血清尿酸测定作业指导书

血清尿酸测定作业指导书

1.实验原理

使用TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder 反应产物）。

尿酸酶

尿酸+ H2O + O2尿囊素+ CO2 + H2O2

过氧化物酶

TBHBA + 4-氨基安替比林+ 2H2O2醌亚胺+ 3H2O

2. 标本：

2.1 病人准备：12小时禁食。

2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。

3. 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存

可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1＋10稀释后检测，结果乘11后报告。

4. 标本运输：常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。

6. 实验材料

6.1 试剂威特曼尿酸测定试剂盒。试剂1 试剂2 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。

6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。当546nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。

6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的

预防措施使用试剂

6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪

8. 操作步骤

8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件

8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件

9. 检验结果的判断与分析

10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法：以TruCal U复合校准品尿酸校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠检测结果，以μmol/L报告。

12. 参考值范围：（μmol/L）

血清/血浆

女性男性

成人137～363 214～488 儿童0～5天113～470 113～470 1～4岁101～303 131～470

5～11岁178～381 178～381

12～14岁190～363 190～440

15～17岁190～381 268～482 尿液≤4.76mmol/d（正常饮食）

≤3.57mmol/d（低嘌呤饮食）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

13. 临床意义：尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。痛风是高尿酸血症最常见的并发症，血清尿酸水平的升高导致在关节处生成尿酸钠晶体。此外导致血液中尿酸升高的原因还有：排泄功能下降的肾脏疾病，饥饿，滥用药物，过度饮酒或某些药物的使用。高尿酸水平也是冠心病的间接危险因子之一。低尿酸血症较少见，其与罕见的遗传代谢紊乱有关。

14. 操作性能

14.1 线性范围：17.8～1190μmol/L。

14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

剂盒(x)，同时对70个样品进行UA检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.02x-26.2μmol/L；r=0.997。

14.4 灵敏度：本试剂的检测限为17.8μmol/L。

14.5 病人结果可报告范围：17.8～1190μmol/L。

15. 超出范围结果处理：本法对尿酸的检测范围为17.8～1190μmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+1稀释，重新测定，结果乘以2。

16. 病危报警值的处理：当尿酸测定值>720μmol/L 时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。