血清尿酸测定作业指导书
血、尿液尿素氮(BUN)测定作业指导书
血、尿液尿素氮（BUN）测定作业指导书1.实验原理Vitros BUN/UREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。
水和非蛋白质成份进入下面的试剂层，与尿素酶反应生成氨。
半透膜只允许氨进入呈色反应层，与指示剂发生反应。
经过一段固定的孵育时间后，通过测定呈色剂的反射强度可间接求出尿素氮的含量。
测定方式：比色法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：尿素酶非蛋白质成份＋水—————→氨+ 二氧化碳氨＋氨指示剂—————→呈色剂2. 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品特别要注意的是：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆；不要用氟化钠作防腐剂，因为氟会抑制尿素酶。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不能使用以下防腐剂：冰醋酸，浓盐酸，硼酸，硼粉或甲酸钠硼酸，样品在测试前要冷藏。
测试前将1份样品加20 份试剂级别的水进行稀释。
将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。
冷藏的样品不能立即测试。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多1天；4～8℃冷藏最多5天；-18℃冷冻保存可长达6个月。
尿液样品在测试前要冷藏。
4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6. 试验材料：6.1测试BUN所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。
xx厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
尿酸(UA)检测标准操作规程
1、方法依据：
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司尿酸测定方法
2、适用范围
适用于尿酸的测定
3、试剂仪器
试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒
未开启的试剂盒避光保存于2℃—8℃有效期一年。
试剂不可以冰冻。
4、操作程序
方法原理
抗坏血酸氧化酶
抗坏血酸 + O2————→脱氧抗坏血酸+ H2O
尿酸酶
尿酸 + O2 + 2 H2O ————→尿囊素 + CO2 + H2O2
过氧化物酶
2H2O2 + 4-AAP + TOOS+H+ —————→醌系色素 + 4 H2O
样本要求
新鲜血清或肝素血浆，样本收集后应尽快测定，必须避光保存，避免使用溶血样本。
上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-220全自
动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2校准“
4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2校准程序：每30天需要定标一次。
当有以下情况时需重新定标： 1）换试剂批号或出现质控漂移时；
2）当仪器做完保养后；
3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行定标，定标通过后进行检测。
UA血清项目操作手册
SOP标准操作程序UA 尿酸（货号：OSR6198，OSR6298）一、目的：规范尿酸测定的操作程序，确保尿酸测定的结果准确二、适用范围：在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人血清中的尿酸（UA）三、临床意义尿酸是人体内嘌呤分解代谢的主要产物。
绝大多数尿酸在肝脏中形成，通过肾脏排泄，体内尿酸库由合成和排泄之间的平衡决定。
高尿酸血症可以分为原发性高尿酸血症和继发性高尿酸血症，包括生成过量或排泄减少。
原发性高尿酸血症也称作特发性或者家族性高尿酸血症。
在大多数病例中，肾小管分泌尿酸减少引起尿酸水平升高。
大约 1% 的原发性高尿酸血症患者在嘌呤代谢中存在酶缺陷，因而导致尿酸生成过多。
原发性高尿酸血症与痛风、Lesch-Nyhan 综合征，Kelley Seegmiller 综合征和磷酸核糖基焦磷酸盐合酶活性升高有关。
继发性高尿酸血症可能由营养型嘌呤摄取增加引起，伴有尿液中尿酸排泄增多。
继发性高尿酸血症与许多情况有关，这些情况包括肾功能不全，骨髓增生性疾病，溶血性疾病，牛皮癣、真性红细胞增多症、I 型糖原贮积病，酒精摄入过多，铅中毒，高嘌呤饮食，禁食，饥饿和化疗。
低尿酸血症可能由于尿酸产生减少引起，例如在遗传性黄嘌呤尿症，遗传性嘌呤核苷磷酸化酶缺乏和别嘌呤醇法治疗中。
低尿酸血症可能由于肾脏尿酸排泄增多引起，这种情况可能出现于恶性疾病，AIDS，Fanconi 综合征，糖尿病，严重烧伤和嗜酸性白细胞增多综合征。
此外，使用促尿酸排泄药物治疗和食入 X 光造影剂也会引发低尿酸血症。
定量测定尿酸的排泄有助于确定高尿酸血症的治疗方案，确认患者是应当使用促尿酸排泄药治疗以增加肾脏排泄，还是应当使用别嘌呤醇治疗以抑制嘌呤合成。
四、方法原理尿酸被尿酸酶转化为尿囊素和过氧化氢。
通过 Trinder 反应测定 H2O2。
在过氧化物酶 (POD) 的作用下，所形成的 H2O2 与 4-氨基比林和 N,N-二（4-磺丁基）- 3,5-二甲苯胺二钠盐 (MADB) 以及 4-氨基比林发生反应，生成发色团，该物质可通过双色分析仪在 660/800nm 处测定。
