人肿瘤坏死因子α(TNF-α)说明书
肿瘤坏死因子-α 正常水平
肿瘤坏死因子-α正常水平肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-alpha，TNF-α）是一种由活化的免疫细胞分泌的细胞因子，广泛参与了多种免疫和非免疫反应。
TNF-α可以激活、调节各类免疫细胞、介导细胞凋亡、促进炎症反应、改变代谢、参与器官发育、影响认知和情绪等多种生理和病理过程。
本文将重点介绍 TNF-α的正常水平及其相关参考内容。
正常水平TNF-α的正常水平会因年龄、性别、生理状态、环境因素等多种因素而异。
正常人体血清中 TNF-α的浓度大约是 1.6 -14.5 pg/mL，但这个水平也有很大的变异性。
此外，不同的检测方法和试剂盒也可能对 TNF-α的检测结果产生影响。
鉴于此，医生在判读检测结果时应该参考具体的医学指南并结合患者情况，以免产生误差。
参考值的设定通常是以健康人群的平均值为基准，多数实验室以3 pg/mL ~ 5 pg/mL为临界值。
当血清中 TNF-α的浓度超过临界值，则有可能存在某些炎症、感染、肿瘤等疾病。
当然，TNF-α检测结果应该与临床症状、其他病理检查结果等综合分析，不能单独作为诊断标准。
影响因素TNF-α的分泌受到多种生理和病理因素的影响。
以下是一些常见影响因素：1. 炎症和感染：TNF-α主要在炎症和感染状态下才会被大量产生。
细菌、病毒或其他致病微生物侵入机体后，会刺激免疫细胞分泌 TNF-α，以启动炎症反应并抵抗病原体。
2. 创伤和手术：创伤和手术也可以引起机体炎症反应，从而促进 TNF-α的分泌。
尤其是大面积的烧伤、创伤和手术后综合征等情况，TNF-α的水平会显著升高，并可能影响病情和预后。
3. 肥胖和代谢紊乱：一些研究表明，肥胖、2型糖尿病和代谢综合征等代谢紊乱疾病与 TNF-α的水平升高有关。
这可能是由于TNF-α与脂肪细胞、胰岛素、葡萄糖代谢等有关的机制。
4. 其他因素：其他因素如精神压力、某些药物、环境污染等也可能引起 TNF-α的变化，但目前仍需进一步研究证实。
肿瘤坏死因子(TNF)
肿瘤坏死因子( tumor necrosis factor，TNF )是由巨噬细胞分泌的一种小分子蛋白，正常人血清为4.3±2.8 mg/L。
TNF-α主要由单核—巨噬细胞分泌；TNF-β主要由活化的T 淋巴细胞分泌。
TNF在体内外均能刺激IL-1的产生，不耐热，70℃30min失活。
1975年Carswell等发现接种BCC的小鼠注射LPS后，血清中含有一种能杀伤某些肿瘤细胞或使体内肿瘤组织发生血坏死的因子，称为肿瘤坏死因子。
1985年Shalaby把巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α，把T淋巴细胞产生的淋巴毒素(lymphotoxin，LT)命名为TNF-β。
TNF-α又称恶质素。
TNF的蛋白特性1、人TNF-α前体由233个氨基酸组成（26 kDa），其中包含由76个氨基酸残基组成的信号肽，在TNF转化酶TACE的作用下，切除信号肽，形成成熟的157个氨基酸残基的TNF-α（17 kDa）。
由于没有蛋氨酸残基，故不存在糖基化位点，其中第69位和101位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。
人类TNF-α与小鼠TNF-α有79%氨基酸组成同源性，TNF-α的生物学作用似无明显的种属特异性。
最近有人报道通过基因工程技术表达了N端少2个氨基酸（Val、Arg）的155氨基酸人TNF-α，具有更好的生物学活性和抗肿瘤效应。
此外，还有用基因工程方法，将TNF-α分子氨基端7个氨基酸残基缺失，再将8Pro、9Ser和10Asp 改为8Arg、9Lys和10Arg，或者再同时将157Leu改为157Phe，改构后的TNF-α比天然TNF体外杀伤L929细胞的活性增加1000倍左右，在体内肿瘤出血坏死效应也明显增加。
TNF-α和β发挥生物学效应的天然形式是同源的三聚体。
2、人类TNF-β分子由205个氨基酸残基组成，含34氨基酸残基的信号肽，成熟型TNF-β分子为171个氨基酸残基，分子量25kDa。
TNF-a说明书
人(human)肿瘤坏死因子a(TNF-a)说明书本试剂盒仅供研究使用标本：血清或者血浆一、试剂组成精密度微孔板96孔 (Microtitration Strips) 1块 2～8℃干燥保存酶标偶合液 (Conjugate ) 1瓶 12.0毫升 2～8℃冷藏保存标准品 (Standard) 5瓶各1.0毫升 2～8℃冷藏保存呈色剂A (Substrate A) 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存呈色剂B (Substrate B) 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存终止液 (Stopping Solution) 1瓶 6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液 (Rinsing Buffer x 20) 1瓶 60.0毫升 2～8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液 (Diluent x 5) 1瓶 15.0ml 2～8℃冷藏保存英文说明书，中文说明书各一份室温保存二、注意事项1. 此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2．使用前应将盒内各试剂取出。
室温放置至少30分钟，3．浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4．浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟5．若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。
不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。
