宠物传染病生物制品

②流行特点：主要感染犬和狐狸，可发生于任何季节，无 年龄和品种差异。该病常见于 1岁以内的幼犬，刚断奶的小 犬最易发病，幼犬病死率高达 25~40% 。幼犬患病时，常于 1~2 天内突然死亡，如耐过 48 小时，多能康复。成年犬多能 耐过，产生坚强的免疫力。
③、临床症状和病理变化特征：
表现为高热稽留、贫血、血液不易凝结而出 血不止，肝小叶中心坏死，肝实质和内皮细胞出 现核内包涵体，康复犬的一眼或两眼呈暂时性角 膜色素炎症称肝炎性蓝眼病。康复犬长期带毒， 并获得免疫力。
二、疫苗和免疫：
（一）疫苗：目前用于预防犬细小病毒病的疫苗 主要有 CPV 灭活疫苗、 CPV 弱毒疫苗 ( 犬细小病 毒-犬钩端螺旋体二联疫苗、犬瘟热-CPV-犬传染 性肝炎-副流感-犬钩端螺旋体五联疫苗、狂犬病犬瘟热 -CPV- 犬肝炎 - 副流感 - 犬钩端螺旋体六联 疫苗)。
1、CPV细胞培养灭活疫苗：
2、病原：ICHV。
①分类地位及形态结构特征：该病毒属于腺病毒科哺乳动 物腺病毒属犬腺病毒Ⅰ型病毒（CAV-I），核酸为双股 DNA，球形，正20面体对称，大小直径80~100nm，无囊膜， 衣壳顶角上有1根纤丝向外突出，长约20~50nm。该病毒与 引起犬传染性支气管炎（犬窝咳）的犬腺病毒Ⅱ型（CAVⅡ）具有共同的抗原决定簇，但在毒力、抗原结构和致病 性等方面都不同，两者具有70%的相同基因，所以在免疫 上能交叉保护。
1、分类地位及形态结构特征：该病毒属于副粘病毒科副 粘病毒亚科麻疹病毒属。病毒核酸为单股RNA，病毒粒子 外观呈球形，大小直径150-200nm。核衣壳呈螺旋状立体 对称。有囊膜，37℃时有的毒株可以凝集鸡的红细胞， 只有一个血清型。 2、生长繁殖特征：适应鸡成纤维细胞的犬瘟热病毒在鸡 胚上传100代后不致病可做疫苗。该病毒在犬、雪貂、犊 牛肾、脾、肺、睾丸等细胞上都可生长，在乳地鼠和乳 小鼠脑内可传代，也可用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞株） 培养。
①安全检验：选择15g左右健康小鼠10只，5只脑内接种 0.03ml，5只腹腔接种0.5ml，观察7d应无异常反应；也 可选择敏感犬5只，3只皮下接种5.0ml，2只作对照，观 察21d无异常反应。 ②效力检验：取免疫犬3只和对照犬2只，用强毒攻击， 观察14d，免疫犬应健活，对照犬出现严重症状至少1只 死亡。
（3）疫苗检验：疫苗病毒毒价应达10-3.5/ml以上，安 全检验时用16～18g小鼠4只，每只腹腔接种0.2ml；另 用250～300g豚鼠2只腹腔接种0.5ml，观察10d应健活。 （4）保存与使用：冻干疫苗2～7℃保存，有效期2年。 使用时，每只犬皮下或肌肉注射1ml，间隔2～3周加强 免疫一次，保护期1年。
2、异源灭活疫苗：
(1)种毒：猫泛白细胞减少症病毒 FNF8 毒株，由病死猫分 离并鉴定，TCID5010-5.5/ml。
(2)制苗：种毒稀释后接种CRFK （猫肾细胞株）单层细 胞。37℃培养72~96h，当细胞出现80%以上CPE时收获 病毒。冻融3次，3000r/min离心20min，取上清，除去细 胞碎片。用BEI（二乙烯亚胺）灭活病毒。加5%氢氧化 铝胶混合，制成CPV异源灭活疫苗。
