固相萃取的四个步骤
固相萃取的实验步骤
固相萃取的实验步骤嘿，朋友们！今天咱来聊聊固相萃取这个有意思的实验步骤呀。
固相萃取呢，就好像是一场精细的筛选游戏。
你先得准备好你的“游戏道具”，也就是固相萃取柱啦。
这柱子就像是一个神奇的小盒子，里面藏着好多秘密呢。
然后呢，你得把要处理的样品溶液小心翼翼地倒进去。
这时候你就得想啦，可别手抖呀，不然不就前功尽弃啦。
接下来，让样品溶液慢慢地在柱子里流淌，就像小河流过山谷一样自然。
这时候那些我们想要的东西就会被柱子给抓住，而其他不相关的就流走啦，是不是很神奇？然后呢，你得给柱子洗个澡，把那些粘在上面不太相干的东西给洗掉，让我们的目标物更加纯净。
再然后呀，就是收获成果的时候啦。
用合适的溶剂把我们辛辛苦苦抓住的目标物给洗脱下来，就像是从宝藏盒子里拿出宝贝一样让人兴奋。
你说这固相萃取像不像一个小小的魔法过程？把乱七八糟的溶液变得干干净净，只留下我们最想要的东西。
这过程可不简单呢，需要我们细心、耐心，还得有那么一点点技巧。
就好比说选择柱子吧，那可得好好挑，就跟挑鞋子一样，得合脚才行呀。
不同的样品需要不同的柱子来对付呢。
还有溶剂的选择，这可不能马虎，要是选错了溶剂，那可就糟糕啦，就像做菜选错了调料一样。
而且在整个过程中，每一步都得认真对待，稍有疏忽可能就会影响结果哦。
这就像是搭积木，一块没搭好，可能整个就垮啦。
所以呀，做固相萃取实验可不能马马虎虎，得打起十二分精神来。
要像爱护宝贝一样对待那些仪器和试剂，这样才能得到准确可靠的结果呀。
总之呢，固相萃取是个很有趣但也很有挑战性的实验步骤。
只要我们用心去做，就一定能在这个小小的实验世界里发现大大的惊喜！这就是我对固相萃取实验步骤的理解啦，你们觉得呢？原创不易，请尊重原创，谢谢!。
固相萃取的操作步骤
固相萃取的操作步骤
固相萃取啊，这可是个很有意思的技术呢！咱就这么说吧，它就像是个神奇的小魔术，能把咱想要的东西从一堆乱七八糟里变出来。
你先得准备好你的固相萃取柱，这就好比是魔术师的道具，可不能马虎。
然后呢，把你那含有目标物的溶液倒进去，就好像把各种物品放进魔术箱里。
这时候，就开始魔法时刻啦！目标物会被吸附在柱子上，其他的杂质就像那些不相关的东西一样被抛弃掉。
你说神奇不神奇？
接下来，你得用合适的溶剂去冲洗柱子，把那些还赖着不走的杂质统统赶走。
这就像是给柱子洗个干净的澡，把脏东西都洗掉。
最后，用一种特别的溶剂把目标物给洗脱下来，哇塞，就像魔术师从帽子里变出兔子一样，你想要的东西就出来啦！
你想想看，要是没有固相萃取，那我们得费多大的劲去分离那些我们想要的东西啊！它可帮了我们大忙啦！
固相萃取就像是一个忠诚的小助手，默默地帮我们处理那些复杂的混合物。
它不声不响，却总能给我们带来惊喜。
比如说，在环境监测中，它能帮我们找出那些微量的污染物，让我们及时发现问题。
在食品检测中，能帮我们检测出那些可能对我们身体有害的物质，保障我们的健康。
你说，这固相萃取是不是很厉害？它虽然看起来不起眼，但是作用可大了去了！难道不是吗？
总之呢，固相萃取就是这么个神奇又实用的技术，让我们的实验、检测变得更加轻松、高效。
我们可得好好珍惜它，好好利用它呀！。
固相萃取与固相微萃取
二、固相萃取的基本原理、分离模 式及操作步骤
固相萃取（SPE）是利用固体吸附剂将液体样品 中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合 物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离和和富 集的目的。先使液体样品通过一装有吸附剂（固 相）小柱，保留其中某些组分，再选用适当的溶 剂冲洗杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱，从而达 到快速分离净化与浓缩的目的。
• 一般选择中等强度的混合溶剂，尽可能除去 基体中的干扰组分，又不会导致目标萃取物 流失。
• 反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶 剂-水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液 而小于洗脱剂溶液。
