圆二色谱仪使用

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圆二色光谱仪操作流程

圆二色光谱仪操作流程

圆二色光谱仪操作流程圆二色光谱仪是一种广泛应用于生命科学领域的仪器,可以用来研究溶液中的有机化合物的结构和构象。

本文将介绍圆二色光谱仪的基本操作流程。

I. 准备工作在开始操作圆二色光谱仪之前,需要完成以下准备工作:1. 样品制备:根据研究目的选择相应的溶剂,将待测的有机化合物溶解于其中,注意控制浓度。

同时,确保样品中没有杂质或者其他干扰物。

2. 刷洗样品池:使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗,以确保无杂质残留。

避免使用有机溶剂,以免对后续实验产生干扰。

3. 仪器预热:启动圆二色光谱仪,并按照厂家的指示预热仪器至指定温度。

通常情况下,建议将仪器预热至室温。

II. 校准仪器在进行实际测量之前,需要对圆二色光谱仪进行校准,以确保测量结果的准确性。

校准的具体步骤如下:1. 空白校准:在样品池中加入相同溶剂但不含有机化合物的空白样品。

按照仪器操作手册的指示,进行空白校准,以消除系统本底的影响。

2. 参考物质校准:选择合适的参考物质,如D-葡萄糖酸钠。

将参考物质溶解于相同溶剂中,加入样品池,按照仪器操作手册的指示进行参考物质校准。

III. 测量样品完成仪器的校准后,可以进行样品的测量。

具体操作步骤如下:1. 操作参数设定:根据样品的性质和研究目的,设置合适的操作参数。

例如,选择适当的波长范围、光强等参数。

2. 样品测量:将待测样品溶液加入样品池中,确保样品池的表面平整没有气泡。

将样品池放入圆二色光谱仪的样品室中。

3. 测量记录:按下开始测量按钮,圆二色光谱仪会自动记录样品的圆二色信号。

在测量过程中,避免干扰,保持实验室环境的稳定。

4. 清洗样品池:在每次测量完毕后,使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗,以避免污染。

IV. 数据处理与分析完成样品的测量后,可以进行数据处理与分析,以获取有关样品结构和构象的信息。

具体步骤如下:1. 数据导出:将测量得到的原始数据导出为适当的格式,如文本文件或Excel文件。

2. 数据校正:根据仪器的响应性能,对数据进行校正,消除背景噪声等。

圆二色光谱测量

圆二色光谱测量

圆二色光谱测量
圆二色光谱(简称CD)是研究稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法,广泛应用于蛋白质的构象研究中。

以下是其测量步骤:
准备样品:确保样品的纯度达到圆二色光谱所要求的纯度(约96%)。

设定仪器参数:在室温下,使用日本产JASCO J-810圆二色谱仪,测定远紫外190-240 nm的光谱。

设定分辨率、带宽、灵敏度和扫描速度等参数。

测定样品:将样品放入样品杯中,设置适当的浓度(例如100 μg/ml)和光径(例如0.2 cm)。

记录数据:按照设定的参数进行测量,并记录光谱数据。

分析数据:使用杨氏算法(Yang. Jsr)等计算方法,将测得的光谱数据与已知的蛋白质二级结构(如Helix、Beta、Turn和Random)的特征谱线进行拟合,结合样品的摩尔浓度进行计算,可以得到溶液中多肽的各种二级结构的含量及比例。

圆二色光谱是研究蛋白质二级结构的主要手段之一,具有快速简便、灵敏度高和对构象变化敏感等优点,对蛋白质的构象研究具有重要意义。

圆二色谱仪chirscan参数

圆二色谱仪chirscan参数

圆二色谱仪chirscan参数
圆二色谱仪(Circular Dichroism Spectrometer)是一种用于
研究物质对圆偏振光的吸收和散射特性的仪器。

Chirascan是一种
商用圆二色谱仪,它具有许多可调参数,以便用户可以根据实验需
求进行调整。

以下是一些Chirascan圆二色谱仪可能具有的参数:
1. 波长范围,Chirascan圆二色谱仪通常可以覆盖较宽的波长
范围,例如从170nm到900nm。

这种广泛的波长范围可以用于研究
各种生物大分子和化合物的圆二色谱特性。

2. 光学路径长度,光学路径长度是样品在仪器中通过的距离,Chirascan通常允许用户调整光学路径长度以适应不同类型的样品。

较长的光学路径长度可提高检测灵敏度。

3. 温控系统,一些Chirascan圆二色谱仪配备了温控系统,可
以在进行实验时控制样品的温度,这对于研究温度对样品圆二色谱
特性的影响非常重要。

4. 数据采集速度,Chirascan圆二色谱仪通常具有可调的数据
采集速度,用户可以根据实验需求选择快速扫描或高分辨率扫描。

5. 自动化功能,一些Chirascan圆二色谱仪具有自动化功能,可以进行自动样品加载、实验执行和数据分析,提高实验效率和准确性。

总的来说,Chirascan圆二色谱仪具有多种参数和功能,可以满足不同实验需求,并且可以通过调整这些参数来实现对样品圆二色谱特性的全面研究。

圆二色光谱仪的使用

圆二色光谱仪的使用

圆二色光谱仪操作步骤仪器型号(法国Bio-Logic:2400304)1.打开光源打开ALX-300光源控制器机箱后部开关,而后按机箱前面板“start"按钮,然后等待15分钟保证ALX-300前面板功率显示稳定,查看是否在150±2,如不是,可用前面板左部旋钮调节至150±2),左旋(逆时针旋转)按钮可使数值变小,右旋(顺时针旋转)按钮可使数值变大;2.在数值稳定在150±2之后,打开MOS-500主机前面板开关;3.打开电脑,双击BioKine图标启动程序;在弹出的界面中,鼠标左键单击菜单栏中的“Install device":在出现的“Device Isallation对话框”中要勾选配置的仪器和附件,这里勾选了“MOS-500”。

