2022梅毒实验室检测方法汇总(全文)

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梅毒检测试验

梅毒检测试验

梅毒(syphilis)是危害人类健康较为严重的性传播疾病之一,近年来在我国的发病率呈逐年上升趋势,选择敏感性、特异性均高的梅毒检测方法有助于梅毒的诊断。

梅毒的病原体是梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP),其含有表面抗原,能刺激机体产生两类抗体,一类为抗密螺旋体的特异性抗体;另一类为非特异性抗体。

根据梅毒螺旋体的生物学及免疫学特性,目前国内外所用的梅毒螺旋体的检测方法主要有以下几种。

1、病原体的检测直接观察分泌物中的梅毒螺旋体,如见到运动活泼的苍白螺旋体可直接诊断梅毒,是最特异、最准确的诊断方法,但灵敏度低。

1.1暗视野显微镜检查梅毒螺旋体(DF)是梅毒病原体检测的主要方法之一。

用暗视野显微镜可直接观察到病灶分泌物中的梅毒螺旋体,结合临床症状可直接诊断梅毒,适用于早期梅毒的诊断。

该方法不仅操作简单,且经济、快速,但此法对晚期及隐性梅毒或口腔病灶标本不适用。

1.2活体组织检查梅毒螺旋体常用银染色法(warthinstarry)或荧光抗体染色,可查见梅毒螺旋体,呈黑褐色。

银染色的阳性结果需谨慎解释,因为类似梅毒螺旋体的其他物质易混淆。

1.3多功能显微诊断仪(multifunctional microscopy diagnostic instrument,MDI)是近年来国外开发的一种综合相差对比、暗视野及偏振光的可变投影显微镜,其特点是待检查标本不需染色及任何加工处理,而是将“活的”真实的样品直接进行观察,具有直接、方便、快速的优点。

但整套仪器价格昂贵,很难普及到各个梅毒检测实验室。

2、梅毒血清学试验是梅毒诊断最主要的实验室检查方法,根据所用抗原不同可分为两类。

2.1非梅毒螺旋体抗原血清试验用心磷脂作抗原,测定血清中抗心磷脂抗体,此类试验为非特异性抗体检测试验,目前多数医院列为梅毒的常规筛查试验。

这类试验可观察疗效、复发及再感染,适于二期梅毒的诊断,而不适于诊断一、三期梅毒,包括潜伏梅毒、神经梅毒的诊断。

梅毒实验室检测及分析

梅毒实验室检测及分析

青岛大学附属医院
TPPA/TPHA原理

TPPA试验原理与TPHA试验基本相同 – TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒
– TPHA试验中梅毒螺旋体致敏羊红细胞

特点 – 梅毒螺旋体(Nichols株)全抗原
青岛大学附属医院
青岛大学附属医院
TP-ELISA

原理 – 用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条,加上梅毒


青岛大学附属医院
梅毒的分期
青岛大学附属医院
梅毒的诊断

梅毒的诊断 – 早期梅毒(一期、二期和早期隐性梅毒)和晚期
梅毒(三期和晚期隐性梅毒)
– 必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析

梅毒的实验室检查 – 结果对诊断有决定性意义
青岛大学附属医院
常用梅毒实验室检测方法

病原学检测

血清学检测
血清和单克隆抗体酶标记物,形成抗原抗体复合
物与酶标记物结合,用酶标仪判定试验阳性反应 。

特点 – 本法可用于大规模血清检测。
青岛大学附属医院
免疫层析
青岛大学附属医院
青岛大学附属医院
临床应用

梅毒螺旋体特异性抗体试验的作用是作为证实试验, 以TPPA/T阳性反应是真阳 性还是假阳性。
青岛大学附属医院
梅毒螺旋体
青岛大学附属医院
传播途径

性接触是主要的传染途径 – 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 – 随着病期的延长,传染性越来越小 – 到感染后2年,通过性接触一般无传染性 母婴传播 – 在妊娠7周时,梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者 ,虽已无性传播(病期>2年),但妊娠时仍可传染给胎儿 –病期越长,传染性越小; 输血传染 间接传播:日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径(接触 部位附有梅毒螺旋体) 。

梅毒检测方法

梅毒检测方法

梅毒检测方法目前,常用的梅毒检测方法主要包括血清学检测、直接检测和分子生物学检测。

血清学检测是目前最常用的梅毒检测方法之一,其原理是通过检测患者血清中的梅毒螺旋体特异性抗体来判断是否感染了梅毒。

血清学检测包括非梅毒螺旋体抗体检测和梅毒螺旋体抗体检测两种方法。

非梅毒螺旋体抗体检测主要包括梅毒快速血浆试验(RPR)和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA),而梅毒螺旋体抗体检测则主要包括梅毒血清学试验(STS)和梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)。