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d.洗脱及收集分析物
• 选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱 液，挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。
携带更方便、操作费用也更 加低廉，另外克服了固相萃 取回收率低、吸附剂孔道易 堵塞的缺点，因此成为目前 所采用的试样预处理中应用 最为广泛的方法之一。SPME 已开始应用于分析水、土壤、 空气等环境样品的分析。
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一、概述
固相微萃取(solid phase microextraction）
• 1989年；Pawliszyn • Supelco1993年推出了商品化的SPME装置 • 1995年Pawliszyn等；空气中苯系物分析；SPME在气相色谱
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美国Supelco公司提供的 给单个固相萃取小柱加 压的单管处理塞。
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b. 固相萃取过滤-负压抽吸
负压抽吸是在固相萃 取柱的出口用注射器 手动抽负压，或与水 泵或真空泵相连，用 泵施加适当真空度， 从而使样品溶液抽吸 通过固相萃取柱。最 常用的是用抽滤瓶实 现负压抽吸。
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也可以采用固相萃取过滤装置同时处理多个样品
固相萃取技术的原理和步骤
固相萃取技术原理及应用一、固相萃取基本原理与操作1、固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等2）离子交换作用：SAX, SCX，COOH、NH2等3）物理吸附：Florsil、Alumina等2、p H值对固相萃取的影响pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。
对于强阳/阴离子交换柱来讲，因为吸附剂本身是完全离子化的状态，目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附保留。
而目标物的离子化程度则与pH值有关。
如对于弱碱性化合物来讲，其pH值必须小于其pKa值两个单位才可以保证目标物完全离子化，而对于弱酸性化合物，其pH值必须大于其pKa值两个单位才能保证其完全离子化。
对于弱阴/阳离子交换柱来讲，必须要保证吸附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附，而溶液的pH值必须满足一定的条件才能保证其完全离子化。
3、固相萃取操作步骤及注意事项针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍有不同。
1）填料保留目标化合物固相萃取操作一般有四步（见图1）：Ø 活化---- 除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。
（注意整个过程不要使小柱干涸）Ø 上样---- 将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。
（注意流速不要过快，以1ml/min为宜，最大不超过5ml/min）Ø 淋洗---- 最大程度除去干扰物。
（建议此过程结束后把小柱完全抽干）Ø 洗脱---- 用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。
（注意流速不要过快，以1ml/min为宜）如下图1:2）填料保留杂质固相萃取操作一般有三步（见图2）：Ø 活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。
（注意整个过程不要使小柱干涸）Ø 上样--将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上，故此步骤要开始收集（注意流速不要过快）Ø 洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集，合并收集液。