若有温控附件则还需勾选Peltier TCU-250(股没有不用选),最后单市“OK"确认:选择菜单栏“Device”,点击Scanming spectrometer(MOS-500)”,在新弹出的小框中,选择是,然后大院等待2分钟。

设置狭缝宽度2nm(输入数值后按enter键),点击窗口上部“Acquisition Setup"在出现的“Scanning Setup对话框”中的Acquisition mode选择“CD”。

其它参数:起始波长(Begin)最低不能低于190nm,否则损伤仪器,End(nm)根据自己的需要一般300-800nm之间。

Step(nm)为扫描速度,数值越大,测样速度越快。

快门选择“常开”其它Options栏都不用勾选,CD parameters不用更改,CD unit选择Elipticity而后单击“OK”确认。

4.Ex输入190enter,点击Shutter off使变成Shutter on,点击HV off使变成HV on,点击Auto 得到330V以下电压值1-2秒后再点击一次Auto使变成灰色。

圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧

圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧

圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧圆二色谱仪(Circular Dichroism Spectrometer,简称CD谱仪)是一种常用的光谱仪器,广泛应用于生物化学、生物物理、有机化学等领域。

它通过测量物质对环形偏振光的吸收差异,可以研究样品的结构、构象和化学反应等信息。

本文将介绍圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧。

一、圆二色谱仪的使用步骤1. 准备样品:选择适合的样品,如蛋白质、核酸、有机小分子等,按照实验要求进行样品制备。

样品的浓度应该适中,一般在0.1-1.0 mg/mL之间。

2. 调节仪器参数:打开圆二色谱仪,根据实验要求选择合适的仪器参数,如波长范围、光程、扫描速度等。

这些参数会对谱图的质量产生较大影响,需要仔细选择。

3. 参考谱图测定:选择一个与样品相类似的参考物质,并制备成相同浓度的溶液。

将参考物溶液装入样品池,并用去离子水进行基线校正。

4. 样品谱图测定:将样品溶液装入样品池,注意不要产生气泡和表面张力现象。

同样,用去离子水进行基线校正。

扫描仪器并记录谱图。

5. 数据处理和分析:将样品谱图与参考谱图进行比较,分析其差异部分。

常见的数据处理方法包括谱图叠加、拟合曲线等。

二、谱图解读技巧1. 谱图的形态:圆二色谱图一般为正或负对称的峰形,其形态可以提示样品的结构特征。

例如,α-螺旋结构的蛋白质在200-230 nm范围内会出现负吸收峰,而β-折叠结构在190-210 nm范围内会出现正吸收峰。

2. 谱峰的位置:谱峰的位置与物质的手性有关。

一般来说,左旋(L-)物质在200-230 nm范围内表现为负吸收,而右旋(D-)物质则相反。

通过对比实验样品与参考谱图的位置差异,可以了解样品的立体构型。

3. 肩峰的存在:有些样品的圆二色谱图中会出现肩峰,它们通常位于主峰的两侧。

肩峰的存在提示样品可能存在多种构象,可能与蛋白质的不规则结构或转变有关。

4. 拟合曲线:通过将实验谱图与拟合曲线进行比较,可以获得更加精确的结果。

圆二色谱仪操作规程培训ppt课件

圆二色谱仪操作规程培训ppt课件
Mean residue ellipticity or Molar ellipticity (摩尔椭圆率[θ]):单位为 deg.cm2.dmol-1,文献中通常都使用
根据Beer-Lambert law 有: θ = [θ]. l.c 或 [θ]=mdeg/(l.c ) (c-摩尔浓度)
计算出的值最后再乘以1000即可转换为deg.cm2.dmol-1
蛋白质: 氨基酸的圆二色性: 在可见光区没有吸收,紫外区只有芳
香族色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。
2、 JASCO J-1500 基本组成与附件
配置:
1)检测器: UV-VIS 163-950nm NIR 400-1250nm 2) 光源:氙灯 3)气体:高纯N2 4)多通道测定 (CD/HT/Abs…),
制样工具
3) 停流附件
注射器:10ml
单管路死体积:46ul
注射器Flow rateMax :5ml/min
反应动力学检测
Mixing Ratio:整数倍
4) N2吹扫装置
只能用于标准样品支架,用于190nm以下样品测试
3、开机与基本操作规程
1)开气:打开氮气,调节分压在0.02mPa左右,依据测定波 长范围在仪器右侧的流量控制器中调节所需的气体流量。 (>190nm 2L/min; 185-190nm 5-10L/min; <185nm 25L/min) 2)开机:打开主机电源,使用变温时,需打开水循环电源。 或使用停流附件需开启停流附件控制器电源。 3) 软件:打开电脑主机,双击“spectra manager”图标,进入 操作界面,显示J-1500处于Idle状态则表示联机成功。
二级结构分析:
打开protein Secondary structure estimation软件,打开转换单位后 另存的文件数据。