6．在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。
7．加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。
8．试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。
三、实验前准备1．使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。
2．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等3．浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液4．浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液5．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。
肿瘤坏死因子α
肿瘤坏死因子α
肿瘤坏死因子α介绍：
肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor，TNF)可分为TNF α和TNF
β两种，前者来自单核巨噬细胞，后者由活化T细胞产生，是具有重要
生物活性的细胞因子。
存在于细胞上的TNF 受体主要有两种：TNFRⅠ
和TNFRⅡ，血清中存在的是可溶性的TNFR(s TNFRⅠ, s TNFRⅡ)。
肿瘤坏死因子α正常值：
放射免疫法：为0.74～1.54纳克/毫升。
肿瘤坏死因子α临床意义：
异常结果：肿瘤坏死因子α基因的报告质粒的荧光素酶基因由肿
瘤坏死因子α基因启动子及3’端非翻译序列驱动，荧光素酶基因的表
达水平即反映了肿瘤坏死因子α基因的表达水平。
肿瘤坏死因子α基
因的报告质粒用于检测化合物对肿瘤坏死因子α基因表达水平的影响。
需要检查的人群：有肝脏炎症，组织炎症以及血糖异常的患者。
肿瘤坏死因子α注意事项：
不合宜人群：无
检查前禁忌：患者应该避免接近各种放射源
检查时要求：标本均与确诊时取静脉血3ml，及时分离血清，-40℃冻存集中测定。
肿瘤坏死因子α检查过程：
用双抗体夹心酶免疫分析法。
将TNF α单克隆抗体包被于PVC板上，样品种的TNF α和单抗体结合后再与辣根过氧化物酶标记免抗TNF α
多克隆抗体结合，过氧化物酶与TMB反应终止后用酶标仪测定450nm的
光密度，结果与标准曲线比较确定TNF α的含量。
肿瘤坏死因子TNFα
人肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。
用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α，再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子α呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)说明书
人肿瘤坏死因子人肿瘤坏死因子αα（TNF-α）酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围检测范围：： 96T20 ng/L -400 ng/L使用目的使用目的：：本试剂盒用于测定人血清样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。
用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α（TNF-α），再与HRP 标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。
试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品（800ng/L ） 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。
操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
重组改构肿瘤坏死因子 注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书
重组改构肿瘤坏死因子注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书注射用重组改构人肿瘤坏死因子治疗非小细胞肺癌患者下面是小编整理的注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书，欢迎阅读。
注射用重组改构人肿瘤坏死因子商品介绍通用名：注射用重组改构人肿瘤坏死因子生产厂家: 上海唯科生物制药有限公司批准文号：国药准字S2*******药品规格：50万IU*2支/盒药品价格：￥950元注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书【商品名称】天恩福【通用名称】注射用重组改构人肿瘤坏死因子【英文名】：InjectionofRecombinantMutantHumanTumorNecrosisFactor【汉语拼音】：ZhusheyongChongzuGaigouRenZhongliuhuaisiyinzi【主要成份】重组改构人肿瘤坏死因子【性状】白色或微黄色疏松体【适应症】天恩福与CAp化疗方案联合适用于经其他方法治疗无效或复发的晚期非小细胞肺癌患者。
【用法用量】仅可与CAp化疗方案使用。
每支用2ml注射用水溶解，肌肉注射，每次400万U/M2，第1-7天及第11-17天每天用药一次，21天为一个疗程，可试用两个疗程。
如无较明显效果，建议停止继续使用。
【不良反应】在天恩福的临床研究中，先后共有约450例受试者接受了天恩福的治疗，试验中，天恩福短疗程应用的近期不良反应主要表现为发热、感冒样症状，注射局部疼痛、局部红肿硬结、骨肌肉疼痛，发生率在80%左右。
4例受试者因发热不能耐受而中止治疗。
出现上述不良反应时，可采取相应的对症治疗措施。
