08级酶工程复习大纲
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各章重点
第一章绪论
1. 酶工程的概念、分类及其研究内容。
2. 酶的分类与命名
第二章酶的生物合成与发酵生产
1.用操纵子模型解释酶的诱导与阻遏机制(末端产物、分解代谢产物)
2.根据酶生物合成的调节类型及机制说明如何提高酶的产量。
3.酶生物合成的模式及影响因素。
4.比较动物植物和微生物在细胞结构、培养基和培养方式上的不同。
5.一些概念的区别:操纵子与操纵基因、诱导酶与组成酶、胞内酶与胞外酶、
外植体与愈伤组织
第三章酶的提取与分离纯化
1.细胞破碎的目的、方法及原理。
2.酶抽提的目标及方法。
3.常用沉淀法的种类及原理。
4.常用沉淀法的种类及原理。盐析法分离蛋白质的原理、种类及盐析常数的含
义。
5.双水相萃取、超临界流体萃取、反胶团萃取的原理。
6.膜分离的种类、原理及应用。
7.比较吸附层析、疏水层析、离子交换层析、凝胶过滤、亲和层析等方法在原
理、层析介质、操作及应用方面的异同点。
8.比活力、提纯倍数、回收率的含义及用途。
9.亲和层析的原理是什么?如何根据目的产物的性质选择洗脱方式?
10.电泳的基本原理是什么?电泳的种类有哪些?
11.SDS-PAGE和等电聚焦电泳的原理和操作的不同之处是什么?
12.影响凝胶过滤分辨率的因素有哪些?分配系数的含义及作用。
第四章酶分子的化学修饰
1.酶活性中心的特点及主要化学基团。
2.研究酶活性中心的方法及差别标记与亲和标记的区别与特点。
3.酶化学修饰的目的是什么?常用的大分子修饰剂有哪些,修饰后的用途及原
理。
4.那些蛋白质侧链基团可以被修饰?主要的修饰剂及修饰反应类型。
5.酶的蛋白质工程、酶分子化学修饰、酶的固定化在目的方法上的异同点。
6.分析说明修饰酶的性质。
7.维持酶分子空间结构稳定的主要作用力是什么?
8.酶的蛋白质工程的含义是什么?为什么要进行酶的蛋白质工程?什么是蛋
白质的定向进化?
第五章酶与细胞的固定化
1. 固定化酶、细胞、原生质体产生的背景。
2. 固定化方法有哪几种?各自的优缺点及适用范围。
3. 酶固定化后性质会发生什么变化?原因是什么?
4. 造成固定化酶活力下降的原因是什么?
第六章酶的非水相催化
1.什么是非水酶学(Non-aqueous enzumology) 和pH印记(pH-imprinting)
2.酶非水相催化的有几种类型?
3.酶在有机介质中的催化特性?
4.有机介质酶催化反应的优点?
第七章酶反应器
1.酶反应器与发酵反应器的区别。
2.试比较各类酶反应器的优缺点。
试卷出题类型及相应分数
一、名词解释:5题×4分=20分
二、选择题:10题×1=10分
三、判断题:10题×1=10分
四、问答题:5题×8分=40分
五、设计体:1题×20分=20分
总计:100分
试题参考(只代表出题方式,不代表一定是试题,请不要误会)
名词解释
1.Enzyme
2.Enzyme engineering
3.Enzyme activity unit
4.Oxidoreductase
5.Transferase
6.Isomerase
7.hydrolase
8.chromatography separate
9.Modification of Enzyme Molecule
10.Site-directedmutagenesis
11.directed evolution
12.DNA shuffling
13.error prone PCR
14.Immobilized enzyme
15.Immobilized cell
16.Enzymatic catalysis in Non-aqueous system
17.pH-imprinting
18.Reactors for enzymatic catalysis
19.CSTR
20.Packed Bed Reactor
21.Fluidized Bed Reactor
论述、设计题
1、如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂?试用所学过的知识加以论述。
2、今欲生产淀粉酶结晶产品,试拟出合理的工艺步骤,并说明下游工程的主要工艺条件。
3、请设计一种测定固定化葡萄糖异构酶的活力和比活力的方法。
4.设计利用微生物发酵生产a-淀粉酶的工艺路线。
5.纳豆激酶是一种具有溶血功效的蛋白酶,请设计一条合理的工艺路线生产该酶