茶藨生柱锈重寄生木霉粗毒素的基本性质

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关键 词 ： 小霉 ； 毒 素 ：Ｌ 悱 匝 ： 蓐 柠 锈 粗 ｔ奉 － 茶
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分 泌 毒 素 和 胞 壁 降 解 酶 破 坏 锈 孢 子 ， 生 物 学 性 且
收 稿 日期 ：０ Ｏ ０ — ８； 订 日 期 ：０ｌ一 ｌ０ ２ １－ ９ ２ 修 ２ １Ｏ一５
基 金 项 目 ：西 南 林 业 人 点 基 Ｊ Ｈ （ ０ ０ ； 南 省 森 林 灾 害 预 警 控 制重 点 实 验 室 资 助 项 目（ Ｋ ９ ０ 、 重 １ ７ ６） １ ｊ Ｚ ０ Ａ１５） 作 者 简 介 ： 永 艳 （ ９ ４ ， ， 两 人 ， Ｉ 硕 ｔ＇ ， 要 从 事 资 源 微 生 物 方 面 研 究 １８ 一） 殳 陕 ｒ ： ：－主 Ｌ
状 优 良 ， 具 有 良好 的生 防 效 果 Ｉ － 笔者 对 该 菌 并 株 所 产 粗 毒 索 的基 本 性 质 进 行 研 究 ， 该 菌 的 活 为 性 成 分 研 究 及 进 一 步 开 发利 用 奠 定 基础 。
１ 材 料 和 方 法
１１ 供 试 材 料 ．
大痫 害 之 一的 五纠 松疱 锈 病 的病 原 ， 中 国 主要 危 在
．
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定 ， 处理 重 复 ３ 。 每 次 １． ｐ ． ８ Ｈ值对 粗 毒 素 活性 的 影响 采 用 １ ｏ・ 。 ２ ｌＬ ｏ ｔ
８℃ ， ０ ・ ｉ‘ 心 ２ ｎ， 清 液 即为 毒 素 原 ４０ ０ ｒ ｎ。 ｒａ 离 ０ｍｉ 上 液 。 以 上 操 作 均 在 无 菌 条 件 下 进 行 。滤 液 置 于 ４Ｃ Ｃ下保 存 ， 用 。 备 １ ． 生 测方 法 ．３ ２ 生 测 采 用 凹 玻 片 法 ， 在 灭 过 即 菌 的 凹 玻 片 内 注 入 １０ Ｌ毒 素 原 液 ， 少 量 锈 ０ 取 孢 子 浸 于 其 中 ， 当 搅 拌 使 锈 孢 子 与 培 养 滤 液 适
未接菌 的相应 ｐ Ｈ值 的 培 养 液 作 对 照进 行 生 物 测 定 ， 处理 重 复 ３ 。 每 次 １ ． 活 性 碳 对 毒 素 粗 提 液 中 活 性 成 分 的 吸 附 ．９ ２ 量 取 １０ｍ ０ Ｌ的 毒 素 粗 提 液 ， 入 ３ｇ 性 炭 ， 玻 加 活 用 棒 搅 拌 使 其 充 分 吸 附 ， 滤后 得 滤 液 Ａ； 吸 附 后 过 将 的 活 性 碳 用 １ ０ｍＬ蒸 馏 水 洗 脱 并 过 滤 ， 滤 液 Ｂ ０ 得 （ 馏 水 洗 脱 液 ）再 将 已 洗 脱 过 的 活 性 碳 用 甲醇 蒸 ； 洗 脱 后 过 滤 得 甲醇 洗 脱 液 ， 后 将 甲 醇 洗 脱 液 于 然 ４ 下 经 旋 转 蒸 发 除 去 甲 醇， 蒸 馏 水 恢 复 至 ０ 用 １ ０ｍＬ得 滤 液 Ｃ。将 滤 液 Ａ、 Ｃ进 行 生 物 测 定 ， ０ Ｂ、 每处理重复 ３ 。 次
Ｓ ０ ３菌 株 （ ｒ ｈ ｄ ｒ １ｏｉｄ ） 该 菌 侏 通 过 Ｓ０ Ｔｉ ｏｅｍａ（ｒｔ ｉｅ 。 ｃ ｔ， ｒ
扩 繁 ５ 然 后 用 ｑ＝ ． ｃ 打孔 器 在 培 养 好 的木 ｄ， ｂ ０６ ｎ 的 霉 平 Ⅲ＿ ｇ Ｌ 将 打 好 的 菌 块 接 种 在 装 有 １ ０ｍＬ １ ＹＴ ， ０
ｎｙ ｏ ａ ａ ｉ ７’ ｈ （ ｌ ７ ｔｒ ｌ ｅ ５ ０ ３ ｏ Ｃ ｏ ａ ｔ ｍ ｒ ｉｏ ａ ｉｅ ｐ ｉ ｓｌ ５（ ｏ［ ’ （ ｉｏ’ ｉ ） ５ ０ ｔ ｒ ｎ ｒｉ ｉ ｃ ｌ ｗｅ ｅ ｓｕ ｉｄ Ｔｈ ｅ ｕ ｈ ｗＰｔｔ ａ ｌ （ ｕｄ ｏｘｎ Ｄｒ ｄ ｅｄ Ｉ ｅ（ Ｃ １ １（ １ ｉｄ ｔ 、 ｕ ｂ ｒ ｔ ｄ ｅ ｅ ｒ ｓ ｈｓｓ ｏ （ ｈ ｔｔｅ － ｅ ｔ ｉ ０ ｕｅ １ １ ｒ 、
