岛津LCMS-8050液质联用仪标准操作规程

岛津LCMS-8050液质联用仪标准操作规程
仪器使用和维护保养
1目的
规范岛津LCMS-8050液质联用仪的使用操作。

规范岛津LCMS-8050液质联用仪的维护和保养。

2适用范围
经过岛津LCMS-8050液质联用仪标准操作规程操作培训的操作人员和仪器负责人。

3 岗位职责
3.1 仪器管理员：负责仪器设备的安装、调试、维护保养、维修、操作规程的编写和仪器档
案的整理等事宜。

3.2 仪器保管员：按照本规程维护保养仪器，填写相关记录。

3.3 实验员：按照本规程使用仪器，填写相关记录。

4 引用资料
4.1 岛津LCMS-8050液质联用仪使用说明书。

5 内容
5.1 开机
打开PC显示器、主机后，确保质谱主机、液相色谱各单元和电脑已经接通电源，依次打开质谱主机、液相色谱各单元和电脑的电源开关，此时可观察到各单元的绿色指示灯依次亮起。

双击进入电脑桌面上的LabSolutions工作站，在新出现的窗口中点击左侧的“Instrument”，再双击右侧的对应的LCMS-8050图标。

然后点击新窗口的左侧按钮“Data Acquisition”，再点击“main”按钮，然后再点击窗口左侧最下方的按钮System control,会出现“System Control”窗口：点击“Auto Startup”按钮，抽真空约 10 分钟后可以开始进行分析实验。

5.2 建立分析方法
在 LCMS Real Time Analysis 界面，所有参数设置均在界面下半部分，如： MS、Interface， Data Acquisition LC Time Prog. Pump Column Oven.分别设置各操作参数，保存方法文件。

点击泵、柱温箱、雾化气、PDA 灯及质谱加热模块等快捷键，使仪器进入工作转态。

点击 Download，将方法文件加载到仪器上，这时如果仪器参数未到达设定值，右上方，LC、PDA、 MS 显示Not Ready，直到三参数都显示 Ready，可进样。

点击Single Start，出现对话框，输入样品名、进样瓶号、进样体积，输入完毕，点击 OK.开始采集数据。

数据
采集完毕，停止，回到 Ready状态。

如数据采集过程中终止数据采集，点击 Stop，停止采集数据，回到 Ready 状态。

5.3 数据处理
在LabSolutions的主界面，选择Postrun，进入 Postrun界面，打开数据文件。

击鼠标右键，出现一系列功能菜单，点击 Peak Intergation,设置积分参数，对指定峰积分。

当自动积分积不出来或积分位置不合理时，采用手动积分，点击 Manual Peak Intergation for MIC/TIC，然后分别点击被积分峰的起始点和结束点，对指定峰积分。

点击鼠标右键，出现一系列功能菜单，点击 Properties，出现对话框，可修改谱图参数，如颜色、背景等，也可选择各峰参数，使谱图显示峰面积、保留时间等。

5.4 关机
5.4.1 日常关机
在仪器界面上，关闭工作站窗口，弹出关闭PDA、泵、柱温箱、干燥气等窗口，全选，点“确定”，即日常关机完毕。

5.4.2 彻底关机
打开“System Control”窗口，操作方法同“启动真空系统”，然后点击“Auto Shutdown”：待质谱的加热模块和 DL 降温后，分子涡轮泵和机械泵会停止，等待关机完成后，即可关闭所有窗口，并按上文要求完成“Shutdown”窗口的操作后关闭“LabSolutions”。

最后关闭液相色谱各单元和质谱单元的电源。

6 注意事项
6.1 流动相需用高纯试剂，易挥发试剂，切勿用不挥发性无机盐。

6.2 在没有分流阀情况下，ESI 源建议流速 0.2 mL/min；不超过 1.0 mL/min.
6.3 定时清洗离子源，尤其分析实际样品。

7 维护保养
7.1 气体的更换
更换气体时，请先执行日常关机操作，确认氮气发生器的阀门和氩气钢瓶的总阀已经关闭。

然后用扳手将钢瓶和氮气发生器相关的接头拧松后进行更换。

7.2 管路的冲洗
如果实验中使用的流动相含有酸或者盐，请先用甲醇水溶液（体积比为 10:90）冲洗色谱柱及整个仪器的管路，流速为 0.3mL/min，时间为 30 分钟，确保酸或者盐被除去。