血清学检测的优点是操作简便、结果可靠,但也存在着假阳性和假阴性的情况,因此需要结合临床症状和其他检测方法进行综合分析。

直接检测是通过显微镜或荧光显微镜观察患者体液或组织标本中的梅毒螺旋体,以确定是否感染了梅毒。

常用的直接检测方法包括梅毒暗视野显微镜检查(DFA)和梅毒直接荧光抗体(DFA)检测。

直接检测的优点是可以直接观察到梅毒螺旋体,结果准确可靠,但其缺点是需要取样部位特定,操作较为繁琐,且对于早期感染的检测效果不佳。

分子生物学检测是通过检测患者体液或组织标本中的梅毒螺旋体DNA或RNA来确定是否感染了梅毒。

常用的分子生物学检测方法包括聚合酶链式反应(PCR)和核酸杂交(NAAT)检测。

分子生物学检测的优点是敏感度高,特异性强,且可以对早期感染进行准确检测,但其缺点是设备和技术要求较高,且成本较高。

总的来说,针对梅毒的检测方法有各自的优缺点,为了提高检测的准确性和可靠性,建议在临床实践中综合应用多种检测方法,并结合临床症状和流行病学史进行综合分析,以便及时发现和诊断梅毒感染,采取有效的干预措施,防止疾病的传播和发展。

梅毒实验室诊断标准

梅毒实验室诊断标准

梅毒实验室诊断标准诊断标准概述梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病。

实验室诊断是梅毒早期诊断的关键步骤之一。

本文将详细介绍梅毒实验室诊断的标准及相关内容。

血清学检测血清学检测方法在梅毒的实验室诊断中,血清学检测是常用的方法之一。

常见的血清学检测方法包括: 1. 血清梅毒螺旋体特异性抗体检测 2. 血清非特异性抗体检测梅毒螺旋体特异性抗体检测梅毒螺旋体特异性抗体检测通常采用补体结合试验(RPR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法。

下面是具体的测试步骤: 1. 准备被测血清和梅毒螺旋体抗原。

2. 将被测血清与梅毒螺旋体抗原混合,并孵育一段时间。

3. 使用特异性试剂与抗原抗体复合物反应。

4. 观察反应结果,通常采用N样本与P样本比较的方法判断阳性与阴性。

非特异性抗体检测非特异性抗体检测包括补体结合试验(RPR)、荧光螺旋体抗体试验(FTA-ABS)等。

这些方法的测试步骤与梅毒螺旋体特异性抗体检测类似,只是检测的抗体种类不同。

碳诺林试验碳诺林试验也是梅毒实验室诊断中常用的方法之一。

这个方法的基本原理是将患者的血清与含有碳诺林颗粒的载玻片接触,通过观察颗粒聚集情况来诊断患者是否感染了梅毒。

其他实验室诊断方法除了血清学检测和碳诺林试验,还有其他实验室诊断方法可用于梅毒的诊断,例如PCR检测、组织培养等。

这些方法在梅毒的早期诊断、治疗及追踪感染情况方面发挥重要作用。

结语梅毒实验室诊断标准是梅毒诊断过程中的关键环节,其中血清学检测和碳诺林试验是常用的方法。

随着技术的不断进步,其他实验室诊断方法也越来越重要。

有关实验室诊断标准的研究仍在进行中,希望未来能有更准确、灵敏的诊断方法出现,为梅毒的早期诊断和治疗提供更好的支持。

梅毒实验室检测技术

梅毒实验室检测技术

梅毒IgM抗体(TP-IgM)
IgM抗体的产生是感染后的早期体液免疫应答反 应。IgM分子比IgG较大,所以IgM抗体不能通过胎盘 屏障。而母亲的IgG抗体可以通过胎盘屏障传给胎儿。 因此若在新生儿血中检测到IgG抗体不能作为先天梅毒 的诊断依据,而IgM抗体可为先天梅毒的诊断依据。
IgM抗体检测其特异性较高,但敏感性较低。因
TPPA试验结果判读
4+: 粒子光滑覆盖整个孔底,有时边缘有折叠 3+: 粒子光滑覆盖大部分底 2+:粒子光滑聚集覆盖孔底,周围有一细胞环 1+: 粒子光滑集聚覆概孔底,周围有一明显细胞环 ±: 粒子沉集孔底,中央形成一小点 –: 粒子紧密沉积孔底中央
a:均为RPR阳性标本
29
ELISA/ CLIA
给予儿童先天梅毒 规范治疗和随访
婴 儿 3、 6月 龄 进 行 “非 梅 ”定 量 检 测 观 察 临 床 症 状
任 何 一 次 “非 梅 ”检 测 结 果 由阴转阳,或滴度
不下降反而上升
3次 检 测 结 果 均为阴性反应
每 3个 月 同 时 进 行 “非 梅 ”定 量 检 测 和 “TP”检 测
任何一次
疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得 到的组织液,在暗视野显微镜下,光线从聚光器 的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光, 从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 ❖ 方法:(1)暗视显微镜检查
(2)镀银染色法 (3)核酸检测(血液标本?) 注:梅毒螺旋体目前体外人工培养还没有获得成功, 仅能通过接种兔睾丸等部位进行有限增殖。
组织病理学检测 白细胞检测 蛋白检测
未经治疗的梅感染毒梅病毒螺人旋的体 自然病程
感染梅毒螺旋体
2-6周

梅毒实验室诊断标准

梅毒实验室诊断标准

梅毒实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病,其临床表现多种多样,因此需要依靠实验室检测来进行确诊。

梅毒实验室诊断标准是指在临床诊断中,通过实验室检测方法来确定患者是否感染了梅毒。

本文将介绍梅毒实验室诊断的标准和方法,以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒患者。

1. 血清学检测。

梅毒的血清学检测是目前最常用的实验室诊断方法之一。

常见的血清学检测包括梅毒螺旋体抗体检测和非梅毒螺旋体抗体检测。

梅毒螺旋体抗体检测主要包括梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测,其中梅毒螺旋体特异抗体检测包括梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(MHA-TP)和梅毒螺旋体血清凝集试验(FTA-ABS)等。