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书1、前言试验名称：尿酸测定，英文名称：UA，方法：氧化酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB-450全自动生化分析仪上测定血清、血浆、样本中的尿酸浓度，以保证测定结果的准确可靠。
尿酸是嘌呤、核酸的代谢产物，因此，尿酸水平异常可作为上述物质代谢异常的指征，高尿酸血症可见于：肾功能障碍、痛风、白血病、红细胞增多症、动肪粥样硬化、糖尿病、甲状腺机能减退、或其他遗传疾病，尿酸水平低可见于威乐逊氏病。
2、测定原理本试验采用改良的Trinder氏方法，其反应原理：尿酸+O2+H2O尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2H2O2+AAP+TBHBA过氧化物酶醌亚胺色素+H2O上式中AAP为4-氨基安替比林TBHBA为3-羟基-2,4,6三溴甲酸在上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比，通过在520nm波长处测定吸光度的变化值，从而计算出尿酸的浓度，试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
3、试剂试剂生产商：长海科华生物工程股份有限公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*40ml R2：4*20ml注册号：沪食药监械（准）字2010第2400028号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：试剂1：过氧化物酶300u/l3-羟基-2,4,6三溴甲酸 2.5mmol/l亚铁氰化钾0.05mmol/l磷酸盐缓冲液150mmol/l4-氨基安替比林0.7mmol/l含非反应性填充物及稳定剂试剂2：磷酸盐缓冲液150mmol/l尿酸酶500u/l储存条件和有效期：试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。
启用后2―10℃可稳定14天，若试剂混浊，或空白在520nm 下吸光度值高于0.4A时，则不能使用。
4、标准品：使用试剂盒附带标准品5、质控品：生产商：英国Randox公司。
剂型：干粉试剂，用5ml去离子水复溶，完全溶解30分钟后使用。
11血清尿酸测定
一、目的尿酸为核蛋白与核酸中嘌呤分解代谢的最终产物。
内源性尿酸由体内组织核酸分解代谢产生，外源性尿酸则来自于食物中核酸的分解。
尿酸除一小部分由肝脏分解破坏外，大部分经肾小球滤过随尿排出体外。
肾脏早期病变时，血中尿酸首先升高，有助于肾脏损伤的早期诊断。
二、测定方法尿酸酶-过氧化物酶偶联法三、原理尿酸酶氧化尿酸生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使3，5-二氯二羟苯磺酸和4-氨基安替比林缩合成红色醌类化合物。
在520nm波长读取吸光度。
与尿酸浓度成比例。
四、标本1、静脉抽取病人空腹血，置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。
2、采血后应立即送到检验科生化室。
3、样品收到后立即分离血清，不能及时测定的血清应于2—8℃保存。
4、溶血或脂血的标本不能测定。
五、设备及试剂1、希迈全自动生化仪。
2、上海复星长征公司尿酸试剂。
3、尿酸试剂应贮存于2—8℃冰箱。
六、操作步骤1、样本的准备：将编好号的样品离心，取血清加入样品杯放到样品盘的规定位置，再把样品盘放到仪器中相应位置。
2、试剂的检查：每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标等情况，确认无误后方可进行测定。
3、操作方法：详见希迈生化仪操作手册。
七、质量控制每天操作过程中应使用上海复星长征公司的生化质控血清至少做一次室内质控，每年定期参加海南省临检中心所组织的室间质评。
八、干扰因素遇高浓度维生素C的标本，可使测定结果偏低。
九、参考区间男性：150—420 umol/l女性：90—360 umol/l十、实验室解释1、血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助，痛风患者血清中尿酸增高，但有时亦会出现正常尿酸值。
2、在核酸代谢增加时，如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等尿酸也会增高。
3、肾功能减退时，尿酸也会增高。
4、在氯仿中毒、四氯化碳中毒及铅中毒、子痫、妊娠反应及食用富含核酸的食物等，均可引起尿酸增高。
十一、异常结果处理实验室结果应与临床相符，不符的应复查。
尿酸操作程序
尿酸操作程序1.目的规范尿酸（UA ）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。
3.术语4．测定原理4．1测定方法：尿酸酶-过氧化物酶偶联（Uricse-PAP ）法。
4. 2 测定原理：尿酸酶 过氧化物酶 尿酸+O 2+H 2O 尿囊素+CO 2+H 2O 2 H 2O 2+4-AAP+ESPAS 醌亚胺(红色)+ H 2OESPAS:N-乙基-N-（3-磺丙基）-间-茴香胺5．标本5.1标本种类：新鲜无溶血血清、肝素抗凝血浆；留取24小时尿液。
血清尿酸在0～4℃下稳定3～5天，在冰冻条件下稳定6个月。
5.2标本采集：见生化标本采集程序。
6.试剂6.1试剂来源：科华试剂。
