培养基母液配制
MS培养基母液的配制与保存
仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱；2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签；3、试剂：95%酒精，0.1-1N NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。
方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。
优点：（1）保证各物质成分的准确性。
（2）便于配置时快速移取。
（3）便于低温保藏。
1、MS大量元素母液（10X）称10升量溶解在1升蒸馏水中。
配1升培养基取母液100ml。
化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16．5g②KNO31900 mg/L 19．0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22．3 mg/L（21．4 mg/L）223mg②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml（即含0．25 mg的量）加入到母液中。
3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
9.4.植物培养基母液的配置
一、植物组织培养中的培养基
培养基：培养基是植物细 胞、组织和器官离体培养所需 的营养基质，其中含有植物细 胞生长分化所必需的各种营养 成分和生长调节物质。
固体培养
液体培养
培
水
养
基
无机盐
成 分
有机物
植物激素
培养体支持材料
辅助性物质
二、培养基母液的配置
（一） 母液配置的必要性 将配方中的药品一次称量供一段时间使用，
化学式
KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuLeabharlann O4.5H2O CoCL2.6H2O
用量（mg/l)
0.83 6.2 22.3 8.6 0.25 0.025 0.025
1.减少工作量 2.减少误差 3.便于母液的低温贮藏。
（二）大量元素母液的配置
（三）母液配制流程图
确定培养基
称量
贴标签 保存于冰箱
母液分装
溶解 定容
母液分装、贴标签
母液保存
保存
在冰箱内 低温保存
思考题
如何配置培养基母液？
Thank You!
即配成一些浓缩液，用时稀释，这种浓缩液就是浓 缩贮备液（简称母液）。
每种培养基往往需要十多种化合物，配制 起来很不方便，也很难达到准确和精确，特别 是微量元素和植物生长调节物质用量极少，很 难准确秤量。
微量元素（以MS培养基为例）
序号 化学名称
1
碘化钾
2
硼酸
3
硫酸锰
4
硫酸锌
5
钼酸钠
6
硫酸铜
7
氯化钾
培养基母液的制备
配制2升MS+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，阐述母液配制，培养基配制的全过程（1）母液配制：1确定制备的培养基为MS+琼脂0.6%+蔗糖3%为大量元素培养基，应注意溶解和添加顺序，防止沉淀。
2确定各母液的浓缩倍数，大量母液一般为浓缩10倍有机母液浓缩100倍，即所需配制的大量母液为200ml 微量元素20ml，铁盐20ml，有机元素20ml。
3根据公式：药品称取量（mg）=配方用量x浓缩倍数x母液体积计算出各药品的用量，即琼脂12g、蔗糖60g4用普通天平（1/100）称量药品，称号后的药品要分别放置。
5将药品分别放入烧杯中，分别溶解，经充分溶解后再混匀。
6将混合后的溶液移入容量瓶中，进行定容。
7混合均匀后，将母液转入试剂瓶。
8在试剂瓶上贴上标签，注明母液名称，浓缩和配制日期。
9放入冰箱中低温（2~4度）保存。
（2）培养基的配制：1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别为大量：200ml 微量20ml 铁盐20ml 有机20ml 琼脂12g 蔗糖60g。
2在容器内装相当于1/3左右的纯水，加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，最后加入称量的蔗糖并搅拌均匀。
3加水定容至2L，再搅拌均匀。
4调整培养基的pH5将配制好的培养基尽快分装。
6将分装后的培养基进行封口7用高压灭菌锅进行灭菌。
现在需要你配制2升MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，已知大量元素母液10倍，微量元素母液100倍，铁盐50倍，有机物母液50倍，6-BA母液1mg/ml，NAA母液0.1mg/ml，请你阐述培养基的配制及灭菌的全部过程。
1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别：为大量元素母液200ml，微量元素20ml，有机物40ml，6-BA4ml，NAA2ml，琼脂12g，60g.2在容器内装相当于1/3左右的纯水，在依次加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，6-BA，NAA，蔗糖。
