植物组织培养试验
植物组织培养实验报告

植物组织培养实验一:培养基的配制学院:风景园林院学号:131001226 姓名:张晟菓一、实验目的1. 掌握植物组织培养实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法。
二、实验原理鉴于微生物种类及代谢类型的多样性,用于培养微生物的培养基的种类也很多。
培养基的配置的程序有器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,以及培养基的无菌检查等。
此次配制400mL MS培养基。
三、实验材料1.药品:激素:BA 1.0L(200mg/L)NAA 0.2L(200mg/L)母液:MS1(大量元素)20mL——浓缩20倍MS2(微量元素)2mL——浓缩200倍MS3(铁盐)2mL——浓缩200倍;MS4(维生素和氨基酸)2mL——浓缩200倍琼脂:2.2g蔗糖:12g(3%)无菌水2.玻璃器皿:移液管、试管、烧杯、量筒、玻璃棒、培养皿3.仪器设备:电子天平4.其他物品:药匙、滤纸、称量纸、pH计、记号笔、棉花等四、实验步骤1.玻璃器皿清洗:将试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水和蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。
晾干后备用。
2.量取母液:MS1(20mL),MS2(2mL),MS3(2mL),MS4(2mL);加激素:BA(1.0mL),NAA(0.2mL);加蔗糖:12g。
3.加水定容至400mL。
4.搅匀后用pH计、烧碱溶液及硫酸溶液调pH值至5.8。
5.加琼脂2.2g,用电磁炉加热溶解并搅拌5-6分钟,冒泡即可拿出。
6.趁热分装,包扎,贴标签。
五、实验结果培养基配置完成。
植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告学院:生命科学技术学院班级:11生物技术(制品)学号:**********姓名:**植物组织培养实验报告实验一植物组织培养母液的配制一、实验目的1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。
2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。
二、实验原理培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。
大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物(碳源、维生素、肌醇、氨基酸等)、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。
无机盐类由大量元素和微量元素组成。
大量元素中,氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在,但在培养基中多用硝酸类,也可以将硝酸类和铵类混合使用;磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供;钾是培养基中主要的阳离子;钙、钠、镁的需要量较少。
微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。
培养基中的铁离子,大多数以螯合物的形式存在,即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。
有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。
培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱,因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。
培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。
蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。
在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。
一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。
肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。
常用的植物生长调节物质包括以下三类:①生长素类:吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、二氯苯氧乙酸(2,4-D)②细胞分裂素:玉米素(ZT)6-苄基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)。
③赤霉素:组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。
培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。
其中最为常见的为酵母提取物。
琼脂作为培养基的支持物,也是最常用的邮寄附加物,他可以是培养基呈固体状态,以利于组织和细胞的培养。
植物组织培养是否成功,在很大的程度上取决于培养基的选择之上。
植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告植物组织培养是一种重要的生物技术手段,通过对植物细胞和组织进行离体培养,可以实现植物再生、遗传改良、病毒检测等多种目的。
本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作方法,以及培养条件对植物再生的影响。
首先,我们选择了小麦离体子叶和茎段作为实验材料,进行了消毒处理和植物组织培养基的配制。
消毒处理是植物组织培养的关键步骤之一,它能有效杀灭外源微生物,保证培养组织的纯净性。
接着,我们将消毒后的植物材料转移到含有植物生长调节剂的培养基上,进行培养。
在培养的过程中,我们注意观察培养组织的生长情况,记录下不同处理条件下植物再生的效果。
实验结果表明,植物组织培养的成功与否受到多种因素的影响,包括植物材料的选择、培养基的成分、光照和温度等环境条件。
在本次实验中,我们发现小麦离体子叶的再生能力较强,而茎段的再生效果较差。
