洁净室环境监测操作规程(资源借鉴)

青岛有限公司文件

文件名称洁净区环境监测操作规程文件编号SOP-ZL66-1

制定人审核人审核人

制定日期审核日期审核日期

批准人批准日期生效日期

颁发部门品管部印数份

分发部门品管部

目的建立洁净区环境监测规程，规范洁净区沉降菌、浮游菌、悬浮粒子的测试，保证药品在规定的洁净级别内进行生产。

范围本标准适用于洁净区沉降菌、浮游菌、悬浮粒子的监测。

责任环境监测员

内容

1、检验依据：

1.1 GB/T16294-2010《医药洁净室（区）沉降菌的测试方法》

1.2 GB/T16293-2010《医药洁净室（区）浮游菌的测试方法》

1.3 GB/T16292-2010《医药洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》

2、悬浮粒子的监测

2.1概述：本测试方法采用计数浓度法，即通过测定洁净区环境内单位体积空气中含大于或等于某粒径悬浮粒子数，来评定洁净室（区）的悬浮粒子洁净度等级。

2.2仪器和设备：尘埃粒子计数器，严格按照《尘埃粒子计数器操作、维护保养规程》（SOP-ZL95-1）操作。

2.3测试步骤

2.3.1测试条件：在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，包括温度控制在18-26℃、相对湿度控制在45-65%、压差等，同时应满足仪器的使用范围。

2.3.2测试状态：静态测试，人员不得多于2人。测试报告中应明确测试时所采用的状态及测试人员数。

2.3.3测试时间：在空态或静态a测试时，对单向流洁净室（区）而言，测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。对非单向流洁净室（区），测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min开始。在静态b测试时，对单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过10min后开始；对非单向流洁净室（区），

测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min 自净后开始。

2.4采样点数目及其布置

2.4.1在空态或静态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应力求均匀，并不得少于最少采样点数目。在动态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应根据产品的生产及工艺关键操作区设置。最少采样点数目如下

面积（㎡） 洁净级别 A 级 C 级 D 级 ＜10

2-3 2 2 ≥10～＜20 4 2 2 ≥20～＜40 8 2 2 ≥40～＜100

16

4

2

采样点的布置：

2.4.2采样点位置：一般在离地0.8m 高度的水平面上均匀布置，并避开回风口。测试人员应在采样口的下风侧。

2.4.3采样次数的限定：对于任何小洁净室或局部空气净化区域，采样点的数目不得少于2个，总采样次数不得少于5次。

最小采样量

洁净度级别

采样量L/次

≥0.5μm ≥5μm A 级 5.66 8.5 C 级 2.83 8.5 D 级

2.83 8.5 2.5洁净度级别

悬浮粒子最大允许数（个/m 3）（静态） ≥0.5μm ≥5μm A 级 3520 20

C 级 352000 2900

D 级

3520000

29000

2.6监测频率：

2.6.1每季度对微生物洁净实验室进行监测，并及时填写监测记录（附件2）。

· ·

· ·

2.6.2 D级取样间每季度监测所有房间，并及时填写监测记录（附件1）

2.6.3每季度对D级洁净区所有房间进行监测，并及时填写监测记录（附件1）。

3、沉降菌的监测

3.1概述：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。本法采用动态监测，培养皿暴露时间为不大于4小时。

3.2仪器和设备：高压消毒锅、恒温培养箱、培养皿（已灭菌，φ90m m×15mm）、大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或沙氏琼脂培养基（SDA）。

3.3测试步骤：

3.3.1测试前培养皿表面必须严格消毒。将已于30—35℃恒温培养箱中倒置培养48小时且无菌落生长的培养皿按照采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。全部采样结束，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配制的培养皿经采样后在30～35℃下培养，时间不少于2天。采用沙氏琼脂培养基（SDA）配制的培养皿经采样后在20～25℃下培养，时间不少于5天。每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。

3.3.2菌落计数：用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。

3.3.3采样点数目及其布置：参照悬浮粒子的采样点数目。

3.3.4最少培养皿数：在满足最少采样点数目的同时，还应满足最少培养皿数

洁净度级别最少培养皿数（φ90m m）

A级 2

C级 2

D级 2

3.3.5采样次数：每个采样点采样一次。

3.3.6

洁净度级别浮游菌

cfu/m3

沉降菌（φ90m m）

cfu/4小时

接触蝶

cfu/蝶

手套

cfu/手套

A级小于1 小于1 小于1 小于1

C级100 50 25

D级200 100 50

3.3.7监测频率：

3.3.7.1 微生物洁净实验室净化台样品每次实验时监测，其他房间每周一次并及时填