MS培养基母液配方
MS培养基母液配方1、大量元素母液（10倍，1 L）NH4NO316.5 g KH2PO4 1.7 g（单独溶解后混匀）KNO319 g CaCl2·2H2O 4.4 g（单独溶解后混匀）MgSO4·7H2O 3.7 g（单独溶解后混匀）2、微量元素母液（200倍，1 L）KI 0.166 g Na2MoO4·2H2O 0.05 gH3BO3 1.24 g CuSO4·5H2O 0.005 gMnSO4·4H2O 4.46 g CoCl2·6H2O 0.005 gZnSO4·7H2O 1.72 g3、铁盐母液（200倍，500 mL；定容后调pH至5.5，加热至90℃左右螯合15~30 min）EDTA二钠（Na2·EDTA·7H2O） 3.73 gFeSO4·7H2O 2.78 g4、有机母液①（200倍，500 mL）盐酸硫胺素（VB1）0.01 g烟酸0.05 g盐酸吡哆醇（VB6）0.05 g5、有机母液②（200倍，500 mL）肌醇10.0 g6、有机母液③（200倍，500 mL）甘氨酸0.2 g7、植物激素1)0.1mg/mL 的6-BA溶液：取25mg的6-BA，用少量1N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250mL。
2)0.1mg/mL NAA：取25mg的NAA可溶于热水中或用少量95%乙醇或少量1N的NaOH溶解后，再加水定容至250mL。
3)2,4-D：2,4-二氯苯氧乙酸，相对分子量为221.0，用乙醇做助溶剂，cas号为94-75-7，分子式为，C8H6Cl2O30.2mg/mL 的2,4-D溶液：40mg 2,4-D，用少量95%乙醇溶解后，再用蒸馏水定容至200ml。
植物组织培养基母液的配制
植物组织培养基母液的配制
植物组织培养基是培养植物细胞、组织和器官的基础培养介质。
配制
植物组织培养基的母液可以按照以下步骤进行：
1. 准备所需的化学品和试剂，包括无机盐、有机添加剂、维生素和其
他辅助物质。
这些化学品可以根据不同的植物种类和培养目的进行选择。
2. 称取所需的化学品，并依次加入无菌蒸馏水中。
搅拌溶解，直到所
有化学品完全溶解。
3. 调节pH值。
使用pH计测量溶液的pH值，如果需要，可以使用酸
或碱来调节pH值，直到达到所需的pH范围。
4. 向溶液中添加琼脂糖或琼脂糖替代物，作为凝胶剂。
溶解并搅拌直
到完全溶解。
5. 过滤溶液，以去除悬浮固体和杂质。
使用无菌滤纸或滤器进行过滤。
6. 灭菌。
将过滤后的溶液装入无菌烧瓶或容器中，使用高压灭菌器或
自动压力锅进行灭菌，通常在121℃高压下灭菌20-30分钟。
7. 灭菌后，将培养基倒入无菌培养瓶中，密封并保存在冰箱中或低温
环境中。
以上是植物组织培养基母液的配制步骤，具体的操作和配方可以根据
不同的要求和实验目的进行调整。
培养基母液的配制
培养基母液的配制植物在自然状态下生长时，具有完整的营养体，是属于自养型的，很多营养物质可以自制，对外界营养条件的要求比较简单,而在离体条件下生长的植物器官、组织和整体植物不同，属于异养型,要求的营养条件十分复杂,因此在人工合成养基的组成和制备上必须全面考虑，满足供应。
一、实验目的配制培养基母液是植物组织培养的基本技术。
当需要连续和大量配制培养基时,如果每次都称量药品、溶解并定容，工作将十分繁琐，因此需要将大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成适当的浓缩液。
要求拿握植物组织培养培养基母液的配制方法。
二、实验材料仪器冰箱、电子天平(0.0001g)容量瓶: 1000 ml, 500ml、250 ml、100 ml、25 ml广口储液瓶: 500 ml、250ml、50 ml、25 ml烧杯: 1000ml、500ml 、250m、100ml 、50 ml.数十根玻璃搅棒、大药勺、小药勺、标签纸、胶水、记号笔药品50%酒精、95%酒精、1N盐酸(1N盐酸(HC1)的配制:取浓盐酸825ml,加入蒸馏水1000ml,即为IN的HCI)、1 N Na0H(1N氢氧化钠(或氢氧化钾)的配制:称40 gNa0H (或氢氧化钾57.1g)加入蒸馏水100ml ,即为1N的Na0H( IN的K0H)几种常用的培养基所需的大量元素、微量元素、有机物、激素、铁盐等药品、蒸馏水三、实验步骤按照培养基配方，把大量元素、微量元素、铁盐、有机物、植物激素分类，每一类中各种药品分别称量。
如Ms培养基各种母液的配制步骤如下:1、大量元素母液:包括用量较大的几种化合物，按表中排列顺序，将每种药品的用量扩大10倍，分别称取，分别溶解,然后按照顺序混合在一-起。
如钙盐等易发生沉淀的药品不能混合，应单位定容。
最后加上蒸馏水，定容至1升或500毫升。
在定容时注意用蒸馏水洗净烧杯和玻璃棒以减少误差。
定容后的溶液为大量元素母液，配制培养基时，每配1 L培养基需吸取该母液100 m或502、微量元素母液:因用量少,为了称量精确和方便,常配成100倍或100倍的母液,即每种药品扩大100倍或者1000倍。
培养基母液配制中的若干关键环节