非梅毒螺旋体抗体检测则包括非梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测,如梅毒螺旋体抗原检测和梅毒螺旋体DNA检测等。

2. 直接检测。

除了血清学检测外,梅毒的直接检测也是一种重要的实验室诊断方法。

直接检测包括梅毒螺旋体的显微镜检查、组织培养和核酸检测等。

其中,梅毒螺旋体的显微镜检查是通过显微镜观察患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体,是一种直接而快速的诊断方法。

组织培养则是将患者体液或病变组织进行培养,以寻找梅毒螺旋体的生长。

核酸检测则是通过PCR等方法检测患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体DNA,是一种高度敏感和特异的检测方法。

3. 其他检测方法。

除了上述的血清学检测和直接检测外,还有一些其他的实验室诊断方法可用于梅毒的诊断,如梅毒螺旋体的免疫组化检测、蛋白质多肽检测和生物传感器检测等。

这些方法在梅毒的诊断中起着一定的辅助作用,可以提高诊断的准确性和灵敏度。

总结。

梅毒实验室诊断标准是通过血清学检测、直接检测和其他检测方法来确定患者是否感染了梅毒。

这些实验室诊断方法各有优势和局限性,临床医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果综合判断,以提高梅毒的诊断准确性和治疗效果。

希望本文对临床医生在梅毒的实验室诊断方面有所帮助,提高对梅毒的诊断和治疗水平。

梅毒的实验室检查与技术规范

梅毒的实验室检查与技术规范

梅毒的实验室检查与技术规范概述梅毒(syphilis)是一种由螺旋体梅毒螺旋体(Treponema pallidum)引起的性传播疾病。

梅毒的及时检测和确诊对于治疗及防止梅毒的传播至关重要。

本文将探讨梅毒的实验室检查方法和相关的技术规范。

实验室检查方法血清学检测血清学检测是梅毒的首选检测方法,常用的血清学检测方法包括非梅毒螺旋体凝集试验(non-treponemal tests)和梅毒螺旋体特异性试验(treponemal tests)。

非梅毒螺旋体凝集试验包括梅毒螺旋体血清检测(VDRL)和荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)。

这些试验通过检测抗体反应来判断是否感染梅毒,并可评估感染程度。

梅毒螺旋体特异性试验主要包括T. pallidum颗粒凝集试验(TP-PA)和ELISA试验。

这些试验可以进一步证实梅毒感染,并对阳性样本进行确认。

分子生物学检测分子生物学检测方法可以直接检测梅毒螺旋体的基因组或其特异性基因片段。

常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链式反应(PCR)和DNA杂交试验。

PCR技术可在早期感染时检测到梅毒螺旋体的DNA,具有高度敏感性和特异性。

DNA杂交试验主要用于检测神经梅毒,可检测到T. pallidum在脑脊髓液中的存在。

细菌学检测细菌学检测是直接观察样本中是否存在活动的梅毒螺旋体。

常用的细菌学检测方法有暗视野显微镜检查、苏木精-伊红染色和螺旋体培养。

在显微镜下观察暗视野试验时,活动的梅毒螺旋体会显示出旋转的运动。

苏木精-伊红染色可以染出梅毒螺旋体的形态。

螺旋体培养可以将梅毒螺旋体培养出来,但是需要较长的培养周期,并且并非常规检测方法。

技术规范为确保梅毒实验室检查结果的准确性和可靠性,以下是一些常见的技术规范:1.实验室人员需接受充分的培训,熟悉各项检测方法和技术操作流程,并按照操作规程执行。

2.所有试剂和材料必须符合质量管理规范,并保持良好的保存和标识。

3.实验室必须建立完善的质量控制体系,包括使用标准品进行日常质控、参加外部质控项目以及进行内部质量评估。

梅毒检测方法

梅毒检测方法

梅毒检测方法梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病,早期可能没有明显症状,但如果不及时治疗,可能会导致严重的并发症。

