DPPH法评价抗氧化活性研究进展_韦献雅

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抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性测定方法是通过对样品中的抗氧化物质含量和抗氧化活性进行定量分析，评估其对自由基的清除能力和抗氧化能力。

随着抗氧化研究的不断深入，测定方法也逐渐完善。

以下是对常见的抗氧化物活性测定方法的总结。

1. ORAC法（氧化应激反应活性测定法）：该方法通过测定样品清除自由基的能力来评估其抗氧化活性。

实验中，将样品与荧光试剂（如2,2'-azobis(2,4-dimethylvaleronitrile)）共同作用，观察其清除自由基的能力，并通过建立标准曲线计算样品的ORAC值。

2.DPPH法（1,1-二苯基-2-苦味基-苦味酸磷）：该方法是一种常用的快速测定抗氧化活性的方法。

实验中，将样品与DPPH稳定自由基共同作用，通过比色反应观察DPPH自由基被样品清除的程度，从而评估抗氧化活性。

3.ABTS法（2,2'-联氮双5-苯砜酸）：该方法通过ABTS离子自由基的生成和清除反应来测定样品的抗氧化活性。

实验中，ABTS与过氧化氢反应生成ABTS离子自由基，通过观察样品对其的清除能力来评估抗氧化活性。

4.FRAP法（亚铁离子还原能力）：该方法基于样品对人造抗坏血酸（Fe3+）的还原能力，通过测量还原后的Fe2+离子的生成量来评估抗氧化活性。

实验中，将样品与Fe3+离子反应生成Fe2+离子，通过比色反应来测定Fe2+的含量。

5. 碘标法（Iodine value）：该方法用于测定油脂、脂肪等样品的抗氧化活性。

实验中，将已知量的碘与样品中的不饱和化合物反应，在光反应下观察反应终点的颜色变化，并根据标准曲线计算样品的抗氧化活性。

6. 硝酸盐法（Nitrite method）：该方法用于测定样品中亚硝酸盐的含量，从而评估其抗氧化活性。

实验中，样品经过还原反应生成亚硝酸盐，然后与DANO（N-乙基-N-（2-苯基乙基）-对硝基苯胺）反应生成稳定的偶氮染料，通过比色测定反应终点的吸光度来计算样品中亚硝酸盐的含量。

抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性 (antioxidant activity)描述了化学物质在抑制或减少氧化反应中所起的作用。

抗氧化物是一类具有亲电子的分子，它们容易被氧化，从而中和自由基。

抗氧化物具有重要的生物学和医学意义，因为氧化损害是许多疾病和老化的主要原因。

因此，抗氧化物活性测定方法是目前研究的热点之一，现将抗氧化物活性测定方法进行总结:1. DPPH法：该方法是一种常用的体外抗氧化测定方法。

含有DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）的溶液表现为紫色，DPPH自由基上的氢原子被抗氧化物夺取后，DPPH自由基变成无色，从而可以通过紫外可见光谱测定其吸光度的降低来表示抗氧化物活性。

2. ABTS法：该法通过测定2,2’-联氮双(3-乙基苯并咪唑啉硫酸铵) (ABTS)自由基的消除能力来测定抗氧化活性。

该法也是一种体外抗氧化测定方法，溶液发生颜色变化，从而通过紫外可见光谱测定其吸光度的降低来表示抗氧化物活性。

3. ORAC法：ORAC（氧化还原能力值）法对不同化学物质的体内抗氧化活性进行定量测定，其原理是将抗氧化剂加入与有氧气气氛接触的荧光染料溶液中，由于受到氧自由基的攻击，染料随着时间流逝会逐渐减少。

为了确定不同化学物质的抗氧化活性，十分重要的是应该不断输入氧自由基。

4. FRAP法：铁还原能力 (FRAP) 方法测量样品对Fe3+的还原能力，其原理是将含有Fe3+的试液与抗氧化剂反应后，Fe3+被还原为Fe2+，测试Fe2+的含量即可评估抗氧化剂的抗氧化性能。

5. TBARS法：该方法是用于评估脂质过氧化物含量，从而推断抗氧化剂的能力。

该评估方法是通过测定细胞膜上的脂质过氧化产物（丙二醛）来分析抗氧化剂活性。

6. Total Phenolic Content (TPC)法：该方法最初是用来测定葡萄酒和咖啡中酚类化合物含量的。

后来发现大多数植物成分含有大量的酚类化合物，故也用于测定植物中的酚类含量。

DPPH·法评价37种植物抗氧化活性

摘要采用ＤＰ法测定了南疆地区３ＰＨ・７种植物清除有机自由基的能力，并做了比较。结果表明：同植物提取物对Ｄ — 不ＰＰ自由基的清除能力不同，中某些植物提取物对自由基的清除能力较强，沙棘果实９１％、椒９．ｌ、榴渣Ｈ・其如４．３辣２２％石９．％、萄渣９．３、季花９７％、柏叶９．２；１６４葡１５％月０．２侧０５％同种植物不同部位的清除能力也有差异，合欢叶８．ｌ、如５２％合欢嫩果８．２、欢成熟果实７．９２７％合７５％。为本地区天然抗氧化剂的深入研究提供了参考依据。
２２抗氧化性的测定Ｈ．
吸取１ｍＰＨ・０ｌＰ储备液，容于１０ｌＤ定０ｍ容量瓶中摇匀待测。利用ＤＰ的溶液特征紫红色团的吸ＰＨ・
收峰，分光光度法测定加抗氧剂提取液后在波长５７ｍ处吸收的下降表示其对有机自由基消除能力。用１ｎ按表１反应液。加
ＸｕＺｎｙｎＭａＳａｂｎＺａｇＸｉｐｎＺａｅｇｏＬｕＬｌＬｎｌｎｏｇｕｈｏｉｈｎｕｉｈｏＷｉｕｉｉｎｉｕＹｉｇｏｇ
（ｎｔｕｅｏｎｍｌｃｎｅａｄＴｃｎｌｙＴｒｎｖｒｔｏｇｉｈｕＲｃａａｏ，ｌ，Ｘｎｉｇ８３０）ＩｓｔｔｆｉａＳｉｃｎｅｈｏｏ，ａｉＵｉｓｙｆｒｕｒｅｅｌｍｔｎＡａｉＡｅｇｍｅｉＡｃｉｒｉａ４３０ｊｎ

用清除有机自由基DPPH法评价植物抗氧化能力 (2)

