尿酸(UA) 酶比色法
尿酸(UA)测定试剂盒(尿酸酶-POD法)产品技术要求sainuopu
尿酸(UA)测定试剂盒(尿酸酶-POD法)适用范围:用于体外定量测定人体血清中尿酸的浓度。
1.1试剂盒包装规格试剂1:1×25ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml;试剂1:3×40ml,试剂2:3×8ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml;试剂1:2×400ml,试剂2:1×160ml;试剂1:1×10L,试剂2:1×2L;试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。
校准品(选配):1×1ml,1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂:试剂1无色澄清液体;试剂2无色澄清液体。
校准品:无色至淡黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、546nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.2。
2.4 分析灵敏度测定浓度为300μmol/L的样本,吸光度变化值(ΔA)应在(0.05,0.25)范围内。
2.5 线性范围在(0,1100)μmol/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.996。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于4%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于6%。
2.8 准确度相对偏差:相对偏差应不超过±10%。
2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,校准品溯源至NIST生产的有证参考物质(SRM913a)。
2.10稳定性效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃下有效期为15个月,取失效期的试剂盒进行检测,试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程UA-SOP
尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程1 目的规范实验室操作,保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。
3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或尿液中尿酸的含量。
4 检验方法本试剂盒采用酶法测定尿酸的含量。
5 检验原理样品中的尿酸在试剂中尿酸氧化酶(GOD)的催化作用下氧化生成尿酸酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶(POD)的催化下与苯胺类色原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醌亚胺色素,醌亚胺色素的生成量与样品中尿酸的含量成正比,通过测定特定波长处反应最终生成的色素量,可以计算出样品中尿酸的浓度。
尿酸+ H2O + O2−−−→−GOD尿酸酸+ H2O2H 2O2+ 4-氨基安替比林 + 苯胺类色原物质−−−→−POD醌亚胺色素 + 水6 标本要求6.1 血清样本应及时离心分离,不得使用溶血或被污染的样本。
6.2 建议尿液样本作pH测定,若pH<8.0,可用NaOH调至pH=8.0。
尿液样本测定前需用水稀释10倍。
6.3 血清、尿液样本无微生物污染在2℃~8℃可稳定3天,冷冻保存可稳定6个月。
7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司尿酸试剂盒(酶法)7.27.3试剂的稳定性与贮存7.3.1试剂在2℃~8℃条件下,干燥、避光、密封贮存,有效期为18个月。
7.3.2试剂开封后在2℃~8℃可稳定30天。
7.4试剂的变质指示若试剂混浊,或以水为空白在520 nm处吸光度值大于0.100A时,则不能使用。
8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白吸光度:A≤0.100。
8.2.1 分析灵敏度:测试1mmol/L被测物时,吸光度变化△A>0.10。
8.2.3 线性范围:0.01mmol/L~1.5mmol/L;线性相关系数r≥0.9900;[0.01,0.3] mmol/L区间内,线性绝对偏差应不超过±0.06mmol/L;(0.3,1.5] mmol/L 区间内,相对偏差不超过±15%。
UA血清项目操作手册
SOP标准操作程序UA 尿酸(货号:OSR6198,OSR6298)一、目的:规范尿酸测定的操作程序,确保尿酸测定的结果准确二、适用范围:在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人血清中的尿酸(UA)三、临床意义尿酸是人体内嘌呤分解代谢的主要产物。
