圆二色谱仪使用

圆二色谱仪

使用手册

实验前请先阅读第一部分注意事项

20RR年4月6日整编

河北大学理化中心

目录

一、注意事项

二、光源的选择

三、MOS450波长的校正

四、电压的调节

五、M OS-450圆二色光谱扫描操作规程

六、MOS450-SFM300动力学操作方法

一、注意事项

1、滴定及变温实验时，需要磁子搅拌。实验结束时首先拔掉搅拌电源。在样品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。

2、光源（也就是氙灯或汞氙灯）不可频繁开关。举例而言，如果马上不用仪器，但半个小时后需要使用仪器，就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。短时间内

频繁开关光源反而会缩短光源寿命。

3、光电倍增管移动时（比如从圆二色模式换为荧光模式），注意用软件将Hv （高压）关闭。

6P MT HV1000V.

7、使用控温附件进行变温实验时，一定要将地上的那个水浴恒温槽打开，水槽温度设为20度以下即可。

8、TCU 上设置为remote;PowersupplR设置为ARC.

9、仪器运行过程中，更换样品时，shutter最好关闭。

二、光源的选择

1电源:

图1中的LamppowersuppIR处有Re （红色）、Re（Hg）（红色）、零线（黑色）三个插孔。

零线插头为黑色，直接插到黑色的零线插孔中。

火线插头为红色，在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在Re （红色）插孔中，在做快速动力学测量的时候插在Re（Hg）插孔中。

2、光源选择：

图2中的Verticalsetting部位下方的底座上有Re、Re（Hg）两个标示前后排列。手动松开中间的大圆头Screws（图2中），可以拉出或推进Verticalsetting。当Verticalsetting的金属头通过前后移动到下方的哪个标示位置上，也就是那个标示所示的灯正对着光路，为测试用光源。做快速动力学测量的时候选Re（Hg），做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时选Re,最后再旋紧中间的大圆头Screws。

注：Re（Hg）灯中的Hg元素有一些很强的特征谱线，加强了Re元素发光的强度，对于动力学测量要求一个波长的光源能量要强，才能测量较为精确的谱图。而对于光谱扫描，单独的Re元素谱线较为平滑，光源对扫描的影响较小。

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- l^imp hiQ using

Supply

____________ horizontal

图1图2

三、MOS450波长的校正

仪器使用一段时间后需要对仪器进行波长校正，以保证测量的准确性，波长校正的操作步骤如下：

1、确认样品仓中没有任何样品和样品池。

2、根据光源选择的操作说明，将光源换为Re（Hg）灯。

3、打开ALR-250、MM-450 和PMS-450 电源。

4、点击电脑中的BioKine软件图标，进入测量主界面。

5、在主界面选择Device菜单的Scanningspectromete命令，进入光谱扫描界面。

点击'■'■■■■';lor ：:，' "■按钮设置参数，在光谱测量模式里选择Fluoresce nee 模式, 波长扫描范围200-750nm,进行光谱扫描，得出如图1所示谱图。此时检测器位置为与入射光成180度的位置，不用改为荧光的位置。

6、谱图在546nm处应该出一个峰，比较546nm处的峰是否有偏差。如果超出+/-1 nm的范围，需要进行波长校正。

7、举例说明，如果在550nm处出峰，波长偏了4nm,那么就在图2所示主界面左下栏的ER处填入550nm,按回车键。

图2

8 点击图2主界面In stall菜单的Spectrometeradva ncedsett ing命令，出现图3所示的窗口，点击ERcitation下方的Calibration按钮，进入波长校正界面，如图4。

图3

图4

在图4所示窗口里的Currentwavelength处输入546,点击OK按钮，进行波长校正。

Re灯校准波长467nm；Re(Hg)灯校准波长546nm。

操作完以上各步骤，波长校正完成。可进行正常的测量操作。

四、电压的调节

1.选择Re灯，打开ALR-250稳定10分钟，将ALR-250的功率调整到150W；

2.在打开ALR-250的同时，打开MM-450电源，机器预热10min；

3.确保空仓(样品池中无待测样品)。狭缝设置为2nm

期

4•点击电脑桌面上的图标，进入BioKi ne软件操作主界面。点击In stall 的Device，出现图1,只选中MOS-450,点击0K。

输入 E R 值 200nm ,打开 shutter , Hvon , Auto 值为 200左右。

五、MOS-450圆二色光谱扫描操作规程

1、选择Re 灯，打开ALR-250稳定10分钟，将ALR-250的功率调整到150W ；

2、 在打开ALR-250的同时，打开仪器电源，先开 MM-450，再开PMS-450。机器 预热10mi

n ；

3、 清洗好样品池，添加待测样品的空白溶液（如水或缓冲盐）到样品池中。

4、 安装上样品池盖。

5、 如果测量波长小于210 nm,需要对仪器进行氮气吹扫处理。打开氮气，调整流

量计流速为1000L/h ，通氮气几分钟。确认电源线插在氙灯的位置，并且氙灯 已对准光路，具体操作见光源的选择操作说明。然后打开 ALR-250光源开关， 将氮气流量计流速设为 400L/h ，查看ALR-250面板显示，当氙灯能量达到 150W ,氙灯稳定。如果无需氮气吹扫，直接打开 ALR-250电源，等待氙灯稳 定后进行下一步操作。

Gpecliornetei

| E N | 50D nm Eir | 0 nm Shultef Vvl^mefcr L mV 1 0 HU? 代

图1

进入图2界面

点击

图2

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