圆二色光谱仪(cd)表征

圆二色光谱仪(cd)表征

圆二色光谱仪(cd)表征
圆二色光谱仪(CD)表征是一种用于研究分子结构和构象,分析
蛋白质、核酸等生物大分子二级结构的高分辨率技术。

CD技术最早应
用于化学领域,如化学键反应的研究,现已广泛应用于生物学、药物学、医学和材料科学等领域。

基本原理:
CD是强度吸收差谱测量技术,利用手性分子(不能跟其镜像重合的化
合物)的特性,根据其在右旋偏振光和左旋偏振光的不同吸收,来研
究分子的构象。

CD谱从波长190-320 nm可见,用强度差Δ A(CD)
或直接CD值来描述。

实验步骤:
1. 样品制备:将样品置于薄膜中,厚度约为0.1 mm,避免空气泡存在。

2. 光路检查:将样品放入样品室中,进行波长和基线的设置。

3. 监测:加入滴定管,记录CD强度吸收差随波长的变化。

4. 数据分析:通过CD曲线分析获得蛋白质、核酸等分子的二级结构信息。

应用领域:
1. 生物学领域:通过CD表征技术,可分析蛋白质的二级结构、折叠及稳定性等特性,还可以分析酶、抗体、肽、鸟苷酸等分子的构象。

2. 药物学领域:CD表征技术可用于研究药物与其靶点的相互作用,交
互作用、配基特征和构象等。

3. 材料科学领域:CD技术可用于研究由低分子化合物构成的配合物,聚合物和纳米粒子等材料的超分子组装过程。

总结:
CD表征技术是研究大分子结构与构象的重要方法,其广泛的应用领域包括生物学、药物学、医学和材料科学等领域。

通过CD分析获得的分子结构与构象信息对新药研究、药物设计和新材料的开发具有重要的指导意义。

圆二色谱 样品浓度

圆二色谱 样品浓度

圆二色谱样品浓度
圆二色谱是一种常用于研究蛋白质二级结构的技术。

它通过测量左旋和右旋偏振光在圆周方向上的吸收差异来获得样品的信息。

样品的浓度、操作步骤等都会影响实验结果。

一、样品浓度:
1.蛋白质的浓度通常在0.1-10mg/mL范围内。

对于某些蛋白质,较低的浓度可能提供更好的分辨率,而某些蛋白质则需要更高的浓度才能观察到结构变化。

2.如果样品太稀,可能会由于光路中的散射导致背景噪声增加;如果样品太浓,则可能会出现光饱和现象,导致检测器接收到的光强过强,同样会增加背景噪声。

二、操作步骤:
1.在测量前,应将蛋白质样品在测定温度下平衡至少30分钟。

2.每次测量前,应确保仪器已经预热至少30分钟。

3.选择适当的扫描速度,通常在100-1000nm/min范围内。

4.记录至少3次扫描以获取可重复的结果。

5.在实验结束后,务必用溶剂清洗仪器,以确保没有蛋白质残留在仪器中,这有助于延长仪器的使用寿命。

6.为了确保结果的准确性,建议在每次实验时都进行背景扫描,并从最终结果中减去背景。

进行圆二色谱分析时,需要注意不同波长下的测量结果可能不同,因此通常会测量整个光谱范围(例如190-260nm),以便获得更全面
的信息。

此外,如果观察到任何异常的CD信号(例如非常强的或与预期不符的信号),这可能是蛋白质变性的迹象,此时应重新检查实验条件。

AVIV410型圆二色光谱仪的使用及维护

AVIV410型圆二色光谱仪的使用及维护

Ke y wo r d s :c i r c u l a r d i c h r o i s m( CD) s p e t r o me t e r ;t e s t c o n d i t i o n s ;s a mp l e p r e p a r a t i o n s ;i n —
得到较好的测试结果 。
关 键 词 圆 二 色 光 谱 仪
测试条件
样 品制 备 仪 器 维 护
AV l V t y p e 4 1 0 r o u nd t wo c o l o r s pe t r o me t e r u s i ng a n d ma i nt e na n c e .Che n M uz i, Fan g WP i,
中 影 响 测 试 结 果 的 因素 很 多 。本 文 以 A VI V 4 1 0型 圆 二 色 光 谱 仪 为 例 讨 论 了 4方 面 的 影 响 因 素 , 包 括 仪 器 开 机 时 参数 设 置 , 样 品制 备 ( 包 括 液 体 样 品 溶 剂 的选 择 , 浓 度 的配 比 , 固体样品的制备) , 样 品 池 的 选 择 以 及 仪 器 的维 护 ; 以
s t u d y t h e s t r u c t u r a l p r o p e r t i e s o f o p t i c a l l y a c t i v e s u b s t a n c e s ,g e t t i n g a p r e c i s e s p e c t r a o f a s a mp l e wa s e s s e n t i a l t o t h e s t r u c t u r a 1 a n a l y s i s 。 wh i l e ma n y f a c t o r s d i s t o r t e d t h e r e s u l t . Du r i n g t h e p r o c e s s o f t h e t e s t s b a s e d o n AVI V mo d e l 4 1 0 c i r c u l a r d i c h r o i s m ( C D)s p e c t r o me t e r ,f o u r f a c t o r s we r e d i s c u s s e d ,a s f o l l o ws t h e p a r a me t e r s e t t i n g s ,t h e s a mp l e p r e p a r a t i o n s( i n c l u d i n g t h e c h o i c e

圆二色光谱仪(Chirascan)仪器操作步骤

圆二色光谱仪(Chirascan)仪器操作步骤

圆二色光谱仪 Chirascan简明操作步骤1.开通氮气通氮气约10分钟后,再进行开通电源等下述步骤。

2.开启电源2.1按“lamp”开关,接通氩灯(xe)的电源,等待约15秒后,按“start”开关,看到氙灯被点亮,有指示灯光透出。

2.2按“System”开关,仪器开始自检,Status指示灯渐渐变为稳定的绿色,Rx,TX指示灯闪亮。

3.开启电脑及软件3.1开启电脑,选择用户帐号( Chirascan user)3.2点击“Chirasean”软件到ProData Chirasean主界面3.3点击图标快捷键3.4设定文件名、工作文件夹及当前工作目录:在E盘中,点击New folder快捷键,命名新建的文件,并设为当前工作目录(点),接下来的测试数据就被直接保存记录下来了。