③特征性病变： 表现为出血性肠炎和心肌炎。3~4周龄犬感染 后以心肌炎为主，8~10周龄犬感染后以肠炎为 主，先呕吐，后腹泻，拉出灰黄色或番茄酱样 稀粪发出难闻的特殊腥臭味。
2、病原：CPV。
该病毒属于细小病毒科细小病毒属。病毒核酸 为单股 DNA ，病毒粒子大小直径 20-22nm ，病毒粒 子外观呈足球形，蛋白质衣壳为 20面体立体对称 ， 无囊膜。该病毒在4℃和25℃能凝集猪和恒河猴的 红细胞，但不能凝集其它动物的红细胞。可在犬 肾、猫肾细胞上增殖并产生CPE。
（3）疫苗检验：一次免疫后10~15dHI抗体效价在 1:40以上，2次免疫后效价可达1:80以上，并能经 受强毒口服的攻击。 （4）保存与使用：于4℃保存，有效期1年。6周 龄和14周龄犬分别免疫接种一次，每次皮下注射 2~3ml，间隔3~4周。妊娠犬产前20d注射一次，可 获得良好的免疫效果。
（3）使用方法：每只犬皮下接种5ml，间隔2-3周加强免 疫一次，免疫保护期3-6个月。
（二）免疫程序：
1、犬瘟热鸡胚弱毒冻干苗： 首免：9周龄刚断奶犬注射一针。 二免：15周龄加强免疫一次。
免疫期一年，以后每年加强免疫一次。
2、犬六联或七联苗： 首免：断奶（45-60日龄）幼犬注射1头份。 二免：首免后15天再注射1头份。 三免：二免后15天再注射1头份。 免疫期一年，以后每年免疫一次两针（首免 1 头份， 15 天 后二免1头份）。
（3）保存与使用：
于4℃保存，有效期1年。体重3kg以下犬皮下 接种3ml，3kg以上犬皮下接种5ml，免疫保护期 6个月。
2、细胞培养灭活疫苗：制苗过程：
(1)种毒：用CAV-I强毒株。 (2)制苗：毒种稀释后接种MDCK（犬肾传代细胞株）单层 细胞，37℃吸附30min，加入EME维持液，继续培养48~72h， 出现 80% 以上 CPE 时收获病毒， TCID50≥10-6.0/ml 。冻融 3 次， 3000r/min离心20min取上清，加入0.2%~0.3%甲醛37℃灭活 24h。灭活后进行无菌检验，合格后加入5%~7%的氢氧化铝 胶，即成犬传染性肝炎细胞培养灭活疫苗。
②、生长繁殖特征：该病毒能在犬、猴、猪、 豚鼠和水貂等肾、肺原代细胞中增殖，易形成 蚀斑和核内包涵体。通过细胞传代可导致毒力 减弱。 ③、凝集特征：能凝集人O型、鸡、豚鼠红细 胞，但不能凝集犬红细胞。
二、疫苗和免疫：
（一）疫苗：用于预防犬传染性肝炎的疫苗有灭活疫苗和 弱毒疫苗。
1、组织灭活疫苗：
3、CPV细胞培养活疫苗：
(1)种毒：CPV-780916弱毒株，为CPV强毒株在犬肾原代 细胞上传代80~115代，经筛选获得的适应弱毒。 (2)制苗：疫苗用犬肾原代细胞或MDCK细胞（犬肾细胞株） 生产病毒，加保护剂冻干而成。疫苗安全有效，免疫接种 后4d即可产生高滴度的HI抗体。 (3)保存与使用：疫苗于﹣15℃保存，保存期1年，皮下注 射1ml，免疫2次，间隔时间2~3周，妊娠犬产前20d免疫一 次，免疫期1年。
（3）疫苗检验：
①常规检验：进行无菌检验，应无菌生长。
②安全检验：选1~2月龄未经免疫健康犬3只，其 CAV-I抗体效价小于 1:4，每只皮下注射疫苗 2ml， 在 1 周内应无体温升高、白细胞减少及注射部位红 肿等不良反应。
（4）保存与使用：
在4~8℃保存期1年。妊娠犬产前20d免疫，仔犬在7 周龄和9周龄各免疫1次，皮下或肌肉注射1ml/只。