培养基母液配制中的若干关键环节培养基母液,也叫浓缩贮备液.它是以培养基配方配制成的高倍的浓缩液,不同组分母液,它的浓缩倍数不同,一般最低为10倍,高的有50倍、100倍、200倍,甚至1000倍.母液是一个方法比较简便、用量比较准确且被广泛采用的配制方法.本文就如何掌握培养基母液配制的操作要领作一阐述,以供参考.以MS培养基为例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类.（见表1）1大量元素和微量元素母液的配制按规定用量,称取所需的各种药品,在配制时为减少工作量,可以把几种药品（如大量元素或微量元素）配在同一母液中（见表1）.但由于各种药品的混合,可能发生反应,生成沉淀物,以致母液失效.为避免类似现象发生,在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时，可采用如下2种做法加以解决：①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物,按“表1”所列药品的先后顺序溶解药品,待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品，以此类推；②使每种成份分别完全溶解,再把它们彼此混合.2铁盐母液的配制铁盐的成份含硫酸亚铁（FeSO4-7H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2-EDTA）.这两种化合物的溶解和混合较为严格,必须按如下方法配制,否则将会产生沉淀.该方法是：分别溶解FeSO4-7H2O和Na2-EDTA,加热并不断搅拌,使之完全溶解,冷却，将2种溶液混合,调PH至5.5,用蒸溜水加至所需容积,棕色瓶保存于冰箱之中.3植物生长调节物质母液的配制植物生长调节物质是培养基的重要组分之一,一般是植物激素类物质,如生长素类的IAA、IBA、NAA,赤霉素类的GA3,细胞分裂素类的2,4-D、KT和6-BA等.由于大多数生长调节物质难溶于水,因此配制方法也各不相同：①IAA,IBA和GA3先用少量95%酒精溶解,再加水定容，摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后，存放在冰箱中；②NAA可用热水或少量95%酒精溶解,再加水定容至所需容积；③2,4-D可溶于少许0.1mol-L-1的NaOH溶液中,然后加水定容；④KT和6-BA可用少量0.1mol•L-1的HCl溶解,再加水定容；⑤玉米素先溶于少量95%酒精中,然后加水定容.植物生长调节物质浓度通常用ppm（mg•ml-1）和mo l•L-1表示,在配制母液时，常以ppm较为方便,一般配制成0.5ppm的母液,这个浓度既便于计算,也可避免冷藏时形成结晶.4有机附加物母液的配制在植物组织培养时,培养基中往往要加入一些有机附加物,如椰子汁,以促进组织培养活性.由于椰子汁的活性成分是耐热的,在配制时,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于的-20℃的低温冰箱内.MS培养基配制中的五点注意1母液配制必须严格分类配制高浓度的母液是植物组织培养的基本功。
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法一、实验目的1.了解无菌操作2.掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
三、实验器材和药品器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。
药品：NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素B1)、甘氨酸。
四、实验步骤1、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。
后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。
到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表1 MS培养基大量元素母液制备序号药品名称培养基浓度（mg/L）扩大10称量(mg)1NH4NO31650165002KNO31900190003CaCl2·2H2O44044004MgSO4·7H2O37037005KH2PO41701700注意：(1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。
为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。
特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
MS培养基母液的配制与保存
实验一MS培养基母液的配制与保存一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能；2、掌握培养基各种母液的保存方法。