绝大多数尿酸在肝脏中形成,通过肾脏排泄,体内尿酸库由合成和排泄之间的平衡决定。
高尿酸血症可以分为原发性高尿酸血症和继发性高尿酸血症,包括生成过量或排泄减少。
原发性高尿酸血症也称作特发性或者家族性高尿酸血症。
在大多数病例中,肾小管分泌尿酸减少引起尿酸水平升高。
大约 1% 的原发性高尿酸血症患者在嘌呤代谢中存在酶缺陷,因而导致尿酸生成过多。
原发性高尿酸血症与痛风、Lesch-Nyhan 综合征,Kelley Seegmiller 综合征和磷酸核糖基焦磷酸盐合酶活性升高有关。
继发性高尿酸血症可能由营养型嘌呤摄取增加引起,伴有尿液中尿酸排泄增多。
继发性高尿酸血症与许多情况有关,这些情况包括肾功能不全,骨髓增生性疾病,溶血性疾病,牛皮癣、真性红细胞增多症、I 型糖原贮积病,酒精摄入过多,铅中毒,高嘌呤饮食,禁食,饥饿和化疗。
低尿酸血症可能由于尿酸产生减少引起,例如在遗传性黄嘌呤尿症,遗传性嘌呤核苷磷酸化酶缺乏和别嘌呤醇法治疗中。
低尿酸血症可能由于肾脏尿酸排泄增多引起,这种情况可能出现于恶性疾病,AIDS,Fanconi 综合征,糖尿病,严重烧伤和嗜酸性白细胞增多综合征。
此外,使用促尿酸排泄药物治疗和食入 X 光造影剂也会引发低尿酸血症。
定量测定尿酸的排泄有助于确定高尿酸血症的治疗方案,确认患者是应当使用促尿酸排泄药治疗以增加肾脏排泄,还是应当使用别嘌呤醇治疗以抑制嘌呤合成。
四、方法原理尿酸被尿酸酶转化为尿囊素和过氧化氢。
通过 Trinder 反应测定 H2O2。
在过氧化物酶 (POD) 的作用下,所形成的 H2O2 与 4-氨基比林和 N,N-二(4-磺丁基)- 3,5-二甲苯胺二钠盐 (MADB) 以及 4-氨基比林发生反应,生成发色团,该物质可通过双色分析仪在 660/800nm 处测定。
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书
生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书1、前言试验名称:尿酸测定,英文名称:UA,方法:氧化酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室,目的是指导工作人员正确的在科华KHB-450全自动生化分析仪上测定血清、血浆、样本中的尿酸浓度,以保证测定结果的准确可靠。
尿酸是嘌呤、核酸的代谢产物,因此,尿酸水平异常可作为上述物质代谢异常的指征,高尿酸血症可见于:肾功能障碍、痛风、白血病、红细胞增多症、动肪粥样硬化、糖尿病、甲状腺机能减退、或其他遗传疾病,尿酸水平低可见于威乐逊氏病。
2、测定原理本试验采用改良的Trinder氏方法,其反应原理:尿酸+O2+H2O尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2H2O2+AAP+TBHBA过氧化物酶醌亚胺色素+H2O上式中AAP为4-氨基安替比林TBHBA为3-羟基-2,4,6三溴甲酸在上述反应中,红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比,通过在520nm波长处测定吸光度的变化值,从而计算出尿酸的浓度,试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
3、试剂试剂生产商:长海科华生物工程股份有限公司。
剂型:液体双试剂。
包装量:R1:4*40ml R2:4*20ml注册号:沪食药监械(准)字2010第2400028号。
生产许可证号:沪药管械生产许20030916号。
基本成份:试剂1:过氧化物酶300u/l3-羟基-2,4,6三溴甲酸 2.5mmol/l亚铁氰化钾0.05mmol/l磷酸盐缓冲液150mmol/l4-氨基安替比林0.7mmol/l含非反应性填充物及稳定剂试剂2:磷酸盐缓冲液150mmol/l尿酸酶500u/l储存条件和有效期:试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。
启用后2―10℃可稳定14天,若试剂混浊,或空白在520nm 下吸光度值高于0.4A时,则不能使用。
4、标准品:使用试剂盒附带标准品5、质控品:生产商:英国Randox公司。
剂型:干粉试剂,用5ml去离子水复溶,完全溶解30分钟后使用。
05 UA
复星长征体外诊断试剂标准操作规程试剂名称:尿酸试剂盒(尿酸酶比色法) 上海复星长征医学科学有限公司目录1 试剂盒概况2 方法学原理3 试剂主要组分4 样本准备5 试剂准备6 校准要求7 质量控制8 计算方法9 参数设定10 参考范围11 试剂性能概要12 超出可报告范围的处理13 其他必须说明的内容14 参考文献1 试剂盒概况1.1 货号:1.02.2001/1.02.2002/1.02.2003/1.02.2008/1.02.2101。
1.2 包装规格:试剂1(R1):4×50mL ;试剂2(R2):1×50mL 。
试剂1(R1):4×50mL ;试剂2(R2):2×25mL 。
