实验方案-益生菌生产中益生菌培养工艺的优化
益生菌类保健食品厂良好生产规范修改
益生菌类保健食品厂良好生产规范修改随着人们健康意识的提高，保健食品市场飞速发展。
其中，益生菌类保健食品以其具有增强免疫力、调节肠道功能等功效受到了广大消费者的热爱。
然而，一些不规范的生产过程和标准，可能导致产品质量问题和健康风险的增加。
因此，益生菌类保健食品厂亟需对生产规范进行修改，以确保产品安全和质量。
本文将重点探讨在生产工艺、卫生条件、质量控制等方面的规范修改。
一、生产工艺规范1. 原材料选择和采购：益生菌类保健食品的质量和功效与所选用的原材料密切相关。
因此，厂商需要对原材料的来源、质量、保存等方面进行严格的控制。
建议与有信誉的供应商建立长期稳定的合作关系，确保原材料的稳定供应和质量可控。
2. 发酵工艺控制：发酵是益生菌类保健食品生产中的重要环节。
厂商需要对发酵条件进行严格控制，包括发酵温度、湿度、pH值等。
同时，为了保证产品中益生菌的存活率和数量，建议在发酵过程中使用适宜的助剂和促生长因子。
3. 产品配方优化：不同的益生菌菌株对于人体的益处也不尽相同。
因此，厂商需要根据产品的目标群体和功能要求优化产品的配方。
此外，还应注意避免使用可能对益生菌生长产生抑制作用的添加剂。
二、卫生条件规范1. 厂房设计与改造：益生菌类保健食品的生产需要在洁净的环境中进行，以防止外界的污染。
因此，厂房应采取合理的设计与改造，包括密封性强、隔离有害物质、易清洁等特点。
同时，要确保通风设施良好，维持适宜的温度和湿度。
2. 人员培训与卫生意识：厂商需要加强员工的卫生意识和培训，确保生产过程中的操作规范和个人卫生符合要求。
同时，建立健全的卫生管理制度，制定相关纪律和规章制度，进行定期的卫生教育和培训。
三、质量控制规范1. 完善的检测体系：建立完善的质量检测体系，包括对原材料、中间产品和最终产品进行全面的检测。
可以采用微生物培养、基因测序等技术手段，确保产品中的益生菌菌株种类和数量符合要求。
2. 规范的记录与追溯：建立规范的记录和追溯体系，包括原材料采购记录、生产过程记录、产品检验记录等。
发酵食品中益生菌菌种的筛选和优化方法研究
发酵食品中益生菌菌种的筛选和优化方法研究发酵食品是一种通过微生物发酵作用来制造的食品，它具有多种益处，例如提高营养价值、改善食品口感和延长保质期等。
发酵食品中广泛存在着一种特殊类型的微生物，即益生菌。
这些益生菌，可以在人体内产生有益的生物活性物质，对维护肠道健康、增强免疫力等方面起到重要作用。
因此，对益生菌菌种的筛选和优化方法的研究具有很大的实际意义。
益生菌菌种的筛选是发酵食品中益生菌菌种的最初选择阶段。
要求所筛选出的菌种具有以下特点：1）对人体安全无毒。
2）能够在食品基质中良好地存活和繁殖。
3）对于食品材料具有优良的功能特性。
4）具有良好的抗性能力，能够在发酵过程中抵抗食品基质中的不良微生物的侵入。
目前，益生菌菌种的筛选方法主要有以下几种。
首先是传统的筛选方法。
这类方法主要是通过纸片对菌株的形态、生长特点等进行观察和鉴定。
但是，这种方法只能从表面上观察微生物型态，对于有些菌种来说，传统的方法很难有效区分。
第二种是生理和生化方法。
这类方法主要通过菌株的生理和生化特性来判断和筛选。
如菌株的耐受性能力、酶活性、细胞物质代谢能力等。
通过这些特性的判断，可以初步了解菌株的优异性。
第三种是遗传和分子生物学方法。
随着分子生物学技术的发展，逐渐应用到益生菌菌种的筛选中。
通过分析菌株的基因组、基因表达和代谢途径等，可以深入了解益生菌菌株的特点和功能。
特别是PCR技术的发展，可以快速准确地检测和筛选出具有益生菌功能的菌株。
优化方法是指通过改变发酵条件来提高益生菌发酵食品生产的效果。
目的是尽量减少有害微生物的生长，提高益生菌的生长速度和产酸能力，增强其功能特性。
具体优化方法如下：首先是调整发酵条件。
发酵条件包括温度、pH值、发酵时间等因素。
通过调整这些条件，可以改变微生物的生长环境，进而改变微生物的生理代谢过程，提高益生菌的生长速度和产酸能力。
第二种是添加培养基的改良剂。
培养基的改良剂主要是指添加有益菌株生长的微量元素、抗生素等。
益生菌坚果冻干营养块的工艺优化
益生菌坚果冻干营养块的工艺优化作者：陈元芝涂俊宏宗宁燕耿云娣朱海燕来源：《食品安全导刊·下》2024年第07期摘要：為了开发出营养均衡、口感丰富的益生菌坚果冻干营养块，本文以感官评分为评价指标，采用单因素试验和正交试验确定益生菌坚果冻干营养块的最优工艺配方。
结果表明，在发酵乳100 g、脱脂乳粉35 g、坚果33 g、麦芽糊精20 g、白砂糖20 g、乳清粉25 g、玉米淀粉8 g、果胶1.2 g和益生菌粉0.1 g的条件下制备的益生菌坚果冻干营养块的感官评分为86.8分，此方法制得的益生菌坚果冻干营养块不仅口感好，还能有效保存益生菌的活性与坚果的营养价值。
关键词：益生菌；坚果；真空冷冻干燥；工艺品质Abstract： In order to develop probiotic jelly dried nutritional blocks with balanced nutrition and rich taste， this article uses sensory evaluation as the evaluation index， and uses single factor experiments and orthogonal experiments to determine the optimal process formula of probiotic jelly dried nutritional blocks. The results showed that the sensory score of the probiotic jelly