因此,及时进行梅毒的检测是非常重要的。

本文将介绍几种常见的梅毒检测方法,帮助大家更好地了解和预防梅毒。

一、血清学试验。

血清学试验是目前最常用的梅毒检测方法之一,包括非梅毒螺旋体试验(非梅试)和梅毒螺旋体试验(梅试)。

非梅试通常用于筛查,而梅试则用于确诊。

这两种试验都是通过检测患者血清中的抗梅毒螺旋体抗体来进行的。

虽然血清学试验的准确性较高,但有时也会出现假阳性或假阴性的情况,因此需要结合临床表现和其他检测方法来综合判断。

二、直接检测法。

直接检测法包括暗视野显微镜检查和聚合酶链反应(PCR)检测。

暗视野显微镜检查是通过在显微镜下观察患者的疹子或溃疡样病变,直接检测梅毒螺旋体的存在。

而PCR检测则是通过扩增患者体液中的梅毒螺旋体DNA片段来进行检测。

这两种方法都能够直接检测梅毒螺旋体的存在,准确性较高,但需要专业设备和技术支持。

三、快速血浆反应试验。

快速血浆反应试验(RPR)和螺旋体血浆试验(TPPA)是两种常用的快速梅毒检测方法。

RPR是一种非特异性试验,通过检测患者血浆中的非特异性抗体来进行初步筛查,如果结果阳性,则需要进行TPPA等特异性试验来确认。

TPPA是一种特异性试验,能够检测患者血浆中的梅毒螺旋体特异性抗体,用于确诊。

这两种试验都具有较高的敏感性和特异性,是常用的快速检测方法。

总结。

梅毒的检测方法多种多样,每种方法都有其特点和适用范围。

在进行梅毒检测时,应根据患者的临床表现和检测条件,选择合适的方法进行检测。

同时,应注意避免假阳性或假阴性的情况,可以结合多种方法进行综合判断。

希望本文能够帮助大家更好地了解梅毒的检测方法,及时发现并治疗梅毒,预防并发症的发生。

梅毒的实验室诊断

梅毒的实验室诊断

梅毒的实验室诊断引言:梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(TP)感染所引起的一种慢性全身性性传播疾病,在中国,梅毒在大约50年前已经基本被消灭[1]。

同其他国家一样,近年来中国梅毒螺旋体感染的发病率呈逐年上升趋势,是目前中国主要的性传播疾病之一。

[2]。

早期主要表现为皮肤黏膜损伤,晚期将累及心血管中枢神经骨骼及眼部等重要脏器。

目前为了控制梅毒的医院感染,现已规定凡是手术、输血( 供、受血者) 及各种创伤性检查的患者,均进行梅毒螺旋体的相关血清学检查。

[3]一,梅毒螺旋体梅毒的病原体为梅毒螺旋体苍白密螺旋体苍白亚种,属于螺旋体体目、螺旋体科、密螺旋体属。

本属包括4种人的病原体和至少6种对人不致病的密螺旋体[4]。

其形态呈柔软纤细的螺旋状,体长6~20μm,宽0.15~0.25μm,螺旋有8~20个,运动特征为弯曲移动、绕轴转动和前后伸缩运动[5]。

其外膜厚46nm,具有抗原性,抗外膜抗体在补体参与的条件下能杀灭梅毒螺旋体或使梅毒螺旋体制动。

梅毒螺旋体抗原还包括特异性耐热的多糖抗原(多糖-RNA复合物)、特异性不耐热蛋白质、非特异性心磷脂抗原和类脂抗原。

梅毒的诊断要依据患者有无疾病接触史、实验室结果、症状和体征等综合判断。

二、梅毒流行病学据世界卫生组织估测,全世界每年新发梅毒感染者大约有1200万。

近年来,在淋病等性病的发病率有所下降的情况下,各期各类梅毒在许多发达和发展中国家出现不断上升的趋势,甚至在部分人群中发生暴发现象,其中特别是男性同性性行为者。

大部分发生在那些缺少有效检测手段的国家和地区。

在发展中国家,孕妇感染梅毒是造成不良妊娠的主要原因,其中大约30%为死胎,30%左右为先天性梅毒[3]。

近年来许多国家,特别是发展中国家,先天梅毒的报告发病率不断上升,是不容忽视的公共卫生问题。

近年来,世界各地梅毒发病率呈上升趋势,我国梅毒发患者数也快速增长,据报道,2010年全国报告梅毒病例358534例,2010年发病率26.86/10万,比2009年增加17.02%,居全国乙类传染病的第3位。

简述梅毒实验室检验主要流程

简述梅毒实验室检验主要流程

梅毒实验室检验主要流程简介梅毒是一种由螺旋体梅毒螺旋体引起的性传播疾病,严重威胁人类健康。

实验室检验是梅毒的重要诊断手段之一,主要通过血清学检测来确定患者是否感染了梅毒螺旋体。

本文将详细描述梅毒实验室检验的主要流程和步骤,确保流程清晰且实用。

流程概述梅毒实验室检验的主要流程包括样本采集、标本处理、血清学检测和结果解读。

具体步骤如下:1.样本采集2.标本处理3.血清学检测4.结果解读下面将逐步详细介绍每个步骤的具体操作。

1. 样本采集样本采集是梅毒实验室检验的第一步,通常采用静脉血作为样本。

采集前需要告知患者相关信息,并征得其同意。

操作步骤如下:1.1 准备采集工具和材料,包括一次性采血针、采血管、消毒棉球、乙醇、手套等。

1.2 患者取坐位或卧位,将采血部位(通常是患者的前臂)暴露。

1.3 穿戴手套,用消毒棉球擦拭采血部位,然后用乙醇再次擦拭,待干燥。

1.4 使用一次性采血针快速穿刺患者的静脉血管,并将血液采集到采血管中。

1.5 采集足够的血液量,通常为5-10ml。

1.6 将采血管密封并标记好患者的相关信息,如姓名、性别、年龄等。

1.7 将采血管放入离心机进行离心,分离血清。

2. 标本处理标本处理是为了获取清晰的血清样本,以便进行后续的血清学检测。

操作步骤如下:2.1 离心结束后,将离心管取出,小心地将血清转移到一个干净的离心管中。

2.2 将血清离心管再次密封,并标记好样本的相关信息。

2.3 将血清离心管放入冰箱中保存,保持在2-8摄氏度。

3. 血清学检测血清学检测是梅毒实验室检验的核心步骤,主要通过血清中的抗体来判断患者是否感染了梅毒螺旋体。

常用的血清学检测方法包括非梅毒螺旋体试验和梅毒螺旋体试验。

操作步骤如下:3.1 非梅毒螺旋体试验 3.1.1 微量血凝试验(VDRL):将患者血清与VDRL试剂混合,在特定条件下观察血清的凝集反应。

3.1.2 螺旋体颗粒吸附试验(TPPA):将患者血清与螺旋体颗粒混合,观察是否有抗体与螺旋体颗粒结合。

梅毒的实验室诊断标准

梅毒的实验室诊断标准

梅毒的实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病,其诊断对于预防和治疗具有重要意义。

实验室诊断是梅毒诊断的重要手段之一,本文将介绍梅毒的实验室诊断标准,以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒。