1.3 产品注册证号:沪食药监械(准)字2014第2400169号1.4 产品标准号:YZB/沪 1638-40-20141.5 版本号:2014-12 方法学原理本试剂采用改良Trinder ’s 方法,其反应为:22222O H CO 尿囊素尿酸酶O H O 尿酸++−−−→−++O H 醌亚胺色素过氧化物酶TBHBA AAP O H 222+−−−−−→−++式中AAP = 4-氨基安替比林 TBHBA = 3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸在上述反应中,红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比,通过可在520nm 波长处测定吸光度的变化值,从而计算出尿酸的浓度。
试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。
3 试剂主要组分3.1 试剂1(R1)过氧化物酶300U/L 3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸 2.5mmol/L 亚铁氰化钾0.05mmol/L 磷酸盐缓冲液150mmol/L 4-氨基安替比林0.7mmol/L含非反应性填充物及稳定剂3.2 试剂2(R2)磷酸盐缓冲液150mmol/L尿酸酶500U/L3.3 储存条件3.3 . 1 在2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂盒自生产之日起效期12个月。
血清尿酸UA测定
血清尿酸UA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。
2 实验原理尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。
尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2在过氧化物酶存在的情况下,4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。
2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比,可通过测定吸光度的上升来获得。
3 标本:3.1 病人准备:使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清.3.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆,尿液。
3.3 标本存放:血清、血浆的稳定性:20~25℃保存可稳定3天;4~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定6个月。
对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测,结果乘11后报告。
3.4 标本运输:常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂:上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014)4.1.1 试剂组成R 1 磷酸盐缓冲液:0.05 mol/L,pH 7.8;TOOS:7 mmol/L;脂肪醇聚乙二醇醚:4.8%;抗坏血酸盐氧化酶(EC 1.10.3.3;胡瓜)≥83.5 μkat/L(25℃)R 2 磷酸盐缓冲液:0.1 mol/L,pH 7.8;亚铁氰化钾(Ⅱ):0.3 mmol/L;4-氨基比林≥3mmol/L;尿酸酶(EC1.7.3.3;原生节杆菌)≥83.4 μkat/L(25℃);过氧化物酶(POD)(EC 1.11.1.7;辣根)≥50μkat/L(25℃)4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:2-8℃下的保存期限:见试剂标签上的有效期。
机上稳定期: 4周4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
高血压患者血清尿酸水平检测及其临床意义
例 , 高血压 4 例 , 级高血压 4 2级 1 3 7例 。高 血 压 诊 断 和 分 级 遵
循《 国高 血 压 防治 指 南 》 准 。排 除痛 风 、 中 标 。 疾病 、 尿病 、 肾脏 糖
水 平 与高 血 压 呈 正相 关 。wah a等 对 5 7 中年 男 性 随 访 1 smi 4例 1 2年 , 现 S 发 UA 水 平 每 增 加 5 . / o/ 1 g d) 发 生 高 血 9 5 m lL(m /1, l 压 的 危 险 增 加 2 , 础 UA 水 平 已成 为 高 血压 病 发 病 的 最 独 3 基 立预报因子。 HUA 引 起 高 血 压 机 制 尚 不十 分 清 楚 , 能 与 同 时 可
伴 随的。 一 肾素 血管 紧 张 素 系 统兴 奋 和一 氧化 氮合 成 酶 表 达 下 调
肥胖 、 脂血 症 者 。对 照 组 : 机 抽 取 本 院 同期 健 康 体 检 者 18 高 随 O 例 , 5 例 , 5 例 , 均年龄 4.±l. 男 6 女 2 平 93 0 6岁 。两 组 间 以 及 高 血压 病 各 亚 组 年 龄 、 别 比 例 、 程 、 重 指数 均无 统计 学差 异 性 病 体
