植物多倍体的诱导及细胞学鉴定

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植物多倍体诱发及细胞学鉴定概要

植物多倍体诱发及细胞学鉴定概要

植物多倍体诱发及细胞学鉴定一、实验目的1、通过实验掌握人工诱导多倍体植物的方法和技术,观察多倍体的特点。

2、利用染色体分析的方法对多倍体细胞做出准确判断。

二、实验原理(一)多倍体1、多倍体是指细胞中具有3个或3个以上染色体组的细胞或个体。

多倍体可以分为:同源多倍体(具有3个以上相同染色体组的细胞或个体,且染色体组来源于同一物种(AAA,AAAA);异源多倍体(具有3个以上染色体组且染色体组来源于不同物种,通常由不相同的种杂交的杂种再经过染色体加倍而来(AABB,AABBDD)。

2、多倍体是适应恶劣环境条件的结果。

3、自然界多倍体产生的原因:温度骤变,使细胞分裂时染色体不分离造成;有丝分裂时染色体分离而细胞没有分裂,导致体细胞染色体加倍;减数分裂时染色体没有减数,使生殖细胞染色体加倍。

4、多倍体植物的特性:A巨大性B可孕性低C适应性强D有机合成速率增加E克服远缘杂交的不结实性(二)人工诱导多倍体的方法、原理及鉴定方法1、人工诱导多倍体的方法A、物理方法温度剧变、机械损伤、各种射线处理等B、化学方法各种植物碱、麻醉剂、植物生长激素等。

秋水仙素是诱导多倍体的最有效的方法之一。

2、秋水仙素的作用A、细胞分裂时抑制纺锤体的形成B、抑制细胞板的形成C、无残效3、诱导方法A种子浸渍处理B点滴法(滴定法) C 毛细管法D 羊毛脂法E球根处理F复合处理G离体组织水平上诱导单个细胞内染色体加倍3、鉴定方法A、间接鉴定:观察气孔的大小和花粉粒的体积最为可靠。

B、直接鉴定:直接检查花粉母细胞或根尖细胞内的染色体数目。

三、实验步骤1、取材:取大蒜(洋葱、蚕豆、小麦等)发根至0.5-1cm,然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶液的培养皿中继续培养24小时,待观察到根部有膨大时取出固定。

与在水中培养的材料做对照。

2、固定:在卡诺固定液中固定24小时,移至70%乙醇中保存或备用。

3、解离:植物的分生组织如根尖、茎尖等需要经过处理以便除去细胞之间的果胶层并使细胞壁软化,经解离的组织才能使压片步骤顺利进行。

蚕豆多倍体诱导和鉴定实验设计方案

蚕豆多倍体诱导和鉴定实验设计方案

蚕豆多倍体诱导和鉴定实验设计方案一、实验目的初步认识化学诱发植物多倍体的过程,学习利用孚尔根反应(染色)鉴定多倍性细胞的方法。

二、实验材料:蚕豆根尖三、实验药品及工具:生物显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、小玻璃瓶、小酒杯、培养皿、恒温箱、0.1%-0.2%秋水仙碱溶液、希夫氏试剂(是一种将碱性复红在酸性溶液中以过剩的亚硫酸(亚硫酸氢钠等)脱色的试剂)、纯净水、1mol 1-1盐酸等四、实验原理:多倍体的发生,尤其是异源多倍体的产生是生物进化的重要途径之一。

正常细胞的有丝分裂,在中期已复制为两的染色体,都集中于中央赤道板上,染色单体由于纺锤丝的牵引至后期分别趋向细胞两级。

纺锤丝主要化学组成为蛋白质。

一般认为蛋白质分子中的二硫键可以被细胞中辅酶的-SH(巯基)还原,于是由分子内的二硫键转变为分子间的二硫键,从而使蛋白质分子聚合。

凡是能抑制巯基作用又能保持细胞活性的物质,就能阻止蛋白质分子聚合或使已构成纺锤丝的蛋白质分子间发生解聚作用,致使纺锤丝不能形成或断裂,从而消失,造成染色单体不能分向细胞两极,细胞质也不分离,复制的染色体仍存在于一个细胞中,结果染色体倍增。

如果该细胞在下一次细胞分裂时又经药剂作用,则可产生更高倍数的细胞,(一般成等比级数增加,但也会出现奇数倍或非整倍现象,且由于药物的毒性作用染色体不会无限止的增多),这样就形成了多倍性细胞。

在药剂作用的过程中,由于同一组织中的不同细胞有丝分裂的不同步性,而出现加倍程度不一的表现,这种现象称为混倍性(混倍现象)。

经加倍了的细胞,一旦停止药剂作用,仍能进行正常的有丝分裂。

由此而产生的子细胞,一般说都是多倍性细胞,从这种细胞分化出来的植株,就是多倍体。

人工诱发多倍体的方法很多,分为物理的(变温、机械损伤、射线处理等)和化学的,我们常采用秋水仙素来进行诱导,这是诱发多倍体最有效的方法,此外还有六氯代苯、a-溴代萘、对-二氯代苯、申苯磺硫苯胺基苯汞(富民隆的主要成分)等化学物质均有此作用。

豌豆多倍体诱导实验报告

豌豆多倍体诱导实验报告

一、实验目的1. 掌握化学诱导植物多倍体的原理和方法。

2. 学习利用秋水仙素诱导豌豆产生多倍体的实验操作。

3. 通过细胞学方法观察鉴定多倍体的特点,以及诱导染色体加倍后的细胞学表现。

二、实验原理1. 多倍体是指细胞中具有三个或三个以上染色体组的生物体。

在植物育种中,多倍体可以提高作物的经济性状,克服远缘杂交障碍等。

2. 秋水仙素是一种常用的化学诱导剂,能够抑制纺锤体的形成,导致染色体数目加倍,从而诱导植物产生多倍体。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:豌豆种子、秋水仙素、蒸馏水、培养皿、镊子、剪刀、显微镜等。