天然肿瘤坏死因子为多效应细胞因子(见上述药理作用)，改构后其性质和特点又可能会发生较复杂的变化，由此可能对造血系统、免疫系统及神经系统等产生不良反应和长期后续效应，特别是对某些肿瘤可能具有潜在的促进作用，以及发生与自身免疫性相关的疾病等，因此对天恩福可能发生的远期和潜在不良反应需给予密切关注。
【禁忌症】1.对天恩福所含成份过敏者禁用。
四正柏生物 人类TNF-α ELISA试剂盒说明书
REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。
客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 7 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 8 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。
Recombinant Human TNF alpha_AbMole中国_M9370说明书Protocol
产品说明Protocol分子量溶解性（25°C ）DMSO N/A 分子式Water Soluble CAS 号Ethanol N/A储存条件2-8°C, dry, protect from light, sealed生物活性重组人肿瘤坏死因子α（Recombinant Human TNF α）是一个同源三聚体，它在生长调节、分化、炎性反应、病毒复制、肿瘤发生、自身免疫性疾病以及病毒、细菌、真菌和寄生虫感染中都起到重要的作用。
TNF α除了诱导肿瘤的出血性坏死外，还和肿瘤发生、肿瘤转移、病毒复制、败血性休克、发热、发炎和罗恩氏病、风湿性关节炎、器官移植排斥等自身免疫性疾病发生有关。
TNF α是一种在多种肿瘤细胞和其他特定靶细胞中具有细胞毒素效应的强效淋巴因子。
内毒素（Endotoxin ）<0.01EU/ug 使用说明（Instructions ）推荐使用浓度为 1000IU/ml 。
如需分装，可用注射用水、生理盐水、培养基或PBS 稀释，稀释后浓度保持在 100ug/mL 以上。
稀释后置于-20℃保存期 3 个月，-80℃保存期 6 个月。
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（数据来源于FDA 指南）小鼠大鼠兔豚鼠仓鼠狗重量 (kg)0.020.15 1.80.40.0810体表面积 (m )0.0070.0250.150.050.020.5K 系数36128520动物A (mg/kg) = 动物B (mg/kg) ×动物B 的K 系数动物A 的K 系数例如，依据体表面积折算法，将白藜芦醇用于小鼠的剂量22.4 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将22.4 mg/kg 乘以小鼠的K 系数（3），再除以大鼠的K 系数（6），得到白藜芦醇用于大鼠的等效剂量为11.2 mg/kg 。
抑制剂化合物库CCK-8 / 蛋白酶抑制剂CocktailAbMole 中国Recombinant Human TNF α 目录号M9370化学数据所有产品仅供科研使用，严禁用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
重组改构人肿瘤坏死因子说明书--天恩福
注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书【药品名称】通用名：注射用重组改构人肿瘤坏死因子商品名：天恩福英文名：Recombinant Human Tumor Necrosis Factor汉语拼音：Zhusheyong ChongzuGaigouRen Zhongliuhuaisiyinzi【成份】主要组成成份为重组改构人肿瘤坏死因子。
【性状】白色或微黄色疏松体【适应症】本品与NP、MVP化疗方案联合，可试用于经其他方法治疗无效或复发的晚期非小细胞肺癌患者。
本品与BACOP化疗方案联合，可试用于经化疗或其他方法治疗无效的晚期非霍奇金氏淋巴瘤患者。
【规格】50万IU/瓶【用法用量】与上述化疗方案联合使用，每周的第3－7天用药，剂量为60－90万单位/m2,用生理盐水稀释至20ml，5－8分钟内恒速静脉推注。
【不良反应】在本品的临床研究中，先后共有约500例受试者接受了本品的治疗，试验中，本品短疗程应用的近期不良反应主要表现为发热、寒战，发生率在50%左右。
其他不良反应包括血压变化、乏力、头晕头痛、关节酸痛、骨骼肌痛、恶心呕吐、白细胞减少、血小板下降、血红蛋白下降、肝功能异常等。
出现上述不良反应时，可采取相应的对症治疗措施。
如出现严重不良反应，应及时停药。
在同类产品的临床研究中，曾出现有呼吸困难的不良反应，应引起注意。
天然肿瘤坏死因子为多效应细胞因子（见上述药理作用）。
研究发现，TNF水平升高与许多疾病的病理过程密切相关，如类风湿性关节炎、成人呼吸窘迫综合症（ARDS）、肝肾功能紊乱等。
其中ARDS的病情与支气管肺泡液中TNF水平正相关，所以不能排除过量TNF可引起ARDS并促使病情进一步恶化的可能。
本品为改构的肿瘤坏死因子，改构后其性质和特点又可能会发生较复杂的变化，由此可能对造血系统、免疫系统、循环系统、呼吸系统、消化系统、神经系统等产生不良影响和长期后续效应，特别是对某些肿瘤可能具有潜在的促进作用，以及诱发与自身免疫性相关的疾病等，因此对本品可能发生的远期和潜在不良反应需给予密切关注。
TNF-a使用说明书
K E X I N科昕生物北京科昕生物科技有限公司重组人肿瘤坏死因子-a(冻干粉末，细胞培养级别)Recombinant Human TNF -a（Cell Culture Grade）产品说明：TNF-α是一个同源三聚体，每个亚基的分子量为17kDa，它在生长调节、分化、炎性反应、病毒复制、肿瘤发生、自身免疫性疾病以及病毒、细菌、真菌和寄生虫感染中都起到重要的作用。
TNF促进T细胞MHCⅠ类抗原表达，增强IL-2依赖的胸腺细胞、T细胞增殖能力，促进IL-2、CSF和IFN-γ等淋巴因子差生，增强有丝分裂原或外来抗原刺激B细胞的增殖和Ig分泌。
TNF-α对某些肿瘤细胞具有生长因子样作用，并协同EGF、PDGF 和胰岛素的促增殖作用，促进EGF受体表达。
TNF也可促进c-myc和c-fos等与细胞增殖密切相关原癌基因的表达，引起细胞周期有G0期向G1期转变。