为 探 讨 血 尿 酸 ( e u r c , UA) 高 血 压 病 的 关 S rm ui ai S c d 与
讨 论
系 , 文 对 测 , 与 1 8 本 2例 并 0
例健 康 体 检 者 进 行 对 照分 析 , 道如 下 。 报 对 象 与 方 法 1 对 象 高血 压 病 组 : 0 7年 l 月 至 2 0 20 0 0 8年 l 0月
尿酸(UA)测定标准操作程序SOP文件
3.1血液:血清及肝素/EDTA抗凝血浆,处理方法见标本准备。
稳定性:2-8℃5天
-20℃6个月
收集后的标本应该尽快检测,或者与细胞进行分离。
3.2尿液:新鲜标本、不要冷冻、加入NaOH后可以
稳定性:20-25℃4天
4试剂
4.1试剂
来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末
S.VOLUME(DECREASE) [14/5/140]
SENSITIVITY LIMIT(LOW) [ 1 ]
S.VOLUME(INCREASE) [ 10 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ 1.9 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
S1 ABS(LOW) [ -32000 ]
R.VOLUME(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 32000 ]
R.VOLUME(R3) [ 36 ]
10.3溶血:溶血指数达到750时不会有明显干扰。(血红素浓度约为750mg/dl)
10.4脂血:乳糜指数达到1000明显干扰。(甘油三酯浓度约为2000mg/dl)
10.5抗坏血酸浓度低于30mg/dl时不会有明显干扰。
11临床意义
11.1血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助,痛风患者血清中尿酸升高。
11.2在核酸代谢增加时,如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等,血清尿酸值常升高。
7.2.2 24小时尿:200-1000mg/24h(1200-5900umol/l)
7.2.3平常饮食:250-750mg/24h
7.2.4低嘌呤饮食:
男性:<480mg/24h
尿酸 (氧化酶法)试剂盒标准操作程序
尿酸测定标准操作程序1. 摘要本试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清或尿液中尿酸的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测新鲜血清或24h 尿液中的尿酸浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定尿酸浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理;本SOP 的改动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的尿酸(UA )试剂盒采用的是氧化酶法。
5. 原理O H ESPAS O H CO O H O O H 2222222224+−−−→−+-+++−−→−++醌亚胺氨基安替比林尿囊素尿酸过氧化物酶尿酸酶ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺血清中的尿酸在尿酸酶的催化下和H2O 与O2反应生成尿囊素, H2O2和CO2,其中的H2O2与4-氨基安替比林和ESPAS 在过氧化物酶的催化下生成了红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长550nm 处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 550nm 处吸光度的变化值与样本中尿酸的含量成正比6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分:抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、氨基安替比林、尿酸酶、ESPAS7.3 试剂稳定性:试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期,本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4 试剂准备:试剂为即用式。
8. 标准品和质量控制8.1校准程序:使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。
高血压前期患者血管功能损害的预警指标