3.5设置测试条件参数Wavelength改为400,点击set,High改为400,点set4.开始一个光谱测试实验4.1首先测试系统背景值空气的吸收情况,样品池中不放任何物体直接采集空气的值,点击“Background”。

4.2测试比色皿及buffer的光吸收性质:选择合适的比色皿,用甲醇清洗比色皿,加入400ul 或200ul甲醇,将比色皿按照一定的方式和方向(比色皿上字朝右)放入仪器,盖上盖子,点击改样品名字,在Spectrum输入Meoh,后面为记样次数(改为0),点击OK,点击“Acquire”。

4.3样品测试使用上一步测试buffer的同一个比色皿,清洗比色皿,稀释样品,将比色皿按照一定的方式和方向(比色皿上字朝右)放入仪器,点击改样品名字,在Spectrum输入样品编号,后面为记样次数(改为1),点击OK,点击“Acquire”。

菜单栏点Window,New Window,Absorbance(紫外),紫外不超过3(1~2)。

5.数据处理测试完成后,关闭紫外吸收的窗口,放大CD窗口将甲醇数据从左边拖到图中,点击界面“D”快捷键处理数据点击Meoh ,设基线set baseline,甲醇点击样品,背景扣除Subtract baseline,解除背景设定unset baseline,选中扣除背景后的样品文件subtracted:0,移除其他Remove Others,选中subtracted:0,点smooth,Smooth后,点OK,选中Smooth(s):0,点Remove Others,OK。

圆二色谱的原理及其应用pdf

圆二色谱的原理及其应用pdf

圆二色谱的原理及其应用一、圆二色谱的原理圆二色谱是一种分析化学技术,用于测定物质的旋光性质。

它在药学、化学和生物学等领域有着广泛的应用。

圆二色谱原理基于物质分子对左旋光和右旋光的吸收性差异。

圆二色谱利用圆二色变化测定物质对圆偏振光的旋光角度和吸收度的关系。

当线偏振光通过样品时,正交两个互相垂直的圆偏振分量,产生旋光现象。

如果样品吸收左旋光的圆偏振分量多于右旋光的圆偏振分量,样品会产生负圆二色变化。

相反,如果样品吸收右旋光的圆偏振分量多于左旋光的圆偏振分量,样品会产生正圆二色变化。

圆二色谱测定的结果可用光谱表示,通常为色散图。

色散图由圆二色变化在不同波长处的数值表示。

通过分析色散图,可以确定物质的结构、构型以及与其他分子间的相互作用。

二、圆二色谱的应用圆二色谱有广泛的应用领域,下面列举了几个常见的应用方面:1. 蛋白质结构研究圆二色谱在蛋白质结构研究中扮演着重要角色。

蛋白质的结构与功能密切相关,圆二色谱可以提供关于蛋白质二级结构的信息,如α-螺旋、β-折叠等。

通过圆二色谱的测定,可以确定蛋白质的二级结构比例,从而推测蛋白质的折叠状态和功能。

2. 药物研究和分析圆二色谱在药物研究和分析中也得到了广泛应用。

通过圆二色谱的测定,可以研究药物与其他分子之间的相互作用,从而帮助优化药物设计和药物疗效评估。

3. 分子手性性质研究圆二色谱可用于分析分子的手性性质。

手性是化学物质的一种重要性质,与其生物活性、药物活性以及光学性质相关。

圆二色谱可以通过测定物质对旋光的吸收情况,从而确定其手性性质。

4. 化学反应动力学研究圆二色谱在化学反应动力学研究中起到了重要作用。

通过测定反应过程中圆二色变化的特征,可以研究反应的速度和路径,并推断反应机理。

三、使用圆二色谱的注意事项使用圆二色谱时,需要注意以下几点:1.样品准备:样品的纯度和浓度对测定结果有重要影响。

样品应尽可能纯净,并适当稀释,以避免吸光度过高引起的光散射效应。

圆二色谱仪使用.

圆二色谱仪使用.

圆二色谱仪使用手册实验前请先阅读第一部分注意事项2011年4月6日整编河北大学理化中心目录一、注意事项二、光源的选择三、MOS 450波长的校正四、电压的调节五、MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程六、MOS 450-SFM 300动力学操作方法一、注意事项1、滴定及变温实验时,需要磁子搅拌。

实验结束时首先拔掉搅拌电源。

在样品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。

2、光源(也就是氙灯或汞氙灯)不可频繁开关。

举例而言,如果马上不用仪器,但半个小时后需要使用仪器,就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。

短时间内频繁开关光源反而会缩短光源寿命。

3、光电倍增管移动时(比如从圆二色模式换为荧光模式),注意用软件将Hv(高压)关闭。

4、扫描速度在0.5-5s/nm。

使用手册上写的扫描速度有误,特别注意不要低于0.5秒/nm,过快的扫描速度易造成calibration移位。

5、如需用到emission单色器,就是那个需要用光纤连接的单色器,扫描速度要大于1s/nm,连0.5s/nm都不能用。

6、PMT的HV不要超过1000V.7、使用控温附件进行变温实验时,一定要将地上的那个水浴恒温槽打开,水槽温度设为20度以下即可。

8、TCU上设置为remote; Power supply设置为ARC.9、仪器运行过程中,更换样品时,shutter最好关闭。

二、光源的选择1、电源:图1中的Lamp power supply处有Xe(红色)、Xe(Hg)(红色)、零线(黑色)三个插孔。

零线插头为黑色,直接插到黑色的零线插孔中。

火线插头为红色,在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在Xe(红色)插孔中,在做快速动力学测量的时候插在Xe(Hg)插孔中。

