时层析柱和系统运行后
的清洗提供便利。 电导检测器用于监测缓冲液和样品的电导率，在线检测真
实的梯度。电导检测器整合温度传感器，可以校正由温度 入口自动化阀（V9-IA, V9-IB）提供多达 2×7 个进口；多个
时防止超压暂停和尽可能减少上样时间。通过使用样品泵，
样品可以以 50 ml/min 的流速上样。
* 即将上市。
4 29-0211-96 AA
多柱位阀 V9-C 也整合了旁路（bypass）和反向流动功能。 使用这个阀门最多可以连接 5 根层析柱，用于自动层析柱 的切换。多根层析柱的连接可以最大限度减少人员之间的 差异，并进一步减少气泡进入层析柱中的风险。
层析设备akta工作原理
层析设备akta工作原理
层析设备AKTA主要利用层析柱系统进行工作。
其工作原理主要包括以下几个步骤：
1. 利用树脂的多孔性形成巨大的比表面积，提供足够的吸附表面。
2. 利用树脂材料分子与目标分子之间的氢键吸附或离子交换，实现目标分子的特征性吸附或交换。
3. 对溶液中的多种物质进行选择性分离。
4. 使用极性接近的溶剂冲洗层析柱，将吸附或交换的目标分子、离子溶解在溶剂中，随之流出。
5. 收集得到的含目标物质的溶液。
通过以上步骤，层析设备AKTA实现了对溶液中多种物质的选择性分离。
如需了解更多关于层析设备的工作原理，建议咨询专业人士。
AMERSHAM AKTApilot无菌设计的快速工艺开发和小规模生产液相层析系统 说明书
AKTApilot 是为工艺开发，进行放大或缩小工艺实验，以及小规模生产而设计的全自动高效液相层析系统。
该系统具有纯化从几毫克到几十克产品的容量，并且是生物兼容，卫生的和可灭菌的系统。
AKTApilot 符合药物开发中I-III 期临床试验，试生产和正式生产的所有GLP 和cGMP 的要求。
●卫生处理的设计— 有利进行无微生物和无污染的的安全生产●独有恒压调速设计— 针对加样和装柱时的需要，可以在指定压力下，自 动调控流速●高动态载量— 流量为4-400 ml/min，梯度为0-100% — 在限定的梯度下流速可达4-800 ml/min — 每一循环可纯化2-10 g产物●具有空气和压力传感器及四个进口的样品泵 — 加样快速，准确 — 最佳加样设计●无菌设计的内置分部收集阀— 可最大地利用有限的实验台空间 — 在单一系统中具有完备的纯化功能●快速，方便的UNICORN TM 软件 — 帮助编程的编程精灵— 内置的在位消毒程序和层析柱库— 在加样和装柱过程中使用恒压控制流速●验证支援— IQ/OQ文件— UNICORN支持FDA 21 CFR PartⅡ要求的电 子签名和电子记录●所有与液体有关的部件都是外置的，方便更换 — 有利于生产不同产品 — 简化清洗效果验证●台式设计— 适用于面积狭小的地方 — 易于移动和维修无菌设计的快速工艺开发和小规模生产液相层析系统这一系统是由AKTApilot 纯化单元及一个包括显示屏和UNICORN 控制系统的计算机组成 (图1)。
UNICORN 能确保不同系统与不同用户之间迅速，简捷地交流信息，并能满足现代化生产和实验室设施的严谨控制和数据处理程序。
编程精灵提供了简便的编程方法。
经过优化的程序可以轻易从实验室规模转化成生产规模。
系统设计和说明AKTApilot 各组件是以AKTAdesign 的可靠性、可缩放性及灵活性为基础。
UNICORN 控制系统是在我们的研究和生产规模系统中应用的最新型的平台。
AKTAready全自动工业层析系统
50ml/min到510L/hr超宽流速范
围，涵盖从70mm~450mm内径
的层析柱，灵活用于不同规模的
生产纯化。
Genotype Phenotype
AKTA ready system 的特点
可轻松更换整套液路，消除了系统清洗过 程，包括方法开发与确认过程
由于操作程序更简化，且产品/批次间的 停工时间更短，故改进了经济性和生产率
新型AKTAready包括色谱柱、UNICORN软 件以及含有传感器和检测流动室的 ReadyToProcess Flow试剂盒。UNICORN 带有安装向导，提供了色谱柱安装的操作指 南和报告，确保试剂盒的正常工作。所有 的?KTA系统使用了相同的软件，能够轻松 实现流程的扩展和完整cGMP生产中 AKTAprocess的快速转换。
AKTAready 全自动工业层析系统介绍
