【CN109852647A】一种双酶法制备可溶性的酵母葡聚糖寡糖的方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910202549.1

(22)申请日 2019.03.18

(71)申请人 江南大学

地址 214000 江苏省无锡市蠡湖大道1800

号

(72)发明人 康振　堵国成　周星　

(74)专利代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权

代理有限公司 23211

代理人 张勇

(51)Int.Cl.

C12P 19/14(2006.01)

C12P 19/08(2006.01)

C12N 1/21(2006.01)

C12R 1/19(2006.01)

C12R 1/125(2006.01)

(54)发明名称

一种双酶法制备可溶性的酵母葡聚糖寡糖

的方法

(57)摘要

本发明公开了一种双酶法制备可溶性的酵

母葡聚糖寡糖的方法，属于生物医药领域。本发

明制备可溶酵母葡聚糖寡糖以提取的水不溶性

的酿酒酵母葡聚糖为底物，经微生物细胞异源表

达的β-1,3-葡聚糖水解酶和β-1,6-葡聚糖水

解酶催化形成具有生物活性的水溶性的小分子

酵母葡聚糖寡糖。本发明为具有生物活性的可溶

酵母葡聚糖的工业化生产方式提供了新的途径。权利要求书1页 说明书4页 附图2页CN 109852647 A 2019.06.07

C N 109852647

A

权　利　要　求　书1/1页CN 109852647 A

1.一种制备可溶性酵母葡聚糖寡糖的方法，其特征在于，以水不溶性酵母葡聚糖为底物，利用葡聚糖水解酶进行催化反应制备可溶性酵母葡聚糖；所述葡聚糖水解酶的添加量为10～20U葡聚糖水解酶/mg葡聚糖；所述葡聚糖水解酶包括β-1,3-葡聚糖水解酶和β-1,6-葡聚糖水解酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述β-1,3-葡聚糖水解酶和β-1,6-葡聚糖水解酶的酶活之比为2～5:1。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述β-1,3-葡聚糖水解酶含有GenBank 登录号为ABD82280.1所示的氨基酸序列；所述β-1,6-葡聚糖水解酶含有GenBank登录号如AAO78418.1所示的氨基酸序列。

4.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，用于催化反应的葡聚糖水解酶的形式包括酶液或表达酶的微生物细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述葡聚糖水解酶在枯草芽孢杆菌或大肠杆菌中进行表达。

6.根据权利要求1～5任一所述的方法，其特征在于，反应pH为4.0～9.0。

7.根据权利要求1～6任一所述的方法，其特征在于，反应温度为10℃～65℃。

8.根据权利要求1～7任一所述的方法，其特征在于，反应时间为4～24h。

9.权利要求1～8任一所述方法在制备含寡糖的产品中的应用。

10.表达含有GenBank登录号为ABD82280.1的β-1,3-葡聚糖水解酶和/或GenBank登录号为AAO78418.1的β-1,6-葡聚糖水解酶的大肠杆菌或枯草芽孢杆菌工程菌。

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