畜禽繁殖与改良教案

教学过程组织：

清点人数（1—2分钟）

复习导入：卵巢囊肿有哪几种情况？（3—5分钟）

进入新课

（四）、受体的同期发情（ 20分钟）

当前比较理想的同期发情药物是前列腺素及其类似物，其剂量因PG种类和用法不同而异。15-甲基 PGF2 2mg肌注，氯前列烯醇500g肌注。各种家畜实施超排处理的具体方法见本书第5章家畜繁殖技术中的发情控制技术部分。

（五）供体的发情鉴定和配种

超排处理结束后，要密切观察供体的发情征状，为确保卵子受精，一般在发情8～12h输精一次，以后间隔8～12h再输精一次，并且要加大输精量。

（六）胚胎采集

在配种或输精后适当时间，从超排供体回收胚胎，准备给受体移植，称胚胎采集或胚胎回收，简称采胚。

1.冲胚液和培养液的配制现在多采用杜氏磷酸盐缓冲液（PBS），不但可用于冲洗、采集胚胎，还用于体外培养、冷冻保存和解冻胚胎。

冲胚液犊牛血清含量一般为3%（1%～5%），培养液血清含量为20%（1%～50%）。犊牛血清需加热（56℃水浴30min）灭活。

2.采胚时间根据配种时间、排卵的大致时间、胚胎的运行速度、胚胎的发育阶段、畜种、胚胎所处部位及采胚方法等因素来确定是适宜的采胚时间。

3.采胚方法采胚方法分为手术法和非手术法两种。手术法适用于各种动物，尤其是绵羊、山羊、猪及实验动物；非手术法仅适用于牛、马等大家畜，且只能在胚胎进入子宫后进行。

（1）手术法采胚

A 母畜保定一种方法是用全身或后躯麻醉，母畜进行仰卧保定。另一种方法是用局部麻醉，使母畜站立于六柱栏中保定。两者的保定姿势均为前低后高的方式。

B 麻醉全身麻醉可用普鲁卡因、酒精等；局部后躯麻醉用普鲁卡因、利多卡因进行腰荐或尾椎硬膜外腔注射，手术部位再以利多卡因作皮肤浸润麻醉。

醉后，再移胚。

3.影响胚胎移植妊娠率的因素

（1）胚胎因素包括胚胎质量、日龄、移植胚胎的数量、提供胚胎的供体、胚胎在体外培养的时间、鲜胚和冻胚等。

（2）母体因素包括供、受体发情同期化程度，受体的孕酮水平，受体的营养，子宫、卵巢的生理状况等。

（3）其他因素包括自然发情与人工诱导发情，移植器污染程度以及操作者熟练程度等。

（3—5分钟）

1．检胚的方法为

2．胚胎保存的方法有、、

3．胚胎移植的部位有

4．手术法移植胚胎的方法有、 ,非手术法移胚的方法有、

5．影响胚胎移植妊娠率的因素有

小结：采用学生互相提问方式（3—10分钟）

如：A学生问：“胚胎的保存方法有？由B学生回答……

课后作业：(1—2分钟)

1、复习本节所讲内容；

2、简述胚胎移植的基本过程

板书设计:

第一节胚胎移植技术

（四）受体的同期发情

（五）供体的发情鉴定和配种

（六）胚胎采集

1.冲胚液和培养液的配制

2.采胚时间

3.采胚方法

（1）手术法采胚

（2）非手术法采胚

4.检胚

（七）胚胎保存

1.常温保存

2.低温保存

3.冷冻保存

（八）胚胎移植

1.移胚部位

2.移胚方法

3.影响胚胎移植妊娠率的因素

（1）胚胎因素

（2）母体因素

（3）其他因素

教后感：本节课采用多媒体辅助教学，完成了本节课的教学目标，课堂中学生合作精神得到了发扬，不足：学生知识点的掌握有待加强

2、胚胎分割的程序

（1）用促性腺激素促使牛、羊超数排卵

（2）通过外科手述取出2、4、8等分裂球的胚胎

（3）将秀明带中的卵裂球分离，用吸管吸出

（4）将分离的分裂球放入其他动物预先掏空的秀明带中，在每个透明带中放入1—2个卵裂球（5）将分割后的胚胎埋藏于琼脂中，放入羊或其他动物输卵管中培养3-4天

（6）将胚胎冲洗出来经鉴定后，再作移植用

（二）胚胎嵌合技术

1、嵌合体的制作方法

（1）早期胚胎聚合法

①采集胚胎

②除去透明带

③胚胎的聚合

④聚合胚胎的培养

⑤嵌合体的移植

⑥嵌合体的鉴定

（2）分裂球聚合法

（3）囊胚注入法

2、嵌合体的标记及鉴定方法

五、动物转基因技术

（一）外源基因导入的主要方法

1、原核显微注射法

2、反转录病毒感染胚胎法

3、胚胎干细胞法子、精子载体法

（二）基因导入的应用前景

1、动物育种

2、生产动物蛋白

六、胚胎干细胞技术

（一）、形态与功能特点

1、形态学特征

2、功能特征

（二）胚胎干细胞建系技术要点

1、饲养层的制备及分化抑制物的选择

2、早期胚胎及PGC的选择和分离

3、早期胚胎及PGC的培养和ESC的分离传代

4、ESC的鉴定及保存

（3—5分钟）

1体外受精的意义为

2胚胎性别鉴定技术、、、

3核移植技术

4核移植及动物克隆的意义是。

5嵌合体的制作方法论

在胚胎移植全部操作过程中，胚胎不应受任何不良因素的影响。

（四）供、受体的状况

1.生产性能和经济价值

2．全身及生殖器官的生理状况

三、胚胎移植技术

（一）供体和受体的选择

1.供体的选择

（1）生产性能高，经济价值大，具备遗传优势，在育种上有价值。

（2）既往繁殖史正常，无遗传缺陷，具有良好的繁殖能力，且分娩顺利。

（3）体质健壮，膘情适度。

2.受体的选择受体母畜可选用非优良品种个体，但应具有良好的繁殖性能和健康体况，可选择与供体发情周期同步的母畜为受体。

（二）药品和器械的准备

1.药品 FSH、HCG、PGF2α；麻醉剂；生盐理水、75%酒精、2%碘酒、青霉素。

2.器械 10ml和1ml注射器、手术刀、剪子、镊子、止血钳、创布、缝合针、线及手术台；冲胚管、移胚管、显微镜、表面皿、凹玻片、拔胚针等。

（三）供体的超数排卵

超排技术通常用于单胎家畜，其目的是让优良母畜排出大量卵子，充分发挥其繁殖潜力，是胚胎移植中的一个重要环节。

1.超排方法

（1）PMSG或FSH超排给供体母畜注射PMSG或FSH，发情开始后12～16h和20～24h各配种（输精）一次，并于第一次配种后静脉注射HCG或LH，以便排出更多卵子。激素的应用时间和剂量因家畜种类不同而有差异。

（2）配合应用前列腺素（PG） PG的用法通常是在应用PMSG以后大约48h进行肌注。牛的用量因PG种类而异，PGF2α为30mg，15甲基PGF2α为 2mg,氯前列烯醇为500μg；绵羊和山羊的用量为牛的一半。

（3）PMSG与抗PMSG配合使用抗PMSG可以消除PMSG的残留作用，明显增加可用胚胎数，提高超排效果。

2.超排效果的评判标准超排是胚胎移植中最难控制的一个环节，在实践中只要能使一半以上处理母畜达到满意结果，则认为超排是成功的。

（四）、受体的同期发情（ 20分钟）

当前比较理想的同期发情药物是前列腺素及其类似物，其剂量因PG种类和用法不同而异。15-甲基PGF2 2mg肌注，氯前列烯醇500g肌注。

（五）供体的发情鉴定和配种

超排处理结束后，要密切观察供体的发情征状，为确保卵子受精，一般在发情8～12h输精一次，以后间隔8～12h再输精一次，并且要加大输精量。

（六）胚胎采集

在配种或输精后适当时间，从超排供体回收胚胎，准备给受体移植，称胚胎采集或胚胎回收，简称采胚。

1.冲胚液和培养液的配制现在多采用杜氏磷酸盐缓冲液（PBS），不但可用于冲洗、采集胚胎，还用于体外培养、冷冻保存和解冻胚胎。

冲胚液犊牛血清含量一般为3%（1%～5%），培养液血清含量为20%（1%～50%）。犊牛血清需加热（56℃水浴30min）灭活。

2.采胚时间根据配种时间、排卵的大致时间、胚胎的运行速度、胚胎的发育阶段、畜种、胚胎所处部位及采胚方法等因素来确定是适宜的采胚时间。

3.采胚方法采胚方法分为手术法和非手术法两种。手术法适用于各种动物，尤其是绵羊、山