此外,培养基中生长调节剂的种类和浓度也对植物再生有显著影响,适当的生长调节剂可以促进再生过程,而过高或过低的浓度则会抑制再生。
综合实验结果,我们得出了一些结论和建议,首先,选择适宜的植物材料对于植物组织培养至关重要,不同植物材料的再生能力存在差异,需要根据具体情况进行选择;其次,培养基的配制需要根据具体植物材料和培养目的进行调整,合适的生长调节剂浓度可以提高再生效率;最后,培养条件的控制也是影响植物组织培养效果的重要因素,包括光照、温度、湿度等,都需要进行合理的调节。
总之,植物组织培养是一项复杂而有趣的实验技术,通过不断的实践和探索,我们可以更好地理解其中的原理和规律,为植物育种和生物工程领域的研究提供重要的技术支持。
希望本次实验结果能对相关领域的研究工作有所启发,也希望能为植物组织培养技术的进一步完善贡献一份力量。
植物组织培养实验报告

摘要:以大豆子叶为外植体,在MS 培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素,以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响,并练习无菌操作。
实验结果显示第 2 组即 MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第 3 组即 MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 培养基中愈伤组织诱导率较高,为较佳的愈伤组织诱导组合。
关键词:大豆;植物组织培养;无菌操作;愈伤组织1.1 实验材料:大豆子叶1.2 实验试剂与仪器〔1〕试剂: 75%酒精、MS 干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂〔NAA、2,4-D、KT、6-BA〕、无菌水、升汞、 NaOH 溶液〔2〕仪器:超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁置架、烧杯、电炉。
1.3 实验方法培养基的配制与灭菌1.3.1.1 配制培养基的准备阶段〔1〕准备 80 个培养试管及封口膜, 2 个小培养皿、 1 个大培养皿,用洗衣粉、自来水洗净,再用蒸馏水把每一个培养试管、润洗一下。
带晾干后将试管编号 1-80;〔2〕在称量纸上用百分之一天平分别称取 1.5g 琼脂 4 份, 7.5g 蔗糖 4 份,在烧杯里用千分之一天平上称取 1.185g MS 干粉 4 份〔烧杯不要清洗〕;〔3〕剪小圆纸片 40,均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜;剪大圆纸片10,均分在两个大培养皿中。
然后分别用报纸包好。
〔4〕把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。
1.3.1.2 配制培养基〔1〕在装有 MS 干粉的烧杯中按下表参加植物生长调节剂实验所用的所有激素浓度均为 0.5mg/mL编号培养基配置激素的加样量(ml)6-BA N A A K T2,4-D1 23 4 MS+6-BA〔1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L)MS+KT〔1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L)0.51.00.250.50.250.50.51.0〔2〕用量筒量取250ml 〔稍多〕蒸馏水,取一个不锈钢杯子参加150ml 蒸馏水和称量好的琼脂,在电炉子加热沸腾 2min,再参加混合好的 MS 培养基 1 号和蔗糖,混合沸腾 2min,用剩余的蒸馏水定容至 250ml;〔3〕当温度降到 60℃摆布时,将溶液 pH 调至 5.8,普通加 4 滴 NaOH 溶液即可;〔4〕取编号 1-20 的培养试管,用大量注射器以每瓶 12.5ml 摆布培养基分装在培养试管中,用封口膜封口, 4 支一捆捆扎好。
植物组培实验报告

植物组培实验报告植物组培技术是指利用植物体细胞分裂和分化的能力,通过体外培养的方法,使其成为整株植物的过程。
该技术已经广泛应用于植物育种、遗传工程、植物繁殖等领域。
实验目的:本实验旨在研究植物组培技术对不同植物品种的影响,探究其在植物育种中的应用价值。
实验材料:本次实验选用了四种不同的植物品种,分别为玉米、小麦、水稻和大豆。
实验所需的试剂包括MS培养基、植物生长素、植物生长素和细胞分裂素等。
实验步骤:1.植物材料的准备将四种植物的种子经过消毒处理后,将其在无菌条件下播种在MS 培养基上。
2.植物细胞的分离将培养基上生长的植物幼苗取出,进行细胞分离。
将其放入含有植物生长素和细胞分裂素的液体培养基中,进行震荡培养。
3.植物组织的培养将分离出来的细胞放入含有植物生长素的液体培养基中,进行组织培养。
待组织生长出来后,再将其移植到含有植物生长素和细胞分裂素的液体培养基中,进行细胞分裂和分化。
4.植物的生长与繁殖将培养好的植物幼苗移植到含有适量营养物质的液体培养基中,进行生长。
当植物幼苗长大后,可以进行繁殖试验,检测组培植物在遗传性状上的变化。
实验结果:经过实验,我们发现不同植物品种对组培技术的适应性不同。
在四种植物品种中,水稻和大豆的组培效果最好,生长速度较快,成活率较高;而小麦的组培效果较差,生长速度较慢,成活率较低。
在遗传性状上,我们也发现组培植物与自然生长的植物有一定的差异,但并不影响其在植物育种中的应用。
结论:植物组培技术是一种高效、快速的植物育种方法。
通过本实验,我们发现植物品种对组培技术的适应性不同,需要根据具体品种加以调整。
虽然组培植物与自然生长的植物在遗传性状上存在差异,但并不影响其在植物育种中的应用。
植物组培技术的不断发展和完善,将会对植物育种和植物繁殖领域带来更多的变革。
组培实验的实验报告

一、实验名称植物组织培养二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理和操作流程。
2. 掌握植物组织培养技术在植物繁殖、遗传改良和资源保护等方面的应用。
3. 培养实验操作能力和团队协作精神。
三、实验原理植物组织培养技术是利用植物细胞的全能性,通过无菌操作将植物组织(如茎尖、叶片、愈伤组织等)在特定的培养基上诱导分化,从而实现植物繁殖、遗传改良和资源保护等目的。
四、实验材料1. 植物材料:柳树茎尖、紫玉兰叶片。
2. 培养基:MS培养基、1/2MS培养基、1/4MS培养基。