dried nutritional block prepared under the conditions of fermented milk 100 g， skim milk powder 35 g，nuts 33 g， maltodextrin 20 g， white sugar 20 g， whey powder 25 g， corn starch 8 g， pectin1.2 g， and probiotic powder 0.1 g was 86.8 points， the probiotic jelly dried nutritional block preparedby this method not only has a good taste， but also effectively preserves the activity of probiotics and the nutritional value of nuts.Keywords： probiotics; nuts; vacuum freeze-drying; technology quality随着现代生活节奏的加快，人们对健康食品的需求日益增长。
益生菌工艺技术
益生菌工艺技术益生菌工艺技术是利用科学的工艺方法培养和提取益生菌的一种技术。
随着人们对健康的重视程度不断提高，益生菌在保健和医疗领域的应用也日益广泛。
益生菌含有乳酸菌、双歧杆菌、酵母菌等有益健康的微生物，可以增加肠道菌群，调节肠道功能，增强人体免疫系统等，具有重要的保健作用。
而益生菌工艺技术则是将这些有益微生物进行繁殖和提取的一种技术。
益生菌工艺技术的主要步骤包括选材、培养、分离、鉴定和提取等。
首先是选材，根据不同的应用需求选择适合的益生菌菌株，通常从乳制品、食品、土壤等自然环境中选取。
其次是培养，将选取的菌株进行培养繁殖，通常采用液态培养、固态培养以及混合培养等方法。
在培养过程中需要控制好菌株的生长条件，包括菌种的选择、培养基的配制、温度、湿度、氧气供应等因素。
同时，还需要进行生理生化特性的研究，以便更好地了解菌株的营养需求和代谢特点，从而为后续的工艺调控提供依据。
然后是分离和鉴定，这是一个非常关键的步骤。
通过不同的分离和纯化方法，将混合培养的菌种进行分离，得到纯种菌株。
再通过形态学、生理生化特性、分子生物学方法等对分离得到的菌株进行鉴定，确定它们的种属以及菌株间的亲缘关系，以确保选取的菌株是真正的益生菌，并具有良好的稳定性和活力。
最后是提取，将获得的纯种益生菌菌株进行扩大培养，然后通过离心、滤液、浓缩等步骤将菌体或代谢产物从培养液中提取出来。
益生菌的提取通常采用低温离心、低温过滤、低温干燥等技术，以保持菌株的活力和活性成分的稳定性，同时还需要采用无菌控制、无毒性处理等方法，确保产品的安全和有效性。
综上所述，益生菌工艺技术是利用科学的工艺方法培养和提取益生菌的一种技术。
通过选材、培养、分离、鉴定和提取等多个步骤，可以获得纯种、活性、稳定的益生菌制品。
益生菌工艺技术的不断发展和完善，将为人们的健康提供更多的选择和保障。
益生菌Lactobacillus casei Zhang固态发酵条件的优化
微生态制剂是指调整生态失调，保持微生态平 衡，提高宿主（人、动植物）健康水平或增进健康的生 理性活菌制品（微生物）及其代谢产物以及促进这些 生理菌群生长繁殖的产品［１】。它无副作用、无残留 污染、不产生抗药性，具有抗病治病、增强免疫和促 生长等优点。目前微生态制剂的生产工艺主要分为 两种：固态发酵和液态发酵。相对液态发酵而言，固 态发酵的优势在于：工业生产的资金投入比较小、产 品性能较好、工业生产时环境污染比较小，有利于生 物循环［２】。因此，在最近十年间，关于固态发酵技术 的研究和应用得到了迅速发展。本文的试验菌株 Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ∞鲥Ｚｈａｎｇ分离自内蒙古传统发酵酸 马奶中，经研究已证实该菌具有耐酸、耐胆盐、降胆 固醇及免疫调节作用【３￣６］。本文对Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ∞贼Ｚｈａｎｇ的固态发酵条件进行了初步研究，旨在 为其工业化生产提供依据。
ｆｏｒ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ Ｚｈａｎｇ
Ｂｉｏ缸虹岫ａｎｄ ＣＵＩ Ｊｉｎｇ－ｌｉ，ＺＨＡＮＧ Ｌｅｉ，ＧＡＯ Ｐｅｎｇ－ｆｅｉ，ＷＡＮＧ ｊｉ—ｃｈｅｎｇ，ＳＵＮ Ｔｉａｎ－ｓｏｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｈｅ－ｐｉｎｇ
３７℃固态发酵２４ｈ，研究不同的水分含量对Ｌａｃｔｏ—
活菌计数采用倾注平板法。准确称取发酵物 ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ Ｚｈａｎｇ活菌数的影响。
５９，放入盛有４５ｍＬ无菌生理盐水（含玻璃珠）的三 １．３．３ 在固态培养基组成为４９豆粕、５９麸皮、
角瓶中，置水浴振荡器中１４０ｒ／ｍｉｎ振荡３０ｍｉｎ，使其 分散均匀。然后按１０倍稀释法制成不同浓度稀释 液，吸取合适的稀释液１．０ｍＬ置于无菌培养皿中，
第３９卷第１期 ２００９年２月
工业微生物 Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ
两种益生菌混合发酵乳清培养基的优化
ｉ ｌｔｄ １ ％， ｏ ｔ ｉｅ １ ｓ ａｅ ． Ｔ ｍａｏｊ ｃ ０％， ｒｏ ｉｅ １ ｏ ４ ｕ Ｃａｒｔｕ ｃ ３％， ｙ ｔｉｅｈ ｍｉ ｍａａｅ０５％， ｌ ｏ ｉｏ ｈ ｓ ．４％ ， ｉ Ｃ ｓｅｎ ｅ ｆ ｒｔ ． ｕ ｏｉ －ｓ ｍａ ｏ ｅ００ ｇ