固相萃取SPE
固相萃取SPE一、概念和原理固相萃取（Solid-Phase Extraction，简称SPE）是一项从八十年代中期开始发展起来的样品前处理技术。
主要用于液体中的半挥发性、难挥发性物质的检测基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程，利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物与干扰化合物分离，达到分离和富集目标化合物的目的。
SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。
其分离机理是利用杂质或目标化合物与样品技术基体溶剂和吸附剂之间亲和力的相对大小。
二、SPE的模式及原理1、正相SPE采用比样品本身更强极性的溶剂洗脱吸附的分析物质①吸附剂（固定相）：极性键合相和极性吸附剂，如硅胶键合－NH2、－CN，-Diol（二醇基）silica、florisil、(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等．②原理：分析物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间的相互作用。
③作用机理：极性-极性、偶极-偶极、偶极-诱导偶极、氢键，π-π键等。
④流动相：非极性、中等极性⑤固定相：极性。
⑥分析物质：极性、中等极性、非极性⑦应用：从非极性溶剂样品中萃取极性化合物。
⑧常用正相固相萃取柱极性官能团键合硅胶-CN，-NH2，-Diol极性吸附物质ProElut TM-Silica，ProElutTM-Florisi ProElutTM-Alumina2、反相SPE用非极性溶剂解吸吸附在固定相中的目标物质。
①吸附剂（固定相）：非极性或弱极性，如硅胶键合C18,C8, C4,C2,-苯基等。
②分析物中的CH键+ 硅胶表面官能团→吸附→极性溶液中的弱有机分析物→保留在SPE。
③作用机理：非极性-非极性相互作用，如范德华力或色散力。
④流动相：极性（水溶液）或中等极性⑤固定相：非极性⑥分离对象：中等到非极性物质⑦应用：强极性的溶剂中（如水样）萃取是非极性或弱极性的化合物。
固相萃取柱使用方法
固相萃取柱使用方法
固相萃取柱是一种常用的分离和富集化合物的方法，适用于样品中含有多种化合物时，需要提取目标化合物的情况。
以下是固相萃取柱的使用方法：
1. 准备工作
准备好所需的固相萃取柱、样品、溶剂和吸附剂等。
在使用前检查固相萃取柱是否干燥，如有湿气应先进行干燥处理。
2. 样品制备
将待提取的样品制备好，根据需要选择适当的溶剂进行稀释或溶解。
注意避免使用过多或过少的溶剂，以免影响提取效果。
3. 固相萃取柱处理
将固相萃取柱插入支架中，并用少量纯水或适当溶液进行预洗。
然后将待处理样品通过固相萃取柱，并收集流出液。
4. 洗脱
待所有样品经过后，用洗脱液对固相萃取柱进行洗脱操作。
根据需要选择不同的洗脱液，如纯水、酸性或碱性溶液等。
5. 浓缩和转移
将洗脱液浓缩至适当体积，并用适当的溶剂转移到需要的容器中。
注意避免过度浓缩或使用不适当的溶剂，以免影响后续分析结果。
6. 分析
将转移后的样品进行分析，如色谱、质谱等方法。
根据需要选择适当的仪器和方法进行分析，并记录结果。
以上是固相萃取柱使用方法的详细步骤。
在使用过程中应注意安全和正确操作，以获得准确可靠的结果。
固相微萃取(SPME)技术
酚类
酚类不仅是医药、染料、化工的中间体，而且还可 作杀虫剂和农药，如五氯酚是木材的防腐剂，饮用水氯 化处理产生卤代酚等。由于酚类化合物毒性较大，美国 EPA已将11种酚类化合物列入优先监测的有机污染物。 采用固相萃取（SPE）水中ng级的酚类化合物，结合 HPLC/紫外检测器分析，无需衍生化即可使苯酚等11种 酚类化合物获得良好的分离。
C8、氰基、苯基、双纯基填料、活性碳、硅胶、 氧化铝、硅酸镁、高分子聚合物、离子交换树脂、排 阻色谱吸附剂、亲和色谱吸附剂等。