一、血清学检测。

血清学检测是梅毒诊断的金标准之一。

包括非梅毒螺旋体抗体(非梅毒螺旋体特异性抗体)和梅毒螺旋体抗体(梅毒螺旋体特异性抗体)两种检测方法。

非梅毒螺旋体抗体包括非梅毒螺旋体血凝试验(Nontreponemal serologic test,如RPR试验)和梅毒螺旋体抗体包括梅毒螺旋体血凝试验(Treponemal serologic test,如TPPA试验)。

在实验室诊断中,通常要求首先进行非梅毒螺旋体抗体检测,如RPR试验,若结果阳性,则需进行梅毒螺旋体抗体检测,如TPPA试验,以确认诊断。

二、直接检测。

直接检测是指在患者临床症状出现后,通过镜检或PCR等方法直接检测患者体液中的梅毒螺旋体。

常用的直接检测方法包括血清暗视野显微镜检查、梅毒螺旋体DNA检测等。

直接检测方法能够更快速地确定患者是否感染了梅毒,对于早期感染的患者具有重要意义。

三、其他实验室检测。

除了血清学检测和直接检测外,还有一些其他实验室检测方法可辅助梅毒的诊断,如梅毒螺旋体培养、梅毒螺旋体分子生物学检测、梅毒螺旋体抗原检测等。

这些方法在实验室诊断中起着重要的辅助作用,能够提高梅毒诊断的准确性和灵敏度。

综上所述,梅毒的实验室诊断标准主要包括血清学检测、直接检测和其他实验室检测方法。

在临床实践中,医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果,综合判断患者是否感染了梅毒,以便及时进行治疗和干预。

希望本文能够帮助临床医生更好地理解梅毒的实验室诊断标准,提高梅毒的诊断水平,为患者的健康保驾护航。

梅毒检验参考

梅毒检验参考

梅毒检验参考梅毒为定性检测,临界值为1,在定标通过,质控通过的情况下,建议按以下步骤发单:磁微粒Anti-TP梅毒螺旋体抗体检测比较特殊,其检测标志物有两种,一种为梅毒螺旋体自身的物质引起机体免疫反应产生的抗体称为梅毒特异性抗体,另一种为梅毒螺旋体破坏机体细胞后,释放心磷脂等物质,这些物质作为抗原引起机体免疫反应产生的抗体称为梅毒非特异性抗体,因此梅毒在临床上的检测与筛查需要同时检测这两种标志物并根据其结果来共同鉴定。

目前常用的梅毒特异性抗体检测方法有酶联免疫(EIA),化学发光(CIA),凝集法(TPPA),荧光吸收法(FTA-ABS)等,梅毒非特异性抗体检测方法有凝集法(RPR/TRUST),性病实验室玻片试验(VDRL)等。

图7为中国疾病预防与控制中心(CDC)2010年发布的梅毒检测流程,用酶联免疫或化学发光法进行初筛,阴性结果报梅毒阴性,阳性结果进行非特异性抗体检测,阳性结果报阳性,阴性结果再用TPPA进行确认。

图1 美国CDC梅毒检测流程图2CDC梅毒检测流程例如只进结果阳性不代抗体检测结果的不同组合也代表着不同的意义,表1为检测结果不同组合临床意义汇总。

表1 梅毒特异性与非特异性抗体检测结果临床意义梅毒螺旋体非特异性抗体检测梅毒螺旋体特异性抗体检测临床意义RPR/VDTLTPPA/FTA-ABSEIA/CIA检测结果--s/co < 未感染/ 初期感染/ 潜伏期-+s/co ≥晚期梅毒/ 既往感染+-s/co < 非特异性反应或假阳性++s/co ≥梅毒感染安图磁微粒TP为梅毒特异性抗体定性检测试剂,临界值为1,检测结果S/CO<1报梅毒特异性抗体阴性,检测结果S/CO≥1报梅毒特异性抗体阳性,阳性样本需加做非特异性抗体检测。

另外有文献研究显示某些疾病如恶性肿瘤、癌症、心血管疾病、肝炎、自身免疫性疾病、妊娠等,这些疾病患者体内含有某些治疗性抗体、类脂嗜异性抗体、自身抗糖尿病体、类风湿因子、甲胎蛋白等,这些物质会与试剂中的抗原成分非特异结合,从而产生假阳性的结果;或一些特殊人群如孕妇、婴幼儿、老年人等,易产生特异性抗体检测假阳性的结果,因此建议在判定检测结果前要综合考虑患者的年龄、病史、临床信息等进行判断。