研究证实〔1,2〕,在高血压前期,炎症因子、血管内皮、心肾功 能就已经开始出现异常,如能在高血压前期及时干预将能有效 阻遏血压从正常高值向高血压发展,保护心脑肾及血管等靶器 官,显著降低心脑血管疾病的病死率,而一旦进入高血压状态, 即使采取药物降压等措施,也疗效有限。因此,有效的高血压 前期干预是高血压防控关键,但至今我国高血压防治指南仍未 提出高血压前期干预策略。血管损害是高血压心、脑、肾等重 要脏器损害的基础,而血管损害在早期主要是血管内皮功能的 损害,目前研究已证实与炎症及氧化应激有直接联系。为加深 对高血压前期的认识及对高血压前期人群及早干预,本研究着 重分析可用于高血压前期人群血管损害的预警指标,以期为其 早期干预提供依据。
第一作者: 夏碧桦( 1970-) ,女,副主任医师,副教授,主要从事心血管疾 病研究。
照。高血压前期组男 41 例,女 59 例; 年龄 28 ~ 68〔平均( 41 ± 11) 〕岁; 正 常 对 照 组,男 40 例,女 60 例; 年 龄 27 ~ 71〔平 均 ( 44 ± 13) 〕岁。
1 资料与方法 1. 1 临床资料 我院就诊或住院的患者及部分招募的高血压 前期 患 者 100 例,其 诊 断 标 准 采 用 美 国 JNC7 标 准: 收 缩 压 ( SBP) : 120 ~ 139 mmHg 和( 或) 舒张压( DBP) : 80 ~ 89 mmHg, 并排除 冠 心 病、心 肌 梗 死、心 力 衰 竭、脑 血 管 疾 病、糖 尿 病、痛 风、肝肾功能不全、肿瘤患者和血液系统疾病及其他内分泌疾 病。此外,收集同期我院体检正常健康志愿者 100 例作为对
中国老年学杂志 2012 年 2 月第 32 卷
于正常血压组( 15. 00% vs 6. 00% ,P < 0. 05) 。 2. 2 高血压前期患者 NO、ET-1、CRP 的变化 与正常对照组 比较,高血压前期患者血中 CRP 水平显著升高; NO 水平显著 下降,ET-1 水平显著升高( 均 P < 0. 01) 。见表 1。
高血压前期患者血管功能损害的预警指标
研究证实〔1,2〕,在高血压前期,炎症因子、血管内皮、心肾功 能就已经开始出现异常,如能在高血压前期及时干预将能有效 阻遏血压从正常高值向高血压发展,保护心脑肾及血管等靶器 官,显著降低心脑血管疾病的病死率,而一旦进入高血压状态, 即使采取药物降压等措施,也疗效有限。因此,有效的高血压 前期干预是高血压防控关键,但至今我国高血压防治指南仍未 提出高血压前期干预策略。血管损害是高血压心、脑、肾等重 要脏器损害的基础,而血管损害在早期主要是血管内皮功能的 损害,目前研究已证实与炎症及氧化应激有直接联系。为加深 对高血压前期的认识及对高血压前期人群及早干预,本研究着 重分析可用于高血压前期人群血管损害的预警指标,以期为其 早期干预提供依据。
颈动脉分叉
IMT( mm) 0. 94 ± 0. 112) 0. 91 ± 0. 10
颈内动脉
IMT( mm) 0. 64 ± 0. 082) 0. 61 ± 0. 10
2. 3 高血压前期患者 UA 的变化 高血压前期患者 UA 水平 和高 UA 血症发生率显著高于正常对照组( P < 0. 01) 。见表 1。 2. 4 高血压前期患者颈动脉超声分 高血压前期组颈总动 脉、颈 内 动 脉 及 颈 动 脉 分 叉 处 IMT 均 高 于 正 常 对 照 组 ( P < 0. 05) 。见表 1。
第一作者: 夏碧桦( 1970-) ,女,副主任医师,副教授,主要从事心血管疾 病研究。
照。高血压前期组男 41 例,女 59 例; 年龄 28 ~ 68〔平均( 41 ± 11) 〕岁; 正 常 对 照 组,男 40 例,女 60 例; 年 龄 27 ~ 71〔平 均 ( 44 ± 13) 〕岁。
表 1 高血压前期患者与对照组各检测指标比较( n = 100,x ± s)
UA 文档,尿酸测定试剂盒(UA)检测标准操作规程
过氧化物酶抗坏血酸氧化酶尿酸酶 1、方法依据:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司尿酸(UA)测定试剂盒(尿酸酶-过氧化物酶法)测定方法2、适用范围:适用于人血清、血浆或尿液尿酸(UA)的测定。
3、试剂仪器:3.1 试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃~8℃有效期为一年。
试剂开瓶后在2℃~8℃应避光保存可稳定2周。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器:迈瑞BS-2000M 全自动生化分析仪. 4、操作程序4.1方法原理首先抗血酸氧化酶消除样品中抗坏血酸的影响,然后样品中的尿酸在尿酸酶和过氧化物酶的作用下生成醌系色素,通过测定反应引起的吸光度的变化可求得尿酸的含量。
抗坏血酸+ O 2脱氢抗坏血酸+ H 2O尿酸 + 2H 2O + O 2 尿囊素 + CO 2 + H 2O 2TOOS + 4-AAP +2H 2O 2 + H + 醌系色素+ 4H 2O4.2样本要求血清、肝素或EDTA 抗凝血浆、尿液。
不可使用已被污染的样本。