6.1.1组成包装规格：R1 70ml×2 R2 70ml×16.1.2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用，用后及时置于2～8℃避光保存。
6.1.3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。
试剂开瓶载机2～8℃稳定30天。
7.仪器参数设定OLYMPUS AU2700参数设定：科华试剂仪器参数设定具体参见试剂厂家提供的相应仪器参数说明书。
8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。
8.1.2仪器经过大保养后。
8.1.3挪动仪器的安装地点。
8.1.4更换试剂批号。
8.1.5室内质控失控。
8．2 AU2700科华试剂系统的校准：8.2.1 准备：申能生化校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存一个月时间，-20℃稳定使用至有效期8.2.3保存位置：低温冰箱-20℃。
8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的8号位置放申能复合多项定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。
尿酸(UA)测定标准操作程序SOP文件
3.1血液：血清及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：2-8℃5天
-20℃6个月
收集后的标本应该尽快检测，或者与细胞进行分离。
3.2尿液：新鲜标本、不要冷冻、加入NaOH后可以
稳定性：20-25℃4天
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
S.VOLUME(DECREASE) [14/5/140]
SENSITIVITY LIMIT(LOW) [ 1 ]
S.VOLUME(INCREASE) [ 10 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ 1.9 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
S1 ABS(LOW) [ -32000 ]
R.VOLUME(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 32000 ]
R.VOLUME(R3) [ 36 ]
10.3溶血：溶血指数达到750时不会有明显干扰。（血红素浓度约为750mg/dl）
10.4脂血：乳糜指数达到1000明显干扰。（甘油三酯浓度约为2000mg/dl）
10.5抗坏血酸浓度低于30mg/dl时不会有明显干扰。
11临床意义
11.1血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助，痛风患者血清中尿酸升高。
11.2在核酸代谢增加时，如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等，血清尿酸值常升高。
7.2.2 24小时尿：200-1000mg/24h(1200-5900umol/l)
7.2.3平常饮食：250-750mg/24h
7.2.4低嘌呤饮食：
男性：<480mg/24h
检验医学SOP文件5--生化室作业指导书
生化室作业指导书文件编号：ABCD-3-SF-01~61第A版编制：审核：批准：生效日期：2015年4月8日ABCD人民医院检验科目录修订页血清总胆红素(T-BIL)测定1. 实验原理血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。
大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。
这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。
申能总胆红素试剂是改良的重氮法。
使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐（DCA），与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。
在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。
胆红素+DCA 红色偶氮化合物表面活性剂2. 标本：2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。
3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。
4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒（141 0817170 1 试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成试剂1：6×64 ml磷酸缓冲液40mmol/L氯化钠9g/L表面活性剂,稳定剂适量试剂2：6×16 ml2,4-二氯苯胺重氮盐1mmol/L盐酸30mmol/L表面活性剂适量6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为18个月。
试剂2必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
尿酸的测定