性病实验室梅毒SOP

性病实验室梅毒SOP

目的:规范的梅毒螺旋体检验操作,确保检测结果准确。

适用范围:性病实验室工作人员责任人:实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。

1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性,医务人员应戴手套谨慎操作。

1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法,各期梅毒的检测方法及部位见下表。

1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要,用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml,室温静置1-2小时(或37℃静置30分钟),待血液凝固、血块收缩后,3000r/min离心10-15分钟,分离新鲜血清,备用。

也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。

溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。

1.2.1.2血浆标本根据需要,用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml,轻轻颠倒混匀8-10次,3000r/min离心10-15分钟,分离血浆,备用。

血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验(一般仅用于RPR实验,),但易出现假阳性反应(需用血清复试),如用其他抗凝剂应首先评价后再用。

1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂,1岁以下儿童采用足跟部)。

一次性采血针刺破皮肤,用无菌棉签擦掉第一滴血。

收集滴出的血液,立即用于检测。

1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位,取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测,或取渗出液直接涂片,用于镀银染色试验。

1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位,刮取渗出液,加入有DNA保存液(1ml/管)的标本管中,备用。

1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结,注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次,取少量的淋巴液直接滴于载玻片上,加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。

梅毒螺旋体的几种实验室检测方法

梅毒螺旋体的几种实验室检测方法

梅毒螺旋体的几种实验室检测方法摘要] 梅毒是一种严重危害人类健康的性传播疾病,临床上主要依靠实验室检测进行诊断。

当前,有多种实验室检测方法被使用。

本文主要对直接检测法、血清学检测法及PCR检测法进行综述。

[关键词] 梅毒;检测方法;血清学;分子生物学梅毒(Syphilis)是由苍白螺旋体(又称为梅毒螺旋体)引起的慢性、系统性性传播疾病。

它主要通过性途径传播,临床上表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒(胎传梅毒)等[1]。

本文综述了目前应用于梅毒实验室检测的三类方法,一是病原体直接检测,二是血清学方法,三是分子生物学技术。

1. 病原体直接检测梅毒螺旋体直接检测适用于一期梅毒。

一期梅毒仅在接触部位发病,主要表现为皮肤黏膜的损害,标志性特征为硬下疳。

此时血清中抗原抗体还未达到可测水平,因此梅毒螺旋体检测对梅毒的早期诊断尤为重要。

1.1 暗视野显微镜检查(DFM)可直接观察病灶分泌物中的梅毒螺旋体,是诊断早期梅毒的主要方法。

用暗视野显微镜观察,可根据典型的形态、大小和运动方式,结合临床症状进行诊断,特异性较高。

但由于病程、取材、实验人员计术水平等多种因素的影响,敏感性较低。

1.2 镀银染色法(Warthin-starry)由于梅毒螺旋体具有亲银性,镀银染色法能将梅毒螺旋体染成棕褐色或黑褐色,形态清晰易辨,且标本可永久保存。

缺点是镀银染液需新鲜配制,且存在其他类似的干扰物质,故临床应用较少。

1.3 直接免疫荧光抗体染色(DFAT)用荧光素标记的抗梅毒螺旋体抗体直接染色标本,利用抗原抗体特异性反应,通过暗视野显微镜观察,从免疫学和形态学两方面检测梅毒螺旋体,敏感性和特异性均较高。

但同时,对显微镜设备和技术条件要求也较高,目前还没有被实验室广泛使用。

1.4 多功能显微镜诊断仪(MDI)是美国科学家布拉德福博士历经20年发明的一种屏幕线性放大40-20000倍的高清晰度显微镜,集现代光学、光电学、电子学、医学影像和多媒体计算机技术于一体的医学显微设备。