二、仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱；2、用具：烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签；3、试剂：95%酒精，0. 1 -1N NaOH，0.1-1N HCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。
三、方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。
优点：（1）保证各物质成分的准确性；（2）便于配置时快速移取；（3）便于低温保藏。
1、MS大量元素母液（10×）称10升量溶解在1升蒸馏水中。
配1升培养基取母液100ml。
化学药品1升量10升量（10×）50升量（50×）①NH4NO31650 mg 16.5g②KNO31900 mg 19.0g③CaCl2·2H2O （CaCl2）440 mg （） 4.4g④MgSO4·7H2O（MgSO4）370 mg （） 3.7g⑤KH2PO4170 mg 1.7g2、MS微量元素母液（100×）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量100升量（100×）①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22.3mg（21.4 mg）223mg（214 mg）②ZnSO4·7H2O8.6 mg 86mg③H3BO3 6.2 mg 62 mg④KI 0.83 mg 8.3 mg⑤Na2MoO4·2H2O0.25 mg 2.5mg⑥CuSO4·5H2O0.025 mg 0.25mg⑦CoCl2·6H2O0.025mg 0.25mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0.25 mg×10=2.5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0.25 mg的量。
MS培养基母液的配制与保存
仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱；2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签；3、试剂：95%酒精，0.1-1N NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。
方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。
优点：（1）保证各物质成分的准确性。
（2）便于配置时快速移取。
（3）便于低温保藏。
1、MS大量元素母液（10X）称10升量溶解在1升蒸馏水中。
配1升培养基取母液100ml。
化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16．5g②KNO31900 mg/L 19．0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22．3 mg/L（21．4 mg/L）223mg②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml（即含0．25 mg 的量）加入到母液中。
3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
培养基母液的配制
主题二 培养基及其制备
任务二培养基母液配制
知识回顾
水
N、P、K 大量元素
活性物质 （植物激素）
培养基
无机盐
Ca、Mg、S
微量元素 糖 维生素 Fe、Mn、Zn 、B 、Cu 、Mo
支持物质
有机物质
肌醇 氨基酸 有机添加物
任务二培养基母液配制中浓度问题 及相关计算
知识回顾
相当于土壤，提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质 与土壤相比较，培养基缓冲性能很小，所以要求培养基各成分浓度精确
母液
母液1
成分
NH4NO3 KNO3 CaCl.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4.
浓缩倍数
10
浓度g/L
16.5 19 4.4 3.7 1.7
配制母液 毫升数
各成分的质量（g）
1000
母液2
KI H3BO4 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2.MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O
表2-1（P20）大量元素20倍浓缩液NH4NO3 浓度为 33000 mg/L表示1L培养基中质量为33000mg，即33g. CuSO4.5H2O0.05mg/L表示1L培养基中质量为0.05mg，即 10－5 g。
什么是培养基母液？
母液：即贮备液，指培养基配制时欲配制液的 浓缩液，一般母液配成比所需浓度放大10-100 倍。 这样不但可以保证各物质成分称量的精准性及 配制时的快速移取，而且浓缩液体积小便于低 温保藏。 母液配制时比所需浓度放大X倍，在配制培养 基时按配制培养基的体积（V升）的V/X吸取 母液即可。
0.86