本产品系由含有高效表达人TNF -α基因的原核表达系统（E.coli）经发酵、分离和高度纯化后经冻干制成。
由157个氨基酸残基组成多肽链，分子量为17.4 kDa。
本产品为无菌冻干粉剂，由含有 10mM 磷酸盐pH为 7.2的蛋白溶液经0.2um过滤后分装冻干。
规格参数：货号：kx30-T 规格：10ug/50ug/500ug/1mg.质量控制：生物学活性：大于3.0 x 107IU/mg.纯度：经高效液相色谱（SEC-HPLC）和SDS-PAGE检测，纯度大于98.0%.内毒素：小于1EU/μg.使用说明：建议将冻干 rHuTNF-α溶解在注射用水或灭菌的超纯水中，浓度不低于100ug/ml，以待进一步稀释至工作浓度。
避免反复冻融。
复溶后的细胞因子：4℃可稳定储存7-10天；长期保存请分装后存放于-20℃。
肿瘤坏死因子-α
蛋白质的一级结构特点
蛋白质的一级结构特点
二级结构预测
三级结构预测
蛋白(TNFR-1) (p60) 在所 有细胞类型上表达，是启动 TNF-α 大部分生物活性的关键。
➢ 而TNF受体2 (TNFR-2) (p80) 只 在免疫细胞中表达。
➢ 只有TNFR-1即具有转导细胞 存活信号的能力亦有诱导细胞 凋亡能力，但这种生死信号调 节的作用机制至今也未被透彻 理解。
TNFR2复合物，从而促进细胞的存活。 ➢ 筛选TNFR2的拮抗剂，可以抑制Treg，可以被开发为抗肿瘤药物。
感谢聆听！
武汉轻工大学
肿瘤坏死因子-α
主讲：XXX
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概述
肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF)，又称恶液质素。TNF主要由活化的巨 噬细胞，NK细胞及T淋巴细胞产生，其中，巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α，T淋巴细 胞产生的淋巴毒素（lymphotoxin，LT)命名为TNF-β。TNFα的生物学活性占TNF总活性 的70%～95%，因此目前常说的TNF多指TNF-α。TNF-α作为主要的炎性介质在多种肿瘤 中表达。TNF-α一方面可以通过诱导癌细胞凋亡去抑制肿瘤细胞生长，另一方面也刺激大 多数对TNF诱导的细胞毒性具有抗性的癌细胞的增殖、存活、迁移和血管生成，从而导致 肿瘤的发展发生。
潜在价值
在关节炎或炎症性肠道疾病中，需要增强TNF-α合成来达到抗炎治疗目的；在自 身免疫病中，需要抑制TNF-α的作用，以便减轻炎症因子对自身细胞的攻击。
值得注意的是，TNF-α是人体正常的免疫分子之一。因此，未来的研究可能会开 发出一种保护细胞免疫系统但选择性阻断TNF-α作用的药物组合，以便在长期内克 服抗TNF-α治疗的副作用。
TNF-α_重组人TNF-α_肿瘤坏死因子使用说明书
GMP级重组人肿瘤坏死因子α（冻干粉）Recombinant Human TNF-α（rhTNF-α）作用机理：TNF-α是一个同源三聚体，每个亚基的分子量为 17kDa，它在生长调节、分化、炎性反应、病毒复制、肿瘤发生、自身免疫性疾病以及病毒、细菌、真菌和寄生虫感染中都起到重要的作用。
除了诱导肿瘤的出血性坏死外，TNFα还和肿瘤发生、肿瘤转移、病毒复制、败血性休克、发热、发炎和罗恩氏病、风湿性关节炎、器官移植排斥等自身免疫性疾病发生有关。
TNF-α是一种在多种肿瘤细胞和其他特定靶细胞中具有细胞毒素效应的强效淋巴因子。
规格参数：货号：TL-303 规格：100ug产品信息：表达宿主：HEK293细胞效价：≥1×107 IU/mg纯度：>95%内毒素：<0.01EU/ug纯化方式：层析纯化性状：白色疏松体保存温度：2-8℃有效期：24 个月生产厂家：同立海源生物使用说明：推荐使用浓度为 1000IU/ml。
如需分装，可用注射用水、生理盐水、培养基或 PBS 稀释，稀释后浓度保持在 100ug/mL 以上。
稀释后置于-20℃保存期 6 个月，-80℃保存期 12 个月。
适用范围：用于 DC 细胞体外培养，适用于直肠癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、淋巴瘤、白血病、多发性骨髓瘤、恶性黑色素瘤、卵巢癌等多种肿瘤的细胞免疫治疗临床研究。
相关产品推荐：Human IL-2、Human IL-15、Human IL-12、Human IL-6、Human IL-18、Human IL-21、Human IFN-γNK细胞培养试剂盒、Human GM-CSF、Human EGF等。
肿瘤坏死因子正常参考范围-概述说明以及解释
肿瘤坏死因子正常参考范围-概述说明以及解释1.引言1.1 概述肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor, TNF) 是一种由人体细胞产生的细胞因子，它在免疫系统中发挥着重要的调节作用。
TNF 是一种既能够促进炎症反应，又能够调节细胞生命周期和信号转导途径的多功能蛋白质。
近年来，研究表明TNF在许多重要疾病的发展中起着关键作用，如癌症、自身免疫性疾病和炎症性疾病等。
TNF的产生受到多种因素的调控，包括免疫细胞的激活、细胞凋亡和炎症反应等。
在正常情况下，TNF的水平是细致平衡的，对机体的正常生理过程起到重要作用。
然而，在某些疾病状态下，TNF的水平可出现异常升高或降低，从而导致疾病的发生和发展。
因此，对于肿瘤坏死因子正常参考范围的研究具有重要意义。
了解TNF 的正常水平范围，可以为临床医生提供参考依据，帮助他们准确判断患者是否存在TNF的异常水平，进一步评估疾病的严重程度，制定个体化的治疗方案。
未来的研究方向可以进一步深入探究TNF与其他细胞因子之间的相互作用关系，进一步探索TNF在不同疾病中的作用机制。
此外，我们还可以开展更多的临床研究，探索TNF在特定疾病中的临床应用潜力，以便为患者提供更好的治疗方案。
综上所述，肿瘤坏死因子正常参考范围的研究对于深入了解TNF的生理作用和相关疾病的发展具有重要意义。
通过进一步的研究和探索，我们有望为临床医生提供更准确、更有效的诊断和治疗策略，从而提高患者的生存质量和生活水平。