Ｋ ＨＰ ． ％ ， ａ ｂ ａ ｎ ｄ ｒ ｓ ｏ ｅ ａ ａ ｙ ｉ ｆｒ ｇ ｅ ｓ ｎ ｍｏ ｅ ． ｉ ｇ ｔ ｅ ｏ ｔ ｌｍｅ ｉ ｍ ｏ ｃ ｌ ｒ ２ Ｏ４ ３ ０ Ｗ ｏ ｔ ｉ ｅ ｅ ｔ ｎ ｔ ｎ ｌｓｓ ｏ ｅ ｒ ｓ ｉ ｄ １ Ｕｓｎ ｈ ｐ ｉ ｄ ｕ ｔ ｕ ｔ ｅ ｇ ｈ ｏ ｍａ ｕ
ｏ ｉ ｃ ｎ ｅａ ｄＥ ｇｎｅ ｎ ， ａｎ ｉ ｎｖｒｉ ｆ ｃ ｎ ｅ＆ Ｔ ｈ ｏｏｙ Ｆ ｎＳ ａｎ ｉ １０ １ ｆ ｆ Ｓ ｉ ｃ ｎ ｎ ｉｅｒ ｇ ｈ ａｘ ｉｅｓｙｏ ｉ ｃ Ｌｅ ｅ ｉ Ｓ Ｕ ｔ Ｓ ｅ ｃ ｅ ｎ ｌｇ， ａ ，ｈａ ｘ ７ ０ ２ ） Ｘ
Ｍ ｉ ｅ ｒ ｅ ｔ ｔｏ ｎ Ｗ ｈ ｙ Ｍ ｅ ｉ ｍ ｘ ｄ Ｆｅ ｍ ｎ ａ ｉ ｎ ｏ ｅ ｄｕ
Ｆ ＣＨＥ Ｘｕ － ｅ ｇ ＡＮ Ｎａ ， Ｎ ｅ ｆｎ ２
（Ｂｏｈｒ ａｅｔａ ｎｉｅｒ ｇＤ ｐｒ ｎ ｆ ｈｎｌｏＵ ｉ ｒｔ， ｈｎｌｏＳ ａｎｉ ７６０ ；Ｃ ｌｇ １ ｉｐａｍ ｃｕｉ ｌ ｇｎｅｉ ｅａｔ ｔ ａｇｕ ｎｖ ｓｙ Ｓａｇｕ， ｈａｘ ２００２ ｏｅｅ ． ｃ Ｅ ｎ ｍｅ ｏ Ｓ ｅｉ ． ｌ
摘 要： 根据嗜酸乳杆茵和双歧杆茵的营养需要和生长特性， 采用响应面分析法对其混合 发 酵乳 清培养基 进行 优化研 究。利 用 Ｓ Ｓ中的 Ｐａｋｔ Ｂ ｒ ｎ二 水平设 计法成 功选取 了对 Ａ ｌ ｅｔ ｕｍａ ｃ － 嗜酸乳杆茵和双歧杆茵发酵培养影响显著的 ３个因素 （ 大豆分 离蛋 白、西红柿汁和胡萝 卜 汁 ）再 用 最陡爬 坡 实验 法确 定 因素水 平 ， ， 最后 依 据 回 归模 型 分析 ， 出最佳 的 混合发 酵乳 清 得 培养基配方为： ％乳清粉、． ４ １ ４％大豆分 离蛋 白、０％西红柿汁、３ １ １ ％胡萝 卜 Ｏ 半胱氨 汁、． ５％ 酸盐酸盐、． 低聚异麦芽糖、． ％Ｋ －Ｏ 。 ０ ４％ ０ Ｏ ３ ￣ Ｐ 用此优化的培养基培养嗜酸乳杆茵和双歧杆 Ｉ
三种双歧杆菌的优化富集工艺与免疫功能研究
三种双歧杆菌的优化富集工艺与免疫功能研究双歧杆菌是一种对人体健康有益的益生菌。
它具有多种生理功能,能够调节机体免疫力,降低胆固醇、提高抗氧化等生理功效。
但是由于厌氧培养条件的限制,使其很难更好地发挥生理功能。
所以对于如何提高双歧杆菌活菌数的研究越来越多,同时在提高双歧杆菌活菌数的前提下,如何更好地发挥其免疫功能显得更加重要。
以玉米糖化液作为培养基,向其中添加西红柿汁、胡萝卜汁和玉米肽,对以上三者进行优化。
选取不同的玉米糖化液浓度、培养温度、接种量和初始pH,对培养条件进行优化。
免疫功能试验主要对免疫器官、碳粒廓清指数、迟发型变态反应、脾淋巴细胞增殖试验和酶联免疫进行测定。
最后选用高通量测序技术检测复合益生菌对大熊猫肠道菌群的影响。
(1)通过单因素试验结果为基础,响应面法优化双歧杆菌增殖因子。
长双歧杆菌BL-01的增殖因子最佳添加量分别为西红柿汁11.6%,胡萝卜汁9.4%,玉米肽1.7%;青春双歧杆菌BA-10的增殖因子最佳添加量分别为西红柿汁13.0%,胡萝卜汁11.0%,玉米肽1.0%;动物双歧杆菌BA-30的增殖因子最佳添加量分别为西红柿汁11.0%、胡萝卜汁10.7%、玉米肽2.0%。
(2)运用BBD试验原理,响应面法优化培养条件。
最佳培养条件分别为长双歧杆菌BL-01:接种量4.9%,玉米糖化液浓度12.1°Bx,初始pH 7.0,培养温度39.2℃;青春双歧杆菌BA-10最佳工艺条件:接种量5.0%,玉米糖化液浓度14.0°Bx,初始pH6.5,培养温度38.8℃;动物双歧杆菌BA-30接种量7.4%,玉米糖化液浓度12.0°Bx,初始pH 6.5,培养温度37.4℃。
(3)碳粒廓清指数测定试验中,复合菌和复合菌-玉米肽的高剂量组高于对照组。
脾淋巴增殖试验中,复合菌和复合菌-玉米肽制剂高剂量组刺激指数高于对照组,差异有显著性意义,说明该样品具有增强细胞免疫功能作用。
益生菌生产工艺流程
益生菌生产工艺流程
益生菌是一种富含有益菌群的微生物制剂，能够维持肠道菌群平衡，改善肠道功能，提高人体免疫力。
下面是益生菌的生产工艺流程。
首先，益生菌的生产需要选择合适的菌株，常用的菌株有乳杆菌、双歧杆菌等。
这些菌株需要经过筛选和鉴定，确保其具有较高的存活性和抗性。
接下来，需要进行菌的培养，通常使用培养基来提供营养物质供菌生长。
培养基的配方包括碳源、氮源、矿质盐和辅助因子等。
菌株会在培养基中进行有限的扩增，以达到足够的数量。
随后，需要进行菌液的发酵。
发酵过程中，控制温度、pH值和搅拌速度等参数，以促进菌株生长和产生所需的代谢产物。
发酵时间一般为24-48小时，取决于菌株的生长速度和代谢活性。
发酵结束后，需要进行菌液的分离和提取，通常采用离心、过滤和浓缩等方法。
这样可以去除其他杂质，获得纯净的菌体悬浊液。
接着，要进行菌体的干燥处理。
常用的方法有喷雾干燥、冷冻干燥和真空干燥等。
通过这些方法，可以将菌体转化为粉末或颗粒状，方便后续的包装和贮存。
最后，需要对产品进行包装和贮存。
包装通常采用铝箔袋或瓶
装，保证产品的密封性和避光性。
贮存条件需要保持在低温、干燥和避光的环境中，以延长产品的保质期和保存活性。
总的来说，益生菌的生产工艺流程包括菌株筛选、培养、发酵、分离提取、干燥处理、包装和贮存。
这些步骤确保产品的质量和活性，能够有效提供有益菌群，维护人体健康。
益生菌生产工艺流程
益生菌生产工艺流程益生菌是一种对人体健康有益的微生物，其生产工艺流程是保证益生菌产品质量和功效的关键。
本文将以从简到繁、由浅入深的方式，介绍益生菌生产的工艺流程，并进一步探讨其背后的科学原理和市场应用。