2. 实验仪器:电子天平、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜等。

四、实验步骤1. 种子处理:将豌豆种子浸泡在1%的氢氧化钠溶液中,室温下浸泡24小时,然后用蒸馏水冲洗干净。

2. 秋水仙素处理:将浸泡好的豌豆种子放入培养皿中,加入适量的秋水仙素溶液,使种子充分浸泡。

根据实验要求,调整秋水仙素浓度和浸泡时间。

3. 培养与观察:将处理过的豌豆种子放入恒温培养箱中,培养条件为温度25℃、光照12小时/天。

每隔一定时间观察种子发芽情况,记录数据。

4. 细胞学观察:选取长出的幼苗,用蒸馏水冲洗干净,取根尖分生组织区,制成临时装片。

5. 显微镜观察:在显微镜下观察细胞染色体的形态、数目等特征,分析多倍体诱导效果。

五、实验结果与分析1. 发芽情况:经过秋水仙素处理的豌豆种子,发芽率明显低于对照组。

随着秋水仙素浓度和浸泡时间的增加,发芽率逐渐降低。

2. 细胞学观察:在显微镜下观察发现,经秋水仙素处理的豌豆幼苗根尖分生组织区细胞染色体数目明显增多,部分细胞染色体数目为4倍体(二倍体细胞染色体数目为2倍)。

3. 多倍体诱导效果:秋水仙素处理对豌豆多倍体诱导效果明显,诱导出多倍体细胞。

六、实验结论1. 秋水仙素能够有效诱导豌豆产生多倍体。

2. 通过调整秋水仙素浓度和浸泡时间,可以控制豌豆多倍体诱导效果。

3. 细胞学观察结果表明,秋水仙素处理可以导致豌豆细胞染色体数目加倍,形成多倍体。

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计引言:植物的多倍化是指由于染色体加倍而产生的具有多个完整染色体组的个体。

不同植物的同源多倍体(autopolyploid)可以通过各种实验诱发和鉴定,本文将就多种诱发和鉴定方法进行阐述。

一、诱发同源多倍体的方法1. 化学诱导:可以通过化学物质诱导多倍化,如染色体稳定化剂Colchicine、Oryzalin等。

将适宜的浓度的诱导剂溶液喷洒到植株的叶片上,使其通过气孔进入植物体内,引发多倍化。

2. 温度诱导:某些植物的花粉直接暴露在高温中,能够诱发染色体变异,进而产生同源多倍体。

诱导温度通常为35-36℃,持续时间为数小时。

3. 辐射诱导:辐射可以直接或间接地引发染色体变异,造成多倍化。

常用的辐射源包括 X 射线、γ 射线、紫外线等。

4. 细胞学处理:通过细胞培养技术,可以利用化学物质、温度或辐射等对植物细胞进行处理,再通过诱导分化和植株再生获得多倍化植株。

二、鉴定同源多倍体的方法1. 核型分析:利用生物学核型技术,可以观察染色体数目和结构是否有变化。

常用的核型分析方法有染色体计数法和比较基因组杂交法。

2. 组织学观察:通过石蜡切片技术,观察植物组织的细胞形态和染色体数目。

不同倍化水平的同源多倍体在细胞外观和染色体数目上会有明显差异。

3. 分子标记分析:利用分子标记技术,如RAPD、SSR等,可以对同源多倍体的基因组进行分析,寻找遗传多样性和差异。

4. 表型观察:观察同源多倍体在形态、生理和生殖方面的变化,通过与野生型或同源单倍体进行比较,寻找差异。

结论:通过化学诱导、温度诱导、辐射诱导和细胞学处理等方法可以实现同源多倍体的诱发,而通过核型分析、组织学观察、分子标记分析和表型观察等方法可以对诱发的同源多倍体进行鉴定。

这些方法的综合应用可以帮助我们更好地理解同源多倍体的形成机制和遗传特征,为植物进化和育种工作提供理论和实践上的指导。

参考文献:1. 黄凤林, 柯华军, 林一明. 植物同源多倍体的诱导及鉴定[J].热带农业科学, 2007, 27(3): 202-207.2. 吴访苏, 韦佳伟, 郭少婵, 等. 植物染色体工程方法优化及染色体在植物生产中的应用[J]. 生物技术通讯, 2020, 31(6): 716-721.3. Li H, Li W, Hu G, et al. Advances on Induction and Identification of Autotetraploid Plants[J]. Molecular Plant Breeding, 2021, 19(4): 1929-1937.4. Jiang J, Gill B S. Different Species-Specific Chromosome Translocations in Triticum timopheevii and Triticum turgidumSupport the D-RNA Model for Nonhomologous Chromosome Synapsis[J]. Genetics, 1994, 15(1): 215-227.。

植物多倍体的诱发和鉴定

植物多倍体的诱发和鉴定

植物多倍体的诱发和鉴定一、实验目的通过实验,进一步了解人工诱导多倍体的原理,并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法及细胞学鉴定。

二、实验原理染色体是遗传物质的主要载体。

每一个物种都具有特定的形态特征。

各个物种细胞内染色体的数目都是相对恒定的,这是一个重要的生物学特征。

染色体数目和结构的改变,将会导致生物性状的改变。

遗传学中把二倍体生物配子中所具有的染色体成为一个染色体组,通常用n来表示。

而一个染色体组中包含的染色体数目成为染色体基数,用x表示。

同一个染色体组的各个染色体的形态、结构和连锁基因群都彼此不同,但它们构成一个完整而协调的体系。

细胞中染色体数目的变异类型有两类:整倍体变异和非整倍体变异。

整倍体变异指体细胞中染色体数目按染色体组的基数(x)成倍数增加或减少的现象。

具有两套染色体组的生物体成为二倍体,体细胞中含有三个或三个以上染色体组的整倍体为多倍体。

多倍体按其来源可以分为:同源多倍体和异源多倍体,同源多倍体是指具有三个或三个以上相同染色体组的细胞或个体:异源多倍体是体细胞中含有两个以上不同类型染色体组的多倍体。

自然界中的多倍体主要存在于植物中,动物中的多倍体很少。

多倍体可以在自然条件卞产生,也可以人工诱导形成。

人工诱导多倍体通常采用物理方法和化学方法。

物理方法有高温、低温、超声波、嫁接和切断等,化学方法是使用秋水仙素、异生长素、蔡骈乙烷来诱导多倍体。

在诱导多倍体的方法中,以应用化学药剂更为有效,其中以秋水仙素效果最好,使用广泛。

秋水仙素阻碍有丝分裂中细胞纺锤体的形成,这样细胞不能分离,产生染色体加倍的核。

本实验用适当浓度的秋水仙素处理洋葱或大蒜根尖,待根尖膨人后制片观察,可诱发多倍体。

三、实验材料大蒜根尖四、实验方法与步骤(一)根尖多倍体的诱发将人蒜去掉老根,置于盛水的培养皿上,25°C条件卞培养发根,待不定根长出1cm时取出洗净,把水晾干后移到0.1%秋水仙素溶液中,根尖朝下,使根部浸没在药液中,于10°C 培养箱中低温培养,直到根尖膨大为止。