★常用洗脱溶剂有：甲醇、水、乙酸、丙醇、异 丁醇、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、苯、甲苯、 四氯化碳、环己烷、正己烷等。
4、 SPE的操作步骤及方法的建立：
SPE操作步骤包括有柱预处理、加样、洗去干扰物和 回收分析物四个步骤。
（1）柱预处理
以反相C18SPE柱的预处理为例。先使数毫升的甲醇通 过萃取柱，再用水或缓冲溶液顶替滞留在柱中的甲醇。柱 预处理有两个目的：
★除去填料中可能存在的杂质；
★使填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。
填料未经预处理或未被溶剂润湿，能引起溶质过早穿 透，影响回收率。
（2）加样
预处理后，试样溶液被加至并通过SPE柱，在该步骤， 分析物被保留在吸附剂上。
例3. 固相萃取技术在水体有机物分析中的应用（董玉瑛
等，环境科学进展，1999，7（4）：84-90）分析。
1、实验方法：用甲醇活化了的SPE(C18 ) 柱富集1L 水 样中PCOCs (控制流速在1L/h) ,提取结束时将柱用氮气 吹干后,分别以二氯甲烷、二氯甲烷：正己烷(1：1) 各 5ml 进行洗脱(控制流速2ml/min) ,洗脱液经无水硫酸钠 脱水后,进行旋转蒸发,浓缩约至0. 5ml 时,加入150μl 壬 烷,再继续旋转蒸发浓缩约至200μl ,改用N2 缓慢吹至 100μl 左右。加入含有五氯甲苯(PCT) 和十氯联苯(DCB) 两种内标物的混合液10μl (浓度为:10ng/μl) ,充分均匀后, 转入小样品瓶中,进行GC 分析。
固相萃取原理
固相萃取原理
固相萃取是一种常用的分离和富集技术，用于从复杂的样品中提取目标分析物。
其原理基于分析物与固定相之间的选择性相互作用。
固相萃取通常涉及四个步骤：样品预处理、装填固定相、洗脱和分析。
在样品预处理阶段，需要将样品准备成适合固相萃取的形式。
例如，可以通过固相萃取柱来分离固体样品中的目标分析物，或者将液体样品净化和富集。
装填固定相是固相萃取的关键步骤。
固定相通常是一种多孔性固体材料，如硅胶或气相色谱柱中的填料。
固定相具有一定的亲水性或疏水性，并对不同的分析物呈现不同的选择性。
样品被通过流动相传递到装有固定相的柱中，固定相与目标分析物之间的相互作用会使目标分析物在柱上被富集。
在洗脱步骤中，可以使用一种或多种溶剂来使被富集的目标分析物从固定相中脱附。
洗脱溶剂的选择通常基于目标分析物与固定相之间的相互作用强度，以及目标分析物的溶解度和稳定性。
最后，富集得到的洗脱溶液经过进一步的处理和分析，可以使用各种分析方法来测定目标分析物的浓度或性质。
固相萃取具有选择性高、灵敏度好、操作简捷等优点，被广泛应用于环境、食品、药物、生物和化学等领域的样品前处理和分析过程中。
固相萃取的概念、步骤和操作
固相萃取的概念、步骤和操作概念：利用固体吸附剂将样品中的目标分析物吸附，与样品的基质和干扰物分离，然后再用有机溶剂或加热解吸附，达到分离、纯化及浓缩目标物的目的。
固相萃取（SPE）是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离和富集的目的。
先使液体样品通过一装有吸附剂（固相）小柱，保留其中某些组分，再选用适当的溶剂冲洗杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
SPE可以用于所有类型样品的处理，但是液体样品是最容易处理的与液液萃取(LLE)相比，固相萃取具有如下优点：①回收率和富集倍数高；②有机溶剂消耗量低，减少对环境的污染；③更有效的将分析物与干扰组分分离；④无相分离操作过程，容易收集分析物；⑤能处理小体积试样；⑥操作简便、快速，费用低，易于实现自动化及与其他分析仪器联用。
固相萃取的基本原理：吸附剂上的活性部分对目标物和样品基质的分子作用力存在差异固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。
洗脱模式：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的洗脱。
通常采用前一种洗脱方式。
一、固相萃取的分离模式：反相固相萃取、正相固相萃取、离子交换萃取、免疫亲和1、反相固相萃取：吸附剂（固定相）是非极性或弱极性的，如硅胶键合C18, C8, C4，C2,-苯基等。