研究简报用清除有机自由基DPPH法评价植物抗氧化能力3彭长连　陈少薇　林植芳　林桂珠(中国科学院华南植物研究所,广州510650)摘要　几种抗氧化剂的浓度与其清除1,12二苯基苦基苯肼(DPPH)能力呈显著的线性相关.不同抗氧化剂清除DPPH能力差异明显.抗坏血酸与DPPH反应的灵敏性高于其抑制肾上腺素氧化的能力.用DPPH法和亚油酸氧化法同时测定了生长在不同光强下植物叶片抗氧化能力的变化,两种方法所得结论相一致.结果表明清除有机自由基法是一种快速、简便、灵敏的评估植物抗氧化能力的可行方法.关键词　1,12二苯基苦基苯肼(DPPH),植物,抗氧化能力,自由基学科分类号　Q946 生物的抗氧化能力与其抗病性、抗逆性及延缓衰老密切相关.因而从天然植物中寻找有效的抗氧化剂应用于医药、食品、保健品、饮料、化妆品等之中,或从氧化与抗氧化代谢的平衡来探讨生物对变化环境条件的适应性机理,都是当前的研究热点之一. 迄今用于评价植物抗氧化能力的方法虽已有诸如硫氰酸盐(thiocyanate)法[1]、硫代巴比妥酸(TBA)法[2]、ORAC法(automated oxygen radical absorbance capacity assay)[3]等.但这些方法或者手续相当繁琐费时,或者所需试剂或大型仪器的费用昂贵,尚缺乏一种灵敏、简单易行的有效方法.1, 12二苯基苦基苯肼(1,12Diphenyl222picryl2 hydrazyl,DPPH)是一种稳定的有机自由基,通过检测生物试剂对DPPH自由基的清除能力可以表示其抗氧化性的强弱.然而对自由基信号的直接检测需要使用顺磁共振仪而使其难以普及.近年来,国外已有人初步利用DPPH溶液的紫红色吸光度变化作为清除自由基能力的分光光度测定[4,5],但对其准确性、灵敏度和可行性尚未有系统的探讨.本文旨在研究DPPH分光光度法用以评价植物抗氧化能力的可行性,为抗氧化剂的筛选和抗氧化胁迫机理的研究提供新的方法和依据.1　材料与方法111　仪器和试剂紫外可见分光光度计(Beckman DU27),二苯基苦基苯肼(1,12diphenyl222picrylhydrazyl,DPPH),肾上腺素,硫代巴比妥酸(TBA),亚油酸,外源抗氧化剂抗坏血酸(AsA)、　皮素(QCT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丁基羟基甲苯(BHT),为Sigma公司产品,α2生育酚(α2TP)为Merck公司产品.自由基捕获剂1,22二羟基苯23,52二磺酸钠(Tiron),甲醇,乙醇为国产产品.112　植物材料试验植物为广东省鼎湖山常绿阔叶林中的乔木黧蒴(Castanopsis f issa)和林下灌木九节(Psycot ria rubra).盆栽幼苗生长于本所试验地的自然光强(100%光)和遮阴降低光强为自然光的36%和16%条件下.012g叶片用50%乙醇浸提,研磨和离心(5000×g,15min),定容至10ml. 113　有机自由基(DPPH)消除能力的测定参考Larrauri和Y okozawa等[4,5]的方法进行修改.利用DPPH溶液的特征紫红色团的吸收峰,以分光光度法测定加抗氧化剂或植物提取液后A525吸收的下降表示其对有机自由基消除能力.反应体积2ml,DPPH溶于少量甲醇后,以50%乙醇配制为120μmol/L.植物提取液稀释10倍,反应时加011ml稀释的提取液及119ml DPPH.室温下静置20min后测吸光度变化.样品对DPPH 的清除百分比=12[(A-B)/A0]×100%,这里A0为未加样的DPPH(119ml DPPH+011ml 50%乙醇)的吸光度,A为样品与DPPH反应后的吸光度,B为样品的空白(样品011ml+119ml　3中国科学院广州分院及广东省科学院测试基金和中国科学院“九五”重点基金(KZ9522J12105)联合资助.　Tel:(020)877056262405,E2mail:pengchl@　收稿日期:1999211220,修回日期:200020420250%乙醇)的吸光度.然后用公式:[(清除率×反应加入的DPPH 量)/样品质量(μg )]求得单位质量的外源抗氧化剂或植物样品对DPPH 的实际清除量.114　抑制亚油酸氧化能力的测定最终浓度为0138mmol/L 的亚油酸加0133mmol/L H 2O 2加速氧化,在有或无植物提取液下置于室温放置5h ,不时摇动,随后用硫代巴比妥酸(TBA )法测定所产生的丙二醛(MDA )[6].用抑制MDA 形成的百分数表示抗氧化能力.115　抑制肾上腺素氧化参照翁元凯等的方法[7],以碱性连二亚硫酸钠产生O ・2,用不同浓度的AsA 抑制O ・2对肾上腺素的氧化,480nm (肾上腺素红的特征吸收峰)检测吸收的下降.2　结果与讨论211　DPPH 的吸收光谱有机自由基DPPH 溶液有两个特征吸收峰330nm 和525nm ,加入抗氧化剂抗坏血酸(AsA )和　皮素(QCT )后两个吸收峰皆降低(图1),但525nm 吸收的降低较显著,故选用可见光525nm 的吸收来表示DPPH 含量的变化,这与Larrauri 等[4]报道DPPH 吸收峰在517nm 有点差异.图1　DPPH 的吸收光谱212　抗氧化剂浓度与其清除DPPH 的关系没食子酸(GIP )、　皮素(QCT )、还原型谷胱甘肽(GSH )和α2生育酚(α2TP )是植物体内常见的抗氧化剂,BHT 是人工合成的常用食品抗氧化剂,Tiron 则是人工合成的自由基捕获剂.图2可见这几种抗氧化剂的浓度皆与DPPH 的光吸收呈显著的线性负相关(图2),相关系数r 除BHT 为018977(图2b )外,其余都在019670～019935之间.抗氧化剂浓度越高,清除DPPH 的能力越大.结果说明无论是植物的内源抗氧化剂还是人工合成的抗氧化剂,其抗氧化性都可用DPPH 法作定量评价.图2　几种抗氧化剂与DPPH 吸收峰(A 525)下降的关系(a )■———■:QCT ,y 1=-010872x +110543,r =019904;●———●:GIA ,y 2=-012485x +110843,r =019935;(b )■———■:BHT ,y 3=-010245x +019008,r =018977;●———●:GSH ,y 4=-010149x +110715,r =019918;(C )■———■:α2TP ,y 5=-010233x +018558,r =019788;●———●:Tiron ,y 6=-010212x +017586,r =019670.213　不同抗氧化剂清除DPPH 能力的比较表1看出计算降低DPPH 吸收50%时抗氧化剂的浓度(IC 50值)或每微克抗氧化剂实际清除DPPH 的数量皆表明,没食子酸的清除能力最强,皮素次之,而GSH 、α2TP 和两种人工合成的抗氧化剂BHT 及Tiron 则较低.这与Cao 等[8]利用ORAC 法的测定指出一些类黄酮比ASA 、α2TP 和GSH 有更强的抗氧化活性结果相一致.表1　几种抗氧化剂清除DPPH 自由基能力的变化抗氧化剂　IC 50(DPPH 吸收降低50%时抗氧化剂的量)　 ρ/μg c /μmol ・L -1DPPH 清除量/g ・g -1GIP2111612324122QCT 516791317170AsA 8141261535107BHT 13190351132183GSH 34136621121130α2TP 19150221631119Tiron16180381121187214　抗坏血酸清除DPPH 与抑制肾上腺素氧化的比较抑制肾上腺素氧化也常用作测定抗氧化能力的一种方法.图3比较了肾上腺素法与DPPH 法用于评价抗坏血酸(AsA )抗氧化能力的灵敏度.结果看出AsA 含量与DPPH 吸收之间的斜率为-010638,相关系数为019986(图3b ),而AsA 含量与抑制肾上腺素氧化之间的斜率为-010011,相关系数为019775(图3a ).即DPPH 法的直线斜率和与AsA 含量的相关性皆大于肾上腺素法,表明其更为灵敏与准确.此外,肾上腺素法需在碱性条件下反应,其活性氧(O ・2)源也需通过化学反应产生,而DPPH 法则可直接检测DPPH 自由基的变化.图3　抗坏血酸抑制肾上腺素氧化(a)和清除DPPH (b)的比较(a )y 1=-010011x +011619,r =019775;(b )y 2=-010638x +110962,r =019986.215　DPPH 法和亚油酸氧化法测定植物叶片抗氧化能力的比较亚油酸氧化法也是测定植物抗氧化能力的常用方法.用它和DPPH 法比较生长在不同光强下森林植物黧蒴和九节叶片的抗氧化能力(图4),可以看出两种方法的结果基本一致.随生长光强的增加,两种植物抗氧化能力都提高.自然光照下九节叶片的抗氧化能力大于黧蒴,而且光强对九节抗氧化能力的影响较黧蒴大,显示前者对光强的敏感性较高.由此结果进一步表证了DPPH 法研究植物抗氧化能力与植物种类及外界环境因子之间关系的可行性.图4　生长在不同光强下的植物提取物清除DPPH (a)和抑制亚油酸自动氧化(b)的变化□:黧蒴;■:九节. 综上所述,应用DPPH 法来评价外源抗氧化剂和植物抗氧化能力是一种快速(反应时间仅需20min左右)、简便(操作简单,且用一般的分光光度计即可测定)、灵敏(只需要少量的植物样品)、直接(抗氧化剂直接作用于DPPH自由基,测定DPPH吸收的变化,而其他许多方法都是间接测定氧化产物的减少)可行的方法.参　考　文　献1　Osawa T,Namiki M A.Novel type of antioxidant isolated from leaf wax of Eucalypt us leaves.Agric Biol Chem,1981,45(3): 735～7392　Ottolenghi A.Interaction of ascorbic acid and mitochondrial lipides.Arch Biochem Biophys,1959,79:355～3633　Cao G,Alessio H M,Culter R G.Oxygen2radical absorbance capacity assay for antioxidants.Free Radical Biol Med,1993,14(3):303～3114　Larrauri J A,Sanchez2Moreno C,Saura2Calixto F.Effect of temperature on the free radical scavenging capacity of extracts from red and white grape pomace peels.J Agric Food Chem,1998,46(7):2694～26975　Y okozawa T,Dong E,Natagawa T,et al.In vit ro and i n vivo studies on the radical2scavenging activity of tea.J Agric Food Chem,1998,46(6):2143～21506　林植芳,李双顺,林桂珠,等.水稻叶片衰老与超氧歧化酶、脂质过氧化的关系,植物学报,1984,26(6):605～615Lin Z F,Li S S,Lin G Z,et al.Acta Bot Sin,1984,26(6): 605～6157　翁元凯,黄　山,翁念宇.用碱性连二硫酸钠水溶液产生超氧阴离子自由基,生物化学与生物物理进展,1989,16(3): 209Wong Y K,Huang S,Wong L Y.Prog Biochem Biophys,1989, 16(3):2098　Cao G,Sofic E,Prior R L.Antioxidant capacity of tea and common vegetables.J Agric Food Chem,1996,44(11):3426～3431Detection of Antioxidative C apacity in Plants by Scavenging Organic Free R adical DPPH.PEN G Chang2Lian,CHEN Shao2Wei,L IN Zhi2Fang,L IN Gui2Zhu(South Chi na Instit ute of Botany,The Chi nese A cademy of Sciences,Guangz hou510650, China).Abstract　A very significant linear relationship was found between the capacity of scavenging DPPH free radical and concentrations of six antioxidants(r= 01898～01994)determined by spectrophotometry. There was an obvious difference in the capacity of scavenging DPPH free radical among different antioxidants.Both scavenging DPPH and inhibiting the oxidation of adrenalin were closely related with the concentration of ascorbic acid.The change of DPPH levels is more sensitive than that of adrenalin in the presence of ascorbate.The antioxidative ability in leaves extracts of two woody plants grown under different light intensities was measured by either scavenging DPPH or inhibiting the oxidation of linoleic acid.The same conclusion was drawn through these two assays.It is suggested that scavenging DPPH free radical is a rapid,simple,sensitive and practical assay for the evaluation of antioxidative capacity in plants.K ey w ords　1,12diphenyl222picrylhydrazyl(DPPH), plant,antioxidative capacity,free radical中国生物化学与分子生物学会简讯由中国生物化学与分子生物学会承办的第十五届亚洲大洋洲生物化学家和分子生物学家联合会(FAOBMB)学术会议于10月21日至24日在北京举行。