文章结构部分的内容可以写成以下形式：1.2 文章结构本文将分为三个主要部分进行描述，具体如下：第一部分为引言部分，主要包括概述、文章结构和目的等内容。
在概述中，将对肿瘤坏死因子进行简要介绍，引发读者的兴趣。
接着，详细阐述文章的结构，说明各部分的内容和组织安排。
最后，明确本文的目的，即探讨肿瘤坏死因子正常参考范围的意义以及未来的研究方向。
第二部分是正文部分，主要包括肿瘤坏死因子的定义和功能、以及肿瘤坏死因子的生理作用。
人肿瘤坏死因子α（TNF-α）英文说明书
Human TNF-αFOR RESEARCH USE ONLYAssay range：：：：20 ng/L -400 ng/L 96determinationsPurposeThis kit allows for the determination of TNF-α concentrations in Human serum, cell culture supernates and other biological fluidsPrinciple of the assayThe kit assay Human TNF-α level in the sample, use Purified Human TNF-α antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add TNF-α to wells, Combined TNF-α antibody which With HRP labeled, become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution, TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of Human TNF-α in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Materials provided with the kit1 wash solution 20ml×1bottle 7 Stop Solution 6ml×1 bottle2 HRP-Conjugate reagent 6ml×1 bottle 8 Standard（800ng/L）0.5ml×1 bottle3 Microelisa stripplate 12well×8strips 9 Standard diluent 1.5ml×1bottle4 Sample diluent 6ml×1 bottle 10 Instruction 15 Chromogen Solution A 6ml×1 bottle 11 Closure plate membrane26 Chromogen Solution B 6ml×1 bottle 12 Sealed bags 1Specimen requirements1. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevantliterature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t,specimen can be kept in -20 ℃to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.2. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.Assay procedure1. Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table:400 ng/L 5 Standard 150µl Original density Standard+150µl Standard diluent200 ng/L 4 Standard 150µl 5 Standard+150µl Standard diluent100 ng/L 3 Standard 150µl 4 Standard+150µl Standard diluent50 ng/L 2 Standard 150µl 3 Standard +150µl Standard diluent25 ng/L 1 Standard 150µl 2 Standard +150µl Standard diluent2.add sample: Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample andHRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40µl to testing sample well, then add testing sample 10µl (sample final dilution is5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.4.Configurate liquid: 30-fold(or 20-fold) wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.5.Washing: Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6. Add enzyme: Add HRP-Conjugate reagent 50µl to each well, except blank well.7. Incubate: Operation with 3.8. Washing: Operation with 5.9.Color: Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃10.Stop the reaction：Add Stop Solution50µl to each well, Stop the reaction(the blue colorchange to yellow color).11. Assay:take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution andwithin 15min.。