一、益生菌生产的基本流程益生菌生产的基本流程通常包括以下几个步骤：1. 菌种筛选和培养：从自然界或已知菌株中筛选出具有益生特性的微生物，并在适当的培养基中进行培养，以扩大菌种数量。
2. 发酵过程：将经过培养的菌种接种到发酵培养基中，并调控适宜的温度、pH值和营养成分等条件，促使菌种在有利环境下进行繁殖和代谢。
3. 分离和纯化：经过一定时间的发酵后，益生菌与其他微生物或固体废弃物混合在一起，需要进行分离和纯化，以得到纯净的益生菌培养物。
4. 冻干和包装：将纯化的益生菌培养物进行冻干处理，以提高其储存稳定性和保质期，并将其装入适当的包装中，便于运输和销售。
以上是益生菌生产的基本流程，但在实际生产中，会根据不同的菌种和产品类型进行一些调整和优化。
二、科学原理和相关技术1. 菌种筛选和培养：菌种的筛选与培养是益生菌生产的起点，关键在于选择具有较强耐受性和适应性的菌株。
常用的方法包括平板筛选、液态发酵和分析仪器等，以确定菌株的益生特性。
2. 发酵过程：发酵工艺是益生菌生产的核心环节，涉及菌种特性、培养基配方和发酵参数等关键因素。
合理调控温度、pH值和氧供应等条件，可促进菌种生长和代谢产物的生成，并最大限度地保留益生活性。
3. 分离和纯化：分离和纯化过程旨在去除发酵液中的杂质和其他微生物，保证益生菌培养物的纯净度和活性。
采用离心、超滤、凝胶层析等技术，可有效分离和提纯目标益生菌。
4. 冻干和包装：冻干是将益生菌培养物制成粉末状的关键步骤，通过低温下的冷冻和真空干燥处理，可使菌种保持活性并延长其存储期限。
合理的包装方式和防潮措施，能更好地保护益生菌产品的品质。
三、市场应用和前景展望益生菌作为一种功能性食品或药品，具有广泛的市场应用前景。
益生菌的高效培养与应用
益生菌的高效培养与应用在现代健康领域，益生菌逐渐成为备受关注的焦点。
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，它们定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效，改善宿主微生态平衡、发挥有益作用。
为了更好地发挥益生菌的作用，高效的培养技术以及广泛的应用探索至关重要。
要实现益生菌的高效培养，首先需要了解它们的生长特性。
不同种类的益生菌有着各自独特的生长需求，比如温度、酸碱度、营养成分等。
以常见的双歧杆菌为例，它在37℃左右、微酸性环境中生长良好。
而嗜酸乳杆菌则更偏爱稍低的温度和较高的酸度。
培养基的选择对于益生菌的培养效果起着关键作用。
优质的培养基应包含益生菌生长所需的各种营养物质，如碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
常见的碳源有葡萄糖、乳糖等，氮源则包括蛋白胨、牛肉膏等。
此外，一些特殊的生长因子，如维生素、氨基酸等，也是促进益生菌生长的重要成分。
培养条件的优化也是提高培养效率的重要环节。
除了温度和酸碱度，氧气的供应也是需要考虑的因素。
有些益生菌是厌氧菌，如双歧杆菌，在培养过程中需要严格控制氧气的含量；而有些则是兼性厌氧菌或需氧菌，对氧气的需求相对较高。
同时，培养时间的把握也很关键。
过长或过短的培养时间都可能影响益生菌的活性和数量。
在培养过程中，无菌操作是确保培养成功的基础。
任何微小的污染都可能导致培养失败，甚至产生有害微生物。
因此，从培养设备的消毒、培养基的灭菌到操作过程中的无菌意识，都需要严格把控。
益生菌的高效培养不仅在于实验室环境，在工业生产中也面临着诸多挑战。
大规模培养需要考虑成本、效率和质量的平衡。
先进的发酵设备、精准的过程控制以及高效的分离纯化技术都是实现工业级高效培养的关键。
当益生菌被成功培养出来后，其在多个领域都有着广泛的应用。
在医疗领域，益生菌可以用于治疗和预防多种疾病。
例如，它们能够调节肠道菌群平衡，改善腹泻、便秘等肠道问题。
对于一些肠道炎症性疾病，如溃疡性结肠炎、克罗恩病等，益生菌也能发挥一定的辅助治疗作用，通过减轻炎症反应、增强肠道屏障功能来缓解症状。
制作益生菌实验实习报告
一、实验背景益生菌是一种对人体有益的微生物，可以调节肠道菌群平衡，增强免疫力，预防疾病。
随着人们对健康饮食的重视，益生菌产品在市场上越来越受欢迎。
为了深入了解益生菌的制备过程，我们进行了制作益生菌的实验。
二、实验目的1. 学习益生菌的基本知识，了解其生理功能。
2. 掌握益生菌的制备方法，包括菌种筛选、培养、发酵等。
3. 分析实验过程中可能遇到的问题，并提出解决方案。
三、实验材料1. 菌种：双歧杆菌、乳酸杆菌等。
2. 培养基：MRS培养基、LB培养基等。
3. 仪器设备：恒温培养箱、无菌操作台、显微镜、移液器等。
4. 其他：无菌水、酒精、无菌滤纸等。
四、实验方法1. 菌种筛选（1）将菌种接种到MRS培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24小时。
（2）挑取单菌落，进行纯化培养。
（3）观察菌落特征，确定目标菌种。
2. 培养基制备（1）称取MRS培养基粉末，加入无菌水溶解。
（2）调pH至6.5-7.0。
（3）分装到无菌试管中，121℃高压灭菌20分钟。
3. 菌种活化（1）将纯化后的菌种接种到MRS培养基上，37℃恒温培养箱中培养24小时。
（2）取活化后的菌液，进行梯度稀释。
4. 发酵（1）将活化后的菌液接种到LB培养基中，37℃恒温培养箱中培养24小时。
（2）观察菌液颜色变化，记录发酵时间。
5. 产物检测（1）观察发酵过程中产生的气泡、沉淀等。
（2）测定发酵液pH值、总酸度等指标。
五、实验结果与分析1. 菌种筛选通过观察菌落特征，我们成功筛选出双歧杆菌和乳酸杆菌两种目标菌种。
2. 培养基制备按照实验步骤，成功制备了MRS培养基和LB培养基。
3. 菌种活化通过活化，菌种生长良好，菌液呈乳白色。