3. 试剂:琼脂、蔗糖、葡萄糖、活性炭、硝酸铵、硝酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、硼酸、氯化钙、氯化钾、氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、氯化钠、硫酸铁、硫酸锌、硫酸铜、抗坏血酸、维生素B6、吲哚丁酸、生长素、细胞分裂素等。
4. 实验器具:超净工作台、高压蒸汽灭菌器、培养皿、移液器、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、无菌水等。
五、实验步骤1. 材料准备:将柳树茎尖和紫玉兰叶片洗净,用75%酒精消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
2. 培养基配制:按照实验要求,将不同浓度的MS培养基、1/2MS培养基和1/4MS培养基分别配制。
3. 接种:将消毒后的柳树茎尖和紫玉兰叶片接种到培养基上,每个培养基接种3个材料。
4. 培养条件:将接种后的培养基放入培养箱中,温度设置为25℃,光照强度为2000勒克斯,光照时间为12小时/天。
5. 观察记录:每隔7天观察一次培养材料的生长状况,记录其生长速度、颜色、形态等变化。
六、实验结果与分析1. 柳树茎尖培养:在MS培养基和1/2MS培养基上,柳树茎尖生长速度较快,颜色为绿色,叶片形状正常;在1/4MS培养基上,柳树茎尖生长速度较慢,颜色为淡绿色,叶片形状较小。
2. 紫玉兰叶片培养:在MS培养基和1/2MS培养基上,紫玉兰叶片生长速度较快,颜色为绿色,叶片形状正常;在1/4MS培养基上,紫玉兰叶片生长速度较慢,颜色为淡绿色,叶片形状较小。
植物组织培养试验

植物组织培养试验《植物组织培养技术》实验指导实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求:1.通过参观,了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。
2.通过实际操作,学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。
二、材料用具:高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿(试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯),以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪,肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。
三、说明:在进行各类具体的组培实验前,首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的,总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。
植物组织培养是一项十分细致的工作,为了保证植物外植体不受污染,第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒,使它们保持无菌状态,做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧,因此每个学生必须学好这套基本功。
四、方法和步骤:首先在老师带领下参观组培室,并听取讲解,然后配制洗液,称取工业用重铬酸钾40克,溶解在500ml在水中,然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸(或废硫酸)配好的溶液呈红色,铬酸洗液是一种强氧化剂,去污能力强,但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效,铬酸洗液可反复使用,直到溶液呈青褐色为止。
此溶液腐蚀性强,洗涤时需注意。
每人清洗部分玻璃器皿,方法:清水洗净一泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷f清水反复冲洗f蒸馏水淋一遍f烘干备用。
然后清洗部分较脏的玻璃器皿,方法:采用先碱后酸,即用洗衣粉洗刷后冲洗干净f晾干一侵入酪酸洗液,浸泡时间视器皿的肮脏程度而定f清水反复冲洗干净f蒸馏水淋洗一遍f烘干备用。
带有石蜡或胶布的器皿:先将其除去,再用常规洗涤,石蜡用水煮沸数次即可去掉,胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时,再用水冲洗,凉干后浸入洗液,以后的步骤同前。
植物组织培养实验

植物组织培养实验植物组织培养实验是一项基于植物生物学的研究技术,它通过在适当的培养基中培育植物细胞、组织和器官,以研究植物生长、发育、代谢和遗传等方面问题。
植物组织培养技术一般涉及的基本步骤包括组织取样、表皮消毒、培养基制备、筛选培养物、培养、观察和数据记录等。
组织取样组织取样是植物组织培养的第一步,选择的组织应为获得感兴趣细胞或器官的基础。
通常情况下,植物种子、叶片、幼茎、根、芽、花和果实等都可以用于组织取样。
在选择组织前需要确定所研究的问题,如要研究种子发育过程,则选择发育中的种子进行取样;若要研究茎的生长过程,就选择茎的新生部位作为实验对象。
表皮消毒表皮消毒是将取得的植物组织中的微生物去除的过程。
微生物会影响组织培养发展,这会导致发生不必要的变异和甚至失败。
表皮消毒的方法有多种,其中最常用的方法是使用双氧水和75%酒精按一定方法进行消毒。
消毒之后,将组织再次用无菌水清洗,以去除残留的双氧水和酒精。
培养基制备培养基是培养组织的营养来源,可以根据不同实验设计的要求选择制备。
基本培养基配方包括营养盐和植物激素,营养盐提供必要的营养物质,而植物激素则起着促进细胞分裂和分化的作用。
例如,包含各种氨基酸、维生素和能量来源的MS基础培养基是最常用的培养基之一。
筛选培养物筛选培养物是将合适的组织细胞挑选出来放置在培养基中培育,防止其过多发生变异或者对人体等方面的危害。
在筛选培养物时,需要注意细胞数量和形态。
对于数量较多的细胞和组织,应采用无菌手术刀进行分离和挑选;而对于较小的器官如芽或根的小茎,可利用移液管或显微镜完成挑选。
培养和观察在选择出适合的培养物之后,需要将其放置在外界充分汲取空气和养分的环境中培养。
养分和水分需要在适宜的时间内追加,以适应发育的需要。
特别是对于更高级的组织器官如花,生长的要求更高,需要精心细致的培育过程。
同时还需要及时观察器官的生长和整体形态,以便对培养过程进行调整和升级。
数据记录数据记录是组织培养实验最后一个步骤,它的目的是为了明确整个实验过程中的变化和优化。
