土壤主要养分测定

土壤全氮(半微量开氏法)

1、仪器、设备

土壤样品粉碎机；玛瑙研钵；土壤筛：孔径1.0mm（18目）；0.25mm（60目）；分析天平：感量为0.0001g。硬质并氏烧瓶：容积50ml，100ml；半微量定氮仪；半微量一管：容积10ml、25ml；锥形瓶：容积150ml；电炉：300W变温电炉。

2、试剂

硫酸（GB 625－77）：化学纯；0.005mol/L硫酸标准溶液；10mol/L氢氧化钠溶液；2%硼酸溶液（W/V）；

混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG3－1220－79）和0.1g甲基红（HG3－958－76）于玛瑙研钵中，加入少量95%乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95%乙醇至100ml。使用前，每升硼酸溶液中加入20ml混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。此液放置时间不宜过长，如在使用过程中pH值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之。

加速剂：100g硫酸钾（HG3－920－76，化学纯），10g五水合硫酸铅（GB 665－78，化学纯），1g硒粉（HG3－926－76）于研钵中研细，必须充分混合均匀。

高锰酸钾溶液：25g高锰酸钾（GB 643－77）溶于500ml无离子水，贮于棕色瓶中；

还原铁粉：磨细通过孔径0.15mm（100目）筛；辛醇。

3、土壤样品的制备

将通过孔径1mm（18目）筛的土样，在牛皮纸上铺成薄层，划分成多个小方格。用小勺于每个方格中，取等量的土样（总量不得少于20g）于玛瑙研钵中研磨，使之全部通过0.25mm筛。混合均匀后备用。

4、测定步骤

4.1 称取风干土样（通过0.25mm筛）1.0g（含氮约1mg）。

4.2 土样消煮

4.2.1 不包括硝态和亚硝态氮的消煮：

将土样送入干燥的开氏瓶底部，加少量无离子水（约0.5～1ml）湿润土样后，加入2g加速剂和5ml浓硫酸，摇匀。将开氏瓶倾斜置于300W变温电炉上，用小火加热，待瓶内反应缓和时（约10～15min），加强火力使消煮的土裘保持微沸，加热的部位不超过瓶中的液面，以防瓶壁温度过高而使铵盐受热分解，导致氮素损失。消煮的温度以硫酸蒸气在瓶颈上部1/3处冷凝回流为宜。待消煮液和土粒全部变为灰白稍带绿色后，再继续消煮1h。消煮完毕，冷却，待蒸馏。在消煮土样的同时，做两份空白测定，除不加土样外，其他操作皆与测定土样时相同。

4.2.2 包括硝态和亚硝态氮的消煮：

将土样送入干燥的50ml开氏瓶底部，加1ml高锰酸钾溶液，摇动开氏瓶，缓缓加入2ml １：１硫酸，不断转动开氏瓶，然后放置5min，再加入1滴辛醇。通过长颈漏斗将0.5g（±0.01g）还原铁粉送入开氏瓶底部，瓶口盖上小漏斗，转动开氏瓶，使铁粉与酸接触，待剧烈反应停止时（约5min），将开氏瓶置于电炉上缓缓加热45min（瓶内土液应保持微沸，以不引起大量水分丢失为宜）。停火，待开氏瓶冷却后，通过长颈漏斗加2g加速剂和5ml浓硫酸，摇匀。按5.2.1的步骤，消煮至土裘全部变为黄绿色，再继续消煮1h。消煮完毕，冷却，待蒸馏。在消煮土样的同时，做两份空白测定。

4.3氨的蒸馏

4.3.1 蒸馏前先检查蒸馏装置是否漏气，并通过水的馏出液将管道洗净。

4.2.2待消煮液冷却，用少量无离子水将消煮液定量地全部转入蒸馏器内，并用水洗涤开氏瓶4～5次（总用水量不超过30～35ml）。

于150ml锥形瓶中，加入5ml 2%硼酸－指示剂混合液，放在冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3～4cm处。然后向蒸馏室内缓缓加入20ml 10mol/L氢氧化钠溶液，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积约50ml时，即蒸馏完毕。用少量已调节至pH4.5的水洗涤冷凝管的末端。

4.3.3用0.005mol/L硫酸（或0.01mol/L盐酸）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为红紫色。记录所用酸标准溶液的体积（ml）。空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4ml。

5、测定结果的计算

5.1计算公式

土壤全氮（%）＝（V- V0）×CH×0.014×100/m

式中：V――滴定试液用酸标准溶液的体积，ml；

V0――滴定空白时所用酸标准溶液的体积，ml；

CH――酸标准溶液的浓度，mol/L；

0.014――氮原子的毫摩质量；

m――烘干土样质量，g。

5.2平行测定结果，用算术平均值表示，保留小数点后三位。

5.3平行测定结果的相差：土壤含氮量大于0.1%时，不得超过0.005%；含氮0.1～0.06%，不得超过0.004%；含氮小于0.06%时，不得超过0.003%。

土壤碱解氮（扩散法）

1、主要仪器及试剂配制

主要仪器：电子天平、扩散皿、毛玻璃、恒温箱、半微量滴定管(5ml)、皮筋

试剂：

(1)1.8molL-1Na0H：称取72gNaOH溶于水中，冷却后用蒸馏水稀释至1升。

(2)2％硼酸溶液：称取硼酸20克，用蒸馏水（约60℃）溶解，冷却后稀释至1000ml，用稀盐酸或稀氢氧化钠调节PH至4.5（定氮混合指示剂显淡红色）。

(3)定氮混合指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红放入玛瑙研钵中，加入100ml95%的乙醇研磨溶解。然后用稀盐酸或稀氢氧化钠调节PH至4.5。最后加水稀释至1000ml，混合均匀贮于瓶中。

(4)特制胶水：将适量氢氧化钠溶于丙三醇中，搅拌均匀。即可。

(5)硫酸亚铁（粉状）：FeSO4.7H2O，磨细，装入玻璃瓶中，存于阴凉处。

(6)0.01 mol/L硫酸标准溶液：将1 mol/L的溶液稀释100倍。

2、操作方法与实验步骤

2.1称取通过1ml筛的风干土样2克(精确到0.001g)和硫酸亚铁粉剂1g（一般适量即可）均匀铺在扩散皿外室，水平地轻轻旋转扩散皿，使土样铺平。

2.2在扩散皿的内室中，加入2ml 2％硼酸溶液，并加入2滴定氮指示剂，然后在扩散皿的外室边缘涂上特制胶水，盖上毛玻璃，并旋转之，使毛玻璃与扩散皿边缘完全粘合，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一条狭缝，迅速加入10毫升1.8mol/LNaOH液于扩散皿的外室中，立即将毛玻璃旋转盖严。

2.3在实验台上水平地轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，并用橡皮筋固定；随后小心放入40℃的恒温箱中，24小时后取出。

2.4用微量滴定管以0.01mol/L的盐酸标准液滴定扩散皿内室硼酸液吸收的氨量，由蓝色滴定到淡红色。记下盐酸用量。

另取一扩散皿，做空白试验，不加土壤，其他步骤与有土壤的相同。