DPPH·法评价杜仲叶提取物的抗氧化活性

８８．
文献标志码：Ａ
文章编号：０１７６（０１０ —１９０１０ —４１２１）６０１—５
ＥｖｌａｉｎｏｔｏｉａｔＡｃｉｉｙｏｃｍｍｉｌｉｓＬｅｆＥｘｒｃｓｂＰＨ・ＡｓａａｕｔｏｆＡｎｉｘｄｎｔｖｔｆＥｕｏａｕｍｏｄｅａｔａｔｙＤＰｓｙＹＵＡＮ — ｅ，ＵＹｉ— ｕｎ，ＺｉＳｎｑａＺＨＡＮＧａｇ，ｙＱｉｎＺＨＵｉｇｑａｇ，Ｍｎ－ｉｎ
同质量浓度的ＢＨＴ，与相同质量浓度的Ｖｃ无显著差异。相关分析表明，仲叶抗氧化活性的主杜
要物质基础为总多酚和总黄酮。
关键词：仲叶；氧化活性；取工艺；ＰＨ・；多酚；黄酮杜抗提ＤＰ总总
ｍｅｈｄａｄｔｅｒａｔｏｉａｔａｔｖｔｅｒｎｅｔａｅｙｓａｅｇｎＰＨ・．ＴｈｘｒｃｓｏｔｉｅｔｏｎｈｉｎｉｘｄｎｃｉｉｉｓｗｅｅｉｖｓｉｔｄｂｃｖｎｉｇＤＰｇｅｅｔａｔｂａｎｄｆｏｏｔｍｕｔｃｎｌｇｃｌｃｎｉｏｓｗｅｅｆｒｈｒｅｔａｔｄｂｉｅｅｔｐｌｒｏｇｎｃｓｌｅｔｎｈｒｍｐｉｍｅｈｏｏｉａｏｄｔｎｒｕｔｅｘｒｃｅｙｄｆｒｎｏａｒａｉｏｖｎｓａｄｔｅｉｆｃｎｅｔｆｔｔｌｐｅｏｉｃｍｐｕｄ，ｔｔｌｆｖｎｉｓａｄＤＰＰＨａｉａｃｖｎｉｇａｔｉｙｗｅｅｄｔｒｏｔｎｓｏｏａｈｎｌｏｏｎｓｏａｌｏｏｄｎｃａｒｄｃｌｓａｅｇｎｃｉｔｒｅｅ — ｖ

