两种不同染色方法在液基细胞学(TCT)检查中的应用价值

两种不同染色方法在液基细胞学（TCT）检查中的应用价值

本文运用HE（Haematoxylin and eosin）染色和巴氏染色两种方法处理宫颈细胞学标本。经TCT检测，比较分析两种染色效果的优缺点，以利同行们选择合适的染色方法。

标签：液基细胞学；瑞氏；巴氏；H-E染色

液基细胞学（TCT）检查是目前国际上较先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，检出率为100%，在宫颈病变诊断中普及，改变了传统手工涂片的方法，制片效果好，利于观察，阳性检出率高，是应用于妇女宫颈癌筛查的一项先进的技术[1-2]。宫颈细胞学的常用染色方法以巴氏染色，HE染色为主，效果各有优劣。比较两种染色方法，分析各自的优缺点，便于在工作中选择合适的染色方法。

1 材料与方法

1.1 仪器材料

福州泰普生物科学有限公司生产的TIB-AUTOPREP1000液基细胞制片仪。液基细胞保存液（天津伊诺新康医疗器械科技有限公司生产）。巴氏染液：福州泰普生物科学有限公司生产的配套染液。H-E染液：福州泰普生物科学有限公司生产的配套染液。

1.2 方法

液基细胞制片，妇科取材保存于细胞保存液中送检。通过95%酒精固定30min，水冲洗，分别用巴氏、HE两种染色法。巴氏染色：液基细胞涂片置苏木素染液浸染3min，水冲洗，盐酸酒精分化5s，水冲洗碱水反蓝，95%酒精2min，EA-50染色2min，95%酒精第一次分化lmin，95%酒精第二次分化lmin，100%酒精第一次分化2min，100%酒精第二次分化5min，二甲苯1～2min，中性树胶封固，HE染色：浸入苏木素染液浸染10～15min，水冲洗30s～1min，1%盐酸酒精分化30S，流水冲洗15min，1%伊红染色3～5min，水冲洗，90%～95%酒精第一次分化30s，95%酒精第二次1min，95%酒精第三次分化1min，100%酒精第一次分化2min，100%酒精第二次分化5min，二甲苯1～2min，中性树胶封固。

2 结果

2.1 巴氏染色

巴氏染色法将胞核染为深蓝色；大部分涂片染色的透明性好，着色较好，胞核结构清晰，不足部分为部分细胞偏红，核周有伊红着色较深处，与核分界不清。染色程序比较复杂。

2.2 HE（Haematoxylin and eosin）染色

苏木素染色后的细胞核呈现蓝色，染色透明度好，核与胞质对比鲜明。红兰适度。

3 讨论

细胞学检查中，核的变化是主要因素，把细胞核染好，核浆对比鲜明是最重要的。液基细胞保存液中，细胞保存时间可较长，因含防腐剂对细胞的影响而对染色的要求较高[3]。

巴氏染液染色特点是细胞具有多色性颜色，细胞核结构清晰，色彩鲜艳多彩。染色效果好，适用于上皮细胞染色，尤其是观察女性雌激素水平对阴道上皮细胞的影响[4]。不足之处是有部分细胞核偏红，核周有伊红着色较深处，与核分界不清的情况。并且染色时间长，操作繁琐。

HE（Haematoxylin and eosin）染色的特点，首先染液的渗透性强，染色透明度好，核浆对比鲜明，操作简便；再者宫颈阴道为非角化复层鳞状上皮，H-E染色后的细胞涂片更易与组织切片相对照。其次当HE（Haematoxylin and eosin）染色不理想时，还能进行弥补，如染色较浅，可分别进行苏木素及伊红复染；如用苏木素使涂片染色过深，后用盐酸酒精处理，直到背景干净，至满意为止[5-6]。最后H-E染色液也可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。因此H-E染色更适合液基细胞染色.

比较上述两种染色方法，分析了各自的优缺点，希望能在实际工作中帮助同行们根据需要正确选择合适的染色方法。

参考文献

[1]李莉，王朝军，窦鹏飞，等.TCT和涂片巴氏染色检查的临床病理结果分析[J].基层医学论坛，2014，（35）：4817-4818.

[2]蔡中文.三种不同染色方法在TCT（液基细胞学）检查中的应用[J].中国民族民间医药，2012，21（5）：57.

[3]Klug SJ1，Neis KJ，Harlfinger W，et al. A randomized trial comparing conventional cytology to liquid-based cytology and computer assistance[J].International Journal of Cancer，2013，132（12）：2849-2857.

[4]蔡中文.三种不同染色方法在TCT（液基细胞学）检查中的应用[J].中国民族民间医药杂志，2012，（5）：57.

[5]栗艳玲，朱东新，李威，等.液基细胞学及TBS诊断报告系统[J].中外医学

研究，2010，8（8）：19.

[6]Akamatsu S，Kodama S ，Himeji Y，et al.A comparison of liquid-based cytology with conventional cytology in cervical cancer screening[J].Acta Cytologica：The Journal of Clinical Cytology and Cytopathology，2012，56（4）：370-374.