肿瘤坏死因子（TNF-α）：自身免疫系统疾病关键靶点
肿瘤坏死因⼦（TNF-α）：⾃⾝免疫系统疾病关键靶点导语：⽬前，⽆论是传统的化药龙头，⾎制品公司还是很多初创的创新性药企，越来越多的公司致⼒于抗体类药物的研发。
⼀夜之间，似乎变成了不研究⼏个单抗产品，出去都不好意思打招呼的局⾯：）但是⽬前全球抗体类药物的市场还是集中在⼏家巨头⼿中，我国的抗体类药物更是⾯临着起步晚，⼤规模制备技术较落后，医保不能覆盖等很多问题，但随着研发技术的提⾼，制备⼯艺的优化，以及医保⽬录的调整等，相信我国的抗体类药物会迎来发展的春天。
民⽣证券医药⾏业研究团队负责⼈吴汉靓将通过⼀系列的报告来研究说明整个抗体药物领域，⽬前的主题包括：靶点的选择，⼯艺的优化，双抗产品的研发等。
下⾯是第⼀篇：肿瘤坏死因⼦（TNF-α）：⾃⾝免疫系统疾病关键靶点。
主要涉及阿达⽊单抗，英夫利昔单抗，依那西普以及我国⾃主研发的益赛普，安佰诺等TNF抑制剂的现状和未来前景。
⼀、单克隆抗体：⽣物药领域最⼤的⼦⾏业，2016年全球市场900亿美⾦1)单克隆抗体：⽣物药领域最⼤的⼦⾏业，占据⽣物药市场的43%根据Transparency Market Research预测，全球⽣物药市场将从2016年的2098亿美⾦增长到2024年的4798亿美⾦，复合增长率11%。
图1：全球⽣物药市场⽣物药可以细分为单克隆抗体、⽣长激素、融合蛋⽩、疫苗等⼦⾏业，其中单克隆抗体是⽣物药领域最⼤的⼦⾏业，2016年占据⽣物药市场的43%，预计从2016年的900亿美⾦增长到2024年的2217亿美⾦，复合增长率11.9%。
单克隆抗体（Monoclonal Antibody, mAb）,简称单抗，是由⼀种类型的B细胞分泌产⽣的，具有和特定抗原发⽣特异性结合的免疫球蛋⽩。
单抗药物针对的靶点包括细胞表⾯分化抗原、细胞⽣长因⼦、⾎管内⽪⽣长因⼦等。
其中临床获批和临床研究最多的四个靶点是CD20、TNF-α、EGFR和HER2。
图2：临床研发和上市的⽣物药靶点2)肿瘤坏死因⼦-α（TNF-α）：细胞信号通路中重要⼀环，药物研发的热门靶点肿瘤坏死因⼦-α（Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α）是⼀种涉及到系统性炎症的细胞因⼦，主要由巨噬细胞分泌。
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人肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。
用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α，再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子α呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为300pg/ml，200pg/ml，100pg/ml，50pg/ml，25pg/ml）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围：8pg/ml-400pg/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月FOR RESEARCH USE ONLY Human Tumor necrosis factorαDrug NamesGeneric Name：Human Tumor necrosis factorα(TNF-α)ELISA Kit. PurposeThis kit allows for the determination of TNF-αconcentrations in Human serum,cell culture supernatant,and other biological fluids.Principle of the assayT he kit assay Human TNF-αlevel in the sample，use Purified Human TNF-αantibody to coat microtiter plate wells,make solid-phase antibody,then add TNF-αto wells,Combined TNF-αantibody which With HRP labeled, become antibody-antigen-enzyme-antibody complex,after washing Completely,Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed,reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of450nm.The concentration of TNF-αin the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Materials provided with the kitMaterials provided with the kit 48determinations96determinationsStorageUser manual11Closure platemembrane22Sealed bags11Microelisa stripplate112-8℃Standard：450pg/ml0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standard diluent 1.5ml×1bottle 1.5ml×1bottle2-8℃HRP-Conjugatereagent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Sample diluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Chromogen SolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Chromogen SolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Stop Solution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃wash solution （20ml×20fold）×1bottle（20ml×30fold）×1bottle2-8℃Specimen requirements1.serum-coagulation at room temperature10-20mins，centrifugation20-minat the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.2.plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix10-20mins,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.3.Urine-collect sue a sterile container,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,If precipitation appeared, Centrifugal again.The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.4.cell culture supernatant-detect secretory components,collect sue asterile container,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,detect the composition of cells,Dilut cell suspensionwith PBS（PH7.2-7.4）,Cell concentration reached1million/ml,repeated freeze-thaw cycles,damage cells and release of intracellular components, centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant, If precipitation appeared,Centrifugal again.5.Tissue samples-After cutting samples,check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）,Rapidly frozen with liquid nitrogen,maintain samples at 2-8℃after melting,add PBS（PH7.4）,Homogenized by hand or Grinders, centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant.6.extract as soon as possible after Specimen collection,and according to therelevant literature,and should be experiment as soon as possible after the extraction.If it can’t,specimen can be kept in-20℃to preserve,Avoid repeated freeze-thaw cycles.7.Can’t detect the sample which contain NaN3,because NaN3inhibits HRPactive.Assay procedure1.Dilute and add sample to Standard:set10Standard wells on the ELISA plates coated,add Standard100μl to the first and the second well,then add Standard dilution50μl to the first and the second well,mix;take out100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separately.then add Standard dilution50μl to the third and the forth well,mix;then take out50μl from the third and the forth well discard,add 50μl to the fifth and the sixth well,then add Standard dilution50μl to the fifth and the sixth well,mix;take out50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well,then add Standard dilution50μl to the seventh and the eighth well,mix;take out50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well,add Standard dilution50μl to the ninth and the tenth well,mix,take out50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample50μl to each well after Diluting,(density:300pg/ml，200pg/ml，100pg/ml，50pg/ml，25pg/ml)2.add sample：Set