流动相为极性（水溶液）或中等极性样品基质。
吸附剂的极性小于洗脱液的极性。
应用：可以从强极性的溶剂中（如水样）萃取非极性或弱极性的化合物。
作用机理：非极性-非极性相互作用（疏水作用），如范德华力或色散力。
例如水中PAHs，利用C18柱，甲醇洗脱剂洗脱。
2、正相固相萃取：（1）吸附剂：极性键合相，如硅胶键合氨基－NH2、氰基－CN，-Diol（二醇基）；（2）极性吸附剂，如silica、Florisil、(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等。
固相微萃取技术
固相萃取的分类
• 按照操作的不同,固相萃取可分为离线萃 取和在线萃取。
• 离线萃取是指萃取过程完成后再使用一 些分析手段进行分析;在线萃取出现于 80年代,萃取和分析同步完成,可靠性、 重现性、以及操作性能和工作效率都得 到很大程度的提高。
四、固相萃取的操作步骤
• 典型的固相萃取一般分为四个基本步骤： 1、吸附剂的选择 • 目标物的最佳保留（即最佳吸附）取决于目标 物极性与吸附剂极性的相似程度，两者极性越 相似，则保留越好（即吸附越好）。 • 选择固相萃取中的固定相吸附剂时，要尽量选 择与目标物极性和样品溶剂极性相似的吸附剂。 • 当目标物极性适中时，正、反相固相萃取都可 使用。 • 吸附剂的选择还受样品溶剂洗脱强度的制约。
SPME 萃取头的选择依据
固定相的处理
• 固相微萃取中的关键部位是石英纤维固 定相, 靠它来对分析组分吸附和解吸, 如 果曾用过但上面的组分未被解吸掉则会 对以后的分析结果有干扰。每次使用前 必须将其插入气相色谱进样器, 在250℃ 左右置1h 以去除上面吸附的干扰物, 如 果曾分析过衍生化组分则需要放置更长 时间。
反相固相萃取
• 反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合 物通常是非极性的或较弱极性的，反相 萃取过程中目标物质的碳氢键与吸附剂 表面官能团产生非极性作用(包括范德华 力或色散力),使得极性溶剂中的非极性 以及弱极性的物质在吸附剂表面吸附、 富集。
离子交换固相萃取
• 离子交换固相萃取又可分为强阳离子固 相萃取和强阴离子固相萃取两种,作用机 理都是目标物质的带电荷基团同吸附剂 表面的带电基团发生离子静电吸引,从而 实现吸附分离。
固相微萃取的装置
SPME装置略似进样器,典型的SPME装置见右图。特制 不锈钢穿透针A为中空结构，纤维固定针B和萃取纤维C 能在其中移动，熔融石英纤维C上面涂布用于萃取的固 定相，柱塞D控制固定针B的移动使纤维C伸出或退回穿 透针中。当纤维暴露在样品中时，涂层可从液态-气态 基质中吸附萃取待测物。吸附完毕后，萃取纤维C退回 到穿透针中被保护起来，己富集了待测物的纤维可直接 转移到仪器(气相色谱仪，液相色谱仪等)进样口，通过 仪器进样口的能量解吸附，然后进行分离分析。
固相萃取技术
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方法建立
固相萃取技术
1.选择SPE小柱或滤膜 首先应根据待测物的理化性质和样品基质,选择对待测物有较强保留能力的固定相。 若待测物带负电荷,可用阴离子交换填料,反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物,可用反相填料萃取。SPE小 柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的体内样品,一般应选用尽量少的固定相 填料萃取较大体积的样品。
固相萃取技术
化学术语
01 内容简介
03 分类 05 方法建立
目录
02 原理 04 简要过程
固相萃取（Solid Phase Extraction）就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基 体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取作为样 品前处理技术，在实验室中得到了越来越广泛的应用。
内容简介