2、光源选择:图2中的Vertical setting部位下方的底座上有Xe、Xe(Hg)两个标示前后排列。

手动松开中间的大圆头Screws(图2中),可以拉出或推进Vertical setting。

圆二色谱数据处理

圆二色谱数据处理

圆二色谱数据处理一、数据采集1.仪器准备:确保圆二色谱仪处于良好工作状态,包括光源、检测器、样品池等。

2.样品准备:将待测样品溶解在适当的溶剂中,确保样品浓度适中,以获得最佳的谱图效果。

3.实验设置:设置实验参数,如扫描范围、扫描速度、光源波长等。

4.开始实验:将样品加入样品池,启动仪器进行测量。

二、数据预处理1.数据导入:将测量得到的原始数据导入到数据处理软件中。

2.数据平滑:对原始数据进行平滑处理,去除噪声和干扰。

3.基线校正:对谱图进行基线校正,使基线保持水平。

4.归一化:将谱图数据进行归一化处理,使其在同一尺度下进行比较。

三、谱图解析1.观察谱图:观察谱图的形状、波峰位置、强度等信息。

2.解析波峰:识别谱图中的波峰,并对其进行标注和分类。

3.归属峰型:根据波峰的特征和归属规律,对波峰进行归属和分类。

四、峰识别与归属1.手动识别:根据谱图特征和经验,手动识别和标注波峰。

2.自动识别:利用软件算法对谱图进行自动识别和标注。

3.归属确认:通过对比已知峰型或与文献数据比对,确认波峰的归属。

五、数据分析1.峰强度分析:对每个峰的强度进行测量和分析,了解样品中各组分的含量。

2.峰位移分析:分析各峰的位移变化,了解样品中各组分在温度、压力等环境因素下的稳定性。

3.谱图比对:将不同样品或不同处理条件的谱图进行比对,了解样品之间的差异和相似性。

4.结构解析:结合已知信息,对未知组分的结构进行解析和推测。

六、结果呈现1.数据表格:将测量和分析得到的数据以表格形式呈现,包括峰强度、位移等信息。

2.谱图展示:将处理后的谱图进行展示,包括平滑后的谱图、基线校正后的谱图等。

3.结构解析图:将解析得到的组分结构以图表形式呈现,便于理解和分析。

4.结果报告:将整个实验过程和结果以报告形式呈现,包括实验目的、方法、结果分析等。

定向圆二色谱

定向圆二色谱

定向圆二色谱
定向圆二色谱是一种分析手段,它可以用于检测光学活性物质的结构和化学性质。

接下来,我们将介绍定向圆二色谱的原理、应用和实验过程。

一、原理
定向圆二色谱的原理是利用圆二色现象来分析样品的结构和性质。

圆二色现象是指具有旋转对称性的光学活性分子对左右旋光具有不同的吸收率,即分子左右旋异构体在旋转光的作用下吸收的光强度不同。

这种差异会导致圆偏振光透过样品后的光的强度和极性发生改变,这种现象就是圆二色现象。

二、应用
定向圆二色谱可以广泛应用于生物大分子、药物、化学物质等领域。

它可以用于确定样品的光学活性、判断分子的手性、研究某些生物大分子的二级结构等。

三、实验过程
1. 样品制备:将要测量的样品制备为无色、透明的溶液或固体;
2. 仪器准备:打开定向圆二色谱仪,调节样品池的缺液量,验证仪器的零点(单元池中加入空白溶液);
3. 样品测试:将样品加到单元池中,调节好光路和波长,进行测试,并记录结果和数据;
4. 数据处理:根据定向圆二色谱图谱的特征,对样品进行结果分析和
比较,得出结论。

总体来说,定向圆二色谱可以提供有关分子手性和构象信息的有用数据。

对于研究生物大分子、药物、化学物质等样品的性质和结构具有重要的应用价值。

圆二色谱仪的原理及应用

圆二色谱仪的原理及应用

圆二色谱仪的原理及应用1. 圆二色谱仪的介绍圆二色谱仪是一种用于测量光学活性物质的仪器,它能够通过测量物质对左旋光和右旋光的旋光性质,实现对物质的结构、构型和纯度等方面的分析。

圆二色谱仪可以广泛应用于医药、化学、生物学等领域,对于研究和分析手性化合物、蛋白质结构等具有重要的作用。

2. 圆二色谱仪的原理圆二色谱仪的工作原理基于光束的旋转和二色性。

当物质通过圆二色谱仪时,它会与光产生相互作用,使得入射光分成两个方向旋转的光束,即左旋光和右旋光。

这两个旋光光束的角度、强度差异可以通过圆二色谱仪测量出来,从而得到物质的旋光性质。

3. 圆二色谱仪的组成圆二色谱仪主要由光源、单色器、样品室、检测器和计算机等组成。

- 光源:圆二色谱仪使用的光源通常为氙灯或卤素灯,具有广谱且连续的特性。

- 单色器:单色器用于将光源发出的白光分解成不同波长的单色光,以满足实验需求。

- 样品室:样品室是放置待测样品的位置,通常包括旋转样品架等装置,用于调节样品的入射角度和位置。

- 检测器:检测器用于测量样品通过的旋光光束的强度,常用的检测器包括光电二极管和光电倍增管等。

- 计算机:圆二色谱仪还配备了计算机控制系统,用于控制实验参数、采集和处理数据等。

4. 圆二色谱仪的应用领域圆二色谱仪在许多领域中都有广泛的应用,以下列举了一些主要领域: - 药学研究:圆二色谱仪可以用于研究药物的手性性质,如药物对不同手性异构体的吸收、分布和代谢等。