尿酸的测定1.原理：2尿酸+O2+H20 尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2H2O+4—氨基安替比林+EHSPT 过氧化物酶醌亚胺+4H2O(POD)2.标本采集与处理：2.1受检者准备：病人必须空腹12小时，不饮酒24小时后采集血样。
2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般采血取坐位，从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带；2.3标本应无溶血。
如不符合应重新采集2.4采血管要求:采血时要求使用一次性无菌注射器，一人一管，用后毁形，用500mg/L有效氯浸泡消毒３０分钟，回收、焚烧、做好登记。
3.试剂：3.1试剂组成：试剂Ⅰ: 尿酸酶﹥0.6u/ml过氧化物酶﹥1.8u/ml4—氨基氨替比林 0.3 mmol/LEHSPT 1.4 mmol/L试剂Ⅱ: 磷酸缓冲液10mmol/L3.2标准液：0.297 mmoI/L3.3质控血清：应在测量未知样本的同时检测质控物并确保质控在可接受的范围内，并且结果必须在三个标准差范围内。
3.3.1质控品批号及范围:批号022431，范围*±2st和*±3s。
3.3.2保存环境:在2—8℃保存，有效期内稳定。
3.4试剂的贮存与稳定性：4.仪器：上海迅达公司的半自动生化分析仪XD811。
5.操作程序：5.1 试剂准备：取试剂Ⅱ5ml加入一瓶试剂1中混合。
5.2 分析参数：方法：终点法波长： 505nm温度：37℃比色杯光径：1cm6.计算方法：血清尿酸（umol/l）=测定管吸光度/标准管吸光度×标准液浓度7.操作性能：如异常升高，用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
8.参考值：142——416umol/L9.结果审核：9.1室内质控结果的判断：对质控结果进行分析是否在控。
9.2对检验结果进行审核，包括检验项目是否漏项，打印是否清楚。
10.临床意义：痛风、急慢性肾小球肾炎、白血病参考文献：全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司。
尿酸测定方法 尿酸酶还原
尿酸的测定方法有多种，其中一种是通过尿酸酶还原法进行测定。
这种方法的主要机制是尿酸酶可以还原尿酸，再通过比色法，为血液中的尿酸定量。
具体步骤如下：
1. 采集空腹静脉血2m1，不抗凝，分离血清进行测定。
检查血尿酸值，需要空腹8小时以上再抽血，一般要求晚上12点后禁食，但可喝水。
2. 采用磷钨酸还原法或尿酸酶-过氧化物酶偶联法进行测定。
请注意，这些步骤仅供参考，不能替代专业医疗建议。
如果您需要更详细或最新的信息，建议咨询专业医生或相关医疗机构。
血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法
授课对象：06级检验1-5班 课 时：2学时血清尿酸（UA ）测定—磷钨酸还原法目 标：1.掌握磷钨酸还原法测尿酸的原理及注意事项 2.规范地进行尿酸测定，正确地使用离心机 3.了解血清尿酸测定的临床意义 实验用品：离心机、洗耳球、712型分光光度计、磷钨酸贮存液、磷钨酸应用液、钨酸试剂、10%碳酸钠溶液、尿酸标准贮存液、（6mmol/L ）尿酸标准应用液（0.3mmol/L ）内 容： 一、原理：2O HO ++−−→−+-钨蓝尿囊素磷钨酸尿酸二、操作步骤：加入物（ml ） R S B UA 标 准 液 － 0.5 － 血 清 0.5 － － 蒸 馏 水 － 0.5 钨 酸 试 剂4.54.54.5充分混匀，静置数分钟。
R 离心，另取3支试管编号R 管上清液 2.5 － － S 管上清液 － 2.5 － B 管上清液 － － 2.5 10%碳酸钠0.50.50.5混匀，室温下放置20min,波长660nm 比色三、计算：血清尿酸μmol/L=A R/A S×300四、正常参考值：男：149~416μmol/L女：89~357μmol/L五、临床意义：1、高尿酸血症与痛风①尿酸排泄减少：见于原发性肾功能不全、药物引起的尿酸潴留（如各种利尿药、水杨酸及抗结核药能抑制肾小管分泌尿酸）、铅中毒、铍中毒、氯仿中毒以及甲状腺功能亢进（可引起肾小管功能受损）、酸中毒（与尿酸竞争肾小管上皮细胞主动分泌机制）。
②嘌呤代谢亢进：见于多发性骨髓瘤、红细胞增多症、地中海贫血、传染性单核细胞增多症等，由于核蛋白转换率增快，使尿酸生成过多。
有的高尿酸血症既由于尿酸合成增多，又由于肾排出尿酸减少。
如慢性酒精中毒、妊娠高血压综合征等。
2、低尿酸血症①尿酸生成过少：见于黄嘌呤尿症（由于先天性黄嘌呤氧化酶缺乏，使尿酸不能正常生成，故患者血与尿酸水平很低，而排出大量黄嘌呤和次黄嘌呤），服用别嘌呤醇类药物（使嘌呤氧化酶抑制或假性反馈抑制嘌呤生物合成，从而阻断尿酸生成，出现低尿酸血症，伴有尿中尿酸排出减少和黄嘌呤排出增多）。
检验科生化尿酸测定的标准操作规程
尿酸测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中尿酸（UA ）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂采用改良Trinder ’s 方法，其反应为：22222O H CO 尿囊素尿酸酶O H O 尿酸++−−−→−++O H 醌亚胺色素过氧化物酶TBHBA AAP O H 222+−−−−−→−++式中 AAP = 4-氨基安替比林TBHBA = 3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸在上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比，通过可在520nm 波长处测定吸光度的变化值，从而计算出尿酸的浓度。