梅毒检测方法

梅毒检测方法

梅毒检测方法梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性病,其传播途径主要是性接触。

梅毒的早期症状往往不明显,容易被忽视,但如果不及时治疗,梅毒会逐渐进展,对患者的健康造成严重威胁。

因此,及时准确地检测梅毒至关重要。

本文将介绍几种常见的梅毒检测方法,希望能帮助读者更好地了解梅毒的检测及预防。

一、血清学检测法。

血清学检测法是目前诊断梅毒最常用的方法之一。

该方法通过检测患者血清中的抗梅毒抗体来确定是否感染了梅毒。

血清学检测法的优点是准确性高,能够检测出患者体内的抗体情况,帮助医生判断患者是否感染了梅毒。

但是,血清学检测法需要专业的实验室设备和技术人员进行操作,且结果需要一定时间才能出来,不适合于急诊情况下的检测。

二、直接镜检法。

直接镜检法是通过显微镜观察患者体液中的梅毒螺旋体来确定是否感染了梅毒。

这种方法操作简单,结果快速,适合于急诊情况下的检测。

但是,直接镜检法的准确性相对较低,易受到操作者技术水平和观察条件的影响,容易产生假阴性结果。

三、PCR法。

PCR法是一种分子生物学检测方法,通过扩增患者体液中的梅毒螺旋体DNA来确定是否感染了梅毒。

PCR法的优点是高度敏感和特异性,能够快速准确地检测出患者是否感染了梅毒。

但是,PCR法需要专业设备和技术人员进行操作,且成本较高,不适合于一般的临床检测。

总结:针对梅毒的检测方法有多种,每种方法都有其适用的场合和特点。

在临床实际操作中,医生需要根据患者的具体情况和临床表现选择合适的检测方法,以确保患者能够及时准确地得到诊断和治疗。

同时,对于一些高危人群,如性工作者、艾滋病患者等,定期进行梅毒的筛查也是非常重要的。

希望通过本文的介绍,能够增加大家对梅毒检测方法的了解,提高对梅毒的认识和预防意识。

梅毒检测及策略

梅毒检测及策略
胺红,稳定、颗粒均匀,生产批间差小,结果易观 察
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梅毒螺旋体抗原血清试验
用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原 测定抗螺旋体抗体
敏感性和特异性均高,一般用作确证试验 检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体,即使患者
经过足够治疗,仍能长期存在,甚至终身不 消失,血清反应仍持续存在阳性,不能用于 观察疗效
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文献报道
昆明医科大学附属第一医院(2013) 326例患者和200例健康体检者 ELISA法、TPPA 法和RPR 法的灵敏度分别为95.1、
96.3和83.4,特异性分别为96.0、 98.0和88.0。结 论 ELISA法是门诊、住院患者初筛梅毒的理想方法; TPPA法为目前公认最好的梅毒血清学确证试验; RPR滴度试验对评价梅毒疗效和判断是否再感染等 有重要临床价值。
4.由于采用EIA法,梅毒治愈多年后仍能检测到梅 毒 IgG 。因此,对确证活动性梅毒,监测疗法,发 现治疗失败的病例和再感染方面使用RPR是有必要 的。
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6.曾经治疗过梅毒的妇女在怀孕期间,RPR检测 效价通常增长1或2倍。由此提出需要对这类孕妇进 行治疗或再治疗。
7.新生儿梅毒筛查:在没有确定母亲梅毒血清检 测结果前,新生儿应该留院。因为存在假阴性和假 阳性,不能只做筛查检测( RPR )。梅毒IgG检测 阳性不能确定新生儿感染梅毒,因为母体抗体可以 通过胎盘被动传播,同时满足RPR和IgG检测阳性 因此新生儿梅毒阳性必须。新生儿和母亲必须采用 相同的检测方法,以保证两者效价结果可比性。
WHO推荐同时采用非梅毒螺旋体和梅毒螺 旋体抗原血清试验用于筛查和诊断

梅毒实验室诊断方法

梅毒实验室诊断方法

梅毒实文验档素材室诊断梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。

一、显微镜检查法〔一〕暗视野显微镜检查【根本原理】梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片,以及淋巴结穿刺液涂片等,在暗视野显微镜下,光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光,从而可依据其特别形态和运动方法进行检测。

【仪器材料】1.暗视野显微镜。

2.钝刀〔刮勺〕、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。

【标本采集】1.皮肤黏膜组织液:无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损外表的污物,钝刀轻刮、挤压皮损表层,取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。

2.淋巴液:无菌操作下穿刺淋巴结,注入生理盐水并反复抽吸2〜3次,取少量的淋巴液直接滴于载玻片上,加盖玻片镜检。

【操作步骤】1.加镜油:在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。

2.聚光:将标本玻片置载物台上,上升聚光器使镜油接触载玻片底面。

3.镜检:在镜下观察,寻觅有特征形态和运动方法的梅毒螺旋体。

【结果判读】梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物,长5〜20p m,直径小于0.2p m,有6〜12个螺旋,具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方法。

暗视野显微镜下发觉有上述特征的螺旋体为阳性结果。

【结果汇报】1.阳性:见到上述特征的梅毒螺旋体。

2.阴性:未见到上述特征的梅毒螺旋体。

【临床意义】1.暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。

2.螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法,世界卫生组织指定为性病实验室必备工程之一。

3.如未见到梅毒螺旋体,并不能排解患梅毒的可能性,应复查和血清学检查。

【考前须知】1.取材时尽量防止出血,以免影响镜下观察。

2.取材后应马上置暗视野显微镜下观察。

3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。

〔二〕镀银染色检查【根本原理】梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染色,从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。

【仪器材料】1.显微镜。

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2022梅毒实验室检测方法汇总(全文)
梅毒(syphilis )是一种全球分布的系统性性传播疾病,它的病原体是苍白密螺旋体(Treponema pallidum , TP )(又称梅毒螺旋体X
人是梅毒的唯一传染源,感染后,既能产生各种各样的症状,又可多年无症状而呈潜伏状态。

患病后病程漫长,早期侵犯生殖器和皮肤,晚期侵犯全身各器官,并生多种多样的症状和体征,病变几乎能累及全身各个脏器。

在艾滋病出现之前,是最令人生畏的性传播疾病。

01、中国梅毒感染现状
据统计,2010年至2020年,中国梅毒累计发病4832807例,累计死亡652 例。

2020年中国梅毒发病数量为464435例相比2019年减少了71384例;
死亡人数为54例,相比2019年增长了12例。

2020年中国梅毒发病率为33.0831/10万,死亡率为0.0038/10万;2019
年中国梅毒发病率为38.3677/10万,死亡率为0.003/10万。

---- 出生时不能诊断胎传梅毒的儿童,任何一次随访过程中非梅毒螺旋体血清学试验由阴转阳,或滴度上升,且梅毒螺旋体血清学试验阳性。

试验仍阳性。

梅毒螺旋体细长,5-15x0.1-0.2um,形似细密的弹簧,螺旋弯曲规则,
平均8-14个,两端尖直。

电镜下显示梅毒螺旋体结构复杂,从外向内分
为:夕卜膜(主要由蛋白质、糖及类脂组成)、轴丝(主要由蛋白质组成)、
圆柱形菌体(包括细胞壁、细胞膜及胞浆内容物),—般染料不易着色。

