小鼠尾静脉注射
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小鼠尾静脉注射:高手经验谈
1、固定:小鼠一定要固定好,注射时尾巴不能动。
我一直用小鼠固定器固定,另外一人用手指轻轻夹住尾巴的根部,这样一般能固定的很好。
(我自己是找一个去500或者1000ml的烧杯,倒卡在桌子上,小鼠放在里面露出尾巴即可)2.对血管的选择,一般来说,小鼠尾部有三条静脉,左右两边各一根而且比较浅,容易穿刺;中间一根位置较深,不是很容易穿到,建议尽量不选择.另外穿刺选择尾部中下2/3~1/2处比较好,因为此处皮肤较薄,我的体会是可以采用75%酒精反复擦拭穿刺血管,使其充盈,并且使皮肤的角质层软化,利于穿刺. 或者在注射之前,小鼠尾巴用温水(水温约50度左右)泡大约2分钟,这样能使血管充分舒张。
用干棉球擦干。
血管应选择两侧的血管,从下向上扎。
这样的好处是万一一次扎不进,还可以继续使用此血管。
3.针的选择:书上说使用1毫升的注射器.有人在实践中采用的是头皮针,后接1毫升注射器.因为头皮针针头更小,对血管的损伤更小,适合多次连续给药,其次使用头皮针穿刺后,我们可以通过回血来判断穿刺是否成功.(我的体会是4号半1毫升注射器,已经足够且很容易进针)
4、注射手法:左手食指和中指上下夹注你所选择血管的靠近身体的一边,无名指和小指垫起一块纱布或者纸巾(建立一个穿刺的平面的作用),拇指压住所选血管的尾尖端,上下夹住血管的距离应以不影响右手持针上下移动为宜.(否则容易人为建立穿刺的角度,而使右手持穿刺针穿刺过深,导致穿刺失败.)右手持穿刺针,稍微挑起皮肤一点,就可以平着进针,看到回血表明成功,还可以回抽,见到回血后表明穿刺已进入血管,可以给药.
用左手将鼠尾拉直,右手持1ml注射器的中下1/3部位,针斜面向上,在尾部的下1/3-1/2处进针,针与皮肤稍成一角度(10度左右),进针后要将针头稍向上挑,然后将针向里送一点。
如果在血管里,则无阻力,并且能看见针。
若针看得很清晰,则扎到了皮下,若针看不清,则扎深了。
可轻推液体验证。
(联系那么多次,发现开始不能很顺利的进针,原因大部分就是插进去然后有个挑起的
过程)
5.穿刺结束后,用纱布压住穿刺部位反折尾部进行止血.良好并彻底的止血对于血管可以起到很好的保护作用,这对于需要天天穿刺给药是非常有用的.(一般小鼠需要按压时间很长,否则易引起出血)
使用无菌的1毫升的无菌小注射器足够了,药店里到处是卖的。
由于师兄做的是小鼠尾静脉注射,自己没事也玩玩,所以耳叙目染对尾静脉注射也有一点感受:
1:小鼠尾静脉最重要的是小鼠一定要固定好,自己可以做一个前面有挡板的塑料同道,后面也有挡板,在后面的挡板留一个小洞,以使尾静脉伸出来。
2:注射前将小鼠尾静脉用热水泡一下或是用75%的酒精擦拭小鼠尾静脉,以使注射1前使尾静脉充分充血扩张;或是在上方悬挂一灯泡,在适当距离烤尾静脉也可以使尾静脉充血扩张。
3:一开始最好从小鼠尾静脉的末端开始注射,如果在中前端注射一旦失败这样可以防止注射的数次失败后液体漏出。
4:注射时手上的感觉很重要,如果针头进入尾静脉,手上会有一种透空感,这种感觉只有自己亲自经历后才会有比较深的体会,另外针头如果进入后,液体的推射会很顺利;如果,感觉液体推不进去,很费力,说明针头没有进入尾静脉,而是进入了周围的软组织。
5:在注射时,一个很重要的原则是注射要缓慢,均匀推射,速度不可以快,一旦速度快,小鼠会发生充血性心衰;如果一旦出现这种情况,立即停止注射,对小鼠实行心脏按摩,也许可以救活(自己曾经这样救活过2只小鼠)!