- 生物化学:圆二色谱仪可以用于蛋白质和核酸的二级结构研究,进而揭示它们的功能和性质。

- 光学活性材料研究:圆二色谱仪可以用于研究光学活性材料(如液晶材料、染料等)的手性性质以及其与其他化合物的相互作用。

-环境分析:圆二色谱仪可以用于环境样品中手性化合物(如农药、药物残留等)的分析与检测。

5. 圆二色谱仪的优势与局限性圆二色谱仪有许多优势,如高灵敏度、高分辨率、快速测量等,使得它在实验室和工业研发中得到广泛应用。

多功能圆二色光谱仪参数特点光谱仪操作规程

多功能圆二色光谱仪参数特点光谱仪操作规程

多功能圆二色光谱仪参数特点光谱仪操作规程紧要用于手性光学活性物质的讨论Q可用于有机立体化学讨论、光学活性物质纯度测试、药WU定量分析、天然有机化学、生物化学与宏观大分子、金属络合物化学、聚合物化学、蛋白质折叠讨论、蛋白质构象讨论、物理化学等。

技术参数:M0S—450/AF—CD-STP-A圆二色光谱仪1)光源:同时装置两个光源150W制灯及150W汞筑灯。

2)检测功能:紫外吸取光谱,圆二色光谱,总荧光谱,光散色谱,线二色谱及荧光各相异性谱。

3)波长范围:165~900nm4)波长精准度:0.1nm(165—900nm)5)光学系统:双光栅(1200条∕mm)6)杂散光:2X10—4%(200nm)7)噪声:荧光检测:水拉曼峰信噪比>2000:1紫外检测:5X10-Urms圆二色检测:0∙Olmdeg8)基线稳定性:0.0Imdeg/hr9)采样频率:10U秒./每点1000秒/每点。

快速动力学停流装置1)混合模式:三一四路混合,各路独立步进电机掌控。

2)zui小注射体积:IOuL3)每路流量范围:0.011.OmL/秒4)混合比:可连续变化由1:1至1:1005)混合器:球型gao效率混合池。

6)注射针体积:10ml7)ZUi小死畴0.25毫秒(用微量检测池附件时)8)扩充本领:冷冻淬灭,超低温停流,温度跳动变化(Temp.Jump)及自动滴定,原位微电导检测等。

9)软件:单一软件可自动掌控停流反应及光谱测量紧要特点:1)一机多功能可检测:紫外吸取光谱,圆二色光谱,总荧光谱,光散色谱,线二色谱及荧光各相异性谱。

2)各路独立步进电机掌控快速动力学停流装置。

直读光谱仪的测量1、使用环境:放置光谱仪的试验室应当防震,干净,通风干燥(如南京麒麟生产的QL-5800A型直读光谱分析仪的环境要求:温度23正负5之间,适度在15—70%之间),一般来说直读光谱仪的相对适度应当小于80%,室内温度应当保持在0—50度之间,在同一个校准周期内室内温度变化不超过5摄氏度。

圆二色谱方法

圆二色谱方法

圆二色谱方法一、基础知识介绍圆二色谱是一种用于研究分子旋光性的光谱技术,通过测量样品在圆偏振光照射下的吸收光谱,可以获得关于分子手性、构象和动态行为等信息。

圆二色谱广泛应用于化学、生物学、药学等领域。

二、实验原理当左旋圆偏振光和右旋圆偏振光以一定比例混合时,形成椭圆偏振光。

当这种椭圆偏振光通过手性分子时,左旋和右旋偏振光会被不同吸收,导致透射光的强度和旋光性发生变化。

通过测量透射光的强度和旋光性,可以获得样品的圆二色谱。

三、实验步骤1.准备样品:制备适当浓度的样品溶液,确保样品在手性环境中。

2.安装仪器:将样品放入圆二色谱仪器的样品池中,确保密封良好。

3.设定参数:设置实验参数,如波长范围、扫描速度等。

4.开始实验:启动仪器,开始测量样品的圆二色谱。

5.数据分析:处理实验数据,提取相关信息。

四、数据分析在圆二色谱实验中,通过测量透射光的强度和旋光性,可以绘制出样品的圆二色谱图。

通常情况下,圆二色谱图以波长为横坐标,以旋光度差值ΔOD(或ΔA)为纵坐标。

通过分析圆二色谱图的峰位、峰形和峰强等信息,可以推断出样品的构象、手性和动态行为等。

五、影响因素影响圆二色谱实验结果的因素很多,主要包括温度、浓度、溶剂极性等。

这些因素可能会影响分子的构象和手性,从而影响实验结果。

因此,在实验过程中需要控制这些因素,以确保实验结果的准确性。

六、应用领域圆二色谱方法在多个领域中有着广泛的应用,例如:在手性识别与拆分领域中,可以用于检测手性化合物的纯度;在化学反应监控领域中,可以用于研究化学反应的机理和动力学;在生物学领域中,可以用于研究生物分子的结构和功能等。