第五章植物组织培养技术实验方案

第五章植物组织培养技术实验方案一、实验目的:1.了解植物组织培养的基本原理和方法。
2.掌握植物组织培养的实验操作技巧。
3.培养植物组织并观察其生长和发育情况。
二、实验材料和设备:材料:麦芽糖、琼脂、植物激素(如IAA、ABA、GA3等)、幼绿豆胚轴组织。
设备:平板培养器、显微镜、高压锅、移液器、无菌操作器具等。
三、实验步骤:1.制备琼脂培养基a)称取适量琼脂加入适量蒸馏水中,搅拌均匀。
b)高压锅加热至沸腾,放入琼脂溶液,保持沸腾10-15分钟,使琼脂充分溶解。
c)将高压锅冷却后取出,倒入洁净的培养器中,晾凉并凝固。
2.准备植物组织a)将绿豆种子浸泡于水中,待种子发芽至一定程度。
b)取出绿豆胚轴组织,用刀切割成适当大小的组织片段。
3.制备植物组织培养基a)取适量砂糖和植物激素(如IAA、ABA、GA3等),溶解于蒸馏水中。
b)加入适量制备好的琼脂培养基,搅拌均匀。
4.进行组织培养a)将准备好的植物组织片段放入培养器中,倒入制备好的植物组织培养基,使组织片段完全浸没其中。
b)盖上培养器盖子,用透明胶带密封,防止细菌浸入。
c)将培养器置于适当的温度和光照条件下,进行培养。
5.观察和记录a)每天观察组织的生长和发育情况,记录变化。
b)使用显微镜观察细胞结构和细胞分裂情况。
c)观察是否有细菌感染或其他异常情况。
d)记录实验数据,如生长速率、生长周期等。
四、实验要点:1.所有实验操作都要在无菌环境下进行,避免细菌和其他微生物的污染。
2.组织培养基的配方可以根据不同的植物种类和研究目的进行调整。
3.培养条件也根据不同植物种类的要求进行调整,如温度、光照等。
4.实验中要注意观察并记录实验数据,对结果进行分析和总结。
五、预期结果:通过植物组织培养技术,可以观察到植物组织的生长和发育情况,研究不同因素对植物生长的影响,培养出健康的植物组织,为其他相关研究提供基础数据和实验材料。
六、安全注意事项:1.操作时要小心使用实验器具,避免切伤或烫伤等事故发生。
植物组织培养实验离体培养技术

植物组织培养实验离体培养技术植物组织培养实验离体培养技术是一种在无菌条件下,通过分离和培养植物细胞、组织和器官,使其在人工培养基上生长和发育的方法。
该技术可用于繁殖、育种、细胞学和分子生物学等方面的研究。
下面将介绍植物组织培养实验离体培养技术的步骤和应用。
一、实验步骤1. 消毒处理:将实验所需的工具、试剂、培养基等进行消毒处理,以保证实验的无菌条件。
2. 材料准备:准备植物材料,根据实验需要选择适合的植物种子、芽、茎段或叶片等。
3. 材料表面消毒:使用适当的消毒剂对植物材料进行表面消毒,以杀灭携带在材料表面的细菌、真菌等微生物。
4. 组织分离:将消毒后的植物材料进行切割、研磨等处理,将细胞、组织分离出来。
5. 培养基制备:根据实验需求,配置适当的培养基,包括基础培养基、激素、糖等成分。
6. 培养条件控制:将分离的植物细胞、组织置于培养基中,控制适宜的温度、光照、湿度等条件,促进细胞分化和生长发育。
7. 培养周期管理:定期更换培养基,检查细胞、组织的生长情况,及时调整培养条件,防止细菌、真菌污染。
二、技术应用1. 植物繁殖:通过植物体外培养技术,可以快速大量繁殖植物种子、芽、茎段等,加快繁殖速度,扩大繁殖规模。
2. 植物育种:利用离体培养技术,可以进行杂交、选择、突变等方法,对植物进行育种改良,获得对病虫害抗性强、产量高的新品种。
3. 细胞学研究:通过离体培养技术,可以对植物细胞进行融合和遗传转化等技术操作,从而探究细胞的形态、结构、代谢等方面的基本规律。
4. 分子生物学研究:离体培养技术可用于植物基因工程研究,如构建转基因植物、表达外源蛋白等。
5. 植物营养生理研究:通过离体培养技术,可以灵活控制培养基的成分,从而研究植物的营养需求、代谢物的合成和转运等问题。
6. 药物生产:某些药用植物可通过离体培养技术进行规模化生产,如对黄连、黄芩等中草药的快速繁殖和有效成分的提取。
总结起来,植物组织培养实验离体培养技术是一种重要的生物学研究方法,应用广泛且前景广阔。
植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告目录1. 引言1.1 研究背景1.2 研究目的1.3 研究意义2. 实验方法2.1 材料准备2.2 实验步骤2.3 实验设计3. 结果与讨论3.1 实验结果3.2 结果分析3.3 结果讨论4. 结论引言研究背景植物组织培养是一种重要的生物技术手段,可用于植物繁殖、种质改良、病毒检测等方面。
通过培养植物的组织和细胞,可以实现对植物特定性状的调控和改善。
研究目的本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作步骤,研究不同培养条件下植物组织生长情况,为植物生物技术的研究提供参考。
研究意义植物组织培养技术可以加快新品种选育的速度,提高植物的遗传改良效率,对于传统育种技术的完善和植物种质资源的保存具有重要意义。
实验方法材料准备- 植物组织样品- 培养基- 生长室- 培养瓶- 剪刀、消毒酒精等无菌操作工具实验步骤1. 准备培养基,对其进行灭菌处理。
2. 取样品进行无菌处理,切取植物组织。
3. 将植物组织置于培养基上,放入生长室进行培养。
4. 定期观察植物组织的生长情况,记录数据。
5. 根据实验设计,对不同处理组进行相应操作。
实验设计本实验设计了对照组和不同处理组,比较不同处理条件对植物组织生长的影响,以验证植物组织培养的有效性。
结果与讨论实验结果经过一段时间的培养,观察到植物组织在培养基上出现生长现象,不同处理组的生长情况有所不同。
结果分析通过对实验结果的分析,可以得出不同培养条件下植物组织生长的规律性,为进一步研究提供了重要依据。
结果讨论在讨论部分,对实验结果进行解释和归纳,总结出植物组织培养的特点和应用前景,为相关研究领域提供参考和启示。
结论植物组织培养是一种重要的生物技术手段,可以在植物繁殖、种质改良等领域发挥重要作用。
本实验结果表明,植物组织培养具有可行性和有效性,对于植物生物技术的发展和应用具有重要意义。
植物组织培养实习报告

植物组织培养实习报告篇一:植物组织培养实验报告植物组织培养实验报告一、实验目的1.掌握无菌操作的植物组织培养方法;2.通过配置ms培养基母液,掌握母液的配置和保存方法;3.通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法;4.通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法;5.了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最终长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞的全能性的理解。