试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
一、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）过氧化物酶 300U/L3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸 2.5mmol/L亚铁氰化钾 0.05mmol/L磷酸盐缓冲液 150mmol/L4-氨基安替比林0.7mmol/L含非反应性填充物及稳定剂试剂2（R2）磷酸盐缓冲液 150mmol/L尿酸酶 500U/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。
尿酸检测作业指导书
尿酸检测作业指导书1 检验目的规范尿酸（UA）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2 测定方法尿酸酶-过氧化物酶法。
3 检测原理尿酸（UA）在尿酸酶的作用下，生成过氧化氢。
在过氧化物酶（POD）的作用下，过氧化氢使ESBmT和4-氨基安替比林氧化缩合产生紫红色色素，通过测定色素的吸光度，求出尿酸的含量。
尿酸酶尿酸+ 2H2O+2O2 尿囊素+CO2+2H2过氧化物酶2H2O2+4-氨基安替比林+ESBmT 紫红色色素+4H2O4 样本血清、肝素、EDTA、草酸盐及氟化物抗凝血浆，处理方法见生化标本采集程序。
稳定性：2～8℃稳定7天；室温可稳定3天。
5 仪器和试剂5.1 仪器：美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。
5.2 试剂：由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂（详见试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。
5.3 校准物：Rodan混合校准品，符合WHO标准，贮存、准备严格遵照其说明书。
5.4 质控物：Rodan正常值及病理值质控品，符合WHO 标准，贮存、准备严格遵照说明书。
6 校准6.1 仪器校准：每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。
6.2 项目校准：试剂盒在仪器上放置稳定期后；试剂批号更换后；由质控结果随时决定。
7 操作步骤上机操作，操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。
8 参考范围150～430µmol/L。
9 警告/危急值未规定。
10 性能指标10.1 线形上限：1487µmol/L。
10.2 精密度：≤8%。
10.3 准确度:不准确度≤10%。
11 干扰因素及变异的潜在来源11.1脂血对本法有干扰作用。
11.2抗坏血酸（0.3mmol/L）,血红蛋白(1g/L)及胆红素(15mg/L)均不干扰。
12 临床意义尿酸测定主要用于各种原因引起的高尿酸血症，以及由此导致的痛风症。
血清尿酸UA测定
血清尿酸UA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。
尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2在过氧化物酶存在的情况下，4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。
2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比，可通过测定吸光度的上升来获得。
3 标本：3.1 病人准备：使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清.3.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。
3.3 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测，结果乘11后报告。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成R 1 磷酸盐缓冲液：0.05 mol/L，pH 7.8；TOOS：7 mmol/L；脂肪醇聚乙二醇醚：4.8%；抗坏血酸盐氧化酶（EC 1.10.3.3；胡瓜）≥83.5 μkat/L（25℃）R 2 磷酸盐缓冲液：0.1 mol/L，pH 7.8；亚铁氰化钾（Ⅱ）：0.3 mmol/L；4-氨基比林≥3mmol/L；尿酸酶（EC1.7.3.3；原生节杆菌）≥83.4 μkat/L（25℃）；过氧化物酶（POD）（EC 1.11.1.7；辣根）≥50μkat/L（25℃）4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8℃下的保存期限：见试剂标签上的有效期。
机上稳定期： 4周4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
尿酸项目检测标准操作规程
R1:2×65mL+R2:1×70mL
7.3主要组成成分
试剂
成分
终浓度
试剂1
哌嗪-1，4-双（2-乙磺酸）
0.1mol/L
过氧化物酶（POD)
300U/L
亚铁氰化钾
20ummol/L
N-乙基-N-（2-羟基-3-丙磺基）-3-甲基苯胺
0.5mmol/L
维生素C氧化酶
1000U/L
试剂2
4.2降低
见于恶性贫血、使用阿司匹林、先天性黄嘌呤氧化酶和嘌呤核苷磷酸化酶缺乏等。
5.标本采集及干扰因素