对尿液用蒸馏水作1+10稀释后检测,结果乘11后报告。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M 全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准:4.3.2.1 标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱中取出,复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序:首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准:1)换试剂批号或出现质控漂移时;2)当仪器做完保养后;3)仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准,校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控:在标本开始之前做质控,质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围血清:男性 202~416µmol/L女性 142~340µmol/L尿液:1.5~4.5µmol/L /24h(注:各实验室应有自己的参考范围)4.5 方法评价线性范围:20.8~1500µmol/L。
尿酸项目检测标准操作规程
R1:2×65mL+R2:1×70mL
7.3主要组成成分
试剂
成分
终浓度
试剂1
哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸)
0.1mol/L
过氧化物酶(POD)
300U/L
亚铁氰化钾
20ummol/L
N-乙基-N-(2-羟基-3-丙磺基)-3-甲基苯胺
0.5mmol/L
维生素C氧化酶
1000U/L
试剂2
4.2降低
见于恶性贫血、使用阿司匹林、先天性黄嘌呤氧化酶和嘌呤核苷磷酸化酶缺乏等。
5.标本采集及干扰因素
5.1标本要求
空腹采集不抗凝静脉血2~3ml。
5.2标本保存
室温保存,及时送检。血清室温保存可稳定3d,2-8℃保存可稳定7d,-20℃保存可稳定6个月。尿液中的尿酸在室温下可稳定3d。
5.3注意事项
12.2尿酸测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一,临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
线性范围:在(18-1190)umol/L范围内:a)线性相关系数(r)应>0.995;b)(18-450)umol/L范围内,线性偏差应≦45umol/L;(450-1190)umol/L范围内,线性偏差应该≦10.0%。
9.4使用方法
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温,轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
9.5质控结果判断
利用Westgard多规则质控方法(12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
男:208-428umol/l
尿酸(UA)测定的标准操作程序
尿酸(UA )测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆及尿液中尿酸(UA )测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】【方法】使用TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)的酶比色测定法。
【原理】尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。
在过氧化物酶存在下,过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸),产生红色醌亚胺(Trinder 反应产物)。
尿酸酶尿酸 + H 2O + O 2 尿囊素 + CO 2 + H 2O 2过氧化物酶TBHBA + 4-氨基安替比林 + 2H 2O 2 醌亚胺 + 3 H 2O【试剂】在测定时的各组分和浓度试剂1(R1):磷酸盐缓冲液 pH 7.0100 mmol/L TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)抗坏血酸氧化酶 1 mmol/L 1KU/L试剂2(R2):磷酸盐缓冲液 pH 7.0 100 mmol/L4-氨基安替比林0.3 mmol/L铁氰化钾10 mol/L过氧化物酶(POD)≥1000 U/L尿酸酶≥2000 U/L试剂稳定性与贮存试剂和标准品避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
当520 nm处的试剂空白吸光度小于0.5时,试剂可正常使用。
以试剂起始的反应试剂为即用式。
以样品起始的反应混合“试剂1”4份+“试剂2”1份(例如“试剂1”20 ml +“试剂2”5 ml)成为单试剂(R)单试剂稳定性:15-25℃保存可稳定2周2-8℃保存可稳定3个月单试剂须避光保存。