它利用分析物在不同介质中被吸附的能力差将标的物提纯，有效的将标的物与干扰组分分离，大大增强对分 析物特别是痕量分析物的检出能力，提高了被测样品的回收率。SPE技术自上世纪70年代后期问世以来，发展迅 速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域。
原理
固相萃取装置
在过去的二十多年中，固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。从痕量样品的前处理到工业 规模的化学分离，吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越 重要的作用。
固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中，固相对分离物的吸附力比溶解分离物的溶 剂更大。当样品溶液通过吸附剂床时，分离物浓缩在其表面，其他样品成分通过吸附剂床；通过只吸附分离物而 不吸附其他样品成分的吸附剂，可以得到高纯度和浓缩的分离物。
固相萃取法步骤
固相萃取法步骤嘿，朋友们！今天咱来聊聊固相萃取法的那些步骤呀！固相萃取法，就像是一场奇妙的化学冒险之旅呢！先来说说准备工作吧，就好比你要出门旅行得先收拾好行李一样。
得把要用的固相萃取柱准备好，这可是这场冒险的关键道具哦！然后再把样品溶液准备好，就像是给旅行准备好充足的食物和水。
接下来呢，活化柱子啦！这就好像给柱子洗个舒服的澡，让它精神饱满地迎接挑战。
把适当的溶剂通过柱子，让它变得活力四射。
然后呀，上样！把样品溶液慢慢地倒进去，就像小心翼翼地把宝贝放进保险箱一样。
这时候可不能着急，得慢慢来，让样品和柱子好好地亲密接触一下。
再之后呢，就是洗涤啦！把那些不需要的杂质给洗掉，就像是给柱子做个大扫除，把那些不速之客都赶跑。
最后，就是洗脱啦！这可是最关键的一步哦，就像打开宝藏的钥匙一样。
用合适的溶剂把我们想要的东西洗脱下来，然后就可以开心地收获啦！你想想看，这固相萃取法是不是很有趣呀？就像一场精心设计的游戏，每一步都很重要，都不能马虎。
要是哪一步没做好，可能就得不到想要的结果啦，那不就白忙活一场啦！所以呀，一定要认真对待每一个步骤哦！在做的过程中，可别小瞧了这些细节呀。
就跟搭积木一样，一块一块地搭好，才能建成漂亮的城堡。
固相萃取法也是这样，一步一步地做好，才能得到准确可靠的结果。
而且哦，做实验的时候可要有耐心呀！不能着急忙慌的，得静下心来，慢慢地去感受每一个步骤。
这就跟钓鱼一样，得有耐心等鱼儿上钩呢！总之呢，固相萃取法虽然听起来有点复杂，但只要我们认真去学，认真去做，就一定能掌握好它。
相信自己，我们一定能在这场化学冒险中取得胜利！加油吧！原创不易，请尊重原创，谢谢!。
固相萃取分离原理介绍
固相萃取分离原理介绍固相萃取是一种常用的分离技术，特别适用于不同化学物质的分离和提纯。
本篇文档将介绍固相萃取的基本原理、分类、操作步骤、优点和应用领域。
基本原理固相萃取是基于化学物质在不同介质中吸附性的差异，通过将待提取物质溶于一个合适的溶剂中，然后经过一段特制的固相材料，将目标物质从混合物中分离出来的方法。
固相材料一般是一种多孔微粒，如吸附树脂、氧化铁、硅胶等，能够吸附化合物、离子、生物分子、蛋白质等。
分类根据固相材料不同，固相萃取可分为：正相固相萃取、反相固相萃取和离子固相萃取。
•正相固相萃取：选择正相固相材料，用极性溶剂洗脱，可以吸附非极性分子，如芳香族化合物、类固醇、地下水污染物等。
•反相固相萃取：选择反相固相材料，用非极性溶剂或饱和溶剂洗脱，能够吸附极性物质，如卤代烃、农药等。
•离子固相萃取：利用正、负离子之间的静电作用力，吸附分离带电物质，例如离子色谱中的固定相。
操作步骤1.选择固相材料：根据待分离物质的性质和样品的性质（如酸碱性、溶解度等）选定合适的固相材料。
2.样品预处理：将待分离的复杂体系处理，如甲醇、水、酸、碱处理等，达到考察样品的条件。
3.样品带入：将预处理好的样品带入固相材料中，让物质发生吸附作用。
4.洗脱：用合适的洗脱剂去洗脱已吸附的物质，洗出的物质可由其他方法进行分析鉴定。
5.净化：将洗脱剂自然蒸发或吹干，得到净化后的目标物。
优点1.快速：固相萃取方法操作简单、快速，具有较高的处理样品能力，特别适用于复杂混合物的处理。
2.灵敏：操作过程中不需要提纯操作，可以有效降低误差，灵敏度高，特别适用于微量分离和测定。