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计要诱发和鉴定不同植物的同源多倍体,可以采用以下实验设计:1. 选择合适的植物材料:选择目标植物的种子、嫩芽或离体培养的组织为实验材料。

确保材料的品种和来源可靠。

2. 细胞处理:将植物材料经过适当的处理来诱导多倍体形成。

常用的处理方法包括化学处理、物理处理和生物处理等。

- 化学处理:使用合适的化学物质,如染色剂(如染色体特异性染料)或化学诱导剂(如某些植物生长调节剂),浸泡、喷洒或处理材料,以促进细胞的多倍化。

- 物理处理:利用离子辐射(如X射线或γ射线)或化学物理处理(如温度、压力)等方法,对植物材料进行处理,诱发细胞的多倍化。

- 生物处理:利用植物病原微生物(如农杆菌)或共生微生物(如植物内生菌)等与植物进行交互作用,诱导细胞多倍化。

3. 培养条件的优化:根据目标植物的生长习性和需要,对培养基的成分、光照条件、温度和湿度等进行优化调整,以促进多倍体形成和生长。

4. 细胞倍化检测:使用适当的细胞学方法来检测和鉴定多倍体细胞。

常用的方法包括:- 核型分析:通过染色体制备和染色,观察细胞的染色体数目和结构,来确定是否形成了多倍体。

- 流式细胞术:利用流式细胞仪分析细胞的DNA含量,多倍体细胞的DNA含量会相应增加。

- 核型鉴定:利用核型学方法,如比较基因组杂交或分子标记技术,检测植物材料的基因组组成和倍性。

5. 多倍体植株的筛选与培养:鉴定出多倍体细胞后,将其分离培养,筛选并培养出稳定的多倍体植株。

在进行实验设计时,应注意对照组的设置,以确保结果的可靠性和准确性。

同时,要充分记录实验过程和结果,以便进行数据分析和后续研究。

此外,还应考虑实验的重复性和统计学分析,以提高实验结果的可信度。

实验五 植物多倍体的诱导和鉴定

实验五  植物多倍体的诱导和鉴定

五.作业
1.分别绘出2n=16和2n=32洋葱中期分裂相细胞。
2.阐述秋水仙素诱导植物细胞染色体数目加倍的机 制。
四.步骤方法
4.保存液中取根尖,纯水漂洗2次,1mol/L盐酸60℃水解根
尖10分钟,再纯水漂洗2次
5.将两种根尖分别置于干净载玻片上,
均切下分生区,加一滴染液,用镊 子捣碎根尖染色3-5分钟
四.步骤方法
6.加盖玻片,进行压片
7.显微观察
四.步骤方法
1.剥去洋葱干茎片,整理干净根盘,泡水3-4天 2.不定根长出约2cm,部分洋葱转入0.05%秋水仙素溶液 处理2天 3.分别取经过秋水仙素溶液处理后膨大的根尖和不处理 的根尖进行固定4-6h,95%酒精冲洗及70%酒精保存 4.保存液中取根尖,纯水漂洗2次,1mol/L盐酸60℃水解 根尖10分钟,再纯水漂洗2次 5.将两种根尖分别置于干净载玻片上,均切下分生区, 加一滴染液,用镊子捣碎根尖染色3-5分钟 6.加盖玻片,进行压片 7.显微观察
人工诱导多倍体也是培育植物新品种的主要 途径之一。
4nx2n 3仙
郁金香
小麦
三.供试材料 洋葱鳞茎
四.步骤方法
1.剥去洋葱干茎片,整理干净根盘,泡水3-4天 2.不定根长出约2cm,部分洋葱转入0.05%秋水仙素溶液处
理2 天
3.分别取经过秋水仙素溶液处理后膨大的根尖和不处理的 根尖进行固定4-6h,95%酒精冲洗及70%酒精保存
实验五
一.目的要求
植物多倍体的诱导和鉴定
了解人工诱导多倍体植物的原理;学习使用秋 水仙素诱发多倍体植物的方法;掌握鉴别植物多倍 体的实验操作。
二.预备知识 具有3个或以上基本染色体组的植物称为多
倍体植物。多倍体有同源多倍体和异源多倍体。 人工诱导多倍体可以采用物理和化学药剂处 理的方法进行操作。

多倍体的诱发与鉴定多倍体的诱发与鉴定多倍体的诱发与...

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实验六多倍体的诱发与鉴定多倍体:三倍和三倍以上的整倍体19世纪末世纪末,,狄.弗里斯普通月见草特别大的变异型(巨型月见草巨型月见草))2n=142n=28染色体数目变异可以导致遗传性状的变化染色体数目变异可以导致遗传性状的变化。

巨大型特征烟草的叶片气孔整倍体:体细胞染色体数为染色体组整倍数的个体。

非整倍体:体细胞染色体数增加一条或几条和减少一条或几条。

一、实验目的初步掌握秋水仙碱诱发多倍体的原理与方法原理与方法;;观察同源多倍体植物观察同源多倍体植物((器官器官))形态特征与细胞学特点态特征与细胞学特点。

二、实验原理人工诱发多倍体最有效的方法是秋水仙碱处理,秋水仙碱的作用是阻止纺锤丝的形成与活动阻止纺锤丝的形成与活动。

当秋水仙碱水溶液渗入分生组织正在分裂的细胞时仙碱水溶液渗入分生组织正在分裂的细胞时,,纺锤丝就不能形成或被破坏就不能形成或被破坏,,有丝分裂就停留在中期状态有丝分裂就停留在中期状态。

每个染色体的两个姊妹染色单体虽然彼此分开了每个染色体的两个姊妹染色单体虽然彼此分开了,,却不能向两极移动不能向两极移动,,不能形成两个子核不能形成两个子核,,于是该分生细胞的染色体数目就加倍了胞的染色体数目就加倍了。

