吸光度法测定花青素含量
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吸光度法测定花青素含量
一、试验器材
1 材料与试剂
花青素标样;体积分数95%的乙醇;盐酸、甲醇、正丁醇、硫酸铁铵,均为分析纯。
2 仪器与设备
超声波细胞粉碎机、微波炉、低速大容量多管离心机、UV—1200 型紫外可见分光度计、pHS—3C型酸度计、RE—52型旋转蒸发仪、电子恒温水浴锅。
二.
1、标准曲线的绘制
准确配制质量浓度为0.50 mg/mL的花青素标准溶液,分别吸取0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mL置于6支10mL具塞比色管中,各加入甲醇溶液至1.0mL,然后加入6.0mL正丁醇—盐酸溶液(体积比为95∶5)和0.2mL质量分数为2%的硫酸铁铵溶液(临用时配制),摇匀后,置沸水浴中加热40 min,然后迅速冷却,在波长400~600 nm处进行扫描,确定其最大吸收波长530nm,于最大吸收波长处测定花青素标准溶液吸光度,得到标准曲线方程。将待测溶液在最大吸收波长下的吸光度值(平行6次)。再通过标准曲线得出其浓度。