blank wells separately(blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent,other each step operation is same). testing sample well.add Sample dilution40μl to testing sample well,then add testing sample10μl(sample final dilution is5-fold),add sample to wells, don’t touch the well wall as far as possible,and Gently mix.3.Incubate:After closing plate with Closure plate membrane,incubate for30 min at37℃.4.Configurate liquid:30-fold(or20-fold)wash solution diluted30-fold(or20-fold) with distilled water and reserve.5.washing：Uncover Closure plate membrane,discard Liquid,dry by swing, add washing buffer to every well,still for30s then drain,repeat5times,dry by pat.6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent50μl to each well,except blank well.7.incubate：Operation with3.8.washing：Operation with5.9.color：Add Chromogen Solution A50ul and Chromogen Solution B to each well,evade the light preservation for15min at37℃10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well,Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11.assay：take blank well as zero,Read absorbance at450nm after Adding Stop Solution and within15min.Important notes1.The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced15-30minutes in the room temperature,ELISA plates coated if has not use up after opened,the plate should be stored in Sealed bag.2.washing buffer will Crystallization separation,it can be heated the waterhelps dissolve when dilute.Washing does not affect the result.3.add Sample with sampler Each step,And proofread its accuracy frequently,avoids the experimental error.add sample within 5mins,if the number of sample is much ,recommend to use Volley .4.if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold),Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.5.Closure plate membrane only limits the disposable use,to avoid cross-contamination.6.The substrate evade the light preservation .7.Please according to use instruction strictly,The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.8.All samples,washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.9.Do not mix reagents with those from other lots.Calculate Assayrange8pg/ml -400pg/mlTake the standard density as the horizontal,the OD value for the vertical ,draw the standardcurve on graph paper,Find out the correspondingdensity according to the sample OD value by theSample curve,multiplied by the dilution multiple,or calculate the straight line regression equationof the standard curve with the standard densityand the OD value ,with the sample OD value inthe equation,calculate the sample density,This chart for reference onlyStorage and validity 1．Storage：2-8℃. 2．validity：six months.。