4. 发酵发酵过程中，观察到气泡产生，发酵液颜色逐渐变深。
5. 产物检测发酵液pH值逐渐降低，总酸度增加，表明发酵成功。
六、实验总结1. 通过本次实验，我们掌握了益生菌的制备方法，了解了其生理功能。
2. 在实验过程中，我们遇到了一些问题，如菌种筛选困难、培养基制备过程中污染等。
益生菌粉的生产工艺流程
益生菌粉的生产工艺流程
益生菌粉的生产工艺流程主要包括以下几个步骤：
1. 原材料准备：需要选择合适的原材料，包括乳糖、麦芽糊精、植物蛋白等，这些原材料需要经过检验，确保符合产品的质量要求。
2. 筛选和培养菌种：从菌库中选择合适的益生菌菌株进行筛选和培养，这个过程需要进行一系列的实验，包括营养条件的优化、菌种的纯化等。
3. 发酵：在无菌状态下进行菌种转接后，发酵过程开始，这个环节会产生更多益生菌，即培育的过程。
4. 初步菌体浓缩：采用一定工艺，把菌体浓缩20-30倍，从而减少剪切力和空气混入。
5. 冷冻干燥：将浓缩的菌体进行冷冻干燥，从而去除水分，使产品能够长期保存。
6. 造粒：将冷冻干燥后的益生菌进行造粒，以便于后续的加工和包装。
7. 包装：将益生菌粉进行包装，确保产品的卫生和安全。
8. 质检：对生产出的益生菌粉进行质量检查，包括微生物限度、细菌总数、霉菌酵母菌总数等指标的检查，确保产品的质量和安全性。
在生产过程中，还需要注意生产环境的卫生和安全，确保生产出的益生菌粉符合相关法规和标准的要求。
同时，也需要对生产过程进行质量监控和控制，确保生产出的益生菌粉具有稳定的性能和质量。
益生菌生产工艺流程
益生菌生产工艺流程益生菌生产工艺流程益生菌是一种有益于人体健康的微生物，通过生产工艺可以将其量化培养并制成产品。
益生菌生产的主要流程包括：菌种选育、发酵培养、离析分离、产品制备等环节。
下面将对每个环节展开详细描述。
一、菌种选育1.1 菌种筛选利用植物、动物、土壤等样品进行菌种筛选。
将样品与营养基混合，将培养基平铺于琼脂上后，进行培养。
通过形态学特征、生理生化鉴定和分子生物学技术等方式筛选到适合益生菌生产的菌种。
1.2 菌种保存将所得到的菌种进行单克隆分离并保存至冷冻管中，放入液氮中保存备用。
二、发酵培养2.1 培养基制备常用菌类发酵培养基包括培养基、豆浆培养基、黑豆培养基等。
选择适合所选菌种的培养基，进行定量配置并进行高温高压灭菌。
2.2 接种菌株将保存在液氮中的菌株解冻后，通过菌种培养和分离等操作放至含有所需培养基的培养罐、发酵罐中，启动发酵过程。
2.3 发酵条件控制温度、pH值、微生物活性等因素对发酵的结果会产生重大影响。
需要精确控制发酵的各个环节变量，如气体的输出，温度、pH值、土壤湿度、压力等进行实时监测，并及时调整。
三、离析分离3.1 离析剂制备选择适合分离的离析剂，如甲醇、酒精、盐溶液等，进行配制和灭菌处理。
3.2 分离操作利用离析剂将发酵液中的益生菌进行分离。
通常是利用化学法、物理法或组合法等方法，进行分离。
3.3 洗涤在分离过程中，需要将分离的益生菌进行洗涤。
洗涤液的配方根据具体情况而定。
四、产品制备4.1 产品的制备方式根据所需产品的类型和规格，选择相应的制备方式。
常见制备方式包括：胶囊、片剂、粉剂、液体剂等。
4.2 加工工艺对益生菌进行简单加工，形成稳定的益生菌产品，其加工方式包括：干燥、冻干、加工成胶囊、造粒、小包装等。
4.3 储存包装将制好的益生菌产品进行包装和储存。
常用包装材料有：铝箔袋、PET瓶、玻璃瓶等。
在储存过程中，需要对包装进行密封，并对其进行氧化、防潮、防霉等处理。
产纤维素酶益生菌—枯草芽孢杆菌的优化培养
２ 一 ８
中国饲料添加剂
２１ ０ ２年第 ３期（ 总第 １７期 ） １
产纤雏东胯益生菌 一抽单芽 弛讦菌的仇伯培养
刘加 合
（ 蒲城县兴镇畜牧兽医站， 陕西 蒲城）
摘
要： 采用单 因素设计 ， 对枯草 芽孢杆 菌的碳 源、 氮源、 起始 ｐ Ｈ值、 盐浓度和培养时
间进 行优 化 ， 测定 茵液 的纤维 素酶 活力 。结果表 明 ： 源是 葡萄糖 时 ， 活力 ０ ７０ 纤 维素 碳 酶 ．５ ，
Ａｂｓｒ ｃ ｔ ａ ｔ：Ｓｎ ｌ ａ ｔ ｒｄ ｓｇ ｈ ｎｇ ｓｃ ｒ ｏ ｉ ｇ ｅｆ ｃｏ ｅ ｉ ｎ ｃ ａ ｅ ａ ｂ ｎ，ｎ ｔｏ ｅ ｏ ｒ ｅ ｉ ｇ ｎ ｓ ｕ ｃ ｓ，ｉ ｉｉｌｐＨ ，ｓ ｌ ｃ ｎ ｅ ｔａ ｒ ｎ ｔａ ａｔ ｏ ｃ ｎｒ－
ｔ ｎ ａ ｄ ｉ ｃ ｂ ｔ ｎ ｔ ｏ ｄ ｔ ｃ ｈ ｅｌ ｌｓ ｃ ｉｉ ．Ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｒ ｉ ｎ ｎ ｕ ａｉ ｉ ｔ ｅｅ ｔｔ ｅ ｃ ｌ ａ ｅ ａ ｔ ｔ ｏ ｏ ｍｅ ｕ ｖｙ ｈ ｅ ｕ ｔ ａｅ：ｗ ｅ ａ ｂ ｎ ｓ ｕ ｃ ｓ ｓ ｈ ｎ ｃ ｒｏ ｏ ｒｅ ｉ
酶 酶 活力最 高 ； 氮源是蛋 白胨 时 ， 活力 ０ ７ １ 纤 维素酶 酶活 力最 高 ； 始 ｐ 为 ７时 ， 活 酶 ．１， 起 Ｈ 酶
力０ ６６ 纤维素酶酶活力最高； ．９ ， 盐浓度 ５ ｏ酶活力 ０ ６８ 纤维素酶酶活力最高； ％， ．９ ， 培养时间
１ｈ 酶 活力 ０ ６８ 纤 维素酶 酶活 力最 高。 ８， ．９ ， 关键 词 ： 维素酶 ； 纤 益生 茵 ； 枯草 芽孢杆 菌 ； 化 优 Ｔ ｅＯｐｉ ｚｄＣ ｌ ｒ ｆ ｌ ａｅＰ ｏ ｕｉｇＰ ｏ ｉｔ Ｂ ｃｌｓＳ ｂｉｓ ｈ ｔ ｅ ｕｔ ｅｏ ｈｌｓ ｒｄ ｃ ｒｂｏｉ ｍｉ ｕ Ｃｅ ｎ ｃ ａｉｕ ｕ ｔｉ ｌ ｌ
益生菌的工艺技术
益生菌的工艺技术益生菌是指对人体有益的菌种，具有调节人体生理功能、增强免疫力、促进肠道健康等作用。
随着人们健康意识的增强，益生菌的市场需求不断提高。
因此，益生菌的工艺技术的研究和发展变得至关重要。