然后再将流动相更换成纯甲醇，冲洗色谱柱及整个仪器的管路，流速为 0.3mL/min，时间为 60 分钟。

8 相关记录
期间核查
1 目的
1.1 规范岛津LCMS-8050液质联用仪期间核查的执行，确保仪器的正常运行和检测数据的准确可靠。

2 适用范围
2.1 适用于本所岛津LCMS-8050液质联用仪在两次检定之间或修理后的运行核查。

3 岗位职责
3.1 仪器管理员：负责制定仪器设备期间核查计划，并统筹实施仪器设备进行期间核查。

3.2 仪器保管员：按期间核查计划，按照本规程核查仪器，填写相关记录。

4 引用资料
4.1 JJF 1317-2011 液相色谱-质谱联用仪校准规范
4.2 岛津LCMS-8050液质联用仪使用说明书。

5 内容
5.1 环境条件
环境温度10-30℃，8小时内温度波动不超过±3℃，室内湿度不大于80%。

5.2 试剂
5.2.1 甲醇（色谱纯）。

5.2.2 纯水
5.2.3 利血平溶液标准物质
5.3. 主要性能指标技术要求
5.3.1 分辨力 ESI+ ≤ 1 u （5ng利血平）
5.3.2 信噪比 ESI+ ≥ 30:1 （50pg利血平）
5.3.3 质量准确性 ESI+ ≤ 0.5 u （5ng利血平）
5.3.4 峰面积重复性 ESI+ ≤ 10% （50pg利血平）
5.3.5 保留时间重复性 ESI+ ≤ 1.5% （50pg利血平）
5.4 检测方法
色谱柱，以甲醇:水(80:20)，加入0.1%体积分数的甲酸为流动相，连接2.1mm内径的UPLC C
18
流量0.3mL/min，紫外吸收波长254nm。

取10ng/mL的利血平标准溶液（用液相色谱流动相稀
释溶解利血平溶液标准物质），以直接注入进样方式，调节质谱参数，即毛细管电压值、锥孔
电压值、碰撞能量、雾化气温度和气流大小，使利血平在m/z 609 的离子峰最高，并选择合适的碰撞能量，优化MRM参数。

保存方法。

5.4.1 分辨力和质量准确性实验
5.4.1.1 分辨力实验
打开利血平调谐文件，待仪器运行稳定后，质谱方法选择MSSCAN，ESI+，Profile，将扫描范围设为m/z=606～612，将1µg/mL 的利血平溶液进样5µL。

观察质谱图，记录m/z609质谱峰，并计算其50%峰高处的峰宽，得到W
1/2
，作为分辨力结果。

分辨力 ESI+ ≤ 1 u。

5.4.1.2 质量准确性实验
提取5.4.1.1分辨力实验中利血平质量数，根据公式（1）计算△M，以△M的最大值作为质量准确性的结果。

观察利血平的质量数是否满足609.28±0.5 u。

△M = ▕ M
测
- 609.28▕（1）5.4.2 信噪比实验
质谱方法选择MRM，定量离子对为m/z 609→195，将10ng/mL 利血平溶液进样5 µL，观察色
谱图，记录其色谱峰峰高作为H
s。

同时记录信号峰后1min～3min时间内的基线输出信号的最
大值和最小值之差，作为H
n。

根据公式（2）计算信噪比S/N，连续测量6次，以6次测量S/N 的平均值作为信噪比的结果。

S/N = H
s /H
n
（2）
公式中：H
s
——提取离子对m/z 609→195 的峰高；
H
n
——利血平峰后1min～3min时间内的基线输出信号的最大值和最小值之差。

信噪比 ESI+ ≥ 30:1。

5.4.3 峰面积和保留时间重复性实验
质谱方法选择MRM，定量离子对为m/z 609→195，将10ng/mL 利血平溶液进样5 µL，连续进样6次，记录峰面积和保留时间。

计算峰面积和保留时间的相对标准偏差RSD（%）。

规定峰面积重复性 ESI+ ≤ 10%；保留时间重复性 ESI+ ≤ 1.5%。

5.5 检测结果的处理
5.5.1 应做好仪器参数、方法、测试结果记录，检测合格后方可使用。

5.5.2 发现性能达不到规定要求，应做好记录，并报仪器设备维修。

6 注意事项
6.1 期间核查周期为12个月。

7 相关记录。