昆布多糖的研究进展

2 . 2 . 2 昆布多糖的化学性质。M olish 反应呈阳性, 有紫色环 产生。苯酚 - 硫酸反应呈阳性。 Feh ling 试剂反应水解前呈 阴性, 加酸水解后呈阳性, 说明粗多糖中存在还原糖; 咔唑 硫酸反应呈玫瑰红, 说明含有糖醛酸; 碘 - 碘化钾反应呈阴 性, 说明不含有淀粉多糖。以葡萄糖为标准糖测得粗多糖中 总糖含量为 66 . 58 % , 由海藻粉中提取多糖得率为 18. 31% 。 2 . 2 . 3 硫酸基含量测定。由明胶 - 氯化钡法测得标准曲线 为 y= 2 . 312 1x - 0 . 029 3( R = 0 . 998), 由标准曲线得到昆布 多糖硫酸基含量为 48. 67% ( 质量分数 ) 。 2 . 2 . 4 紫外光谱分析。 紫外吸收光谱表明, 在 260 nm 和 280 nm 处均无特征吸收峰, 说明除蛋白完全, 初步纯化的多糖不 含有核酸与蛋白质。 3 昆布多糖的药理作用与临床应用概况及其作用机理 昆布多糖的药理作用与临床应用概况及其作用机理如 表 1所示 :
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取昆适量布多糖样及 LAM S, 用
D2 O 溶解并进行测定。由 C NMR 图谱可知 , 在 LAM S样品 的碳谱中发现糖环上大多数碳化学位移发生了明显变化, 与 昆布多糖相比, 其 C1、 C3 、 C6 化学位移向高场移动, 但峰强度 未发生显著变化, 推测可能是糖环上硫酸基团的引入对邻碳 产生影响; 而 C4、 C5化学位移和峰强度均未变化, 说明 C 4位 未发生取代; C2 信号移向低场, 并且峰强度降低, 表示 C 2位 已经被硫酸基团取代。由此可见, 硫酸酯化的过程主要发生 在 C2 OH 处。 2 昆布多糖的提取分离及理化性质研究 2 . 1 昆布多糖的提取分离 目前昆布多糖大多是从海带中提 取, 随着提取工艺的改良, 得率从 1 %
表 1 昆布多糖的药理作用与临床应用概况及其作用机理 Table 1 Pharm acological action , clin ica l application and mechan ism of lam inarin 药理作用 Phar m acological action 临床应用概况及其作用机理 C lin ical app lication and m echan ism
昆布又名海带 , 其主要含有多糖、 天然蛋白质、 纤维素、 脂肪、 矿物质及核酸等, 具有显著的临床药理作用, 而药理作 用与其含有的多糖量紧密相关。研究表明, 昆布多糖主要有 褐藻 ( 如褐藻酸钠, 又称褐藻胶 , 在海带中含量约为 19 . 7 % )、 褐藻淀粉 ( 又称昆布多糖、 海藻硫酸多糖、 褐藻多糖, 在海带 中含量约为 1 % )、 褐藻糖胶 ( 又称岩藻糖胶, 主要成分为岩 藻多糖, 又称岩藻聚糖 ) 。多糖昆布中还含有少量的木糖、 半乳糖、 葡萄糖醛酸和蛋白质。笔者从昆布多糖的结构研 究、 提取分离及理化性质的研究、 药理作用与临床应用概况 等 3个方面阐述昆布多糖的研究进展, 以期为昆布多糖的研 究提供理论依据。 1 昆布多糖的结构研究 目前研究昆布多糖结构的常用方法是对昆布多糖进行 硫酸酯化, 并对其产物的纯度及结构进行分析。一般用氯磺 酸 - 吡啶法先对昆布多糖进行硫酸酯化, 同时使用 HPLC ELSD 法测定其反应产物的纯度与分子量, 然后利用硫酸钡 比浊法测定昆布多糖硫酸酯中 SO4 含量, 再利用波谱法研 究其具体结构。 [ 1] 1. 1 硫酸酯化分析 昆布多糖的硫酸酯化研究方法步骤
摘要 从昆布多糖的结构研究、 昆布多糖的提取分离及理化性质的研究、 昆布多糖的药理作用与临床应用概况等 3个方面阐述昆布多 糖的研究进展, 以期为昆布多糖的研究提供理论依据。 关键词 昆布多糖 ; 结构分析 ; 分离提取 ; 药理作用 中图分类号 R 915 文献标识码 A 文章编号 0517- 6611( 2010) 27- 15447- 02 R esearch Progress of Lam inarin YUAN X iu li et al ( College of L ife Science and Engineering , ShaanxiU niversity of Science and Technology , X i an, Shaanx i 710021) A bstract The research advance of la m inarin were discussed fro m aspects o f structure , extraction , isolation and physical and che m ical proper ties , phar m aco logica l e ffects and c linica l application , which am i ed to prov ide theoretica l basis for studying la m inarin . K ey w ords Lam inar in ; Structural analysis ; Separation and ex traction; Phar m aco logy