当染色体已经加倍了的细胞不再接受秋水仙碱处理时胞不再接受秋水仙碱处理时,,它就又恢复正常的有丝分裂分裂,,结果形成多倍体组织结果形成多倍体组织。

秋水仙碱诱发多倍体的原理多倍体的鉴定形态育性细胞学观察三、试材与用品试材::经加倍处理的黑麦根尖•试材显微镜、、载玻片载玻片、、盖用品::恒温水浴锅恒温水浴锅、、显微镜•用品、胶头玻璃棒、碱性品红染胶头玻璃棒、镊子、、镊子玻片玻片、、1M盐酸。

盐酸。

醋酸、、45%醋酸液、0.2%秋水仙碱秋水仙碱、四、步骤与方法实验步骤种子发芽黑麦根尖染色体加倍处理十字压片制染色体临时片观察1.1.种子发芽种子发芽将吸水纸铺在培养皿中选取均匀选取均匀、、饱满饱满、、有发芽力的黑麦种子倒入培养皿中 实验方法倒入清水浸泡浸种14~18小时室温催芽36hr左右,根长至种子发芽种子发芽,0.5~1cM2.黑麦根尖染色体加倍处理把吸水纸盖在已经发芽的黑麦种子上倒入0.2%的秋水仙碱加倍处理约26小时根尖分生区以下明显增粗洗净根尖把洗净的根尖装入广口瓶倒入固定液固定1~24小时固定液固定液::卡诺氏Ⅰ,冰乙酸冰乙酸((1份):):无水乙醇无水乙醇无水乙醇((3份)逐级转入70%乙醇中保存备用3.制片制片::十字压片法制临时片解离水洗软化取分生区(膨大部位以上膨大部位以上))十字压片染色加盖玻片压片、敲片镜检绘图1M 1M盐酸盐酸60ºC 水浴1515~~2020分钟分钟60ºC 温水清洗清洗33~5次4545%%醋酸2~3枚碱性品红3~5分钟2n=4x=28 2n=2x=142n=4x=281.1.绘制正常细胞和加倍细胞中期分裂相各一个绘制正常细胞和加倍细胞中期分裂相各一个2.2.写出实验收获和体会写出实验收获和体会作业。

实验五 植物多倍体的诱导及细胞学鉴定

实验五 植物多倍体的诱导及细胞学鉴定

实验五植物多倍体的诱导及细胞学鉴定一、实验目的(1)掌握人工诱导多倍体的方法和技术,观察多倍体的特点及染色体加倍后的细胞学表现。

(2)了解染色体数目变异的鉴定方法二、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,但在特定的条件下,染色体的数目变异可分为整倍体变异和非整倍体变异,以体细胞中的染色体数(2n)为基础增减了个别染色体就是非整倍体变异,如单体2n-1、缺体2n-2(1)、三体2n+1、双三体2n+1+1、四体2n+2(1)等。

以染色体组或组内染色体基数(x)为基础成倍地增减,这是整倍体变异,如一倍体x、二倍体2x、三倍体3x四倍体4x等。

三倍体以上的生物体统称多倍体。

多倍体又可分为同源多倍体和异源多倍体。

同源多倍体是指具有三个或三个以上相同染色体组的细胞或个体,其增加的染色体组来自同一物种,一般是由二倍体的染色体直接加倍产生的。

异源多倍体是指增加的染色体组来自不同物种,一般是由不同种属间的杂交种通过染色体加倍而形成。

自然界有许多植物是多倍体,是变异发生的重要途径之一。

多倍体可自然发生,也可人工诱导。

人工诱导多倍体可以采用物理方法(如高温、低温和射线等处理)和化学方法(如秋水仙碱、植物激素等处理)。

其中,应用最广泛的是秋水仙碱处理。

秋水仙碱处理的有效质量浓度为0.1~4g/L,常用2g/L秋水仙碱溶液浸泡、涂抹或点滴等方式处理植物的分生组织。

不同植物材料的最适处理质量浓度和时间不同,需通过试验来确定。

多倍体的鉴定方法主要有细胞学鉴定和形态学鉴定。

细胞学鉴定是观测根尖、茎尖分生组织或花粉母细胞的染色体数目,是一种直接的鉴定方法;形态学鉴定是观测叶片气孔保卫细胞的大小及其叶绿体数目,花、果实、种子的形态,花粉粒的大小和姓等性状的变异,是一种间接的鉴定方法。

通常多倍体植物的气孔、花器、花粉种子,果实等明显变大,气孔数目减少而密度变稀,同源多倍体可形成部分畸形的不育花粉粒,育性有一定的降低。

三、实验材料洋葱(2n= 16)、小麦( 2n= 42)、玉米(2n=40)、水稻(2n=24)、蚕豆(2n=12)等植物的种子均可作为实验材料。

多倍体诱导

多倍体诱导

C—有丝分裂
加倍染色体
三、实验准备
1、材料:大蒜根尖 2、仪器药品:显微镜、小镊子、刀片、载玻片、 盖玻片、水浴锅、卡诺氏固定液、解离液、龙 胆紫染液
四、实验步骤

1.取材:清水中培养直新根长出 2.多倍体诱导: 移至0.2-0.4%浓度的秋水 仙素溶液中培养直至根尖1-2cm 3.固定: 卡诺氏固定液12-24小时→70%的酒 精中保存 4.解离: 水洗→盐酸60℃ 8min解离→水洗 5.染色、压片: 切取分生区→吸水→染色液 一滴,5分钟→压片 6.镜检实验目的
1、通过实验掌握诱导植物多倍体的方法和技 术。 2、观察多倍体的特点及染色体加倍后的细胞 学表现。 3、利用染色体分析的方法对多倍体的细胞作 出准确判断。
二、实验原理


秋水仙素是诱导多倍体效果最好的药剂之一。在适宜 浓度的秋水仙素的作用下,它既可以有效地阻止纺锤 体的形成,又不至于对细胞发生较大的毒害。 作用机理:当细胞进行分裂时,一方面能使染色体的 着丝点延迟分裂,于是已复制的染色体两条单条分离, 而着丝点仍点连在一起,形成“X”形染色体图像(称 为C—有丝分裂,即秋水仙效应有丝分裂);另一方 面是引起分裂中期的纺锤丝断裂,或抑制纺锤体的形 成,结果到分裂后期染色体不能移向两极,而重组成 一个双倍性细胞核。这时,细胞加大而不分裂,或者 分裂成一个无细胞核的子细胞和一个有双倍性细胞核 的子细胞。经过一个时期以后,这种染色体数目加倍 了的细胞再分裂增长时,就构成了双倍性的细胞和组 织。
五、作业