3.选择性：根据固相材料的不同，可以选择性地吸附不同的物质。
4.经济：固相萃取的材料成本低，操作方便，可以有效减少对大量有机溶剂的需求。
应用领域固相萃取可用于食品、环境、医药等领域的分离和提纯，可以用于生物样品前处理、药物毒性研究、药物代谢产物的研究等。
另外，固相萃取也是现代色谱技术中的必要步骤，可用于样品预处理、提纯和浓缩等领域。
固相萃取(SPE)技术的介绍和实际应用
Increasing polarity NON-POLAR PHASES C18 C2 CH PH Octadecyl Ethyl Cyclohexyl Phenyl POLAR PHASES CN 2OH NH2 SI Cyanopropyl Diol Aminopropyl Silica
SPE柱子类型的选择
1、Reversed-phase bonded silica sorbents having alkyl groups such as octadecyl (C18, C18), octyl (C8, C8), or ethyl (C2, C2) covalently bonded to the silica gel backbone or cyclohexyl (CH) or phenyl groups and sorbents composed of polymeric resins such as polystyrene–divinylbenzeneinteract primarily with analytes via van der Waals forces. 2、Nonionic watersoluble compounds can be retained by reversed-phase sorbents but may not be as well retained as analytes that are soluble in methanol or methanol–water miscible mixtures. 3、Normal-phase polar sorbents, such as silica, alumina, and Florisil, and cyano (CN) bonded phases interact by polar-dipole/dipole forces between polar functional groups in the analyte and the polar surface of the sorbent. 4、Amino (NH2) and diol sorbents interact with analytes by hydrogen bonding. 5、Hexane-soluble analytes are best retained by normalphase sorbents such as silica or Florisil or polar functionally substituted bonded phases such as amino or diol. 6、Strong cation-exchange (SCX) and strong anion-exchange (SAX) sorbents interact primarily through electrostatic attractions between the sorbent and the analyte. 7、Graphitized carbon sorbents exhibit both nonspecific van der Waals interactions and anionexchange, or electrostatic, attraction for analytes.
维生素的提取分离纯化方法 -回复
维生素的提取分离纯化方法-回复维生素是维持人体正常生理功能所必需的有机物质，通常以微量存在于食物中。
为了满足人体对维生素的需求，科学家们致力于开发出高效的维生素提取分离纯化方法。
本文将介绍目前常用的维生素提取分离纯化方法，并逐步解释其原理和步骤。
一、液液萃取法液液萃取法是一种常用的维生素提取分离方法。
该方法的基本原理是利用维生素与某一有机溶剂的相溶性差异，在两相溶液中进行分离。