6:每次注射的剂量:不可以超过0.2毫升;注射剂量过多,也会发生充血性心衰。
本人最近也在练习尾静脉注射,前面的帖子也看了不少,但是一直没找到手感,前天偶然在一个网页上看到相关技巧的介绍,试了一下果然灵验,今天的成功率居然提高到40%(原来是很低的哦),大体是这样的:小鼠左右两侧的静脉较粗,而且很鼓(中间的那根太扁,最好不要采用),用酒精擦一下,使血管扩张,
可看到有明显的两根血管充盈,在距鼠尾2~3cm处小于30度进针,若打进去,则推行无阻力,而且拔针会有回血。
我做过小鼠的尾经脉注射,可以分享如下:
1.固定:先放一托盘再桌子上,用市售的小鼠固定器(刚好固定住)固定小鼠,手持尾巴并向后拉,力量要适当;
2.搽洗:我试过用75%的酒精搽洗尾巴,但是试验成功率很低;在老师的建议下,我使用的是热水,搽洗若干次;你就可以看到小鼠尾部双测血管比搽前红而充盈。
3注射:小鼠一般用1ml的注射器就可以了。
如果你是初学者,要先从尾的最远端开始,以防一次不成功还可以再次选择注射部位注射。
针头进入血管时会有一种透空感,正如上述战友所说,药物推进速度不课太快等等。
注意:针头一定不要有倒刺,要光滑;你可以用手感觉到的;
水的温度一定要把握好,太热容易使小鼠尾巴烫伤;温度不够达不到效果。
这两条是注射成功的关键。
如果你的试验需多次重复给药,那么你的一次进针的成功率就要达到99%以上,否则会影响你下次注射给药。
打了将近一个学期尾静脉,谈谈自己的一些经验:
1、固定:很重要,我们实验室自制了一个小圆筒,筒的直径正好容下一直小鼠,筒的一端是盲端,筒身上开了N个通气空,有一个后盖,后盖上留有一圆孔,正好容下尾巴。
由于小鼠有钻洞的习性,把它往筒口一放,自己就钻进去了,然后把尾巴从盖孔中穿过,盖上后盖即可。
这样比较稳妥。
我一般找一张桌子,把尾巴压在桌边沿上,由于边沿是个直角,把尾巴的下1/3处压在直角上能使尾部暴露很好。
2、扩张血管:关键,我一般用热水泡,直至发红即可,不能太热,容易把皮烫掉了;小鼠尾巴如果发白,那是没烫到位,再多泡一会即可。
3、手法:这要靠多练,熟能生巧。
现在我基本上是100%的成功率,关键是要对自己有信心!!
我做过小黑鼠的尾静脉注射,也来说说体会:首先,要用固鼠器固定好,尽量把鼠尾拉直,用酒精擦鼠尾(必要时再用手拍打),好让静脉充分扩张,在鼠尾两侧可找到两条尾静脉(小黑鼠比较难看一点,但认真还是可以看到的)。
用细针头皮下进针(我用的是4号)从远端打起,后面的皮薄一点,较容易打成功(个人看法),打成功时进针会很顺畅,注药没有阻力,一般不会自己回血,若不成功再往近端打,但一般一条血管打过三次还不成功的话最好先暂停,因为刺激后血管会收缩,很难打,歇一会儿换另一边打。
还有一点,信心很重要!!有了信心才能找到感觉。
所以楼主一定要坚信自己能行,这样才能很轻松打中了。
首先,我觉得你打不进去小鼠的尾静脉,不应该发这个帖子,有这个时间和工夫,还不如去练习。
尽管我体验过几十只老鼠只打进去几只的崩溃心情。
我记得刚刚开始打尾静脉,很多老鼠都打废了,中午的时候我一个人在动物房对着一笼老鼠有放声大哭的冲动,心里难过得要命,可就是打不进去,我一个师姐买了包子让我吃了再做,包子是和眼泪一起吞到肚子里的,下午5点多回家以后我才意识到,一整天从早上起床到下午五点,我除去吃了师姐的一个包子外,没有吃任何东西,没有喝一口水,甚至没有上过厕所。
不过终于度过那段时间了,现在我几乎可以针针无虚发。
任何实验操作,掌握它只有一个办法,那就是勤练,除此之外没有任何投机取巧的办法,在实验的操作上大家都有心得,但这些心得都是在长期练习后得来的,每个人都有不同的感觉。
当然,有的时候不是有那么多的动物可以让你练手,我练尾静脉的时候,本科的实验有小鼠的,我就让同学做完先不要处死,然后自己养起来练;还有练习大鼠动脉插管时,如果实验室有人杀大鼠,就跑去帮忙,然后在死老鼠身上练插管,也就练出来了。
梅花香自苦寒来,宝剑锋从磨砺出,好好地练吧,有一天你一定会针针无虚发,有了自己的操作心得。
小鼠尾静脉注射主要要靠多练,养两笼老鼠,天天打进去一针,连续打3周,再换一批,再打三周......一直到你的技术过关了为止。