简要描述正常二倍体和多倍体植物的异同。 绘制二者中期细胞图片

植物多倍体诱发和鉴定

植物多倍体诱发和鉴定

实验材料、器具与试剂
(一)实验材料
洋葱根尖 ,大蒜(Aillum sativum)根尖
(二)实验器具 显微镜、培养箱、恒温水浴锅、温度计、镊子、刀片、载玻片、
盖玻片、烧杯、 1.5ml离心管、滴瓶、玻片、大培养皿、吸水纸、 铅笔、移液枪。 (三)药品试剂
卡诺氏固定液(无水乙醇3份,冰醋酸1份)、改良苯酚品红染色 液、1N HCl、45%醋酸。
• 2.你观察到的被鉴定物种的 染色体数目是多少?处理后 得到了哪些染色体数目变异 类型的细胞?
实验方法
(五)染色、压片 将解离后的根尖用蒸馏水冲洗后, 放入45%醋酸中软化5min左右,制片时,取一根 尖放在洁净的载玻片上,用刀片切取1mm左右的 生长区,其余部分弃掉,滴加改良苯酚品红染色液 染色15分钟左右。用刀片在材料的上方轻压几下, 使生长区的细胞分散开来,再将多余的染料用吸水 纸吸走,加盖玻片。用铅笔上的橡皮头敲击根尖部 位,重复几次,力一次比一次大,以盖玻片不破裂 为准。
植物多倍体诱发和鉴定
实验目的
•1.了解人工诱导多倍体的 原理
•2.学习用秋水仙碱诱发多 倍体植物的方法
二、实验原理
秋水仙碱是细胞有丝分裂的抑制剂,它的主要作 用是抑制纺锤丝微管的形成,因而抑制了染色体 移向两极的运动,使细胞停滞在中期状态而不能 分裂成二个新的子细胞,而秋水仙碱对染色体结 构并无明显的影响,对细胞也不产生严重毒害, 细胞解除秋水仙碱环境后仍可正常生长分裂,因 而出现细胞含有多个染色体组的情况,亦即构成 了多倍体细胞。如果用秋水仙素处理植物的根尖, 则在根尖分生区内可检测到大量染色体加倍的细 胞
实验方法
(一)材料准备 选取大蒜瓣去皮,用透明
胶带固定放在盛有清水的培养皿中,使根部 与清水接触,在 20~25℃光照条件下培养2 天左右。待根尖长到0.5~1cm时,将清水换 成含0.1%秋水仙素的水溶液中,置阴暗处培 养1~2天,至根尖膨大为止。

实验六 植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定

实验六 植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定

实验六植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定实验六植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定实验六植物多倍体诱导和细胞学鉴定一、实验目的通过实验掌握植物多倍体的方法和技术,观察多倍体的特点和染色体加倍后的细胞学表现。

染色体分析用于准确判断多倍体细胞。

2、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这是物种的基本特征之一。

多倍体是细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。

自然界中有许多植物是多倍体,也是变异发生的重要途径之一。

多倍体在形态较二倍体植物个体大,叶片上的气孔也很大,较易辩认。

多倍体研究在育种具有重要的意义。

利用一些诱发因素可以人工诱导植物产生多倍体。

这些因素包括物理的因素、化学因素等。

其中最为有效是化学药品是秋水仙素,秋水仙素colchicine(c22h25o6n)是1937年发现的,是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。

能够抑制细胞有丝分裂时形成的纺锤体,染色体虽然完成了复制,但是不能形成两个子细胞,因而使染色体的数目加倍。

含加倍的染色体的体细胞再分裂出来的子细胞,染色体数目都比原来的体细胞增加了一倍,就形成了一个多倍体植株。

三、实验试剂和用具秋水仙碱:浓度分别为0.02%、0.05%、0.1%。

卡诺固定液:3份95%酒精与1份冰醋酸配制而成。

龙胆紫溶液:将0.5g龙胆紫溶解于100ml和2%醋酸溶液中,制备0.5%龙胆紫溶液。

乙酸品红溶液:将1g品红与100ml冰醋酸混合,煮沸。

煮沸时,加入一颗生锈的钉子。

1%醋酸品红染料中加入少量铁,可提高染色效果。

搪瓷盘、镊子、剪刀、烧杯、培养皿、恒温水浴锅、纱布、试管。

四、实验材料促进发芽的玉米种子、幼苗等。

5、实验方法(一)玉米种子的处理和检测(1)玉米种子处理:浸种发芽的水稻种子秋水仙碱浓度分别为0.02%、0.05%和0.1%,浸种时间分别为12h、24h和48h。

浸泡后,用蒸馏水冲洗三次,并在皮氏培养皿中继续培养一周。

(2)、多倍体检测:剪取根尖(或胚芽)2-3mm,投入盛有10%hcl的培养皿中解离10min,再清水漂系2次。

植物的多倍体诱导及其观察实验报告

植物的多倍体诱导及其观察实验报告

植物多倍体的诱导及其鉴定一、实验目的1、通过实验,掌握化学诱导植物多倍体的原理以及方法,学习利用秋水仙素诱导植物多倍体的一般方法及多倍体诱导在植物育种上的意义。

2.学习利用细胞学方法观察鉴定多倍体的特点以及诱导染色体加倍后的细胞学表现,利用染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。

二、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这是物种的基本特征之一。

多倍体是细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。

在植物育种上,利用多倍体可以改良作物的经济性状,同时还可以利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。

利用一些化学因素诱导植物产生多倍体,秋水仙素是诱导多倍体形成最有效和常用的药品之一,利用秋水仙素处理正在进行有丝分裂的细胞,可以抑制纺锤丝的形成,使细胞有丝分裂中期纺锤丝断裂或纺锤体形成受抑制,有丝分裂后期,复制的染色体无法移向两级,细胞内的染色体加倍,形成多倍体。

因此在适宜浓度的秋水仙素作用下,它既可以有效的阻止纺锤体的形成,又不至于对细胞发生较大的毒害,因此,细胞经一定时期后仍可恢复正常,继续分裂,只是染色体数目加倍成为多倍性细胞,并在此基础上进一步发育成为多倍体植物。