筛选和评价天然抗氧化剂的方法-DPPH法

抗氧化剂具有预防自由基对人体的氧化损伤、防止食品中的脂质氧化变质等功能。由于合成抗氧化剂对人体有不良影响，自２０世纪９０年代，从植物中筛选和提取天然抗氧化剂成
为研究热点。因此，用于筛选抗氧化剂、评价抗氧化剂活性或效果的方法也随之增多。基于稳定的自由基ＤＰＰＨ（ｄｉｐｈｅ “ ｙｌｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ，二苯苦肼基）的方法是目前使用非常
普遍的方法之一。
自由基。
．
Ｎ— Ｎ
Ｕ＞＝胄
图１ＤＰＰＨ的结构（自由基，紫色）
１ＤＰＰＨ法的基本原理
ＤＰＰＨ法是５Ｏ多年前美国斯坦福大学的ＭａｒｓｄｅｎＢｌｏｉｓ提
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｔｗａｓｏｎｅｆｏＣＵＳｏｆｆｏｏｄｓｃｉｅｎｃｅｓｔｕｄｙｔｏｓｃｒｅｅｎａｎｄｅｘｔｒａｃｔｎａｔｕｒａｌａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｆｒｏｍｔｈｅｐｌａｎｔ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｔｏｓｃｒｅｅｎａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｎｄｅｖａｌｕａｔｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ．Ｉｔｗａｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎｍｅｔｈｏｄｓｔｏ

化妆品抗氧化功效评价方法研究进展

化妆品抗氧化功效评价方法研究进展戴结玲;杨琼利;孙红梅【摘要】氧化应激会引起皮肤衰老和皮肤病的发生,抗氧化是从清除自由基、提高抗氧化酶活性与减少脂质代谢产物、保护细胞重要的细胞器、调控细胞信号转导通路抑制细胞凋亡等途径发挥作用.本文结合抗氧化作用机制,分别对化学法、细胞法、皮肤模型等体外评价方法及人体评价方法进行综述,为抗氧化化妆品的功效评价和研发提供借鉴.【期刊名称】《化工管理》【年(卷),期】2018(000)019【总页数】3页(P57-59)【关键词】抗氧化;自由基;皮肤模型;功效评价【作者】戴结玲;杨琼利;孙红梅【作者单位】无限极(中国)有限公司, 广东广州 510623;无限极(中国)有限公司, 广东广州 510623;无限极(中国)有限公司, 广东广州 510623【正文语种】中文【中图分类】TQ658衰老和抗衰老是永恒的话题，随着现代科学的发展，人们提出了很多衰老学说，其中活性氧自由基学说得到较多的支持[1]。

人体正常生理代谢和环境影响如紫外线照射、环境污染等都会导致活性氧(ROS)的产生。

ROS含量超过人体清除的能力，打破了氧化与抗氧化的平衡，就会引起氧化应激，皮肤作为人体最外层的组织，直接暴露于环境，更容易引起氧化应激造成氧化损伤[2]。

ROS导致的氧化损伤包括对细胞膜、DNA、蛋白质的损伤，除了造成皮肤衰老，还会引发皮肤肿瘤、光老化、红斑狼疮等皮肤病[1-5]。

抗氧化机制从细胞水平大致分为清除自由基，提高抗氧化酶活性与减少脂质代谢产物，保护细胞重要的细胞器，调控细胞信号转导通路抑制细胞凋亡。

由于抗氧化作用往往是多种机制互相协调共同作用的结果[6]，因此，采用不同的自由基清除剂或抗氧化剂复合研制的化妆品，能达到延缓皮肤老化的效果，这类化妆品也深受消费者欢迎。

目前大多数抗氧化测试方法也把清除自由基、降低ROS水平、提高抗氧化酶活性等作为评价依据。

本文对体外评价方法和人体评价方法分别进行综述，为抗氧化化妆品的功效评价和研发提供借鉴。

用清除有机自由基DPPH法评价茶叶多糖的抗氧化活性

24不同提取方法所得精制茶叶多糖的抗氧化活性按14方法提取精制得到的江西分宜的精制茶叶多糖分别溶于水后配成溶液采用152方法测定它们对dpph的清除率然后根据图2所得线性方程将每100mgl精浓度清除率每100mgl精制茶叶多糖溶液的提取方法mgl清除率换算成抗坏血酸溶液的浓度mgl室温搅拌提取1053549749950搅拌提取1324693752970搅拌提取1267624707490搅拌提取10293574933100搅拌提取11522012396微波辅助提取10715827823超声波辅助提取11486357966表2不同提取方法所得精制茶叶多糖的抗氧化活性table2theantioxidativeactivitiesofteapolysaccharidesobtainedbydifferentextractionprocesses制茶叶多糖溶液的清除率换算成抗坏血酸溶液的浓度见表2比较它们之间抗氧化活性
※基础研究
食品科学
2006, Vol. 27, No. 03 35
公司；其它试剂为国产分析纯。１．２仪器
扫描型紫外可见分光光度计（ＵＶ－８５００ＰＣ）天美科学仪器有限公司；ＵＶ２０００紫外分光光度计上海尤尼柯仪器有限公司；ＤＫ－Ｓ２４型电热恒温水浴锅上海精宏实验设备有限公司；ＴＤＬ－５Ａ离心沉淀机上海安亭分析仪器有限责任公司；ＲＥ－５２旋转蒸发仪上海亚荣生化有限公司；ＷＤ７００ＡＴＬ１７－３电脑型烧烤微波炉Ｇａｌａｎｚ；ＳＹ３２００型超声波清洗器上海声源超声波仪器设备有限公司。１．３茶叶多糖的提取精制
表１不同产地、不同等级精制茶叶多糖的抗氧化活性Ｔａｂｌｅ１Ｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｅａ

抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法总结引言：抗氧化物活性测定在食品、医药、化妆品以及生命科学等领域具有重要应用。

目前，常用的抗氧化物活性测定方法主要包括化学法、生物法和物理法。

本文将对这几种方法进行总结。

一、化学法1.1.DPPH自由基法该方法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、通过DPPH自由基与抗氧化物发生反应，使DPPH自由基得以还原为无色溶液，测定溶液的吸光度来评估抗氧化活性。