一、菌种筛选和培养技术益生菌的工艺技术的核心之一是菌种的筛选和培养技术。
通过采集和分离自然界中的益生菌，可以利用一系列育种技术对菌种进行筛选和培养。
在菌种筛选方面，要求益生菌具有耐高温、耐酸、胆盐以及抗生素等特性，以能在胃酸等逆境环境中存活和繁殖。
在菌种培养方面，可以采用液体发酵、固态发酵等方法，通过提供适宜的培养基、温度、pH值、氧气供应等条件，使菌种快速繁殖并维持良好的生长状态。
二、发酵工艺技术益生菌的发酵工艺技术是益生菌工艺的关键环节。
在发酵过程中，益生菌要始终保持活性，且产生足够的活性代谢物。
常用的发酵方式包括常规发酵、乳酸发酵、醋酸发酵、凝胶包埋发酵等。
常规发酵是最为传统的发酵方式，通过定义的发酵基质和菌种，利用发酵罐等设备将其置于适宜的温度、湿度和通气条件下进行发酵。
乳酸发酵是将益生菌与乳酸菌联合发酵，产生的乳酸有助于维持菌群平衡。
醋酸发酵则是通过添加适量的醋酸菌和发酵基质，利用醋酸发酵罐进行发酵，产生的醋酸和益生菌都具有调节肠道菌群的作用。
凝胶包埋发酵是将益生菌包埋在凝胶中，保护菌种的活性，并控制菌种的释放速度。
三、产品制备技术益生菌的产品制备技术是将发酵得到的益生菌进行分离、纯化和制剂化的过程。
首先，通过离心和过滤等方法将发酵液中的菌体和代谢物分离。
然后，通过冷冻干燥、喷雾干燥等方法将菌体冻干或者干燥成粉末，以提高产品的稳定性。
此外，还可以通过固态发酵得到的益生菌菌饼进行粉碎和包埋等处理，制成更为方便携带和使用的益生菌产品。
最后，将益生菌制剂按照一定的比例和标准制备成片剂、胶囊、粉剂等形式，以满足不同人群的需求。
综上所述，益生菌的工艺技术包括菌种筛选和培养技术、发酵工艺技术以及产品制备技术等内容。
复合益生菌芽孢杆菌发酵培养基及条件的优化
复合益生菌芽孢杆菌发酵培养基及条件的优化张媛媛;赵敏;张宁【摘要】A study was performed to optimize the culture medium for compound probiotics of Bacillus and the various types of parameters of fermentation process, aiming to obtain probiotic preparations with large numbers of active bacteria, strong resistance and economic values. Bacillus subtilis and Bacillus coagulant were cultured together. The culture medium ingredients were optimized by single-factor test and orthogonal experiments, and the fermentation conditions were also optimized based on the above experiments. The ingredients of optimal culture medium were obtained as molasses 15 g/L, Indian meal 15 g/ L, soybean powder 40 g/L, KH2PO4 1 g/L, K2HPO4 1 g/L, and calcium chloride 2 g/L. The best information were obtained as temperature 37 degrees C, initial pH 7.5, rotational speed 160 r/min, inoculation amount 8%, and liquid volume 40%. The number of active bacteria was significantly enhanced, reaching 6.62x1010 CFU/mL.%为了获取活菌数高、抗性强、经济效益好的益生菌制剂,对复合益生菌芽孢杆菌制剂的培养基配方及各项发酵工艺参数进行了优化.选取枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌进行联合培养,并采用单因子试验和正交试验对其发酵培养基成分进行了优化,在此基础上对其发酵条件做了进一步优化.优化后最佳培养基成分为:废糖蜜15 g/L、玉米粉15 g/L、豆粕粉4,0 g/L、KH2PO4 1g/L、K2HPO4 1g/L、氯化钙2 g/L；最佳发酵条件为发酵温度37℃,初始pH值7.5,转速160 r/min,接种量8％,装液量40％.经优化后活菌数得到显著提高,达到6.62× 1010CFU/mL.【期刊名称】《东北林业大学学报》【年(卷),期】2012(040)003【总页数】5页(P93-97)【关键词】枯草芽孢杆菌;凝结芽孢杆菌;发酵培养基;发酵条件【作者】张媛媛;赵敏;张宁【作者单位】东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040【正文语种】中文【中图分类】Q939.97社会呼唤绿色、安全的食品，而饲料安全更是食品安全的前提。
简述益生菌的生产工艺
简述益生菌的生产工艺
益生菌的生产工艺主要包括以下几个步骤：
1.菌种培养：选择高活性的益生菌菌种，通常是乳酸菌、酵母菌或双歧杆菌等。
将菌种接种到培养基中，提供适宜的温度和营养物质，培养菌种以增加其数量和活性。
2.发酵：将培养出的菌种转移到发酵设备中，添加适量的培养基，并提供合适的温度、湿度和通气条件。
在发酵过程中，益生菌会利用培养基中的营养物质进行生长和繁殖，同时产生有益的代谢产物。
3.产品提取和分离：发酵结束后，将发酵液进行离心分离，得到含有益生菌的浆液。