将秋水仙素处理的植物根尖,制成临时装片,利用显微镜观察根尖分生区细胞中的染色体数目而确定是否形成染色体。

三、实验材料、器具及试剂1、实验材料:发芽的蚕豆,蚕豆幼苗2、实验器具:显微镜、解剖针、小试管、刀片、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、试管、培养皿、烧杯。

3、实验试剂:秋水仙素: 0.1%浓度。

卡诺固定液:3份95%酒精与1份冰醋酸配制而成。

1mol/l盐酸,45%醋酸,改良苯酚品红,70%酒精。

四、实验步骤1、取材:将种子消毒,并于无菌水中浸泡24小时后,将蚕豆种子(2n=16)培养在培养皿内的湿滤纸上,室温或28℃发芽,待胚根长达1~2cm时,取出萌发的种子,用自来水洗2~3次,备用。

2、预处理:将胚根长到1~2cm的蚕豆种子移到盛有0.1%秋水仙素的润湿的的吸水纸的培养皿内,室温下处理48h,待观察到根部有膨大时取出固定,与在水中进行培养的蚕豆种子(一般植物生长周期为17~18h)做对照。

诱导实验报告

诱导实验报告

一、实验名称植物多倍体诱导实验二、实验目的1. 掌握化学诱导植物多倍体的原理和方法。

2. 学习利用秋水仙素诱导植物多倍体的一般方法。

3. 了解多倍体诱导在植物育种上的意义。

4. 学习利用细胞学方法观察鉴定多倍体的特点。

5. 掌握染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。

三、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这是物种的基本特征之一。

多倍体是细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。

在植物育种上,利用多倍体可以改良作物的经济性状,同时还可以利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。

秋水仙素是一种诱导植物多倍体形成最有效和常用的药品之一。

利用秋水仙素处理正在进行有丝分裂的细胞,可以抑制纺锤丝的形成,使细胞有丝分裂中期纺锤丝断裂或纺锤体形成受抑制,有丝分裂后期,复制的染色体无法移向两级,细胞内的染色体加倍,形成多倍体。

四、实验材料与仪器材料:1. 植物种子或幼苗(如小麦、水稻、玉米等)2. 秋水仙素3. 0.1%的H2O2消毒液4. 无菌水5. 移液枪、吸管等仪器:1. 培养皿2. 烧杯3. 移液器4. 显微镜5. 细胞计数板五、实验步骤1. 将植物种子或幼苗进行表面消毒,消毒液为0.1%的H2O2,消毒时间约为30秒。

2. 将消毒后的植物种子或幼苗放入培养皿中,加入适量无菌水,保持湿润。

3. 将秋水仙素加入无菌水中,配制成一定浓度的溶液。

4. 将配好的秋水仙素溶液倒入培养皿中,使植物种子或幼苗浸泡在溶液中。

5. 将培养皿放入恒温培养箱中,保持适宜的温度和湿度。

6. 经过一定时间后,取出植物种子或幼苗,用无菌水冲洗干净。

7. 将冲洗干净的植物种子或幼苗放入新的培养皿中,加入适量无菌水,继续培养。

8. 经过一段时间后,观察植物种子或幼苗的生长状况,并记录数据。

9. 利用显微镜观察植物细胞的染色体,进行染色体分析。

10. 根据染色体分析结果,判断植物种子或幼苗是否为多倍体。

六、实验结果与分析1. 经过实验,大部分植物种子或幼苗在秋水仙素处理后,生长状况良好,表现为叶片颜色加深、植株高度增加等。

植物多倍体的诱发与鉴定实验报告

植物多倍体的诱发与鉴定实验报告

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实验十三植物多倍体诱发与鉴定

实验十三植物多倍体诱发与鉴定

3.细胞学观察
• 用根尖压片法制成染色体玻片标本,在 显微镜下认真观察和染色体计数,与对 照进行对比。
• 洋葱根尖细胞染色体 (染色体加倍)
• 洋葱根尖细胞染色体 (正常二倍体细胞)
六、作业及思考题
• 1.与对照植物相比,处理后的多倍体植物有哪些不 同特征?
• 2.你观察到的被鉴定物种的染色体数目是多少?处 理后得到了哪些染色体数目变异类型的细胞?
• 2.药品试剂:秋水仙碱、改良品红染色液、 无水酒精、冰醋酸、1N盐酸。
五、实验步骤
1.多倍体的诱发
• 可处理萌动种子,幼苗或植株生长点, 浓度以0.01~0.4%为宜;在以实验室观 察为目的的情况下,可以处理根尖。
2.植株形态特征的观察
• 整个植株、或组织、 器官、细胞都可以看 到增大,其中气孔, 保卫细胞表现尤为明 显。
三、实验材料
• 洋葱(Allium cepa,2n=16)、蚕豆(Vicia faba,2n=12)、西瓜(Citrullus vulgaris ,2n=22) 等作物的种子、根尖、花蕾或幼苗 。
四、实验用具药品
• 1.用具:显微镜、烧杯、培养皿、载玻片、 盖玻片、剪刀、镊子、刀片、解剖针、 纱布、吸水纸等。
实验十三 植物多倍体 诱发和鉴定
一、实验目的
• 了解人工诱导多倍体的原理,学习用秋 水仙碱诱发多倍体植物的方法,学习识 别多倍体植物的形态特征及其细胞学特 点。
二、实验原理
• 秋水仙碱是细胞有丝分裂的抑制剂,它的主要 作用是抑制纺锤丝微管的形成,因而抑制了染 色体移向两极的运动,使细胞停滞在中期状态 而不能分裂成二个新的子细胞,而秋水仙碱对 染色体结构并无明显的影响,对细胞也不产生 严重毒害,细胞解除秋水仙碱环境后仍可正常 生长分裂,因而出现细胞含有多个染色体组的 情况,亦即构成了多倍体细胞。如果用秋水仙 素处理植物的根尖,则在根尖分生区内可检测 到大量染色体加倍的细胞,若处理植物幼苗的 芽,则可以得到染色体加倍的植株。