【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本,适用标本为血清或肝素抗凝血浆(肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l),不可从正在静脉滴注手臂上采血,上机标本不能有凝块,样品采集后2天内离心标本,分离血清,血清或血浆标本室温保存4天,冷藏7天,冷冻保存6个月。
日立7600-110全自动生化分析仪D模块试剂交叉污染及对策
日立7600-110全自动生化分析仪D模块试剂交叉污染及对策王冠;石卫平【摘要】目的分析日立7600-110全自动生化分析仪D模块试剂交叉污染现象,探讨解决方案.方法将D模块4组通道均配置项目后,按单组或4组同时测定各项目(重复3~5次),统计分析各项目结果,验证是否存在交叉污染,若不存在则可按该配置进行临床标本的检验工作;若存在应进一步将4组项目按不同组合再检测,确定具体是哪两个项目存在交叉污染,以便对通道进行调整.结果由天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和清蛋白(Alb)分别与尿酸(UA)组合检测结果可以确定UA受Alb污染会导致结果偏高.结论运用该验证方法能有效避免D模块各项目间的交叉污染,提高了检测结果的准确度和精密度.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2011(008)024【总页数】2页(P3034-3035)【关键词】日立7600全自动生化分析仪;D模块;交叉污染【作者】王冠;石卫平【作者单位】云南省德宏州医疗集团检验科,678400;云南省德宏州医疗集团检验科,678400【正文语种】中文交叉污染是生化分析仪使用过程中永恒的话题,因为临床检验结果准确、可靠是临床检验工作的首要前提,而交叉污染是严重影响检验结果准确性的主要原因之一,且解决起来困难而繁琐。
现就本科室在日立7600-110全自动生化分析仪使用过程中关于D模块交叉污染问题的心得体会与大家分享。
2010年11月作者发现尿酸(UA)从P模块移至D模块后检测结果差异较大,且在做室内质控时该项目在组合测定与单独测定时结果也存在明显差异,反复检查过D模块的试剂喷嘴和搅拌器,并按规定进行了保养维护,各试剂喷嘴未见堵塞,试剂喷嘴和搅拌器表面无结晶和污物、也无滴漏水的现象,基本可以排除由于维护不当所带来的污染。
为查明原因,作者进行了D模块的交叉污染验证试验,现报道如下。
1 材料与方法1.1 仪器 HITACHI 7600-110全自动生化分析仪。
尿酸(UA) 酶比色法
目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收,所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比,再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较,经过计算可求出血清中尿酸的含量。
试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响,测定尿酸所用的酶反应如下:尿酸酶尿酸+O2 +2H2O ------------ 尿囊素+CO2 +2H2O2过氧化物酶H2O2+4-氨基安替比林+2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺+H2O2.标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂:血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。
2.4 标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3.试剂3.1 试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:尿酸标准液:590umol/L3.2 尿酸校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
测定尿酸的一种简易酶比色法
测定尿酸的一种简易酶比色法
王易振
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】1989(7)3
【摘要】本文介绍一种实用的尿酸酶比色法测定体液中尿酸含量。
本法尿酸酶的用量仅为一般尿酸酶比色法的1/10,血清用量50μl,尿酸浓度在178.6~
714.3μmol/L 范围内呈良好线性关系,批内CV3.0%(n=13,尿酸浓度545.1μmol/L)及4.47%(n=10,尿酸浓度233.5μmol/L),回收率98.3%,本法同ENI 公司尿酸试剂盒对照45例无显著性差异(P>0.05)。
本法采用酶试剂干燥管,保存时间长,使用方便。
尿酸标准采用定值血清可较长时间稳定。
【总页数】1页(P118)
【作者】王易振
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R446.19
【相关文献】
1.一种新的细胞毒测定法:NAG酶荧光比色法 [J], 朱瑞芳;黄建英
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5.终点平衡尿酸酶法与动力学尿酸酶法联用测定尿酸 [J], 龙高波;杨宪峰;刘红博;蒲军;杨晓兰;廖飞