二、实验原理(一)植物组织培养植物组织培养是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成一完整植株的过程。
植物的组织在培养条件下,原来已经分化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,即愈伤组织。
这一过程称为“脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。
(二)植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
(三)组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后,经过继代培养,可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团,然后,再分化成不同的器官原基。
有些情况下,外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
(四)培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近,似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。
营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素(生长调节剂)和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70%酒精、0.1%升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、84消毒液、蔗糖、琼脂等。
植物组织培养实验教案

一、教案基本信息1. 课程名称:植物组织培养实验教案2. 课程类型:实验课3. 课时:2课时4. 年级:八年级5. 学科:生物二、教学目标1. 让学生了解植物组织培养的基本概念和原理。
2. 培养学生运用实验方法探究植物组织培养的能力。
3. 提高学生对生物技术的认识,培养学生的创新意识和实践能力。
三、教学内容1. 植物组织培养的定义和意义。
2. 植物组织培养的基本原理。
3. 植物组织培养的步骤和操作方法。
4. 植物组织培养的应用实例。
四、教学重点与难点1. 教学重点:植物组织培养的基本原理、步骤和操作方法。
2. 教学难点:植物组织培养过程中条件的控制和实验操作技巧。
五、教学过程1. 课前准备:教师准备植物组织培养实验所需的材料和仪器。
2. 导入新课:介绍植物组织培养的基本概念和意义,激发学生的兴趣。
3. 讲解原理:讲解植物组织培养的基本原理,让学生理解其科学依据。
4. 演示实验:教师演示植物组织培养的实验步骤和操作方法,强调注意事项。
5. 学生实验:学生分组进行植物组织培养实验,教师巡回指导。
6. 总结拓展:总结植物组织培养实验的原理和操作要点,引导学生思考植物组织培养在生产生活中的应用。
六、教学评价1. 学生实验报告的质量:评估学生在实验过程中的观察、操作和分析能力。
2. 学生课堂表现:评估学生在课堂上的积极参与程度、提问和回答问题的能力。
3. 学生作业完成情况:评估学生对课后作业的认真程度和思考深度。
4. 学生小组合作能力:评估学生在实验过程中的团队协作和沟通能力。
七、实验材料与仪器1. 植物材料:选择具有良好再生能力的植物组织,如茎段、叶片等。
2. 培养基:含有植物激素、营养物质和抗生素的培养基。
3. 容器:无菌培养瓶、三角瓶等。
4. 仪器:显微镜、消毒器、恒温培养箱、移液器等。
八、实验步骤与操作方法1. 准备材料:选择健康的植物组织,切割成适当大小,进行消毒处理。
2. 制备培养基:按照配方配制培养基,分装到培养瓶中。
植物组织培养实验教案

一、实验背景植物组织培养技术是一种在无菌条件下,将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块,通过人工方法在特制的培养基上进行培养,使其逐渐发育成完整植物体的技术。
本实验旨在让学生了解植物组织培养的基本原理,掌握实验操作技能,培养学生的创新意识和实践能力。
二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理及应用。
2. 掌握植物组织培养实验的操作步骤。
3. 培养学生的创新意识和实践能力。
三、实验材料与仪器1. 材料:植物茎段、叶片、茎尖等;培养基;植物激素;消毒剂等。
2. 仪器:无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、培养皿、移液器、解剖刀、镊子、滤纸等。
四、实验步骤1. 准备实验材料:选取健康的植物茎段、叶片或茎尖,去除杂质,清洗干净。
2. 消毒:将实验材料用70%酒精浸泡30秒,再用无菌水清洗,用消毒剂处理1-2分钟。
3. 切割材料:用解剖刀将消毒后的实验材料切割成适当大小的小块。
5. 培养:将接种后的培养皿放入培养箱中,控制温度、光照等条件,进行培养。
6. 观察与记录:定期观察植物组织的生长状况,记录实验现象。
五、实验注意事项1. 实验过程中需严格无菌操作,避免污染。
2. 切割材料时要注意刀片的消毒和更换。
3. 培养过程中要定期观察,调整培养条件。
4. 实验结果可能存在差异,要注重数据分析与讨论。
教案编写仅供参考,具体实验操作请根据实际情况进行调整。
祝实验成功!六、实验拓展1. 探索不同植物激素对植物组织培养的影响。
2. 尝试用植物组织培养技术繁殖难生根或珍贵植物。
3. 研究植物组织培养在基因工程中的应用。
七、实验报告要求1. 描述实验材料、仪器和实验步骤。
2. 记录实验现象和结果。
3. 分析实验结果,探讨可能的原因。
4. 提出实验中存在的问题及改进措施。
八、实验评价1. 评价学生对植物组织培养原理的理解。
2. 评价学生对实验操作的熟练程度。
3. 评价学生对实验现象的观察与分析能力。
4. 评价学生在实验过程中的团队合作精神。
组培实验报告结果(3篇)

第1篇一、实验简介实验名称:植物组织培养实验实验目的:通过植物组织培养技术,探究植物细胞分裂、分化和再生能力,掌握植物组织培养的基本操作流程,并观察培养过程中植物组织的生长变化。
实验材料:水稻、玉米、小麦等植物叶片、茎段、愈伤组织等。