然后通过过滤或离心等方式，将益生菌从浆液中提取和分离出来。
4.产品加工：将提取和分离出的益生菌进行加工，通常是通过喷雾干燥、冷冻干燥或浓缩等方式，将益生菌制成粉剂、胶囊、饮料或乳制品等形式，以增加其稳定性和便于服用。
5.质量控制：对加工后的益生菌产品进行质量检测和控制，包括活菌数、菌群组成、污染物检测等，以确保产品的安全性和有效性。
6.包装和存储：将质检合格的益生菌产品进行包装和标签，通常是使用密封的容
器和防潮包装材料，以防止湿气、光照和氧气对益生菌的影响。
然后将产品存储在适宜的温度和湿度条件下，以保持菌种的活性和产品的质量。
值得注意的是，益生菌的生产过程需要严格控制卫生条件和工艺参数，以确保益生菌的数量和活性。
此外，不同种类的益生菌可能具有不同的培养和加工要求，因此生产工艺可能会有所不同。
复合益生菌芽孢杆菌发酵培养基及条件的优化
（ 东北林 业大学 ， 哈尔滨 ，５０ ０ １０ ４ ）
摘 要 为 了获取 活茵数 高、 抗性 强、 经济效 益好 的益生 茵制剂 ， 对复合益生茵 芽孢杆菌制剂的培养基配方及 各项发 酵工艺参 数进行 了优化。选取 枯草芽孢杆 菌和凝结 芽孢杆 菌进行联合培 养 ， 并采 用单 因子试验和正交试验 对其发 酵培 养基 成分进行 了 化 ， 优 在此基础 上对其发 酵条件做 了进一 步优 化。优化后 最佳培养基成 分为 ： 糖 蜜 废 １ Ｌ ．米粉 １ Ｌ 豆粕粉 ４ ／ 、 Ｈ２ ０ Ｌ Ｋ Ｈ Ｏ ／ 、 ５ 、ｘ Ｉ ５ 、 ０ｇＬ Ｋ Ｐ ４１ 、 ２ Ｐ ４ ｇ Ｌ 氯化钙 ２ｇ Ｌ 最佳发 酵条件为发酵温度 ３ １ ； ／ ７℃ ， 初始 ｐ Ｈ值 ７ ５ 转速 １０ｒｍ ｎ接 种量 ８ ， ．， ６ ｉ ， ／ ％ 装液量 ４ ％。经优化后活菌数得到显著提 高， ０ 达到 ６６ ｘ ０ Ｆ ／ Ｌ ．２ １ Ｃ ｕ ｍ 。 关 键词 枯草 芽孢杆茵 ； 凝结芽孢 杆茵 ； 发酵培养基 ； 发酵条件
第４ ０卷 第 ３期
２１ ０ ２年 ３月
东
北
林业大ຫໍສະໝຸດ 学学报 Ｖｏ ． ０ ． １ ４ Ｎｏ ３ Ｍａ．２ ２ ｒ ０１
Ｊ ＯＵＲＮ ＡＬ ＯＦ ＮＯＲＴ ＡＳ Ｏ Ｓ ＲＹ ＵＮ ＶＥ Ｉ Ｙ ＨＥ Ｔ Ｆ ＲＥ Ｔ Ｉ ＲＳＴ
复合 益 生 茵芽 孢 杆 菌 发 酵 培 养基 及 条 件 的优 化
分 类号 Ｑ ３ ．７ ９ ９ ９
Ｏｐ ｍｉ ａ ｏ ｆ Ｃｕ ｔ ｒ Ｍ ｅ ｉ ｎ ａ ｄ ｅ ｍｅ ｔ ｔ ｎ ｉ ｔ ｚ ｔ ｎ ｏ ｌｕ ｅ ｉ ｄ ｕ ｌ ｎ Ｆ ｒ ｎ ａ ｏ Ｃｏ ｄ ｔｏ ｓ ｏ Ｃｏ ｏ ｎ Ｐ ｏ ｉ ｔｃ ｏ ｃｌ ｓ Ｚ ａ ｇ ｉ ｎ ｉ ｎ ｆ ｒ ｉ ｍｐ ｕ ｄ ｒ ｂ ｏ ｉｓ ｆ Ｂａ ｉ ｕ ／ ｈ ｎ ｌ
食品酸奶中益生菌的培养与保活技术研究
食品酸奶中益生菌的培养与保活技术研究酸奶作为一种受欢迎的健康食品，在现代生活中越来越受到关注。
在食品酸奶中的益生菌被认为是对人体有益的微生物。
在酸奶中，益生菌通过发酵作用转化乳糖为乳酸，从而提高酸奶的口感和营养价值。
然而，由于益生菌在加工酸奶的过程中会受到温度、酸碱度、氧气等因素的影响，其生存能力常常受到挑战。
因此，研究益生菌的培养与保活技术具有重要的意义。
一、益生菌的培养技术益生菌的培养技术是酸奶工业生产中的关键环节之一。
常用的培养方式有传统培养、凝胶培养、批次培养和连续培养等。
传统培养是最常见的培养方式，即将益生菌菌种加入含有营养物质和合适酸碱度的培养基中，通过生长培养来促进其繁殖。
凝胶培养是一种常用于培养益生菌的方法，通过将益生菌悬浮于含有凝胶成分的培养基中，使其在凝胶中生长和繁殖。
批次培养和连续培养是一种将益生菌加入连续流动的培养基中，通过恒定供应营养物质来维持其生长和繁殖的方法。
二、益生菌的保活技术保活技术是指将培养好的益生菌保持在一定条件下，保持其生存能力的一系列方法。
常见的保活技术包括低温冷冻、喷雾干燥、真空冷冻干燥、喷雾冷冻干燥和微胶囊化等。
低温冷冻是将益生菌培养物在极低温下保存，通过减缓代谢活动来延长其寿命。
喷雾干燥是将益生菌培养物通过喷雾器喷雾成颗粒，然后在干燥的条件下使水分蒸发，最终得到干燥的益生菌粉末。
真空冷冻干燥是将益生菌培养物冷冻后，在真空条件下进行干燥，以保持菌株的活性。
喷雾冷冻干燥是将益生菌培养物通过喷雾冷冻的方式，将其在冷冻状态下干燥。
微胶囊化是将益生菌包裹在微胶囊中，以保护其抵御外界环境的侵害，提高其存活率。
三、益生菌的应用前景益生菌不仅在食品酸奶中有广泛应用，还在医疗、保健品和农业等领域具有潜力。
在医疗方面，益生菌能够调节肠道菌群平衡，改善消化系统功能，对一些肠道疾病有一定的预防和治疗作用。
在保健品方面，益生菌可以增强免疫力，改善人体机能，并在抵抗疾病方面发挥积极作用。
益生菌饮料工程设计方案
益生菌饮料工程设计方案一、益生菌饮料的原料选取1.1 益生菌益生菌是益生菌饮料的主要原料，其种类多样，常见的有嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等。
在选取益生菌时，要注意其存活率和稳定性，以保证产品的效果和品质。
1.2 发酵基质发酵基质是益生菌饮料的发酵食料，可以选择牛奶、果汁或糖水等。
不同的发酵基质会影响产品的口感和营养成分，因此在选择时需要考虑产品定位和市场需求。
1.3 辅料辅料包括添加剂、香精、防腐剂等，要根据产品特点和法律法规进行选择和使用。
二、益生菌饮料的生产工艺2.1 预处理牛奶或果汁等发酵基质需要进行预处理，如巴氏杀菌、过滤等，以保证发酵后的产品卫生安全。
2.2 发酵将益生菌接种到预处理好的发酵基质中，控制温度、PH值和时间等参数，进行益生菌的发酵培养。
2.3 调味根据产品口味和风味的要求，可添加果汁浓缩、香精、糖浆等调味料。