1.2.ABTS自由基法该方法通过生成具有特定吸光度的ABTS自由基，评估抗氧化物对自由基的清除能力。

与DPPH自由基法相比，ABTS自由基法具有更高的灵敏度和稳定性。

1.3.羟自由基清除法该方法利用特定的化学反应，测定样品对羟自由基的清除能力，评估其抗氧化活性。

该方法适用于抗氧化物活性测定和体外抗氧化活性评价。

1.4.过氧化物清除法该方法测定样品对过氧化物的清除能力，通过测定生成的不稳定的自由基产物的分解速率，评估抗氧化活性。

该方法适用于测定生物样品的抗氧化活性。

二、生物法2.1.脂质过氧化抑制能力测定法该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力，评估其抗氧化活性。

常用的指标包括丙二醛生成量、硫代巴比妥酸反应物（TBA）生成量等。

2.2.DNA损伤保护能力测定法该方法通过测定样品对DNA损伤的保护能力，评估其抗氧化活性。

常用的指标包括DNA链断裂率、碱基损伤率等。

2.3.超氧化物歧化酶（SOD）活性测定法该方法测定样品中SOD的活性，评估其清除超氧自由基的能力。

常用的指标包括抑制率、相对酶活等。

2.4.过氧化氢酶（CAT）活性测定法该方法测定样品中CAT的活性，评估其清除过氧化氢的能力。

常用的指标包括催化剂浓度、酶单位等。

三、物理法3.1.相对电子自旋共振法该方法通过测定样品中的自由基产物的电子自旋共振信号的强度，评估抗氧化物的活性。

常用的指标包括g值、线宽等。

3.2.高温氧化法该方法利用样品在高温条件下的氧化反应，评估其抗氧化活性。

DPPH法评价抗氧化活性研究进展

DPPH法评价抗氧化活性研究进展韦献雅;殷丽琴;钟成;章明海;牛应泽【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2014(035)009【摘要】植物化合物或植物提取物的抗氧化活性的体外评价是研究功能因子的一个重要方面.1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法常用于评价化合物或植物提取物的抗氧化活性,但由于没有一个标准化的方法,因而不同实验的结果难于相互比较.本文从DPPH法的原理、测定方法、检测波长、DPPH初浓度、反应时间、清除率计算公式、结果表达、评价指标等几个方面对DPPH法做归纳总结,分析几种外界因素对DPPH法的影响,有助于研究者提高认识,从而准确的开展研究工作.【总页数】6页(P317-322)【作者】韦献雅;殷丽琴;钟成;章明海;牛应泽【作者单位】四川农业大学油菜研究中心,四川成都 611130;四川农业大学油菜研究中心,四川成都 611130;四川农业大学玉米研究所,四川成都 611130;四川农业大学油菜研究中心,四川成都 611130;四川农业大学油菜研究中心,四川成都 611130【正文语种】中文【中图分类】TS207.3【相关文献】1.细胞抗氧化活性方法在食物抗氧化活性评价中的研究进展 [J], 夏春燕;郭晓晖;李富华;陈龙;赵国华;明建2.用清除有机自由基DPPH法评价茶叶多糖的抗氧化活性 [J], 聂少平;谢明勇;罗珍3.常见生物模型抗氧化活性评价方法的研究进展 [J], 张泽生;卢亚莉;高云峰;吴天宸;王笑仪4.天然产物抗氧化活性评价方法研究进展 [J], 张雪;苗婷婷;陆炯;汤同中;张耀堂;张春平;段静雨5.DPPH法评价大黄提取物的抗氧化活性 [J], 闫海燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

DPPH法评价抗氧化活性研究进展_韦献雅

DPPH法评价抗氧化活性研究进展韦献雅1，殷丽琴1，钟成2，章明海1，牛应泽1,*（1.四川农业大学油菜研究中心，四川成都611130；2.四川农业大学玉米研究所，四川成都611130）摘要：植物化合物或植物提取物的抗氧化活性的体外评价是研究功能因子的一个重要方面。

1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ，DPPH ）法常用于评价化合物或植物提取物的抗氧化活性，但由于没有一个标准化的方法，因而不同实验的结果难于相互比较。

本文从DPPH 法的原理、测定方法、检测波长、DPPH 初浓度、反应时间、清除率计算公式、结果表达、评价指标等几个方面对DPPH 法做归纳总结，分析几种外界因素对DPPH 法的影响，有助于研究者提高认识，从而准确的开展研究工作。

关键词：DPPH 法；自由基；抗氧化剂；抗氧化活性Advances in the DPPH Radical Scavenging Assay for Antioxidant Activity EvaluationWEI Xian-ya 1, YIN Li-qin 1, ZHONG Cheng 2, ZHANG Ming-hai 1, NIU Ying-ze 1,*(1. Rapeseed Research Center, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China;2. Maize Research Institute, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China)Abstract: in vitro evaluation of the antioxidant activity of plant compounds or plant extracts is an important aspect of functional factor research. The DPPH (1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging assay is widely used for antioxidant activity evaluation of plant compounds and extracts. However, this method lacks a standardized program so that results from different experiments may be difficult to compare with each other. The present review presents a comprehensive overview of the principle, measurement procedure and wavelength, initial DPPH f ree radical concentration, reaction time, calculation of the scavenging rate, expression of results and evaluation indices. Several external factors influencing the DPPH assay are also discussed.Key words: DPPH method; free radical; antioxidant; antioxidant activity 中图分类号：TS207.3 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2014）09-0317-06doi:10.7506/spkx1002-6630-201409062收稿日期：2013-06-25基金项目：四川省科技计划项目（12CGZHZX0712）；四川省教育厅重点科技项目（11LD018）作者简介：韦献雅（1980—），女，博士研究生，研究方向为作物遗传育种。

抗氧化活性研究方法

抗氧化活性研究方法引言：氧化反应是指分子或原子失去电子，而还原反应是指分子或原子获得电子。

由于氧化反应产生的自由基具有高度活性，能够对细胞结构和功能造成损害，导致多种疾病的发生。

因此，研究抗氧化活性及其机制对于预防和治疗这些疾病具有重要意义。

本文将介绍几种常用的抗氧化活性研究方法。

一、DPPH自由基清除能力测定法DPPH自由基清除能力测定法是一种常用的抗氧化活性测定方法。

DPPH（2,2-二苯基-1-苦味肼）是一种紫色自由基，其颜色随着氧化程度的增加而减弱。

在该方法中，将待测样品与DPPH溶液混合，通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够清除DPPH自由基，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降。

二、还原能力测定法还原能力测定法是通过测定待测样品对还原剂的还原能力来评估其抗氧化活性。

常用的还原剂包括铁离子、铜离子等。

在该方法中，将待测样品与还原剂混合，通过测定混合液的吸光度变化或还原剂浓度的变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够还原还原剂，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降或还原剂浓度的降低。