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目录
1. 检测原理
2. 标本采集与处理
2.1 受检者的准备
2.2 静脉采血
2.3 抗凝剂
2.4 标本处理
3. 试剂
3.1 试剂
3.2 校准血清
3.3 试剂与校准血清的稳定性
4. 仪器
5. 操作
6. 计算
7. 操作性能
7.1 精密度
7.2 准确度
7.3 灵敏度
7.4 可报告范围
7.5 特异性
7.6 干扰
8. 参考值
9. 临床意义
附录A: 参数
1. 检测原理
反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收,所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比,再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较,经过计算可求出血清中尿酸的含量。
试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响,测定尿酸所用的酶反应如下:
尿酸酶
尿酸+O2 +2H2O ------------ 尿囊素+CO2 +2H2O2
过氧化物酶
H2O2+4-氨基安替比林+2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺+H2O
2.标本采集与处理
2.1 受检者的准备:
病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血:
除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂:
血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。
2.4 标本处理:
血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3.试剂
3.1 试剂:
本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:
尿酸标准液:590umol/L
3.2 尿酸校准血清:
使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次:
空白定标:每日需做试剂空白定标。
全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围,需要全点定标。
3.3 试剂与校准血清的稳定性:
原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
试剂开瓶后,在仪器中至少可保存30天。
试剂储存在18-22℃稳定28天,试剂应避免污染。
试剂R1, R2颜色为无色,当试剂变色,按照试剂失效处理。
多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期,复溶后-20℃保存,可稳定一个月,只可冻融一次,避免反复冻融。
参见校准血清说明书。
试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期,开瓶后2-8℃储存避免污染,可稳定2个月。
4.仪器
KONELAB 30型号仪器。
性能:波长505nm,仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。
5.操作
样品为血清或肝素抗凝血浆。
本法为终点法。
参数见后附,附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作,见仪器操作规程。
6.计算
ΔA测定
C = ————×C o
ΔA标准
式中:
c——测定尿酸浓度,μmol/L;ΔA = A2 - A1
ΔA测定——标本管吸光度;ΔA标准——标准管吸光度;
C O——校准血清尿酸浓度,μmol/L;
7.操作性能
7.1 精密度:
批内CV≤8.3%,批间CV≤10.0%。
7.2 准确度:
检测结果的相对不准确度≤±10%。
7.3 灵敏度:
尿酸浓度为:330μmol /L时,显色吸光度为0.123~0.134。
7.4 可报告范围:
样本:R1:R2 =1:40:10时,测定上限为1180μmol /L。
7.5 特异性:
测量值在给定值的95%-105%范围内。
7.6 干扰:
内源性干扰物为Hb 1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显影响。
8.参考值
男:210~430μmol /L;女:150~360μmol /L。
9.临床意义
尿酸是核酸中嘌呤分解代谢的最终产物,由肾脏排泄,随尿液排出体外。
肾脏疾病如急慢性肾炎、肾结石、痛风、以及体内核酸分解代谢过盛的疾病,如慢性白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等可使尿酸量增高;而恶性贫血及应用ACTH、皮质素、阿斯匹林等药物时,血中尿酸量下降。
附录A: 参数。