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曲线的制作。首先称取适量标准葡萄糖置于容量瓶中 , 加水 至刻度; 然后准确吸取葡萄糖标准溶液, 加水补至一定刻度; 再加入质量分数为 6 % 的苯酚及浓硫酸, 摇匀, 室温放置 20 m in后于 490 nm 测光密度, 以适量水按同样显色操作为空白 对照, 纵坐标为光密度值, 横坐标为多糖浓度, 即可得到标准 曲线。 # 待测多糖样品含量的测定。称取昆布多糖样品, 加 蒸馏水至刻度, 配成样品溶液; 吸取样品液 1 . 0 m l 按上述步 骤操作 , 测得光密度, 根据标准曲线计算多糖含量。 ∃ 多糖 得率的计算。多糖得率 ( m /m ) = [ 粗多糖干品中的总糖质量 ( g) /原料干粉质量 ( g) ] ∋ 100 %。 2. 1. 3 昆布粗多糖的初步纯化。按 2. 1 . 1!方法得到昆布 粗多糖, 加水溶解, 并用氨水调节 pH 值至 8 ; 在温度低于 50 ( 条件下 , 滴加 20 % H 2 O 2, 直至溶液呈淡黄色, 然后保温 2 h; 将所得溶液用蒸馏水透析 3 d, 3 d后对未透过的部分采 用 Sevag 法去除蛋白质
安徽农业科学, Journ al ofAnhu iAgr.i Sc. i 2010 , 38( 27): 15447- 15448 , 15452
责任编辑
马树梅
责任校对
李岩
昆布多糖的研究进展
袁秀丽 , 吕嘉枥 , 肖 静 , 马 强
1 1 2 1 ( 1. 陕西科技大学生命科学与工程学院, 陕西西安 710021 ; 2. 长安大学理学院, 陕西西安 710064)
95 % 乙醇进行沉淀, 并于 4 ( 静置过夜 ; 次日离心, 并收集
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安徽农业科学
2010年
沉淀, 真空冷冻干燥即可得初步纯化的白色纤维状昆布粗 多糖。 2. 1 . 4 昆布多糖的提取与精制。称取昆布粗粉置于圆底烧 瓶中 , 加石油醚 ( 60~ 90 ( ) 浸泡 2 h; 回流提取 1 h, 滤过; 滤 渣挥干溶媒, 以 95% 乙醇回流提取 2次, 每次 1 h , 滤过; 滤渣 置于圆底烧瓶中, 加蒸馏水浸泡 1 h后回流提取 2 h, 滤过; 再 加蒸馏水回流 提取 2 h, 滤 过; 合 并滤液, 浓缩 至适量, 用 Sevage法去除蛋白后加入 95% 乙醇使含醇量为 80% , 静置过 夜, 抽滤; 滤渣用无水乙醇、 丙酮依次洗涤多次, 得精制多糖 , 冷冻干燥备用。 2. 2 昆布多糖的理化性质 2. 2 . 1 昆布多糖的物理性质。粗多糖干品为黄褐色块状固 体, 有海腥味。经 H2 O2 脱色后冻干得到白色纤维状固体, 可 溶于水, 易溶于热水, 难溶于酸碱, 不溶于高浓度乙醇、 甲醇、 丙酮等有机溶剂 , 无挥发性, pH 值为 6 . 5, 比旋光度为 [ ] D20= - 1. 25)( c= 0 . 80, H 2 O ) 。
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调节免疫功能 Regu lating i m 昆布多糖能够显著影响机体非特异性免疫功能, 褐藻多糖对机体特异性免疫功能也具有显著增强作用 mune function
。
调 节 血 脂 作 用 R egulating 昆布多糖能够降低血浆中胆固醇喝低密度脂蛋白的含量, 增加高密度脂蛋白含量, 还可减少动脉粥样硬化指数, 降低 [ 11] b lood lip id 血浆中脂质过氧化物浓度 。 降血糖作用 H ypog lycem ic 抗凝血作用 An ticoagulants 抗氧化作用 An ti oxidan t 抗肿瘤作用 An tineop lastic 昆布多糖能够降低糖尿病小鼠的血糖含量, 调节糖尿病小鼠的蛋白质代谢, 降糖时还能促进胰岛细胞分泌胰岛素
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为: ∀ 取昆布多糖适量, 采用氯磺酸 - 吡啶法进行硫酸酯化 ; # 对硫酸酯化反应所得产物进行透析、 醇沉及干燥, 获得昆 [ 2- 3] 布多糖硫酸化产物 ( LAM S ); ∃ 利用 H PLC ELSD 法 对 LAM S 进行纯度检测, 结果表明, LAM S 呈单一对称峰, 利用 归一化法计算其纯度; % 采用硫酸钡比浊法 [ 4] 测定 SO42- 含 量。紫外光谱检测结果表明, 昆布多糖在 260 nm 和 280 nm 处无吸收, 说明昆布多糖样品中不含蛋白质和核酸; 另外 2LAM S 在 260 nm 处有最大吸收, 说明样品中含有 SO 4 。昆 布多糖及 LAMS 的红外光谱图显示其在 3 400 cm 处有强 峰, 说明存在 OH 基团; 昆布多糖在 2 918 cm 处有弱吸收 , 说明存在 - CH 3 或 - CH2 基团的 C H 键伸缩振动; LAM S 在 1 649 cm 处有强吸收, 说明有 C = O 的伸缩振动和非对称 - 1 伸缩振动, 在 1 001 c m 处的强吸收峰是 C O C 的伸缩振