这些大家都知道,我说几
条大家一般比较少提到的注意点:
1.选择进针部位,进针的位置不是死板的,用酒精棉球擦过后,选择血管清晰鼓胀发黑的部位进针,主要多体会几次就是那种感觉很“厚"的位置,有些血管,粉红粉红的,颜色浅浅的,看起来挺宽,实际上非常难打,因为这种血管很扁,进针深浅不好掌握,要知道,我们进针的时候左右的偏差几乎是没有的,但是深浅的偏差很难控制,所以这种扁扁的位置很难打,怎么判断血管是不是扁扁的,主要看颜色,有的位置看起来很细很细,但是颜色很浓,这种其实也很好打,当然,那种又粗又黑的血管是极品进针位置,就不说了。
还有一种地方不能进针,就是那种有结节的地方,一定要避开,血管颜色再深都不要去打,有的小鼠的尾巴从头到尾密密麻麻的结节,这种小鼠放弃为妙。
同理,从头到尾都是粉红色扁扁的血管的小鼠也要放弃。
这种小鼠特别是连续i.v的时候,简直能让人抓狂。
我做实验的时候,都是把vehicle组放在最后,前面给药的时候发现不好的尾巴就换到vehicle组(或者其他的给药没有给进去也无关紧要的组),呵呵。
2. 手法很重要,大家进针的手法讨论的很多,比如斜面朝上什么的,但是我觉得还有几点要注意的手法的问题:一个是保证注射面平直,有的人固定方法的问题,造成打两侧血管都需要把小鼠的尾巴扭曲起来,这种时候至少要保证进针那一段尽量平直。
第二个,固定小鼠尾巴的那只手的手法很有讲究,食指和大拇指捏住尾巴,这个大家都知道,但是要注意,大拇指的位置要低一些,差不多压在食指指腹中部的位置(千万不要用指甲去掐,要用皮肉的部位去捏住),为什么呢,如果大拇指随随便便的往食指上一搭,进针的针头被大拇指顶住,不可避免的要以一个角度刺入,然后再挑起来,这个属于比较高难度的动作,如果大拇指的位置低一些,针头几乎就可以水平刺入,更好掌握。
另外中指也不能闲着,要顶出去,顶在前面的物体上(笼子壁啊,桌子边什么的),而且要顶紧,把小鼠固定住,这样有支力点的固定比较牢靠,小鼠一般的挣扎你都能控制得住,如果没有这个支点,想来大家都体会过明明已经刺准了,小鼠一动,又滑出来或者把血管刺穿的感受吧,这种情况对操作者的耐心是最大的打击。
3. 大胆一点,进针深一点吧,很多人在初学的阶段,总是抖抖索索刺进去一点
点就不敢继续进针了,这样子首先体会不到针头在血管中滑行感觉,另外对固定也不好,小鼠稍有挣动,针头就滑出来了,针头如果进得深一些就不怕了。
好了,暂时只想到这些,总之还是要多练,上面的技巧只是提高i.v时的把握,但是如果练到深处功夫自然厉害。
我认识一位老师,看远处要带近视眼镜,看近处要带老花眼镜,唯独打老鼠尾静脉的时候什么眼镜都不带,看也不看,全凭手上感觉,小黑鼠也是一扎一个准,用他自己的话来说就是,小黑鼠小白鼠小灰鼠都是一样的,反正我都看不清楚。
另外还有一位同行,姿势手法别扭无比,一把抓住注射器就上手刺的,就这么个奇怪的姿势,人家也能连打三周的小鼠尾静脉,不佩服都不行啊。
止血的问题,注射完后,固定鼠尾的手中指回来和食指一起把尾巴稍微捏住,大拇指上去轻压在针孔上,退针的一瞬间大拇指捏下去止血即可。
我给小鼠尾静脉注射的几点体会:
1. 将小鼠要保定好,否则小鼠乱动,容易扎偏。
最好一个人保定,一个人注射。
2. 将小鼠尾部用酒精擦拭后再用手指弹弹,保定者用大拇指掐住尾巴根部,使尾静脉充分扩张。
3. 注射者不要紧张,手不要发抖,否则扎不准。
4. 最好选用4号针头,注射器为1ml 的注射器。
5. 针头扎入后感觉一下,如果扎入静脉中,注射器容易推进,反之,比较困难。
小鼠尾静脉注射是很不容易的事,需要手感,需要练习,需要耐心!
1. 固定。
可就近取材,如老鼠笼子的塑料盖子,建议可以在压痕处垫上一层棉花,既人道又方便以后多次注射保护尾巴!
2. 扩张血管。
可采用酒精棉球擦拭,或者温水泡尾巴,有条件的用台灯照10分钟左右。
3. 一般采用由远及近地注射,不到万不得已不要动用尾动脉。
4. 我使用的是1ml注射器的配制针头,还行,对于药品珍贵的用胰岛素注射器,
不仅针头超细,而且在针头接合处储留的液体也少。
说到底还是要多练习,有了好的手感和心态,万事OK!。