2.4 包装经过发酵和调味处理的益生菌饮料需要进行包装，包括瓶装、袋装等不同形式，同时需要进行灭菌处理，以延长产品的保质期。
三、益生菌饮料的生产设备3.1 发酵罐发酵罐是益生菌饮料生产的核心设备，可以根据生产规模选择不同容量和材质的发酵罐。
3.2 灭菌设备灭菌设备包括巴氏杀菌机、紫外线灭菌装置等，用于对产品进行灭菌处理，以保证产品的卫生安全。
3.3 包装机械包装机械包括瓶装机、贴标机、灌装机等，可以根据产品形式选择适合的包装机械。
3.4 清洗设备清洗设备用于对生产设备和容器进行清洗和消毒，保证产品的卫生安全。
四、益生菌饮料的质量控制4.1 生产过程控制在生产过程中，需要对原料存储、发酵控制、包装灭菌等进行严格的监控和控制，以确保产品的卫生安全和质量稳定。
4.2 产品检验产品检验包括对产品外观、口感、营养成分、微生物指标等进行检测，以确保产品符合相关的标准和法规。
4.3 质量管理体系建立完善的质量管理体系，包括生产记录、质量追溯、异常处理等，以保证产品质量和顾客满意度。
五、结语益生菌饮料的工程设计方案涉及原料、工艺、设备和质量控制等多个方面，在实际生产中需要根据产品定位和市场需求进行具体的调整和优化。
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工业生产中益生菌培养工艺的优化
一、实验目的
在实验室条件下，对益生菌的培养及胶囊的制备进行模拟和优化，以达到改
善益生菌的生产条件，降低工业生产成本，提高益生菌在胶囊中的活度，提高益
生菌胶囊品质的目的。
二、实验材料
1.菌种：YO-MIX 300 LYO 250 DCU（维维），含有保加利亚乳杆菌，嗜热链球菌，双歧杆菌。
2.培养基成分
2.1 TPY培养基：大豆蛋白胨1．67％, 酪蛋白胨（酪蛋白？）0．83％，乳糖0．5％，
酵母浸出粉O．5％，低聚糖（菊粉）0．7％，胡萝卜汁15％琼脂粉2%～1.5% 水. 115°C高压蒸汽灭菌15-20min.该培养基尽量配的比较透明。
2.2脱脂乳培养基：脱脂奶粉10% 菊粉4% 水。
115°C高压蒸汽灭菌15-20min.
3.主要仪器：
无菌操作台三角瓶培养箱真空冷冻干燥机离心机高压蒸汽灭菌锅
超净工作台恒温箱PH计
三、实验过程：
1、益生菌混合菌株的形态学研究
1.1菌种的分离
1.2菌种的性质实验
2、益生菌生长特性以及相互影响（查文献得到）
2.1单一菌种发酵实验
2.2混合菌种发酵实验
2.3培养基配方的优化（益生因子）
3、对离心上清液的成分及性质探究
3.1抑菌性质实验
3.2促益生菌生长性质实验
3.3成分测定实验？怎么测？
3.4环境因素对其性质影响实验
4、对冻干粉存储条件的探究及优化
4.1存储温度对冻干粉活度影响实验
4.2存储时间对冻干粉活度影响实验
4.3冻干粉耐氧实验
四、实验方法
1.菌种的活化
将菌种接种在装有TPY（或脱脂乳）培养基的试管中，将试管用塞子塞好，在厌
氧操作台中厌氧培养48小时，37℃。
2.扩大培养
2.1将菌种5％接种于脱脂乳液体培养基，于恒温培养箱中37℃培养48h。
每4
小时测一次菌液pH值和滴定酸度和活菌数。
测活菌数采用10倍稀释后平板计数法。
2.2将菌种5％接种于TPY培养基，37℃恒温培养，在0～48h内每间隔4h测定
600nm下菌液的吸光值和pH值和滴定酸度，并相应测定菌种的活菌数，绘制生
长曲线（首先，菌悬看成是溶液，其中的菌体理想化成球状，而且是均一的。
这
种溶液会吸收一定波长的光，在一定范围内，在此波长下，光密度跟菌体的浓度成正比。
不过一定要注意选择最大吸收波长。
）。
接种的同时需测活菌数，采用10梯度稀释后接种平板，37℃厌氧培养36小时后记活菌数的方法（菌落数大于300的平板无效）。
通过研究益生菌生长特性，找出最佳的工业培养时间范围。
用正交实验的方法，设计添加比例不同的脱脂乳培养基，研究培养基配方对菌种生长的影响。
3.离心脱水
3.1采用4℃，6000r/min条件下离心30min，将上清液收集到三角瓶中。
并测离心前后菌液的重量，计算得到离心脱水率。
3.2针对测定上清液中有效成分的问题，分两部分进行。
3.2.1测上清液中是否有大量的益生菌活菌。
采用10梯度稀释后接种平板，37℃厌氧培养36小时后记活菌数的方法。
3.2.2测上清液中是否含有大量能促进益生菌生长的物质。
将上清液以添加到TPY液体培养基中，采用对照试验的方法，测实验组和对照组的菌液吸光值。
4.冷冻干燥
-30℃至-40℃条件下，对脱脂乳培养基中的菌种冷冻36小时。
并在冷冻前后对菌液称重，计算脱水效果。
在冷冻前后对活菌数进行测定，计算活菌损失率。
5.低温储藏
4℃条件下，将冻干粉装于无菌袋密封中进行冷藏。
第一星期每48小时测一次活菌数，取益生菌冻干粉1克溶于生理盐水中，采用平板计数法37℃厌氧培养72小时后计数。
之后每星期测一次活菌数。
五、备注
1.形态学研究：革兰氏染色，拍照，分离球菌和杆菌。
2.生长特性研究：生长曲线研究，产酸研究，分光光度计测od值等
3.培养基配比的优化研究：研究菊粉，还有菊糖分的添加量不同菌种的生长状况
4.单菌株与多菌种的相互影响研究：与多菌种情况作对比，研究菌株之间的影响相互影响。
5、研究离心脱水的效果，以及脱水是否会带走有效成分。
6、对离心液成分的研究：是否有抑菌成分，是否有大量活菌，是否促进益生菌生长
7、对离心液性质的研究：高温处理后是否会影响其抑菌性，温度与其抑菌性的关系，ph与其抑菌性质的关系。
8、离心液的存储条件研究：温度，时间，对其抑菌效果的影响
研究冷冻干燥的脱水率，
以及是否会对益生菌活度造成损伤。
9．存储条件的不同对益生菌活度的影响
研究时间对益生菌活度的影响
研究温度对益生菌活度的影响
研究冻干粉对氧气的敏感性
研究混合菌株和单菌株的对比。