三、氧化脂质抑制能力测定法氧化脂质抑制能力测定法是通过测定待测样品对氧化脂质的抑制能力来评估其抗氧化活性。

常用的氧化脂质包括脂肪酸、脂肪油等。

在该方法中，将待测样品与氧化脂质混合，通过测定混合液中脂质的氧化程度来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够有效抑制氧化脂质的形成。

四、超氧阴离子清除能力测定法超氧阴离子是一种常见的自由基，具有较高的活性。

超氧阴离子清除能力测定法是通过测定待测样品对超氧阴离子的清除能力来评估其抗氧化活性。

常用的超氧阴离子产生体系包括NBT（硝基蓝盐）-NADH（尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸）体系、XTT（二苯基四唑盐）体系等。

在该方法中，将待测样品与超氧阴离子产生体系混合，通过测定混合液的吸光度变化来评估样品的抗氧化活性。

抗氧化活性强的样品能够有效清除超氧阴离子，使其浓度降低，从而导致吸光度的下降。

中药抗氧化的作用机理及评价方法研究进展

中药抗氧化的作用机理及评价方法研究进展【摘要】综述了中药抗氧化作用的可能机理和中药抗氧化作用的评价方法；重点介绍了二苯代苦味酰基自由基(DPPH)法、硫代巴比妥酸（TBA）法、Fe3+还原/抗氧化能力（FRAP）法和生物化学发光法4种目前常用的中药抗氧化作用评价方法及采用这些方法所取得的研究结果。

【关键词】中药；抗氧化作用；机理；评价方法Abstract:This article overviews the possible mechanism of antioxidation and the evaluation method of Chinese medicine;Four kinds of frequently used evauation methods for Chinese medicine at present are introduced mainly in this article，including DPPH，TBA，FRAP and biochemilemine scence.Some research results using these methods are also introduced.Key words:Chinese medicine; Antioxident activity; Mechanism; Evaluation method衰老的自由基(free radical)学说是英国的Harman于1956年最早提出的，该学说认为自由基攻击生命大分子造成组织损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要原因［1］。

近年来，新的抗氧化机制不断被发现，人们越来越趋向于应用天然抗氧化剂，我国有丰富的中草药资源，它们的药效和安全性比较明确。

许多学者认为某些中草药的疗效与其抗氧化作用密切相关。

已发现的植物药抗氧化成分有黄酮类、皂苷类、多糖类、有机酸类、萜烯等，这些物质通过清除人体内自由基，还原氧化物质，从而达到保护机体的作用［2］。

3种抗氧化活性测定方法

3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性是指物质对氧化过程的抑制作用，能够减缓或阻断自由基对细胞和组织的损害。

目前，常用的抗氧化活性测定方法主要包括DPPH 自由基清除法、ABTS自由基清除法和铁还原能力测定法。

以下将对这三种方法进行详细介绍。

1.DPPH自由基清除法：DPPH（2,2-二苯基-1-若氧基-苯基-π-苦味噁唑）自由基清除法是一种常用的抗氧化活性测定方法。

该方法是通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。

DPPH自由基是一种紫色稳定的自由基，在接触到氢供体（抗氧化剂）后，会发生颜色变化从紫色转变为黄色。

可以通过测定样品溶液的吸光度来评估其抗氧化能力。

吸光度的降低表明样品对DPPH自由基的清除能力较强。

2.ABTS自由基清除法：ABTS（2,2'-联氨基双（3-乙基苯并噻唑））自由基清除法也是一种常用的抗氧化活性测定方法。

ABTS自由基是一种无色可溶性自由基，其生成主要通过氧化剂与ABTS反应而产生。

测定方法是将ABTS与过氧化氢反应，生成蓝色自由基溶液，然后将样品加入到溶液中，通过测定吸光度的变化来评估样品的抗氧化活性。

吸光度的降低表明样品对ABTS自由基的清除能力较强。

3.铁还原能力测定法：铁还原能力测定法是一种评估抗氧化活性的常用方法，通过测定样品对Fe3+还原为Fe2+的能力来评估其抗氧化能力。

在这个方法中，还原剂（如抗氧化剂）会与Fe3+反应，生成Fe2+，并且Fe2+的浓度可以通过测量其吸光度来确定。

浓度越高，吸光度越高，表明样品的抗氧化能力越强。

这三种抗氧化活性测定方法各有其优势和适用范围。

DPPH自由基清除法适用于评估样品对自由基的清除能力，但其结果受其他化合物的影响较大；ABTS自由基清除法对于水溶性和脂溶性样品均适用，但其结果也受其他化合物的影响；铁还原能力测定法适用于样品中还原型物质的测定，可评估样品对金属离子的还原能力。