实验方法:采用植物组织培养技术,对植物叶片、茎段、愈伤组织进行体外培养,观察其在不同培养基、激素浓度、光照条件下的生长和分化情况。
二、实验结果与分析1. 培养基对植物组织生长的影响实验结果表明,不同培养基对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中,MS培养基(Murashige and Skoog培养基)对植物组织的生长和分化效果较好,愈伤组织诱导率和再生植株数量较高。
(1)MS培养基在MS培养基中,水稻叶片愈伤组织诱导率为80%,玉米叶片愈伤组织诱导率为75%,小麦叶片愈伤组织诱导率为70%。
再生植株数量分别为:水稻40株,玉米30株,小麦20株。
(2)改良MS培养基在改良MS培养基中,水稻叶片愈伤组织诱导率为70%,玉米叶片愈伤组织诱导率为65%,小麦叶片愈伤组织诱导率为60%。
再生植株数量分别为:水稻25株,玉米20株,小麦15株。
2. 激素对植物组织生长的影响实验结果表明,激素对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中,生长素(IAA)和细胞分裂素(KT)对植物组织的生长和分化效果较好。
(1)生长素和细胞分裂素浓度对愈伤组织诱导率的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时,水稻叶片愈伤组织诱导率达到最高,为80%。
玉米叶片愈伤组织诱导率达到最高,为75%。
小麦叶片愈伤组织诱导率达到最高,为70%。
(2)生长素和细胞分裂素浓度对再生植株数量的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时,水稻再生植株数量为40株,玉米再生植株数量为30株,小麦再生植株数量为20株。
3. 光照条件对植物组织生长的影响实验结果表明,光照条件对植物组织的生长和分化具有显著影响。
植物组织培养实验

植物组织培养实验植物组织培养是指将植物的一些组织细胞分离出来,在特殊的培养基中进行培养和生长,目的是繁殖和获取大量的纯种植物。
本次实验通过试验实现相应的目标。
实验材料及器械:1. 培养基:MS培养基(Murashige和Skoog培养基)、B5培养基(Gamborg培养基)、N6培养基(Chu培养基)、KN培养基(Knudson培养基)等;2. 植物组织:初代愈伤组织,生长点、芽,小叶片;3. 水平台,无菌工作台,培养箱,显微镜,中性纸,平板培养瓶,筛网,剪刀,酒精灯,卷尺,移液枪,枪头等。
实验步骤:1. 资料准备:对不同材料的特点、培养基的制备方法及组成、实验的目的等进行归纳、总结和分析。
2. 组织处理:先将绿色植物的各种组织根据类型进行分离,选取具有分化能力的愈伤组织或生长点进行培养。
去除杂质后,取少量组织接种到平板培养瓶中,有的需要进行酶解,提高细胞分裂能力。
3. 培养基准备:按照MS、B5、N6、KN等培养基制备方法,称取培养基粉末,加入适量的蔗糖、植物激素等,将pH调整到5.8-6.2。
接种前对制备的培养基冷藏保存。
4. 组织接种:取出平板培养瓶,用无菌水加热消毒后,将组织以均匀的分布覆盖于培养基表面。
将试管装入培养箱中,控制温度、湿度、光照等条件进行培养。
5. 观察记录:每隔一段时间拿出培养样本,进行显微镜观察。
观察组织细胞的形态、颜色、大小、分化程度、生长情况等。
根据实验进程记录主要观察的实验数据。
实验结果及分析:1. 愈伤组织培养:初始培养时,愈伤组织的生长状况不同,在不同的培养条件下,细胞分化能力、再生器官的形成也有所不同。
初步培养的愈伤组织有不同的再生能力和生长状态:生长状况下降、枯死、增殖等。
愈伤组织需要在适宜温度、适宜光照的情况下进行培养,严格执行无菌操作,才能获得大量高质量的细胞。
在不同的培养环境下,诱导他们进行特定细胞分化,从而提高愈伤组织再生的成功率。
2. 生长点培养:生长点培养时,需要先将其消毒,以免污染飞溅到培养基上。
植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告
植物组织培养是一种重要的生物技术手段,它可以用来繁殖植物、改良植物品种、研究植物生长发育规律等。
本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作技巧,为进一步的研究和应用提供参考。
首先,我们准备了所需的材料和试剂,包括植物组织培养基、植物激素、无菌
器皿、无菌操作工具等。
然后,我们选择了适合组织培养的植物茎段作为实验材料,进行无菌处理并切割成小段。
接着,将这些茎段置于含有植物激素的培养基中,利用无菌技术将其保存在无菌条件下。
在培养过程中,我们需要注意控制培养基的pH值、温度和光照条件,以及定
期更换培养基,促进植物组织的生长和增殖。
同时,还需要注意观察培养过程中是否有细菌或真菌的污染,及时采取措施消除污染源。
经过一段时间的培养,我们观察到茎段逐渐产生了新的组织,包括愈伤组织、
根系和茎芽等。
这些新生组织可以用来进行植物再生、基因转化等研究,具有重要的应用价值。
通过本次实验,我们初步掌握了植物组织培养的基本原理和操作技巧,对植物
生长发育规律有了更深入的了解。
在今后的研究和实践中,我们将进一步探索植物组织培养的应用前景,为农业生产和生物技术的发展做出贡献。
总之,植物组织培养是一项重要的生物技术,它为植物繁殖、品种改良、基因
转化等研究提供了重要手段。
通过本次实验,我们对植物组织培养有了更深入的认识,相信在未来的研究中能够发挥重要作用。
植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告实验报告:植物组织培养一、实验目的掌握植物组织培养的实验技术,培养植物组织,研究其生长过程和生理生化特性。
二、实验原理三、实验步骤1.提取组织:从植物器官中提取叶片、茎段等组织。
2.消毒处理:将提取出的组织进行消毒处理,浸泡在含有消毒剂的溶液中,达到杀灭外界微生物的目的。
3.培养基准备:配置适合植物组织培养的培养基,包括基础培养基和添加剂。
4.培养条件:将消毒处理后的组织置于培养基中,放置在恒温恒湿的培养箱中,设置适宜的光照和温度条件。
5.观察记录:观察组织在培养基上的生长情况,记录其形态变化、增殖情况等。
6.提取代表性样本:根据需要,提取生长良好、代表性的样本进行下一步的分析。
四、实验结果经过数天的培养,观察到了组织的形态发生了变化。
最初的组织经过消毒处理后放置在培养基上,经过一段时间的培养,发现组织逐渐增殖。
最初的组织形态变得模糊,开始出现小芽的形成。
随着时间的推移,这些小芽逐渐长大,发展成幼苗,并开始生长根系。