5.1标本要求
空腹采集不抗凝静脉血2~3ml。
5.2标本保存
室温保存，及时送检。血清室温保存可稳定3d,2-8℃保存可稳定7d,-20℃保存可稳定6个月。尿液中的尿酸在室温下可稳定3d。
5.3注意事项
12.2尿酸测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
线性范围：在（18-1190）umol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（18-450）umol/L范围内，线性偏差应≦45umol/L;（450-1190）umol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
9.4使用方法
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温，轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
9.5质控结果判断
利用Westgard多规则质控方法（12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
男：208-428umol/l
尿酸的实验报告
一、实验目的1. 了解尿酸测定的原理和方法；2. 掌握尿酸测定的操作步骤；3. 学会尿酸测定的数据处理和分析。
二、实验原理尿酸是一种嘌呤代谢产物，主要来源于人体内嘌呤的分解。
尿酸在血液中的浓度反映了人体嘌呤代谢的状态。
尿酸测定常用的方法有酶法、紫外分光光度法、磷钨酸比色法等。
本实验采用酶法测定血清尿酸浓度。
酶法测定尿酸的原理：血清中的尿酸在尿酸氧化酶的作用下，生成尿囊素和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下分解产生水，同时释放出一定量的能量，该能量使色原物质产生颜色变化，颜色的深浅与尿酸浓度成正比。
三、实验材料1. 实验试剂：尿酸氧化酶、过氧化物酶、色原物质、还原剂、缓冲液、标准尿酸溶液；2. 实验仪器：分光光度计、离心机、移液器、试管、比色皿等；3. 实验样品：血清样本。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制：（1）取6个试管，编号为1-6；（2）分别向各试管中加入不同浓度的标准尿酸溶液，使各试管中的尿酸浓度分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mmol/L；（3）向各试管中加入适量的缓冲液，使总体积达到1.0mL；（4）加入适量的尿酸氧化酶，混匀；（5）室温放置5分钟；（6）加入适量的过氧化物酶，混匀；（7）室温放置5分钟；（8）加入适量的还原剂，混匀；（9）立即测定各管在特定波长下的吸光度；（10）以尿酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血清尿酸测定：（1）取2个试管，编号为1和2；（2）向试管1中加入适量的血清样本，向试管2中加入适量的标准尿酸溶液，使两管中的尿酸浓度相同；（3）按照标准曲线绘制步骤，测定两管的吸光度；（4）根据标准曲线，计算血清样本中的尿酸浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：（1）根据标准曲线绘制结果，得出标准曲线方程：Y=0.011X+0.003（R²=0.998）；（2）标准曲线线性范围为0-1.0mmol/L。
2. 血清尿酸测定：（1）根据标准曲线，计算出血清样本中的尿酸浓度为0.5mmol/L；（2）与正常参考范围比较，该血清样本的尿酸浓度略高。
尿酸(UA)测定的标准操作程序
尿酸（UA ）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆及尿液中尿酸（UA ）测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】【方法】使用TBHBA （2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。
【原理】尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。
在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA （2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder 反应产物）。
尿酸酶尿酸 + H 2O + O 2 尿囊素 + CO 2 + H 2O 2过氧化物酶TBHBA + 4-氨基安替比林 + 2H 2O 2 醌亚胺 + 3 H 2O【试剂】在测定时的各组分和浓度试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液 pH 7.0100 mmol/L TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)抗坏血酸氧化酶 1 mmol/L 1KU/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液 pH 7.0 100 mmol/L4-氨基安替比林0.3 mmol/L铁氰化钾10 mol/L过氧化物酶（POD）≥1000 U/L尿酸酶≥2000 U/L试剂稳定性与贮存试剂和标准品避光保存于2－8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
当520 nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。