以下是液液萃取法的步骤：1. 样品制备：将富含维生素的食物样品加入适当的溶剂中，使维生素溶解在溶剂中。
2. 搅拌和震荡：通过搅拌和震荡，将样品中的维生素充分与溶剂混合。
3. 分离两相溶液：将搅拌后的样品经离心或静置，使其分为两个相（有机相和水相），维生素通常偏向有机相。
4. 分离目标成分：将有机相和水相分离，并分别收集。
5. 溶剂蒸发：对收集到的有机相进行溶剂的蒸发，以得到纯净的维生素。
液液萃取法适用于某些特定维生素的提取，如维生素E的提取常采用醚类溶剂。
然而，该方法需要大量有机溶剂，且操作过程中有毒有害物质的使用和处理，因此在实际生产中运用较少。
二、固相萃取法固相萃取法是一种常见的维生素提取分离方法。
与液液萃取法类似，该方法利用了维生素与某种固定相间的相互作用，实现提取和分离。
以下是固相萃取法的步骤：1. 样品制备：将富含维生素的食物样品加入适当溶剂中，并进行必要的前处理，如加热、酶解等。
2. 短柱填充：将某种多孔负荷固相材料的短柱装入固定装置，保持横截面的均匀性。
3. 样品进样：将样品溶液以一定的速率通过短柱，维生素与固相材料发生相互作用。
4. 洗脱：通过洗脱溶剂冲洗短柱，将固相材料上的维生素洗脱出来。
5. 浓缩和干燥：将洗脱液进行浓缩和干燥，得到纯净的维生素。
固相萃取法相对于液液萃取法而言，具有操作简便、溶剂消耗少、环境友好等优点。
但由于固相材料的种类繁多，选择合适的固相材料对提取效果有重要影响。
三、柱层析法柱层析法是一种广泛应用于维生素提取分离纯化的方法。
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固相萃取的四个步骤
1. 柱子预处理conditioning（固定相活化）（Column solvation/pre-equilibration）
活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并去除柱内所有杂质。
通常需要两种溶剂来完成上述任务，第一个溶剂（初溶剂）用于净化固定相，另一个溶剂（终溶剂）用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。
每一活化溶剂用量约为1－2ml/100mg 固定相。
终溶剂不应强于样品溶剂，若使用太强的溶剂，将降低回收率。
通常采用一个弱于样品溶液的溶剂不会有什么问题。
值得注意的是，在活化的过程中和结束时，固定相都不能抽干，因为这将导致填料床出现裂缝，从而得到低的回收率和重现性，样品也没得到应有的净化。
如果在活化步骤中出现干裂，所有活化步骤都得重复。
2. 上样load sample(Apply sample)
上样步骤指样品加入到固相萃取柱并迫使样品溶剂通过固定相的过程，这时分析物和一批样品干扰物保留在固定相上。
为了保留分析物，溶解样品的溶剂必须较弱。
如果溶剂太强，分析物将不被保留，结果回收率将会很低，这一现象叫穿漏（breakthrough）。
尽可能使用最弱的样品溶剂，可以使溶质得到最强的保留或者说最窄的谱带。
只要不出现穿漏，允许采用大体积的上样量（0.5-1L）。
有时候固体样品必须用一个很强的溶剂进行萃取，这样的萃取液是不能直接上样的。
所以萃取液要用一个弱溶剂稀释以得到一个合适的溶剂总强度进行上样。
例如一个土壤样品，采用50％甲醇萃取，得到2ml萃取液，用8ml水稀释，得到10％的甲醇溶液，这样就可以直接上反相固相萃取柱而不存在穿漏问题。
3. 淋洗Rinse(Interference elution)
分析物得到保留后，通常需要淋洗固定相以洗掉不需要的样品组分，淋洗溶剂的洗脱强度是略强于或等于上样溶剂。
淋洗溶剂必须尽量地弱以洗调尽量多的干扰组分，但不能强到可以洗脱任何一个分析物的程度。
溶剂体积可为0.5-0.8ml/100mg 固定相。
淋洗时不宜使用太强溶剂，太强溶剂会将强保留杂质洗下来。
使用太弱溶剂，会使淋洗体积加大。
可改为强、弱溶剂混用；但混用或前后使用的溶剂必须互溶。
4. 洗脱Analyte Elution
淋洗过后，将分析物从固定相上洗脱，洗脱溶剂用量一般为0.5-0.8ml/100mg固定相。
而溶剂必须进行认真选择，溶剂太强，一些更强保留的不必要组分将被洗出来；溶剂太弱．就需要更多的洗脱液来洗出。