因此，在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法来评估样品的抗氧化活性。

DPPH法评价抗氧化活性研究进展

万方数据万方数据万方数据万方数据万方数据万方数据DPPH法评价抗氧化活性研究进展作者：韦献雅，殷丽琴，钟成，章明海，牛应泽， WEI Xian-ya， YIN Li-qin， ZHONG Cheng， ZHANG Ming-hai， NIU Ying-ze作者单位：韦献雅,殷丽琴,章明海,牛应泽,WEI Xian-ya,YIN Li-qin,ZHANG Ming-hai,NIU Ying-ze(四川农业大学油菜研究中心,四川成都,611130)，钟成,ZHONG Cheng(四川农业大学玉米研究所,四川成都,611130)刊名：食品科学英文刊名：Food Science年，卷(期)：2014,35(9)1.ANI V;VARADARAJ M C;NAIDU K A Antioxidant and antibacterial activities of polyphenolic compounds from bitter cumin (Cuminum nigrum L.) 2006(01)2.SCHERER R;GODOY H T Antioxidant activity index (AAI) by the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl method 2009(03)3.JIN Jie;LI Zhixi;ZHANG Feng Scavenging function of mulberry vinegar extractives for 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 2006(03)4.OZCELIK B;LEE J H;MIN D B Effects of light,oxygen and pH on the absorbance of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl2003(02)5.BLOIS M S Antioxidant determinations by the use of a stable free radical 19586.BRAND-WILLIAMS W;CUVELIER M E;BERSET C Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity 1995(01)7.SUN T;HO C T Antioxidative activities of buckwhcat extracts 2005(04)8.SHARMA O P;BHAT T K DPPH antioxidant assay revisited 2009(04)9.EKLUND P C;L(A)NGVIK O K;W(A)RN(A) J P Chemical studies on antioxidant mechanisms and free radical scavenging of lignans 2005(18)10.SHIMADA K;FUJIKAWA K;YAHARA K Antioxidative properties of xanthan on the autioxidation of soybean oil in cyclodextrin emulsion 1992(06)11.KUMARAN A KARUNAKARAN R L Antioxidant and free radieal scavenging activity of anaqueous extract of Coleus aromaticus 2006(01)12.KARIOTI A;HADJIPAVLOU-LITINA D;MENSAH M L K Composition and antioxidant activity of the essential oils of Xylopia aethiopica (Dun) A.Rich.(Annonaceae) leaves,stem bark,root bark,and fresh and dried fruits,growing in Ghana 2004(26) 13.KORDALI S;CAKIR A;MAVI A Screening of chemical composition and antifungal and antioxidant activities of the essential oils from three Turkish Artemisia species 2005(05)14.HUANG D J;OU B X;PRIOR R L The chemistry behind antioxidant capacity assays 2005(06)15.FOTI M C;DAQUINO C;GERACI C Electron-transfer reaction of cinnamic acids and their methyl esters with the DPPH@ radical in alcoholic solutioos 2004(07)16.VILLA(N)O D;FERN(A)NDEZ-PACH(O)N M S;MOY(A) M L Radical scavenging ability of polyphenolic compounds towards DPPH free radical 2007(01)17.CHANDRASEKAR D;MADHUSUDHANA K;RAMAKRISHNA S Determination of DPPH free radical scavenging activity by reversed-phase HPLC:a sensitive screening method for polyherbal formulations 2006(02)18.SUN L Q;DING X P;QI J Antioxidant anthocyanins screening through spectrum-effectrelationships and DPPH-HPLC-DAD analysis on nine cultivars of introduced rabbiteye blueberry in China 2012(02)19.ZHAO G;PENG L;WANG S HPLC fingerprint:antioxidant properties study of buckwheat 2012(07)20.ZHANG Yuping;SHI Shuyun;WANG Yuanxi Target-guided isolation and purification of antioxidants from Selaginella sinensis by offiine coupling of DPPH-HPLC and HSCCC experiments 2011(02)21.WETTASINGHE M;SHAHIDI F Scavenging of reactive-oxygen species and DPPH free radicals by extracts of borage and evening primrose meals 2000(01)22.ZALIBERA M;STA(S)KO A;(S)LEBODOV(A) A Antioxidant and radical-scavenging activities of Slovak honeys:an electron paramagnetic resonance study 2008(02)23.AWAH F M;UZOEGWU P N;OYUGI J O Free radical scavenging activity and immunomodulatory effect of Stachytarpheta angustifolia leaf extract 2010(04)24.CIE(S)LA L;KRYSZE(N) J;STOCHMAL A Approach to develop a standardized TLC-DPPH@ test for assessing free radical scavenging properties of selected phenolic compounds 201225.GIL M I;TOMAS-BARBERAN F A;HESS-PIERCE B Antioxidant activity of pomegranate juice and its relationship with phenolic composition and processing 2000(10)26.TANG D;LI H J;CHEN J Rapid and simple method for screening of natural antioxidants from Chinese herb Flos Lonicerae Japonicae by DPPH-HPLC-DAD-TOF/MS 2008(20)27.THAIPONG K;BOONPRAKOB U;CROSBY K Comparison of ABTS,DPPH,FRAP,and ORAC assays for estimating antioxidsnt activity from guava fruit extracts 2006(6/7)28.LOCATELLI M;GINDRO R;TRAVAGLIA F Study of the DPPH@-scavenging activity:Development of a free software for the correct interpretation of data 2009(03)29.MISHRA K;OJHA H;CHAUDHURY N K Estimation of antiradical properties of antioxidants using DPPH@ assay:a critical review and results 2012(04)30.LIM Y Y;LIM T T;TEE J J Antioxidant properties of several tropical fiuits:a comparative study 2007(03)31.CHEN Z;BERTIN R;FROLDI G EC50 estimation of antioxidant activity in DPPH@ assay using several statistical programs 2013(01)32.DAWIDOWICZ A L;WIANOWSKA D;OLSZOWY M On practical problems in estimation of antioxidant activity of compounds by DPPH@ method (Problems in estimation of antioxidant activity) 2012(03)33.AYRES G H Evaluation of accuracy in photometric analysis 1949(06)34.SLOANE H J;WILLIAM S G Spectrophotometric accuracy,linearity and adherence to Beer's law 1977(01)35.ELZAAWELY A A;XUAN T D;TAWATA S Essential oils,kava pyrones and phenolic compounds from leaves and rhizomes of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.Burtt and R.M.Sm and their antioxidant activity 2007(02)36.DENG J;CHENG W Y;YANG G Z A novel antioxidant activity index (AAU) for natural products using the DPPH assay 2011(04)37.BAYDAR N G;OZKAN G;YASAR S Evaluation of the antiradical and antioxidant potential of grape extracts 2007(09)38.AZEVEDO J;FERNANDES I;FARIA A Antioxidant properties of anthocyanidins,anthocyanidin-3-glucosides and respective portisins 2010(02)39.AL-DABBAS M M;AL-ISMAIL K;KITAHARA K The effects of different inorganic salts,buffer systems,and desalting of Varthemia crude water extract on DPPH radical scavenging activity 2007(02)40.RUBERTO G;RENDA A;DAQUINO C Polyphenol constituents and antioxidant activity of grape pomace extracts from five Sicilian red grape cultivars 2007(01)41.XU J;CHEN S;HU Q Antioxidant activity of brown pigment and extracts from black sesame seed (Sesamum indicum L.) 2005(01)42.MOLYNEUX P The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity 2004(02)43.LIU D H;SHI J;IBARRA A C The scavenging capacity and synergistic effects of lycopene,vitamin E,vitamin C,and b-carotene mixtures on the DPPH free radical 2008(07)44.TEOW C C;TRUONG V D;MCFEETERS R F Antioxidant activities,phenolic and β-carotene contents of sweet potato genotypes with varying flesh colours 2007(03)45.CUI Y;KIM D S;PARK K C Antioxidant effect of Inonotus obliquus 2005(1/2)46.MEDA A;LAMIEN C E;ROMITO M Determination of the total phenolic,flavonoid and proline contents in Burkina Fasan honey,as well as their radical scavenging activity 2005(03)47.YUAN Y V;BONE D E;CARRINGTON M F Antioxidant activity of dulse (Palmaria palmata) extract evaluated in vitro 2005(03)48.LI H Y;DENG Z Y;ZHU H H Highly pigmented vegetables:Anthocyanin compositions and their role in antioxidant activities 2012(01)49.GUIL-GUERRERO J L;MART(I)NEZ-GUIRADO C;REBOLLOSOFUENTES M M Nutrient composition and antioxidant activity of 10 pepper (Capsicum annuun) varieties 2006(01)50.S(A)NCHEZ-MORENO C;LARRAURI J A;SAURA-CALIXTO F A procedure to maesure the antiradical efficiency of polyphenols 1998(02)51.MAGALH(A)E L M;SEGUNDO M A;REIS S Automatic method for determination of total antioxidant capacity using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl assay 2006(1/2)52.LITWINIENKO G;INGOLD K U Abnormal solvent effects on hydrogen atom abstraction.1.The reactions of phenols with 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH·) in alcohols 2003(09)53.ROBERTO L S Organic acids influence on DPPH@ scavenging by aseorbic acid 2008(01)引用本文格式：韦献雅.殷丽琴.钟成.章明海.牛应泽.WEI Xian-ya.YIN Li-qin.ZHONG Cheng.ZHANG Ming-hai.NIU Ying-ze DPPH法评价抗氧化活性研究进展[期刊论文]-食品科学 2014(9)。