Outline
2007. 01
产品介绍
AKTA ready
AKTAready是专为药物临床早期
生产和工艺规模放大而设计的工
蛋白
业层析系统。该系统使用可更换
的预先经消毒灭菌的流路进行操
作，通过快速更换高流速或低流
速管路组件，该系统可实现从
ÄKTAready系统由大量的产品监控文档和服 务提供支持，具体包括验证文档、有关使用 材料信息的产品文档、美国药典第六类CFR 177和AOF证书，以及监控支持文件 （RSF）。
ReadyToProcess 平台由应用整个工艺的即用即取型溶液组成。 完成 纯化任务后，柱和液路（如 AKTA ready Flow 套件）可弃置，也可用 于同一纯化流程的其它产品批次。 ReadyToProcess 概述可加速工艺
操作，这是因为其操作步骤更少：无需建立和确认清洗过程，也没 有复杂的设置步骤。 可迅速改变液路，停工时间少于 1 小时，这样 就可节省时间、投资、启动成本，以及人工和耗材成本。
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产品参数
产品材质构成
操作温度要求
洗脱装置
排出管
均匀洗脱装置 梯度虚脱装置
进样闸门 装置
柱
梯度洗脱装置
洗脱装置在仪器中所处位置
sizes: 1 L, 2.5 L, 10 L, and 20 L
专门设计用于药物开发I期到III期的流程扩展 和生产，以及GLP和cGMP标准的全规模生 产。系统操作的简化和产品批次之间停工期 的缩短节省了启动时间以及人工及消耗品的 花费，改善了成本效率和生产力。 ÄKTAready以即用型一次性流程进行操作， 排除了交叉污染的风险，以及清洁和对清洁 程序进行验证的需要。
新型AKTAready包括色谱柱、UNICORN软 件以及含有传感器和检测流动室的 ReadyToProcess Flow试剂盒。UNICORN 带有安装向导，提供了色谱柱安装的操作指 南和报告，确保试剂盒的正常工作。所有 的?KTA系统使用了相同的软件，能够轻松 实现流程的扩展和完整cGMP生产中 AKTAprocess的快速转换。
4
附件模式图
1、 流量装置 2、 PH电极 3、空气输入滤过器 4、压敏原件 5、履带推进器
稳健、卫生的设计 AKTA ready 系统耐受蛋白质回收工艺中的 化学剂，包括吸收、洗脱和冲洗缓冲液，以 及生产和清洗溶液。 所有产品都具有经验 证的质量，整个液路都是一次性的。 所有 洗涤材料都完全生物相容（USP Class VI）， 并且所用材料均可追溯至其生产批。 Flow 套件是在受控环境下生产，并且使用经确认 的方案在洁净室（ISO 8）内包装。
蛋白
Genotype Phenotype
AKTA ready system 的特点
可轻松更换整套液路，消除了系统清洗过 程，包括方法开发与确认过程 由于操作程序更简化，且产品/批次间的 停工时间更短，故改进了经济性和生产率 产品/批次之间的交叉污染风险被消除 随附内容广泛的产品文件 在智能的UNICORN™软件的控制下工作的， 这个软件可以让您控制纯化进程的每一步都 变得相当便利。
ÄKTAready系统由大量的产品监控文档和服 务提供支持，具体包括验证文档、有关使用 材料信息的产品文档、美国药典第六类CFR 177和AOF证书，以及监控支持文件 （RSF）。
ReadyToProcess 平台由应用整个工艺的即用即取型溶液组成。 完成 纯化任务后，柱和液路（如 AKTA ready Flow 套件）可弃置，也可用 于同一纯化流程的其它产品批次。 ReadyToProcess 概述可加速工艺 操作，这是因为其操作步骤更少：无需建立和确认清洗过程，也没 有复杂的设置步骤。 可迅速改变液路，停工时间少于 1 小时，这样 就可节省时间、投资、启动成本，以及人工和耗材成本。
AKTAready 全自动工业层析系介绍
Outline
2007. 01
产品介绍
AKTA ready
AKTAready是专为药物临床早期 生产和工艺规模放大而设计的工 业层析系统。该系统使用可更换 的预先经消毒灭菌的流路进行操 作，通过快速更换高流速或低流 速管路组件，该系统可实现从 50ml/min到510L/hr超宽流速范 围，涵盖从70mm~450mm内径 的层析柱，灵活用于不同规模的 生产纯化。