植物多倍体诱发和鉴定实验报告

植物多倍体诱发和鉴定实验报告

植物多倍体诱发和鉴定实验报告一,试验目的1.通过试验掌握植物多倍体化学诱导的原理和方法研究用秋水仙素进行植物多倍体诱导的常用方法和多倍体诱导对植物育种的重要性。

2、学会用细胞学方法来观察和识别多倍体特征及诱导染色体加倍的细胞学表现并通过染色体分析对多倍体细胞作出精确判断。

二,实验原理生物体内细胞核内均存在着比较稳定的染色体数量,这也是最基本的物种特征。

多倍体指细胞内有三个或更多染色体组存在的生物体。

在植物育种中,用多倍体可使作物经济性状得到改善,但也能用多倍体来克服远缘杂交时遇到的阻碍。

用某些化学因素来诱导植物多倍体的发生,其中秋水仙素对诱导多倍体的发生作用最大,也是目前使用频率最高的药物,用秋水仙素来处理进行有丝分裂过程中的细胞能抑制纺锤丝发生,从而在细胞有丝分裂过程中期纺锤丝被打断或者纺锤体的发生受到抑制,而在有丝分裂过程后期复制染色体不能移动到2个水平上,在细胞中染色体发生倍增而发生多倍体。

所以当秋水仙素浓度合适时,既能有效地阻断纺锤体生成,也不会对细胞产生很大毒害,所以细胞经过一段时间之后仍然能恢复正常而持续分裂,只需染色体数量倍增为多倍性细胞就能以此为基础进一步发展成多倍体植物。

用秋水仙素加工植物根尖制作临时装片并在显微镜下观察根尖分生区细胞内染色体的数量来判断染色体形成与否。

三,实验的材料,用具和试剂1.试材:萌发蚕豆及蚕豆幼苗2.实验器具,显微镜,解剖针,小试管,刀片,镊子,载玻片,盖玻片,吸水纸,试管,培养皿,烧杯等。

3.实验试剂为秋水仙素,浓度为1度。

卡诺固定液:由三种95%酒精和一种冰醋酸混合制成。

1mol·l-1盐酸、1mol·L-1醋酸、改良苯酚品红、1mol-1酒精。

四,试验步骤1.取材:种子经消毒后在无菌水中浸泡24 h,取蚕豆种子(2n=16)置于培养皿中湿滤纸中,常温或28℃条件下催芽,胚根长1~2cm,取催芽种子用自来水冲洗2~3遍待用。

2.预处理:取胚根长1~2cm蚕豆种子,移入装有蚕豆种子秋水仙素湿润吸水纸培养皿中,常温处理48h后,观察根部膨大情况后取出固定不动,并以水中培养蚕豆种子(通常植物生长周期17~18h)作对照。

植物多倍体的诱发与鉴定

植物多倍体的诱发与鉴定

植物多倍体的诱发与鉴定张延杰山东大学生命科学学院09级四班200900140178摘要通过对大蒜根尖的秋水仙素处理,将根尖进行多倍体诱导,了解人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种上的意义。

初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的实验技术和多倍体的鉴定方法。

引言多倍体广泛地存在于植物界,目前已知被子植物中有三分之一以上的物种是多倍体,如普通小麦是异源六倍体,棉花是四倍体,此外还有烟草等,这些部是自然界存在的多倍体。

多倍体产生的途径除自然发生外。

也可以采用高温、低温、嫁接、切断和射线处理等物理方法和化学药剂处理方法,在这些方法中以化学药剂处理最为有效,如秋水仙素,萘嵌戊烷、异生长素、植物激素、富民隆等,都可诱发多倍体,其中应用最广泛、效果最好的是秋水仙素。

秋水仙素是由百合科秋水仙属的秋种番红花一一秋水仙素(Colchicum autumnale)的种子和器官中提炼出来的一种生物碱。

化学分子式为。

它具有麻醉作用,对植物的种子、幼芽、花蕾、花粉、嫩枝等可产生诱变作用,它的作用机理是抑制细胞分裂时纺缍体的形成,使复制后的染色体不能拉向两极,细胞不能继续分裂形成两个子细胞,从而导致染色体加倍,形成多倍体细胞,在此基础上进一步发育成多倍体植物,多倍体植物可以通过有性繁殖进行繁殖下去。

用人工方法诱导的多倍体,可以得到一般二倍体没有的优良性状,如大粒、大穗、内含物量增加、抗病性强等。

人工培育的三倍体西瓜、三倍体甜菜、八倍体小黑麦已在生严上厂泛应用。

对多倍体的鉴定,除了检查染色体数目变化外,形态特征的变异也是一个重要方面。

多倍体植物的气孔、花器、花粉粒、种子、果实等部分明显变大,气孔数目减少而密度变稀,同源多倍体育性有一定的降低,所以同源多倍体中有部分畸形的不育花粉粒。

实验材料:1、活体材料大蒜。

2、实验器具显微镜、剪刀、培养皿、载玻片、盖玻片、吸水纸、培养箱、镊子、解剖镜、镊子、解剖针、培养皿等。

3、药品改良苯酚品红染液、固定液、1mol/L HCl、冰醋酸、无水乙醇、医用乙醇(75%)等。

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植物多倍体的诱导及细胞学鉴定
实验时间:4月6日
摘要一个物种细胞中染色体形态结构和数目的恒定性是这个种的重要特征。

我们把二倍体个体中能维持配子或配体正常功能的、最低数目的一套染色体称为染色体组或基因组。

当生物体内细胞染色体组数达到3组或3组以上者,称为多倍体。

多倍体在植物进化中有很重要的意义。

本实验利用大蒜作为试验材料,利用秋水仙素诱导,使生长出多倍体根尖。

然后通过制作大蒜根尖压片,观察染色体的数目,以鉴定大蒜根尖细胞是否为多陪细胞。

(本实验报告主要从多倍体的鉴定方面展开,而多倍体培育方面,将在下次报告中给出。


1.引言
生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目,这是物种的基本特征之一。

遗传学中,将二倍体生物一个配子的染色体总和称为染色体组,也叫基因组,用n表示。

以下是几种常见模式生物的染色体组数目:玉米,2n=20;拟南芥,2n=10;果蝇,2n=8;小鼠,2n=40;水稻,2n=24。

又如,小麦染色体组可表示为2n=6x=42。

其中x表示每一个染色体组的染色体数,称为染色体基数,它是物种演化过程中的染色体倍数性的关系。

多倍体是指细胞中具有3个或3个以上染色体组的细胞或个体,而多倍体可以分为:同源多倍体(具有3个以上相同染色体组的细胞或个体,且染色体组来源于同一物种(AAA,AAAA))、异源多倍体(具有3个以上染色体组且染色体组来源于不同物种,通常由不相同的种杂交的杂种再经过染色体加倍而来(AABB,AABBDD))。

