链酶亲和素

实用标准文案链霉亲和素商品化应用简介

一、链霉亲和素性质streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质，）是由链霉菌streptavidin，SA链霉亲和素（条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨4分子量为65kD。链霉亲和素分子由链霉亲和素是一种稍而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；酸的含量较大，）的蛋白质，并且不带任何糖基。偏酸性（pH6.0链霉亲和素分子中每条肽链都能结合一个生物素，因此与亲和素一样，一个链霉亲和素

）亦为个生物素分子，二者亲和常数（K分子也能结合4间断裂，和Ｃ端19-2112N端10～L10／mol。在蛋白水解酶作用下，链霉亲和素可在15链霉亲和素的活性单位也是以结形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。18U。生物素所需的量来表示，１mg链霉亲和素的最高活性可达μ合1g

二、亲和素和链霉亲和素的比较相同点14~18U

：，SA生物素结合能力：、AV：13~15U1两个位点有110-111和懒氨酸：亲和素在氨基酸序列的70-70-2、活性中心依赖于色氨酸懒氨两个位点含有色氨酸-120-121-色氨酸懒氨酸，链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和酸。

不同点：AV=66KD, SA=54KD

分子量：、1

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实用标准文案带正电较多，非特异性结合较强。等电点：AV=10.5, SA=6.0, AV2、深，位阻效应较强，长臂生物素更适合。SA的生物素结合位点较AV3、位阻效应：协同结合。随机结合，SA4、生物素的结合：AV SA含甘氨酸丙氨酸较多，无糖和二硫键。10%氨基酸序列：AV 含二硫键和糖，5、

ELISA中的应用三、链霉亲和素在）可用于测定抗原，，ELISA酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3可根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，记的抗原或抗体，③酶作用的底物。设计出各种不同类型的检测方法。中的应用有多种形式，生物素－链霉亲和素系统在ELISA、用于间接包被：可以在固相上先预包被链霉亲和素，原用吸附法包被固相的抗体或抗原1这种包通过链霉亲和素－生物素反应而使生物素化的抗体或抗原间接包被。与生物素结合，被法主要有以下优点：增加吸附的抗体或抗原量，而且使其结合点充分暴露。①

阴性对照、空白对照本底低，检测敏感性高。②

或不易避免了抗体包被微孔时容易发生失活(用链霉亲和素替代抗体包被微孔，③

。保存)通过生物素将抗体结合于链霉亲和素包被的酶标板上，可克服传统物理吸附方

④法造成的抗原抗体结合能力大量丧失的不足。精彩文档．

实用标准文案生物素标记捕获抗体、酶标指示抗体和样品中的抗原三者在均相中形成复合物

⑤由于链霉亲和素和生物素之间亲和力后，再通过生物素结合于链霉亲和素包被的酶标板上，极强，并且具有高度的特异性和稳定性，因而可提高检测灵敏度。，使用链霉亲和素μg/LELISA法最低检测值为7.25实例：CTnT检测实验中，双抗体夹心倍。ELISA法灵敏度提高7包被法最低检测值达到1.0μg/L，较双抗体夹心

然后连接中的酶标抗体也可用生物素化的抗体替代，用于终反应放大：在常规ELISA2、

的等电点低，表面带的正电荷少，因此它和SA亲和素－酶结合物，以放大反应信号。由于上应用ELISAAV低，这样在聚苯乙烯板载体的静电吸附力弱，SA的阴性对照显色明显比可进一步提高方法的灵敏度。链霉亲和素对生物素化的抗体是一个主动的吸附过程，生SA而被物素化的抗体吸附在链霉亲和素表面，抗体排列整齐，分布均匀，抗体容易保持功能，链霉亲和素免疫反应

动吸附抗体排列极不规则容易导致大量抗体失去功能，所以将生物素- 系统引入竞争法中，可以大大提高酶联免疫的灵敏度和特异性。的％-链霉亲和素免疫法测定实验中，传统方法被动吸附只有约5实例1: 地高辛的生物素的抗体具有功能。60％抗体具有功能，生物素-链霉亲和素体系中，相μg/L0.625 实例2：淋球菌抗原测定方法实验中，生物素-链霉亲和素法检测灵敏度为。1.25 μg/L淋球菌，而同时进行常规当于3.5×104/mlELISA测定时，其灵敏度为

四、链霉亲和素相关商品标记化链霉亲和素、1

ELISA放大检测信号，提高检测灵敏度。用酶或荧光素等修饰链霉亲和素，应用于产品实例：精彩文档．

实用标准文案蛋白FITC）标记Streptavidin①绿色荧光素（产品说明）是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病理学及自身FA 荧光素标记抗体（抗体的临床免疫中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。成分，并采用直IgG荧光素抗体为制备的抗血清，再经过亲和层析纯化的方法制成抗体的蛋经过纯化、接标记法，将异硫氰酸荧光素共价交联到链霉亲和素分子的氨基基团分子上，FITC白定量、浓度及效价鉴定而制备完成。应用范围：1. 免疫组织及免疫病理中抗原、抗体检查，如：各肿瘤抗原检查，细胞凋亡检测。2.用于细胞因子等检查的荧光流式细胞仪测定。. 3.用于临床自身免疫病的多种自身抗体荧光检查，如：抗核抗体，抗心肌酶抗体4.白细胞分型抗原的免疫荧光染色。用于细菌、病毒、梅毒螺旋体、钩端螺旋体等微生物的抗原及抗体检测。5. 主要性能：链防腐剂。含有0.01%NaN3并提供浓缩液或冻干粉，0.3ml或根据试验需求的各种包装，为最大约在70-80ug/ml,495nm为Sigma异构体I,.FITC霉亲和素含量在1mg/1ml左右525 nm .

吸收峰，激发波长稀释使用。5020：–1：10.01mol/l pH7.4 PBS 工作浓度：用作-20保存：℃可保存一年，避免反复冻融。

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链霉亲和素酶标板、2使用时只要加入生物素稳定性高，易于保存，将链霉亲和素直接或间接预包被在酶标板上，化的抗体或者抗原即可。产品实例：链霉亲和素酶标板/板条ImmobilizerTM- 适用于生物素化生物分子瞬间耦合链霉亲和素共价粘附在表面上可以随时使用无需进行封闭步骤）*20pmol/F96极佳的结合力（例如透明孔表面流失率低精彩文档．实用标准文案