在光镜暗视野下,人们仅能看到梅毒螺旋体的折光性,其活动较强。

内鞭毛
细胞膜
外膜
主要传播途径有:性传播、血液传播和母婴传播,临床表现分为一期梅毒、
二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒。

03、梅毒的实验室检测方法
梅毒的确诊依据临床症状与实验室检测。

实验室检测分为以下几类:
01、暗视野显微镜检查
暗视野显微镜下,典型的梅毒螺旋体呈白色发光,其螺旋较密而均匀,平均814个。

运动规律,运动性较强,观察其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。

见到梅毒螺旋体,结合典型临床表现,有确诊梅毒的价值。

未检出螺旋体不能排除梅毒的诊断。

02、镀银染色检查
梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染成棕黑色,在普通显微镜下观察, 梅毒螺旋体染成棕褐色。

03、核酸扩增试验
采用聚合酶链反应(PCR )法。

通过特异引物和特定条件下的热循环反应, 对皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊液等样品中的梅毒螺旋体进行核酸检测。

每一次检测需同时做阳性对照、阴性对照,只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段视为实验成立,可作出核酸检测阳性或阴性结果的判定。

当人体感染梅毒螺旋体后4周〜10周,一方面对感染损伤的局部组织及TP表面释放的心磷脂类物质发生免疫应答,产生非特异性抗心磷脂类抗体(反应素);另一方面对TP的外膜脂蛋白、外膜鞘蛋白等抗原发生免疫应答, 产生抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。

根据检测所用抗原不同,梅毒血清学试验分为两大类:一类为非梅毒螺旋体血清学试验(又称梅毒非特异性抗体试验);另一类为梅毒螺旋体血清学试验(又称梅毒特异性抗体试验\
1、非梅毒螺旋体血清学试验
a )性病研究实验室玻片试验(VDRL )
b )快速血浆反应素环状卡片试验(RPR )
c )甲苯胺红不加热血清试验(TRUST )
2、梅毒螺旋体血清学试验
a) 梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA )
b )荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS )
c )梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(ELISA )
d )梅毒螺旋体快速检测试验(RT)
e )梅毒螺旋体化学发光免疫试验(CLIA )
f)梅毒螺旋体igM抗体检测
梅毒螺旋体血清学试验的敏感性和特异性均较高,可适用于人群的筛查、
产前检查及健康体检等。

05、组织病理
梅毒的基本病理变化如下:
a)血管内膜炎:特别是小动脉内皮细胞肿胀与增生;
b)血管周围炎:血管周围大量淋巴细胞和浆细胞浸润;
c)二期梅毒后期和三期梅毒常见上皮样细胞和多核巨细胞等组成的肉芽
肿性浸润;
d养艮染色、免疫组化染色和PCR检测可发现组织中的梅毒螺旋体病原体。

一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒组织病理变化又有所不同。

06、脑脊液检查
晚期梅毒患者,当出现神经症状,经过驱梅治疗无效,应作脑脊液检查。

这一检查对神经梅毒的诊断、治疗及预后的判断均有帮助。

检查项目应包括:细胞计数、总蛋白测定、VDRL试验及胶体金试验。

04、梅毒诊断依据
本部分仅讨论实验室检测部分。

应根据流行病学史、临床表现及实验室检查等进行综合分析,作出诊断。

01、—期梅毒
a)暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验
硬下疳损害刮取渗液或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体,或核酸扩增试验检测梅毒螺旋体核酸阳性。

b)非梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

如感染不足6周,该试验可为阴性,应于感染6周后复查。

c)梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

如感染不足4周,该试验亦可为阴性,应于感染4周后复查。

02、二期梅毒
a)暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验
二期梅毒皮损如扁平湿疣、湿丘疹及黏膜斑,其刮取渗液可查见梅毒螺旋体,或核酸扩增试验检测梅毒螺旋体核酸阳性。

b)非梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

c)梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

03、三期梅毒
a)非梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

b)梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

c)脑脊液检查
白细胞计数*0x106/L ,蛋白量>500mg/L ,且无其他引起这些异常的原因。

脑脊液VDRL试验(或RPR/TRUST试验)或FTA-ABS试验(或TPPA/TPHA试验)阳性。

d)组织病理检查
有三期梅毒的组织病理变化。

04、隐性梅毒(潜伏梅毒)
a)非梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

b)梅毒螺旋体血清学试验
阳性。

c)脑脊液检查
有条件时可进行脑脊液检查以排除无症状神经梅毒。

隐性梅毒一般无明显异常。

05、胎传梅毒(先天梅毒)
a)暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验
在早期胎传梅毒儿的皮肤黏膜损害或组织标本中可查到梅毒螺旋体,或核酸扩增试验检测梅毒螺旋体核酸阳性。

b)梅毒血清学试验
—出生时非梅毒螺旋体血清学试验阳性,滴度大于或等于母亲分娩前滴度的4倍,且梅毒螺旋体血清学试验阳性。

梅毒螺旋体igM抗体检测:阳性。

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