筛选和评价天然抗氧化剂的方法-DPPH法

筛选和评价天然抗氧化剂的方法-DPPH法
王会
【期刊名称】《广州化工》
【年(卷),期】2013(041)022
【摘要】从植物中筛选和提取天然抗氧化剂是食品科学研究的热点,用于筛选抗氧化剂、评价抗氧化活性的方法也随之增多.DPPH法是普遍采用的方法之一,此法使用稳定的自由基DPPH筛选抗氧化剂、评价抗氧化效果.本文对DPPH法的原理、操作过程、表示测定结果的方法及该法的特点及应用进行了概括,并对影响测定结果的因素进行了探讨.
【总页数】4页(P30-32,42)
【作者】王会
【作者单位】河南化工职业学院应用化学系,河南郑州450042
【正文语种】中文
【中图分类】O629
【相关文献】
1.天然抗氧化剂在重组牛肉干中应用效果的评价 [J], 何腊平;龚进;胡斌;朱秋劲
2.天然抗氧化剂的筛选 [J], 翁新楚;任国谱
3.系统筛选与评价作为天然产物-药物相互作用药代动力学沉淀剂的天然产物的方法（英文） [J], Mary F PAINE
4.适宜于花生酱抗氧化应用的天然抗氧化剂筛选 [J], 王娴;崔龙;范家霖;董威杰;许勃;彭乃卫;陈云堂
5.一种评价天然抗氧化剂对羟自由基致DNA损伤保护作用的改进方法 [J], 曹炜;陈卫军;郑晓晖;郑建斌
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DPPH在抗氧化活性评价中的应用

DPPH在抗氧化活性评价中的应用DPPH（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl）是一种广泛用于评价抗氧化活性的自由基。

DPPH自由基是一种稳定的紫色自由基，其吸收峰位于波长517 nm。

其吸光度随着还原剂的加入而减小，可用于测定抗氧化剂的能力。

1.抗氧化剂的选择和筛选：DPPH法是一个简单且经济的方法，可以有效地评价天然产物、食品添加剂、药物、化妆品和其他化合物的抗氧化活性。

通过与DPPH自由基的反应，可以量化评价抗氧化剂的能力，通常以IC50（抑制50%的浓度）作为评价指标。

IC50越小，表明抗氧化剂的抗氧化活性越强，推荐进一步的研究。

2.抗氧化剂的相关性研究：DPPH法可用于评价抗氧化剂与其他营养物质或化学物质之间的相互作用。

通过与DPPH自由基的反应，可以评估不同化合物之间的相互作用，从而了解它们对抗氧化过程的贡献程度。

这有助于揭示一些抗氧化剂的混合物或复杂多组分体系中的相互作用机制。

3.抗氧化剂的稳定性评价：DPPH法可以用来评估不同条件下抗氧化剂的稳定性，如光照、温度和pH值等。

通过检测其吸光度的变化，可以了解抗氧化剂在不同条件下的稳定性，并选择合适的条件来保护抗氧化剂的稳定性。

4.抗氧化剂的动力学研究：DPPH法还可用于研究抗氧化剂与DPPH自由基之间的反应动力学。

通过测定DPPH与抗氧化剂反应的速率常数，可以了解化合物与DPPH自由基的反应速率，并推测其机制和反应类型。

5.新型抗氧化剂的发现：DPPH法可以广泛应用于天然产物的抗氧化活性筛选，有助于发现新型的抗氧化剂。

通过检测化合物与DPPH自由基的反应，可以评估它们的抗氧化能力，并筛选出具有潜力的新型抗氧化剂。

总之，DPPH法是一种简单、快速且有效的方法，已在抗氧化活性评价中得到广泛应用。

它可以用于抗氧化剂的筛选和选择、抗氧化剂与其他物质的相关性研究、抗氧化剂的稳定性评价、抗氧化剂的动力学研究和新型抗氧化剂的发现。

DPPH法评价抗氧化活性研究进展

DPPH法评价抗氧化活性研究进展一、本文概述随着人们对健康生活的追求和对疾病预防的重视，抗氧化剂的研究和应用逐渐成为科学研究的热点。

DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）法作为一种简便、快速、高效的抗氧化活性评价方法，在抗氧化剂筛选、食品营养评价、药物研发等领域得到了广泛应用。

本文旨在综述DPPH法在评价抗氧化活性方面的研究进展，包括其基本原理、实验操作、影响因素以及应用实例等方面，以期为该领域的研究者提供全面的参考和借鉴。

通过本文的阐述，读者可以深入了解DPPH法的优势与局限性，进一步推动抗氧化活性评价方法的优化与创新。

二、DPPH法的基本原理DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）法是一种常用的体外抗氧化活性评价方法，其基本原理基于DPPH自由基的稳定性和颜色变化。

DPPH 自由基是一种紫色的有机自由基，其溶液在517nm处具有强吸收峰。

当抗氧化物质存在时，它们可以通过提供氢原子或电子来与DPPH自由基发生反应，从而使其颜色由紫色变为黄色，最大吸收峰也随之降低。

这种颜色变化与DPPH自由基被清除的程度成正比，因此可以通过测定反应前后溶液吸光度的变化来评价抗氧化物质的活性。

DPPH法具有操作简便、快速、灵敏度高和重现性好等优点，因此在抗氧化活性评价中被广泛应用。

DPPH自由基是一种脂溶性的自由基，可以模拟生物体内多种自由基的反应，因此DPPH法也具有一定的生理意义。

然而，需要注意的是，DPPH法仅是一种体外评价方法，其结果并不能完全代表抗氧化物质在生物体内的实际抗氧化效果。

因此，在评价抗氧化物质的活性时，还需要结合其他方法进行综合分析。

以上内容仅为简要介绍，如需更深入了解DPPH法的基本原理和应用，建议查阅相关文献或咨询专业人士。

三、DPPH法在抗氧化活性评价中的应用DPPH法作为一种简便、快速、灵敏且可重复性强的方法，已被广泛应用于抗氧化活性的评价中。

该方法基于DPPH自由基的稳定性和其在可见光区具有的特征吸收峰，通过测定待测物与DPPH自由基反应后吸光度的变化，可以推算出待测物的抗氧化活性。

DPPH在抗氧化活性评价中的应用

２０ｌ４年第２Ｏ期第４ｌ卷总第２８６期
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ＤＰＰＨ在抗氧化活性评价中的应用
梁蓉蓉，贾振斌，罗辉，李文杰，李宁
（ｆ ‘ 东医学院，广尔东莞５２３８０８）
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