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法一、实验目的1.了解无菌操作2.掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
三、实验器材和药品器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。
药品：NH4NO、KNO3CaCI2 •2H2O MgS04・ 7H2Q KH2PO、KI、H3BO3MnSO44H2O ZnSO4•7H2ONa2MoO4?H2O CuSO45H2OCoCI2 •6H2OFeSO4 7H2O Na2-EDTA・ 2H2O肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇（维生素B6）、盐酸硫胺素（维生素B1）、甘氨酸。
四、实验步骤1 、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。
后用蒸馏水定容到1000ml的容量瓶中,即为10倍的大量元素母液。
到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表1 MS培养基大量元素母液制备注意:(1)配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+ SO42-、Mg 2+和H2PO4-等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。
为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。
特别应将Ca2+、SO42—、Mg2十和H2PO4 一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
(2)CaCI2 • 2H2O 要在最后单独加入，在溶解 CaCI2 • 2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的 CO2以防沉淀。
另外，CaCI2 • 2H2O 放 入沸水中易沸腾，操作时要防止其溢出。
2、微量元素母液的配制MS 培养基的微量元素无机盐由7种化合物(除Fe )组成。
培养基母液配制
培养基母液的配制（一）激素母液由于多数生长调节物质难溶于水，因此配法各不相同，激素母液可以在2~4℃冰箱中保存。
在配制药品前，应准备好一定容积的小烧杯、玻璃棒，用纯净水冲洗干净方可使用：1、IAA、IBA、GA3、ZT可先用少量95%酒精溶解，再加水定容，摇匀后贮于试剂瓶中，贴上标签。
2、2,4-D、KT、可用少量10%的Noah溶解，再加水定容。
3、6-BA可用少量1mol/LHCl溶解后，再加水定容。
4、NAA可溶于热水或少量95%酒精中，再加水定容至一定体积。
5、1mg/ml的2.4-D的配制：称取0.1g2,4-D，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
6、1mg/ml的6BA的配制：称取0.1g6-BA，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
7、1mg/ml的NAA的配制：称取0.1gNAA，用少量95%酒精助溶，然后定容到100ml容量瓶中。
8、1mol/L的HCl的配制：量取83.3ml盐酸加水稀释定容至1L。
（一般、组培室用量少，配制500ml即可，即：称取盐酸41.65ml 稀释定容至500ml。
配制盐酸时。
需要带口罩、戴手套。
）9、10%的NaOH的配制：称取10gNaOH，加少量纯净水溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
10、HgCl2 的配制：称量1g的HgCl2，加热水后进行溶解定容至1L。
二、培养基配制配错培养基造成的危害比组培技术中其他任何失误都大。
因此，配制培养基和称取其他成分必须绝对小心。
为了降低配错培养基的风险，最好准备一张纸，详细地写出配制培养基过程中所需的成分和配置步骤。
每配完一种成分或配完一种母液，划掉相应的记录。
1、一般而言，分化配方的配制：除萱草琼脂为5.5g/L外，其它植物为琼脂5g/L。
白糖为30g/L。
母液粉为4.74g/L。
用自己配制的母液配培养基时，大量母液（1号）50ml/L，微量（2~5号为5 ml/L）。
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法培养基是用于细胞培养的基础营养物质，它为细胞提供适当的营养和环境条件，以促进细胞的生长和繁殖。
培养基母液是制备培养基的初始液体，下面是一种常见的培养基母液的配制方法。
配制培养基母液的材料和设备：1.高质量的培养基成分：如氨基酸、维生素、无机盐、糖、有机酸等。
2.纯净的水：可以使用去离子水或高纯水。
3.称量器具：称量天平、量筒等。
4.搅拌装置：磁力搅拌器或振荡器等。
5.固液分离装置：滤纸、滤膜或离心管等。
6.灭菌工具：如高压灭菌锅、紫外线灭菌仪等。
具体步骤如下：步骤1：准备工作-清洗和消毒工作台和必要的玻璃器皿，如量筒、烧杯、磁力搅拌器等。