同时,观察到培养基的颜色也发生了变化,由最初的无色逐渐变为淡黄色。
五、实验分析由实验结果可知,植物组织培养可以通过一系列的人工控制,使植物细胞和组织在无菌条件下繁殖和发育。
通过调节培养基的配方、光照和温度等条件,可以控制生长的速度和分化程度。
实验中观察到的小芽和根系的形成表明植物组织在培养基上能够继续分化和增殖,这为后续的植物繁殖和基因改造提供了基础。
六、实验总结本次实验通过植物组织培养的方法,成功地培养出了植物幼苗,并观察到了其生长过程。
通过实验我们了解到了植物组织培养的基本原理和操作技术,并对植物的细胞分化和增殖有了更深入的了解。
植物组织培养作为一种重要的生物技术手段,不仅可以用于植物繁殖和育种,还可以应用于植物基因工程和药物研究等方面。
1.张三,李四,王五.植物组织培养技术的应用[A].植物生长与发育研究进展[C].北京:科学出版社。
2. Liu K,Liu G F.植物组织培养与应用研究进展[J]. 中国园艺科技.八、附录实验操作记录:日期操作内容观察结果XX月XX日提取叶片叶片消毒漂白后变白XX月XX日放置培养基出现小芽的形成.........注意事项:实验过程中需要严格遵守无菌操作规范,保持培养箱的洁净,避免外界微生物的污染。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
《植物组织培养技术》实验指导实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求:1.通过参观,了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。
2.通过实际操作,学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。
二、材料用具:高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿(试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯),以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪,肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。
三、说明:在进行各类具体的组培实验前,首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的,总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。
植物组织培养是一项十分细致的工作,为了保证植物外植体不受污染,第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒,使它们保持无菌状态,做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧,因此每个学生必须学好这套基本功。
四、方法和步骤:首先在老师带领下参观组培室,并听取讲解,然后配制洗液,称取工业用重铬酸钾40克,溶解在500ml在水中,然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸(或废硫酸)配好的溶液呈红色,铬酸洗液是一种强氧化剂,去污能力强,但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效,铬酸洗液可反复使用,直到溶液呈青褐色为止。
此溶液腐蚀性强,洗涤时需注意。
每人清洗部分玻璃器皿,方法:清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。
然后清洗部分较脏的玻璃器皿,方法:采用先碱后酸,即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液,浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。
带有石蜡或胶布的器皿:先将其除去,再用常规洗涤,石蜡用水煮沸数次即可去掉,胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时,再用水冲洗,凉干后浸入洗液,以后的步骤同前。
对器皿和用具进行高压灭菌,即用手提式高压灭菌锅,在1.1个大气压下保持15~20分钟。
解剖刀、手术剪、解剖针、镊子等用具在接种前还要用百分之七十的酒精棉球擦一下,再用酒精灯的火焰灭菌,冷却后即可应用。
五、作业:试阐述为什么要对器皿和用具进行严格的洗涤和灭菌?实验二母液的制备及培养基的配制、灭菌一、目的要求:通过掌握培养基对母液制备及常用培养基的配制和灭菌方法,为植物组织培养准备合适的营养条件。
二、材料用具:高压灭菌锅、冰箱、普通及精密天平、电炉、铝锅、玻璃器皿(烧杯、量微、容量瓶、移液管、试剂瓶、三角瓶、漏斗),化学试剂(CaCl2·2H2O,KNO3,MgSO4·7H2O,NH4NO3,KH2PO4,Na2—EDTA,FeSO4·7H2O,MgSO4·4H2O,Zn SO4·7H2O,H3BO3,KI,NaMoO4·2H2O,CuSO4·5H2O,CoCl2·6H2O,甘氨酸,盐酸硫胺素,盐酸吡哆醇,烟酸,肌醇,蔗糖,琼脂,若干种生长调节物质及天然复合物,HCL,NaOH,酒精),以及称量纸、药匙、玻璃棒、精密度纸,瓶盖用纸,线绳或橡皮筋、铅笔、标签纸。
三、说明:植物材料培养要获得成功,并正常生长,培养基的组成成分是一个决定性因素,不同植物要求不同的培养基,因此,在进行大量工作之前,对不同培养基应进行分析、比较、试验,选择或发展出一个符合试验材料需要的适宜培养基。
大多数植物组织培养所用的培养基由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等。
四、方法和步骤:(一)母液的制备母液的配制是按所使用药品的类别,而分别配成大量元素、微量元素、维生素和铁盐等。
配制母液时特别要注意无机盐成分在一起,可能产生的化学反应,如Ca2+和SO2-4,Ca2+,Mg2+和PO3-4一起溶解后,会产生硫酸钙或磷酸钙的不溶物沉淀,因此不能配在一起作母液贮存,应分别配制和保存。
配制母液时要用双重蒸馏水等纯度较高的水,药品应采用化学纯或分析纯级,药品的称量及定容都要准确,各种药品先以少量蒸馏水使其充分溶解,然后按培养基上的排列顺序混合。
现以Murashige和Skoog(1962)培养基为例叙述如下:根据各种药品的特点,母液可配成4种。