在自然界中许多植物都是多倍体,大约有30%~35%的被子植物,其中70%的禾本科植物属于多倍体,它们在植物进化中起了重要的作用,也是植物发生变异的重要途径之一。

多倍体植物,一般被认为是适应恶劣自然环境的结果,如我国西南部地区,温度变化激烈,紫外线辐射强,许多植物产生了多倍体类型。

在自然界中,大多是因为温度骤变,导致细胞分裂时染色体不分离,从而形成了多倍体。

植物多倍体有许多特性,其中一些特性也为农业经济发展提供了帮助。

巨大性,随着染色体加倍,细胞核和细胞变大,组织器官也变大,根、茎粗壮,叶宽厚、色深、花大、色艳、气孔、花粉粒、果实、种子大;可孕性低,多倍体特别是三倍体是高度不孕的,表现----无籽、种子皱缩(例外----风信子三倍体品种(2n=3X=24)表现高度可孕性);适应性强,植物多倍化不仅使植株基因活性及酶的差异性增强,而且还增强了植株的生态适应性、对逆境的抗耐性,所以分布地区较广。

有机合成速率增加,多倍体有多套基因,新陈代谢旺盛,酶活性加倍,提高了有机物的合成速率。

客服远缘杂交不亲和的问题。

人工诱导植物多倍体的方法很多,如物理方法:温度剧变、机械损伤、各种射线处理等;化学方法:各种植物碱、麻醉剂、植物生长激素等。

其中,有秋水仙素[1]处理是诱导多倍体
的最有效的方法之一。

如:浸渍法处理种子,点滴法处理幼苗,毛细管法处理较大植株,羊毛脂法处理植株或幼苗,注射法处理球根内生长点。

以鲍的多倍体诱导为例,介绍动物多倍体的诱导方法。

水压法,以皱纹盘鲍的受精卵为例:在卵受精后7分钟及22分钟用200千克/平方厘米的静水压力处理5分钟,可分别获得抑制第一极体释出后形成的三倍体和抑制第二极体释出后形成的三倍体,诱导率均在60%以上。

水压法对胚胎有轻度的损伤,其缺点是需要专门的压力设备,成本较高。

温度法,低温法,以皱纹盘鲍为例:卵受精后12分钟,在3℃水温下浸泡受精卵15分钟,可获得抑制第一极体释放后形成的三倍体;卵受精后32分钟,在3℃水温下浸泡受精卵15分钟,可获得抑制第二极体释放后形成的三倍体。

三倍体诱导率均可达70%~80%。

高温法,皱纹盘鲍的卵在受精后7分钟用35℃的高温水浸泡3分钟,可获得抑制第一极体释放而形成的三倍体;受精后22分钟可用35℃高温水浸泡3分钟,可获得抑制第二极体释放而形成的三倍体。

两者的诱导率分别可以达到50%~70%、60%~80%。

利用高温或低温均可抑制极体生成,而且本方法具有设备简单、成本低廉等优点,但受精卵对温度休克较为敏感,成活率常偏低。

细胞松弛素B[2]诱导法,本方法是目前海产贝类多倍体培育最常用的方法之一,其诱导率较高,最高可达100%。

多倍体生物的鉴定方法。

间接法,就是根据多倍体的外形特征,通过观察生物体的特征来确定是否为多倍体;直接法,获取生物体的组织细胞,在显微镜下观察确定染色体的数目来确定是否为多倍体。

2.实验材料
2.1.试验材料
新鲜的大蒜
2.2.试验方法
2.2.1.取材:取大蒜放于清水中发根至0.5-1.0cm,然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶液的培养皿中继续培养24小时,待观察到根部有膨大时取出固定。

与在水中培养的材料做对照。

(一般植物生长周期17-18小时)
2.2.2.固定:在卡诺固定液中固定24小时,移至70%乙醇中保存或备用。

2.2.
3.解离:植物的分生组织如根尖、茎尖等需要经过处理以便除去细胞之间的果胶层并使细胞壁软化,经解离的组织才能使压片步骤顺利进行。

解离常用酸解法和酶解法。

①酸解法:固定后的材料用清水洗涤后,用1MHCl在60℃水浴中恒温处理5-10min。

在酸解过程中一定要掌握好温度和时间,若解离不够,则压片不易分散。

若解离太过,在下一步处理材料时由于材料过软而易丢失。

然后水洗3次。

②酶解法:用10-20g/L的果胶酶,或与10-50g/L的纤维素酶混合使用。

本实验中,将以获取的大蒜根尖用清水冲洗2-3遍,然后采用酸解法解离大蒜根尖。

2.2.4.染色:切取根尖分生组织区,用改良苯酚品红染色15 min。

2.2.5.压片:将染色后的根尖分生区盖上盖玻片,在盖玻片上盖上两层吸水纸,用一个双面刀片,插到盖片与载片之间的一角,用左手食指压紧盖片,防止滑动,用右手持解剖针,用针柄轻敲盖片,使材料均匀分散开。

然后将刀片轻轻撤出,再用针柄重敲盖片,使细胞分散压平。

2.2.6.镜检:在制成的染色体玻片标本中,染色清晰而且分散良好的中期分裂相总是少数,
所以,在压片之后需要认真地进行镜检。

镜检时先用低倍镜进行观察,找到好的视野后再转用高倍镜观察。

然后计数所看到的染色体数目,与正常二倍体树木对比。

3.结果
3.1.实验结果,如下图
图1(二倍体)图2(四倍体)
3.2.结果讨论
3.2.1.大蒜根尖的生长周期约为17-18个小时,所以用秋水仙素处理的时候,应当注意时
间的问题;
3.2.2.秋水仙素处理好的大蒜根尖应当是根尖膨大,可以此作为秋水仙素处理好坏的标准;
3.2.3.酸解法解离完毕之后,一定记得用清水将根尖洗净,以免影响碱性染料对染色体的
染色;
3.2.
4.我们处理得到的多倍体实际上只是大蒜根尖那点分生区的细胞染色体加倍了,所以
在鸦片观察时,之切取根尖2-3mm左右的跟腱膨大区观察即可;
3.2.5.压片的老问题。

与前几次不同的是,本次材料为植物细胞,有细胞壁,所以在鸦片
是可适当的稍微用力一点,时间稍久一些,以充分的是细胞破碎,染色体分散。

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