-检查所需材料和设备是否完整，以防止操作过程中的中断。
步骤2：配制培养基1.按照所需培养基配方中各成分的质量比例，用称量天平准确称量各成分。
2.使用量筒或烧杯，加入适量的纯净水。
3.将已称量的培养基成分加入水中。
根据配方要求的顺序，加入各成分并充分搅拌混合。
4.搅拌速度和时间根据配方要求进行调整，使各成分充分溶解并均匀分布。
步骤3：过滤和灭菌1.准备好合适的滤纸或滤膜，并放置在过滤装置中。
可以根据需要使用多次过滤或组合过滤器设备以获得更好的过滤效果。
2.调整过滤装置的设置，使培养基缓慢通过过滤器，以避免气泡的产生。
可以使用真空过滤或重力过滤方法，根据实际情况进行选择。
3.检查过滤结果，确保培养基没有异物或沉淀物。
4.准备好灭菌容器，如离心管或高压灭菌锅。
将过滤后的培养基倒入容器中，并盖好盖子。
5.使用适当的灭菌设备对培养基进行灭菌处理。
可以使用高压灭菌锅、摇床灭菌、紫外线灭菌等方法。
步骤4：保存和使用1.灭菌后的培养基母液应存放在适当的条件下，如低温、阴凉和无光照的环境中，以保持其质量。
2.在使用前，应对培养基进行适当的质量控制，如pH值检测、无菌条件下培养等。
总结：以上是一个常见的培养基母液的配制方法。
在实际操作中还要根据所需培养基的种类和配方进行合理选择和调整。
母液和培养基的配制
母液和培养基的配制在实验中常用的培养基，可将其中的各种成分配成10倍、100倍的母液，放入冰箱中保存，用时可按比例稀释。
配制母液有2点好处：一是可减少每次配制称量药品的麻烦，二是减少极微量药品在每次称量时造成的误差。
母液可以配单一化合物母液，但一般都配成以下四种不同混合母液。
应注意以下几个方面：A.药品称量应准确，尤其微量元素化合物应精确到0.0001克，大量元素可精确到0.01克。
B.配制母液的浓度适当，一是长时间保存后易沉淀，二是浓度大，用量少，在配制培养基时易影响精确度。
C.母液贮藏不宜过长，一般几个月左右，要定期检查，如出现浑浊、沉淀及霉菌等现象，就不能使用。
D.母液应放在2－4℃的冰箱中保存。
(1)大量元素混合母液:指浓度大于0.5mmol／L的元素,即含N、P、K、Ca、Mg、S等六种盐类的混合溶液，可配成10倍母液，用时每配1000ml取100ml母液，配时要注意以下几点：a.各化合物必须充分溶解后才能混合。
b.混合时注意先后顺序，特别要将钙离子与硫酸根离子，磷酸根离子错开，以免产生硫酸钙、磷酸钙等不溶性化合物沉淀。
c.混合时要慢，边搅拌边混合。
(2)微量元素混合母液:指小于0.5mmol／L的元素即含除Fe以外的B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等盐类的混合溶液，因含量低，一般配成100倍甚至1000倍，用时每配1000ml取10ml或1ml。
配时也要注意顺次溶解后再混合，以免沉淀。
(3)铁盐母液:铁盐必须单独配制，若同其他无机元素混合配成母液，易造成沉淀。
配法是将5.57g FeSO4.7H2O水溶液缓慢加入到7.45gNa2－EDTA微沸水溶液中，并不断搅拌，最后定容到1000ml，用时每配1000ml培养基取5ml。
（4）有机化合物母液：主要是维生素和氨基酸类物质，这些物质不能配成混合母液，一定要分别配成单独的母液，其浓度有每ml含0.1、1.0、10mg化合物，用时根据所需浓度适当取用。
培养基母液配制
一.大量元素(10倍液)：称取下列药品分别溶解定容到1升后，加到5升存储瓶中。
KNO3 95gNH4NO3 82.5gKH2PO4 8.5gMgSO4•7H2O 18.5gCaCl2•2H2O 22.0g注意事项：1配置母液前要仔细清洗存储容器2.应按照顺序分别彻底溶解后混合，每加完一种药品，摇动存储瓶使其混合均匀；3.溶解时最好加热，以便充分溶解，避免沉淀的产生；4.夏季要用新制的蒸馏水，并加热，这样可以避免因为水中带菌量过大而产生沉淀，同时可以减缓绿藻的生成；5.沉淀的产生一是由于溶解不充分就混合造成的（浑浊型沉淀），所以配置时一定不要急；二是由于长菌而产生絮状沉淀，所以要用新制的蒸馏水并加热。
二.微量元素母液的配制(100倍)：取少量(200-300ml)温水依次加入下列药品，每加一种药品后搅拌溶解，最后定容到1L：KI 0.083gH3BO3 0.62gZnSO4*7H2O 0.86gNaMoO4*2H2O 0.025gCuSO4*5H2O 0.0025gCoCl2*6H2O 0.0025gMnSO4*4H2O 2.23g (MnSO4*H2O 1.69g)注意：配好后在室温下放置10 h以上再放入冰箱保存，即刻放入冰箱易产生结晶沉淀。
配制过程中产生沉淀的原因有：1. 前一个没彻底溶解就加入了后一个药品；2. 蒸馏水pH 值过高，可加几滴盐酸校正。
三.甘氨酸和肌醇的配制(100倍):甘氨酸: 0.2g溶解定容到一升; 肌醇: 10g溶解定容到一升。
四.铁盐的配制（100倍）:称取EDTA 3.73 g , FeSO4·7H2O 2.78 g , 分别溶解后混合定容到1L,放入棕色细口瓶中,室温放置10 h以上（防止结晶沉淀），然后放入4℃冰箱。
五.维生素B的配制（100倍）：改良MT：VB1（盐酸硫氨素）1g, MS： 10mgVB6 (盐酸吡哆素) 1g , 50mgVB5 (烟酸) 0.5g, 50mg分别称取顺序溶解在温热的蒸馏水中，定容到1升。