七、实验注意事项1.在实验过程中要保持恒温,避免温度波动对实验结果的影响。

2.确保样品的浓度和纯度符合要求,避免杂质干扰实验结果。

3.正确选择溶剂和浓度,以确保分子处于合适的构象状态。

4.在数据分析过程中要注意峰位的准确性,避免由于仪器噪声等因素引起的误差。

八、展望随着科技的不断发展和进步,圆二色谱方法的应用前景也越来越广泛。

CD圆二色谱的原理及其应用

CD圆二色谱的原理及其应用

CD圆二色谱的原理及其应用1. 简介CD圆二色谱是一种用于研究化合物结构和功能的实验技术,通过测量在紫外可见区域分子吸收光谱的旋光性质,来获得关于分子的信息。

本文将介绍CD圆二色谱的原理和常见的应用领域。

2. 原理CD圆二色谱利用电磁波和手性分子相互作用的效应来测量分子的旋光性质。

手性分子与右旋光或左旋光的光线发生非对称性吸收,使光在通过样品后发生光学旋光。

CD圆二色谱将通过样品后的左旋光和右旋光光束分离并测量其吸收率差。

3. 实验方法在进行CD圆二色谱实验时,通常需要准备以下材料和步骤: - CD圆二色谱仪器:包括光源、样品室、检测器等。

- 样品制备:将待测化合物溶解于合适的溶剂中,控制样品浓度。

- 校准:使用已知手性化合物进行校准,确保仪器的准确性。

- 数据采集:测量样品的光谱,并记录吸收率差随波长的变化。

- 数据处理:根据测得的光谱数据,使用适当的软件进行数据处理和分析。

4. 应用领域4.1 初级结构研究通过CD圆二色谱,可以对生物分子的初级结构进行研究,如蛋白质、核酸等。

通过对这些分子的旋光信号进行测量和分析,可以帮助解析其空间结构、螺旋转动等信息。

4.2 药物开发CD圆二色谱在药物开发领域中起着重要的作用。

通过测量药物分子和靶蛋白之间的相互作用,可以研究药物的结构活性关系、药物的构象变化等信息,从而指导药物分子的设计和改进。

4.3 食品分析CD圆二色谱在食品分析领域中也具有广泛的应用。

通过测量食品中的旋光特性,可以鉴别食品中的手性分子、判断食品的品质和真伪。

4.4 环境监测CD圆二色谱在环境监测领域中被用于检测和分析环境中的有机污染物。

通过测量这些有机污染物的旋光信号,可以判断其构象、分子结构等信息,进而指导环境保护工作。

5. 结论CD圆二色谱作为一种重要的实验技术,在化学、生物学等领域中具有广泛的应用。

通过测量分子的旋光性质,可以获得关于分子结构和功能的重要信息,为科学研究和工程应用提供了强有力的工具。

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圆二色谱仪使用手册实验前请先阅读第一部分注意事项20RR年4月6日整编河北大学理化中心目录一、注意事项二、光源的选择三、MOS450波长的校正四、电压的调节五、M OS-450圆二色光谱扫描操作规程六、MOS450-SFM300动力学操作方法一、注意事项1、滴定及变温实验时,需要磁子搅拌。

实验结束时首先拔掉搅拌电源。

在样品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。

2、光源(也就是氙灯或汞氙灯)不可频繁开关。

举例而言,如果马上不用仪器,但半个小时后需要使用仪器,就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。

短时间内频繁开关光源反而会缩短光源寿命。

3、光电倍增管移动时(比如从圆二色模式换为荧光模式),注意用软件将Hv (高压)关闭。

6P MT HV1000V.7、使用控温附件进行变温实验时,一定要将地上的那个水浴恒温槽打开,水槽温度设为20度以下即可。

8、TCU 上设置为remote;PowersupplR设置为ARC.9、仪器运行过程中,更换样品时,shutter最好关闭。

二、光源的选择1电源:图1中的LamppowersuppIR处有Re (红色)、Re(Hg)(红色)、零线(黑色)三个插孔。

零线插头为黑色,直接插到黑色的零线插孔中。

火线插头为红色,在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在Re (红色)插孔中,在做快速动力学测量的时候插在Re(Hg)插孔中。

2、光源选择:图2中的Verticalsetting部位下方的底座上有Re、Re(Hg)两个标示前后排列。

手动松开中间的大圆头Screws(图2中),可以拉出或推进Verticalsetting。

当Verticalsetting的金属头通过前后移动到下方的哪个标示位置上,也就是那个标示所示的灯正对着光路,为测试用光源。

做快速动力学测量的时候选Re(Hg),做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时选Re,最后再旋紧中间的大圆头Screws。

注:Re(Hg)灯中的Hg元素有一些很强的特征谱线,加强了Re元素发光的强度,对于动力学测量要求一个波长的光源能量要强,才能测量较为精确的谱图。

而对于光谱扫描,单独的Re元素谱线较为平滑,光源对扫描的影响较小。

radiaiar to remwe- l^imp hiQ usingSupply____________ horizontal图1图2三、MOS450波长的校正仪器使用一段时间后需要对仪器进行波长校正,以保证测量的准确性,波长校正的操作步骤如下:1、确认样品仓中没有任何样品和样品池。

2、根据光源选择的操作说明,将光源换为Re(Hg)灯。

3、打开ALR-250、MM-450 和PMS-450 电源。

4、点击电脑中的BioKine软件图标,进入测量主界面。

5、在主界面选择Device菜单的Scanningspectromete命令,进入光谱扫描界面。

点击'■'■■■■';lor ::,' "■按钮设置参数,在光谱测量模式里选择Fluoresce nee 模式, 波长扫描范围200-750nm,进行光谱扫描,得出如图1所示谱图。

此时检测器位置为与入射光成180度的位置,不用改为荧光的位置。

6、谱图在546nm处应该出一个峰,比较546nm处的峰是否有偏差。

如果超出+/-1 nm的范围,需要进行波长校正。

7、举例说明,如果在550nm处出峰,波长偏了4nm,那么就在图2所示主界面左下栏的ER处填入550nm,按回车键。

图28 点击图2主界面In stall菜单的Spectrometeradva ncedsett ing命令,出现图3所示的窗口,点击ERcitation下方的Calibration按钮,进入波长校正界面,如图4。