培养 物 ， 用 ８层 纱 布 滤 去 菌丝 体 ， 得 的滤 液 经 先 所
的方 法 并 做 一 定 改 动 。将 毒 素 粗 提 液 置 于 室 温 ０ ５ １ ０ｃ 恒 温 水浴 锅 中和 １ １℃ 、 ． ＭＰ 处 ， ０，０ Ｃ ２ ０１ 下
理 ３ ｎ后 ， 各 处 理 的 毒 素 粗 提 液 进 行 生 物 测 ０ｍｉ 将
害红 松 （ ｉｔ ｋ ｒｉ ． ） Ｐｎ ｓ ｏａｅ 及 …松 （ ｒ ａ ）。 ｘ ｎ Ｐ 『 ｎ Ｉ ７ 。
据 调 ， 藤 生 锈 日前 仪在 云南 使 上万 公 顷 茶 华 山松 林 发 病 ， 重 贼 胁 着 Ｋ江 游 防 护林 体 系的 建 ： 给 生 态 恢 复 带 来 极 大 闲难 ＝长 期 以来 ， ， 对 华 Ｉ 松 疱 锈 病 的 治 以 化 学 防 治 为 主 ． 配 以 Ｉ Ｉ 并
】 试 验 方 法 ． ２
于 茶 藤 生 柱 锈 菌 乃 长循 环 转 主寄 生 锈 蒲 ， 治 防 在 山松 疱 锈 病 防 ｈ研 究 过 程 中 ， 茶 麒 生 从 柱 锈 菌 锈 孢 子 堆 中 分 离 获 得 ｌ 重 寄 生 木 霉 株
１ ． 培 养 方 法 将 供 试 菌株 接 于 Ｐ Ａ培 养 基 上 ．１ ２ Ｄ
．
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茶 膜 生性 锈 Ｃｏ ａｔ ｍ， ｉ ｌ 是世 界林 木 ■ ｒｎ ｒ ｕ ・ ＜ ａ） ｉ ｉ・ ｂｏ
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Ａｂｓ ｒ ｔ ｔ ａｃ ：Ａｄ ｐｔｉ ｔ ｍ ｅｌ ｏ ｌ ｉ ｅｉ ｕ ａｎ ｂｉｌ ｋ・ｄｅｅ ｔｏ ｔ ｅ ｅ ｎｔＤ， ｐ ｏ ｒｉ ｓ ｆ ｒ （ｅ ｏ ｉ Ｄ （ ｕｅ ｄ ） ｏ ｉ１ ｈ（ ｇ ｔｏｄ ｌ ｆ ｉ ｄ ｌ — ｑｕ ｈｔ ｄ ｏｏｇ ｔｃ ｉｎ ｈｅ ｌ ｍｅ ａ ｒ ｐｅ ｔｅ ｏ ｅ ｕ１ ｔ ｘ ｎ ｌ） ｅ ｔ ｄ ｖ
以 １０ｒ ｍｉ ２ ・ ｎ 荡 培 养 （５℃ ， ：Ｄ １ ：１１ 振 ２ Ｌ ＝２ ２，
法进行 。
１ ． 温度 对粗 毒 素活性 的影 响 ．７ ２
参 照黄 丽丹等
培 养 液 保 持 自然 ｐ Ｈ值 。 每处 理 重 复 ３ 。 次 １ ． 毒 素 原 液 的 制 备 将 培 养 ８ｄ的 供 试 菌 株 ．２ ２
天 津 农 业 科 学 ７ａｊ ｜ｒ ｕｔｔ （ ｎ ７ｑｉ ｇｉ ｌ ｗ ｔ （ ｎ ｅ ｕ ｅ
２ １ ．７ ２ ： １ １ ０１ １ （ ）１—５
茶 蔗 生 柱 锈 重 寄 生 木 霉 粗 毒 素 的 基 本 性 质
李 永艳 敖 新 字 ！ 陈 王 惠 ， ，
１两 南 林 、 ： 护 物 ． Ｉ ； 久 ：ｆ 院， ｉ ｆ 柯 叫 ６０ ２ ２两南 忭 、 夫 基 础 部 ， 南 昆 明 ６ ０ ２ ） ５ ２４： ． 【 、 ５ ２ ４
通 讯 作 者 简 介 ： ｝惠 （ ９ １ ， ， 南 人 ， 授 ， 要 从 事 植 物 病 理 学 和 生 物 化 学 方 斯 的 研 究 黝 １６ 一） 女 云 教 丰
天 津 农 业 科 学
第 ｌ 卷 ７
Ｒｃａｄ 养 液 的 ２０ｍＬ 角 瓶 中 ， 瓶 接种 ３ ， ｉ ｒ培 ｈ ５ 三 每 块
摘
要 ： 用液 体发 干 物 洲定 卡 纳 合的 ‘ ， 采 ¨ ｎ 法 研究 Ｊ茶 麒牛性 锈（ｒｎ ，ｗ ｉ ＜ｌ１ 寄生 小霉 Ｓ０ ３ Ｃｏａｔ ”ｒ ｉ ＜重 ＂ ｉ ｂ－ ｅ Ｓ ０ 蔺株 （ ｒ・ ｄ “ Ｔｉ ｏ ｃ ｈ
ａｒ ’ｉｅ 昕产粗 隶 的基术忡 嘎 一结粜 明 ，Ｓ ０ ｆ ｒ ） ｏｉｄ Ｓ ０ ３所产柑毒 素为～ 类 非蛋 门质 、 一 极性 较大 的物质 ， 有较高 的热稳 定性和 具