表1 MS培养基母液的配制成分 规定用量/mg.L -1储备液扩大倍数称取量/ mg母液定溶体积/ml配1LMS 培养基吸取量/ml母液Ⅰ 大量元素 KNO 3 1900 20 38000100050NH 4NO 3165020 33000 MgSO 4·7H 2O 37020 7400KH 2PO 417020 3400 CaCl 2·2H 2O 440208800母液Ⅱ 微量元素 MnSO 4·4H 2O 22.3 200 446010005ZnSO 4·7H 2O 8.6 200 1720 H 3BO 3 6.2 200 1240 KI0.83200 166 Na 2MoO 4·2H 2O 0.25 200 50母液Ⅲ 铁盐 Na 2-EDTA37.3200 7460 10005FeSO 4·7H 2O 27.82005560母液Ⅳ 有机物质 甘氨酸 2.0 200 40010005盐酸硫胺素(Vit.B 1) 0.120020盐酸吡哆醇(Vit.B 6) 0.5200100烟酸(Vit.B 3) 0.5200100肌醇100200200001 大量元素和微量元素母液的配制按规定用量,称取所需的各种药品,在配制时为减少工作量,可以把几种药品(如大量元素或微量元素)配在同一母液中(见表1).但由于各种药品的混合,可能发生反应,生成沉淀物,以致母液失效.为避免类似现象发生,在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时,可采用如下2种做法加以解决:①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物,按“表1”所列药品的先后顺序溶解药品,待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品,以此类推;②使每种成份分别完全溶解,再把它们彼此混合. 2 铁盐母液的配制铁盐的成份含硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA).这两种化合物的溶解和混合较为严格,必须按如下方法配制,否则将会产生沉淀.该方法是:分别溶解FeSO4·7H2O和Na2-EDTA,加热并不断搅拌,使之完全溶解,冷却,将2种溶液混合,调PH至5.5,用蒸溜水加至所需容积,棕色瓶保存于冰箱之中.3 植物生长调节物质母液的配制植物生长调节物质是培养基的重要组分之一,一般是植物激素类物质,如生长素类的IAA、IBA、NAA,赤霉素类的GA3,细胞分裂素类的2,4-D、KT和6-BA等.由于大多数生长调节物质难溶于水,因此配制方法也各不相同:①IAA,IBA和GA3先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后,存放在冰箱中;②NAA可用热水或少量95%酒精溶解,再加水定容至所需容积;③2,4-D 可溶于少许1mol·L-1的NaOH溶液中,然后加水定容;④KT和6-BA 可用少量1mol·L-1的HCl溶解,再加水定容;⑤玉米素先溶于少量95%酒精中,然后加水定容.植物生长调节物质浓度通常用ppm(mg·ml-1)和mol·L-1表示,在配制母液时,常以ppm较为方便,一般配制成0.5ppm的母液,这个浓度既便于计算,也可避免冷藏时形成结晶.4 有机附加物母液的配制在植物组织培养时,培养基中往往要加入一些有机附加物,如椰子汁,以促进组织培养活性.由于椰子汁的活性成分是耐热的,在配制时,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于的-200c的低温冰箱内.(二)培养基的配制1 量取所配培养基总体积的2/3体积的蒸馏水,如要配l升培养基, 先量取约700 ml体积的水。
表2 根据培养基配方,用量筒量取所需要的各种元素的母液。
大量元素母液(20×)50ml微量元素母液(200×)5ml铁盐母液(200×)5ml有机物质母液(200×)5ml蔗糖30g琼脂8g吸取母液时,注意应先将几种母液按顺序排好,不要弄错以免使培养基中药品成分发生改变。
在培养不同的外植体时,应加入不同的激素。
加入一种母液后应先搅拌均匀,避免因不均而使局部浓度过高而引起沉淀,琼脂可于加入蔗糖调节完pH值后再加入,此时应注意搅拌,以免琼脂或蔗糖沉淀于烧杯底而炭化。
加热至沸腾片刻,以使琼脂充分溶解,检查时可注意烧杯内溶液是否透明。
3 调节培养基的pH值,用pH计或pH试纸测定培养基的pH按照培养材料的要求分别用1 mol/L NaOH溶液、1 mol/L HCl溶液来调节所配制培养基的pH值,一般培养基的pH值约为5.8,培养的材料不同,对培养基的pH值要求也不同。
4 分装将配制好的培养基分别装在事先洗净的三角瓶,用锡铂纸封口,注明标签,然后和用牛皮纸或报纸包好的培养皿及用三角瓶装好的蒸馏水一道进行高压灭菌。
5 培养基的灭菌培养基灭菌一般采用湿热灭菌法,即将分装好的培养基放在高压灭菌锅中,加热,待压力上升到0.5kg/cm2时,打开放气阀排净冷空气,关闭放气阀继续加热使压力稳定在1.1-1.2kg/cm2,温度为121摄氏度的条件下,维持15-20分钟,培养基灭菌时间不宜过长,以防引起培养基成分的变化,灭菌后的培养基置于室温下贮存(最适宜的温度为10摄氏度),一般培养基在灭菌后二星期内应用。
6 培养基的保存消毒过的培养基通常放在接种室或培养室中保存,一般应在消毒后的两周内用完,最好不要超过一个月。
实验三细叶连翘愈伤组织的诱导和增殖一、目的要求:掌握植物组织培养的基本技术和方法。
二、实验原理:植物组织培养的理论依据是植物细胞具有全能性,所谓细胞全能性是指植物体任何一个细胞都携带着一套发育成完整植株的全部遗传信息,在离体培养情况下,这些信息可以表达,产生出完整植株。
要使细胞所具有的全能性表达出来,除了生长以外,还要经过脱分化和再分化等过程。
分化了的植物根、茎、叶细胞,通过脱分化培养可以产生愈伤组织。
愈伤组织是一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团。
愈伤组织经过进一步的分化培养,提供不同的营养和激素成分,又可再生出完整的小植株。
植物组织培养技术,不仅具有重大的理论意义,而且在生产实践中已显示了广泛的应用前景。
三、材料用具:细叶连翘叶片、分析天平、超净工作台、高压灭菌锅、培养箱或培养室、剪刀、镊子、手术刀、电炉、烧杯、试剂瓶、培养瓶、酒精灯、精密pH试纸四、试验方案本试验以MS培养基为基本培养基,采用正交设计探索生长因子6-BA、2,4-D、NAA对细叶连翘幼嫩叶片愈伤组织诱导的适用量,每个因子设三种水平(表1),构成三因素三水平的试验设计(表2)。