图3图4在图4所示窗口里的Currentwavelength处输入546,点击OK按钮,进行波长校正。

Re灯校准波长467nm;Re(Hg)灯校准波长546nm。

操作完以上各步骤,波长校正完成。

可进行正常的测量操作。

四、电压的调节1.选择Re灯,打开ALR-250稳定10分钟,将ALR-250的功率调整到150W;2.在打开ALR-250的同时,打开MM-450电源,机器预热10min;3.确保空仓(样品池中无待测样品)。

狭缝设置为2nm期4•点击电脑桌面上的图标,进入BioKi ne软件操作主界面。

点击In stall 的Device,出现图1,只选中MOS-450,点击0K。

输入 E R 值 200nm ,打开 shutter , Hvon , Auto 值为 200左右。

五、MOS-450圆二色光谱扫描操作规程1、选择Re 灯,打开ALR-250稳定10分钟,将ALR-250的功率调整到150W ;2、 在打开ALR-250的同时,打开仪器电源,先开 MM-450,再开PMS-450。

机器 预热10min ;3、 清洗好样品池,添加待测样品的空白溶液(如水或缓冲盐)到样品池中。

4、 安装上样品池盖。

5、 如果测量波长小于210 nm,需要对仪器进行氮气吹扫处理。

打开氮气,调整流量计流速为1000L/h ,通氮气几分钟。

确认电源线插在氙灯的位置,并且氙灯 已对准光路,具体操作见光源的选择操作说明。

然后打开 ALR-250光源开关, 将氮气流量计流速设为 400L/h ,查看ALR-250面板显示,当氙灯能量达到 150W ,氙灯稳定。

如果无需氮气吹扫,直接打开 ALR-250电源,等待氙灯稳 定后进行下一步操作。

Gpecliornetei| E N | 50D nm Eir | 0 nm Shultef Vvl^mefcr L mV 1 0 HU? 代图1进入图2界面点击图2HVon| Adp||—0~ V6、点击电脑桌面上的图标,进入BioKine软件操作主界面。

7、点击图1主界面的Device/ScanningSpectromete,进入光谱扫描界面,如图2。

图1图 2 7•点击主界面上方的按钮,进行光谱测定参数的设定,如图 3图3Acquisitionmode :选择测量模式CD。

Begin(nm):扫描初始波长End(nm):扫描结束波长Scan Repeat扫描次数Acquisitionduration :每个nm的测量持续时间,范围0.5s-20s,此项相当于扫描速度的设定。

园二色谱扫描速度不能低于0.5s。

使用emission单色器,扫描速度为1nm/sShutterAutomaticmode:选择AlwaRsopen,挡板处于始终打开的状态。

PMga in R10 :当在非常低的信号测量,可选择此项,进行信号的增益。

CDparameters CD的灵敏度,根据信号的振幅设置,有四个不同的选项,1000、300、100 和30mdeg。

其他选项根据需要可以选择。

以上参数都设置好后,点击OK按钮,参数设置完成,回到主界面。

8•在要测量波长的范围内取一个波长点,输入到图2下方的ER处,点击Enter键。

这时确认按钮变为然后点击亘,自动调整HV电压,然后再~~点击色旦按钮,锁定此电压值。

电压值一般小于800V。

9.空白的测量点击图2主界面Biankspectum区域的Record按钮,记录第一步添加的空白样品谱图,空白谱图显示在主界面中。

测量后选择Subtract复选框,将在随后的样品光谱的测量中扣除空白值。

10样品的测量再点击仝二按钮,关闭挡板,取出样品池,将空白样品换成被测样品,然后再放回到样品支架上,盖好样品仓盖。

这时再点击=,打开挡板。

点击图2主界面Acquisitioncontrol区域的• I按钮,记录样品的园二色谱图,显示在图 2 主界面中。

11谱图的平滑第十步测量的谱图为样品园二色原始测量图,需要经过平滑处理,得到平滑的曲线图,操作如下:选择主界面AnalRsis菜单,这时界面变为分析界面,选择Tools菜单下的Smooth ing命令,出现平滑的设置界面,选择第二项。

选择平均平滑点数,此数值必须是奇数,然后点击Proceed按钮,这时平滑后的曲线出现在界面中。

12.保存数据选择主界面的File菜单下的SaveAs…,出现图5界面。

图5选择要保存文件到哪个文件夹,并给文件命名,选中SaveasteRt然后点击Save按钮,文件保存到指定的文件夹中。

13.如果对园二色数据需要进行蛋白质二级结构分析,进行如下操作:在BioKine软件中选择File菜单的Loaddatafile命令,打开要进行分析的文件,然后选择File菜单的ERprotdatato/Dicroprotfile命令,如图6,导出数据文件为Dicroprot 的文件。

图6出现图7所示界面,选择导出数据要保存的文件夹并命名此导出数据,并根 据测量的具体情况填入相应的信息,点击 ERport 按钮,数据导出结束,关闭图 7 界面。

Export FileDirect ones :e= \rebecca 2009\^P 数聒资料询1国 亠5葩徂五山”Lj lebecca 2009 U 客户数据资料 注江南大学 二单海童主 6.24Drives z16Dicroprot p^raineter^图7在http://dicroprot-pbil.ibcp.fr 网站上下载蛋白质二级结构分析软件,然后将导出的 数据在此软件中打开进行相应的二级结构分析。

File Name : hdic IName of proteii| Name Light path (mm)Concentration [1 Number of residues (n) 1 QQ ;罟汕Motecular weight (Da] 110000190lc IC Export。

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