以试剂起始的反应试剂为即用式。
以样品起始的反应混合“试剂1”4份+“试剂2”1份（例如“试剂1”20 ml +“试剂2”5 ml）成为单试剂（R）单试剂稳定性：15－25℃保存可稳定2周2－8℃保存可稳定3个月单试剂须避光保存。
【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。
实验十七 血清尿酸测定
标准 1ml 20μlFra bibliotek测定 1ml
20μl
混匀，37℃保温10分钟，550nm波长下测定 各管吸光度值。
三、参考值： 男：202μmol/L-416μmol/L 女：142μmol/L-339μmol/L
四、临床意义： 1.痛风 2.核酸代谢增加时，如白血病，多发性骨 髓瘤，真性红细胞增多症及摄入富含核算的 食物时。 3.肾功能减退时，排泄减少，血中UA增加 4.铅中毒，高血压和服用利尿剂如速尿等， 可使UA增高。
实验十七
血清尿酸测定
一、实验原理：
尿酸＋2H2O＋O2 尿酸酶 尿囊素＋CO2＋H2O2 2 H2O2＋4－氨基安替吡啉＋TOOS POD 醌亚胺＋4 H2O TOOS（3，5-二氯-2-羟苯磺酸）
二、实验操作： 取5mlR2复溶R1，轻轻摇动至完全 溶解，即为工作液。
二、实验操作： 空白 工作液 1ml 蒸馏水 20μl 校准液 血清
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血清尿酸测定作业指导书
1.实验原理
使用TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。
尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。
在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder 反应产物）。
尿酸酶
尿酸+ H2O + O2尿囊素+ CO2 + H2O2
过氧化物酶
TBHBA + 4-氨基安替比林+ 2H2O2醌亚胺+ 3H2O
2. 标本：
2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。
3. 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存
可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1＋10稀释后检测，结果乘11后报告。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂威特曼尿酸测定试剂盒。
试剂1 试剂2 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。
当546nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。
6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的
预防措施使用试剂
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以TruCal U复合校准品尿酸校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠检测结果，以μmol/L报告。
12. 参考值范围：（μmol/L）
血清/血浆
女性男性
成人137～363 214～488 儿童0～5天113～470 113～470 1～4岁101～303 131～470
5～11岁178～381 178～381
12～14岁190～363 190～440
15～17岁190～381 268～482 尿液≤4.76mmol/d（正常饮食）
≤3.57mmol/d（低嘌呤饮食）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义：尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。
痛风是高尿酸血症最常见的并发症，血清尿酸水平的升高导致在关节处生成尿酸钠晶体。
此外导致血液中尿酸升高的原因还有：排泄功能下降的肾脏疾病，饥饿，滥用药物，过度饮酒或某些药物的使用。
高尿酸水平也是冠心病的间接危险因子之一。
低尿酸血症较少见，其与罕见的遗传代谢紊乱有关。
14. 操作性能
14.1 线性范围：17.8～1190μmol/L。
14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内精密度小于3%，总精密度小于3%。
用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
剂盒(x)，同时对70个样品进行UA检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.02x-26.2μmol/L；r=0.997。
14.4 灵敏度：本试剂的检测限为17.8μmol/L。
14.5 病人结果可报告范围：17.8～1190μmol/L。
15. 超出范围结果处理：本法对尿酸的检测范围为17.8～1190μmol/L。
当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+1稀释，重新测定，结果乘以2。
16. 病危报警值的处理：当尿酸测定值>720μmol/L 时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。