植物培养基母液的配制
实验1 培养基母液的配制一、实验目的掌握培养基母液的配制方法。
二、实验原理配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例，所需配制的母液可分为MS 大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。
另外，还要配制生长调节物质母液，在不同类型的培养基中使用。
三、实验器具和药品电子分析天平、扭力天平、烧杯（50mL、100mL、500mL、1000mL）、量筒（1000mL、100mL、25mL）、容量瓶（1000mL、500mL、100mL）、磨口试剂瓶（500mL、1000mL）、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉（1000W）、冰箱。
配制MS培养基所需药品按培养基的配方准备。
植物生长调节物质2，4-D、NAA、6-BA 等。
四、培养基母液的配制过程首先，按书中MS培养基的配方，将各种母液根据各自的扩大倍数，计算出扩大后的称取量，然后分别进行药品称取和母液配制。
具体操作如下：（1）MS大量元素母液（20倍）的配制。
按照MS培养基的用量扩大20倍，将大量元素配制成20倍的母液。
配制时先用量筒量取蒸馏水大约800mL，放入1000mL的烧杯中，依次分别称取：NH4NO3 33g 、KNO3 38g、KH2PO4 3.4g、MgSO4.7H2O 7.4g 、CaCl2.2H2O8.8g,按顺序先后倒入烧杯中，用玻璃棒搅动，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入1000mL的容量瓶中，用蒸馏水定容至1000mL，然后倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名，置于4摄氏度冰箱保存备用。
配制培养基时每升MS培养基吸取该母液量为50mL。
（2）MS微量元素母液（100倍）的配制。
实验1 培养基母液的配制
如肌醇用量较大，可配制成10—20吨／mL的母液浓度。这类物质的称量，必
须用感量为0．0001 g的电光分析天平。
咖5m栅I船1m
96 4 3 1
溶解各种有机化合物所用的溶剂不同，必须注意。例如配制生长素类，如
2,4-D、萘乙酸、吲哚乙酸等，应先用少量1—2mL95％酒精溶解，然后用重
泛酸钙
蔗糖
NH4N03(硝酸铵)
KN03(硝酸钾)
KH2P04(磷酸二氢钾)
MgS04·7H20(硫酸镁)
CaCl2(氯化钙)
xFeS04·7H20(硫酸亚铁)
xNq皿U＼(乙二胺四乙酸牛内)
MnS04·4H20(硫酸锰)
ZnS04．9H20(硫酸锌)
HaB03(硼酸)
Ⅺ(碘化钾)
Na2M004·2H20(钼酸钠)
KCl(氯化钠)
MgS04·7H20(硫酸镁)
NaaS04(硫酸钠)
NaH2P04·21420(磷酸二氢钠)
MnS04·4H20(硫酸锰)
Na2M004·2H20(钼酸钠)
CuS04·5U20(硫酸铜)
Pe(C6U507)·3H20(柠檬酸铁)
烟酸
甘氨酸
盐酸吡哆素(维生素B6)
盐酸硫铵素(维生素B1)
2,4-D
盯
蔗糖
琼脂
0．4 nag／L
0．5 mg／L
0．S mg／L
2 mg／L
100 mg／L
0．5 mg／L
1 mg／L
20 g／L
8 g／L
10倍液
100倍液
5 mL／L
1 mg／mL
培养基母液的配制计算题
培养基母液的配制计算题
培养基母液的配制计算是生物实验中的重要环节，其准确性和精确性直接关系到实验结果的可靠性，因此，有必要对其进行科学的配制。
培养基母液的配制计算主要是根据培养基母液的成分按照一定的比例进行配制，其主要步骤如下：第一步，计算培养基母液的总容量。
首先，根据实验所需要的总量，确定培养基母液的总容量，比如，要配制1000ml的培养基母液，则总容量为1000ml。
第二步，计算每种成分的加入量。
根据培养基母液的配方，确定各成分的加入量，比如，配制1000ml的培养基母液，其
中需要加入50g蛋白粉，则该蛋白粉的加入量为50g。
第三步，按照计算的比例加入每种成分。
按照计算的比例，将各成分分别加入到培养基母液中，比如，将50g蛋白粉加入到1000ml培养基母液中。
第四步，搅拌均匀。
将加入到培养基母液中的所有成分搅拌均匀，使它们充分混合，比如，将加入到1000ml培养基母
液中的50g蛋白粉搅拌均匀。
第五步，进行灭菌处理。
将配制好的培养基母液灭菌处理，以防止细菌的污染，比如，将1000ml培养基母液置于灭菌仪
中进行灭菌处理。
以上是配制培养基母液的主要步骤，其中每一步都非常重要，必须按照计算的比例进行，以保证培养基母液的质量。
此外，在配制培养基母液时，还要注意选择优质的原料，以保证实验数据的准确性和精确性。
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培养基母液配制
培养基配制通常先根据各组分性质，配制成较浓的母液（母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍），贮存在冰箱中备用，以后配制培养基时根据用量量取。
由于培养基成分较多，如果每配制一次即进行多次称量（不少成分用量较微），不仅会造成较大的误差，而且会增加工作量，因而配制母液可使培养基配制方便准确。
配制大量成分母液通常为原培养基浓度的20、50或100倍，倍数不宜过高。
MS培养基母液及培养基配方法参考表2。
大量成分母液经常将CaCl2·2H2O单独配制保存，以免长期贮存发生沉淀。
若将全部大量成分配在一起时，为防止在混合时发生沉淀，须在各药品充分溶解后，按表中化合物出现顺序混合，氯化钙最后加入，以免与硫酸镁形成沉淀.大量成分称量溶解后，在1000 ml容量瓶中定容，然后移入磨口瓶中，贴上标签，置于普通冰箱（4℃）贮存。
微量元素母液配制时，由于培养基中微量元素用量甚微，浓度为~l，所以母液浓度宜为原培养基配方中用量的100倍。
一般将微量元素分别称量溶解，定容在1000 ml容量瓶中后贮存在一个细口瓶中，但也有将KI分别配制，单独贮存在棕色瓶中。
配好后，贴上标签，贮存于4℃冰箱。
培养基中的铁盐母液一般单独配制。
目前常用的铁盐为硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二纳的螯合物。
称取Na2-EDTA g，FeSO4 ·2H2O g，分别溶解（可加热），然后混合定溶于1000 ml容量瓶中。
转入细口瓶，贴上标签，4℃冰箱中保存。
氨基酸和维生素等有机成分母液可配制时，母液浓度通常为原培养基配方的50倍（或100）。
常用氨基酸和维生素为水溶性物质，可用蒸馏水溶解，但叶酸要先用少量稀碱或稀氨水溶解，然后用重蒸馏水定容。
配制好后，转入细口瓶，贴上标签，-20℃（或4℃）冰箱中保存。
植物生长调节物质如生长素类和细胞分裂素类可以根据需要，灵活设计其浓度，一般为、、、或1 mg/l。
如配 mg/l NAA母液，称25 mg NAA溶于50 ml 重蒸馏水，或50 mg的NAA定溶于100 ml重蒸馏水中。
IAA要用棕色瓶暗中贮存，以免光照分解。
常用植物生长调节物质和维生素特征见表3。
生长素为醇溶性物质，配制时，应用少量95%酒精或稀碱溶解，然后用重蒸馏水溶解定容；细胞分裂素应先用少量1 N NaOH或HCl溶解，然后用重蒸馏水定容。
配制好的母
液放置在4℃普通冰箱中备用。
这些母液保存时间不宜过长，当出现沉淀、浑浊及霉菌团时，应重新配制。
椰乳中因含有许多种细胞分裂素物质，如KT类似物
（9-β-D-ribofuranosylzeatin）、玉米素及玉米素核糖甙等，有时可与细胞分裂素相互代替。
采集到椰子时，应检查其汁液（保证没有变质），煮沸，滤纸过滤掉蛋白，高温高压消毒，贮存在-20℃下备用。
有时可直接加入培养基。
酵母提取液也一般也现用现配，称量酵母粉后，加热至沸腾30分钟，过滤去渣。
注意：
使用电子分析天平时注意不要把药品撒到称盘上，用完以后，用吸耳球将天平内的脏物清理干净。
3、铁盐母液的配制
铁盐不是都需要单独配成母液，如柠檬酸铁，只需和大量元素一起配成母液即可。
目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液。
这种螯合物使用起来方便，又比较稳定，不易发生沉淀。
配制方法同上，直接用蒸馏水加热搅拌溶解，定容至1L。
配制培养基时，配制1L取此液10ml。
表4 MS铁盐母液的配制
5、激素母液配制
植物组织培养中使用的激素种类及含量需要根据不同的研究目的而定。
一般激素母液的配制的终浓度以ml为好，需要注意的是：
（１）配制生长素类，例如IAA、NAA、、6BA，应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解，或者用 1mol/L的NaOH溶解，然后用蒸馏水定容到一定的浓度。
（２）细胞分裂素，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解，再用蒸馏水定容。
（３）配制生物素，用稀氨水溶解，然后定容。
注意：
所有的母液都应保存在0~4℃冰箱中，若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。
植物组织培养的必要条件
录入时间:2011-7-19 13:59:05 来源：生技网
（一）温度：对大多数植物组织20～28℃即可满足生长所需，其中26～27℃最适合。
（二）光：组织培养通常在散射光线下进行。
光的影响可导致不同的结果。
有些植物组织在暗处生长较好，而另一些植物组织在光亮处生长较好，但由愈伤组织分化成器官时，则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和根。
有些次生物质的形成，光是决定三因素。
（三）渗透压：渗透压对植物组织的生长和分化很有关系。
在培养基中添加食盐、蔗糖、甘露醇和乙二醇等物质可以调整渗透压。
通常1～2个大气压可促进植物组织生长，2个大气压以上时，出现生长障碍，6个大气压时植物组织即无法生存。
（四）酸碱度：一般植物组织生长的最适宜pH为5～6．5。
在培养过程中pH可发生变化，加进磷酸氢盐或二氢盐，可起稳定作用。
（五）通气：悬浮培养中细胞的旺盛生长必须有良好的通气条件。
小量悬浮培养时巨常转动或振荡，可起通气和搅拌作用。
大量培养中可采用专门的通气和搅拌装置。