(1)种毒：为CAV-I标准毒株，也可选择经分离鉴定的犬传 染性肝炎病毒强毒株。种毒稀释后，静脉接种易感犬，发 病后出现典型临床症状时，捕杀，无菌采取肝、脾组织， 用高速组织捣碎机捣碎，用PBS制成20%悬液，加入 0.1%~0.2%甲醛，37℃灭活24h，制成组织灭活疫苗。
(2)疫苗检验：按常规进行。
(1)种毒：CPV-GN毒株。 (2) 制苗：用 CPV-GN 种毒接种 CRFK （猫肾细胞株）细胞， 37℃ 培 养 24h 形 成 单 层 后 换 入 维 持 液 ， 37℃ 继 续 培 养 72~96h ，待 CPE 达 80% 以上时 (HA≥1:1024) ，收获病毒， 冻融 3 次， 3000r/min 离心 15min ，取上清，除去细胞碎片 , 上 清 加 入 终 浓 度 0.25% 甲 醛 ， 37℃ 持 续 搅 拌 24h ， HA≥1:512 ，再加入 7%~8% 氢氧化铝胶混匀即成 CPV 灭活 疫苗。
3、主要症状：
①呼吸道症状：表现为支气管炎、卡他性肺炎、咳嗽、气 喘、呼吸困难。 ②神经症状：表现为癫痫、转圈、共济失调、肌肉强直痉 挛等。
③消化道症状：严重病犬腹泻水样粪便，恶臭，混有血液。 ④特征性症状：双相热型，少数病犬的鼻和足垫可发生角 质化过度。
犬瘟热足掌角质化
犬瘟热全身抽搐
（二）、病原：CDV，只有一个血清型。
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第一节 犬瘟热（CD）
一、病况与病原概述：
（一）、病况： 1、概念：犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬和肉食目中许 多动物的一种热性高度接触性传染病。 2、流行特点：主要感染犬和水貂，幼犬和幼貂感染死亡 率高达30-80%。该病不同年龄、性别和品种的犬都可感染， 但2月龄以内的仔犬由于受母源抗体的保护，80%不受感染， 3-12月龄的幼犬易感性最高，2岁以上的犬发病率逐渐降 低。犬瘟热病康复犬可获终身免疫力。
3、犬传染性肝炎活疫苗：
种毒选用已适应犬肾原代细胞的CAV-I弱毒株。将种毒 稀释后接种MDCK（犬肾传代细胞株）细胞，37℃吸附 30min，加入MEM维持液，培养至CPE达85%以上时收获 病毒，冻融3次后，离心除去细胞碎片，加入5%蔗糖脱脂 乳保护剂，冻干制成冻干疫苗。效力检验，可取疫苗稀释 后做TCID50测定，TCID50≥10-4.0/ml。
纤维细胞增殖病毒，制成弱毒疫苗。用以免疫犬和水 貂，安全有效。欧美国家广泛用于水貂犬瘟热的预防。
我国用于配制犬的六联疫苗或七联疫苗，广泛用于预
防犬的犬瘟热。
制苗过程如下：
（1）毒种：低温保存的毒种使用前经鸡胚成纤维细胞培 养传2~3代。脑内接种1~2日龄小白鼠，最小发病量不低于 10-3/0.03ml。15~20g小鼠脑内接种0.03 ml或皮下注射0.5 ml，观察10d无异常反应为合格。 （2）制苗：取9~11日龄SPF鸡胚制备鸡成纤维细胞，待细 胞长成单层后按2.5%~3%比例将种毒接入维持液，37℃恒 温培养。接毒后3~5d出现细胞肿大、聚集如星芒状、拉网 变圆，脱落，当CPE达85%以上时，收获培养物，反复冻 融3次，加入抗生素即成弱毒疫苗原液。加5%蔗糖脱脂乳 冻干成冻干疫苗。
第二节 犬细小病毒病（CPD）
一、病况与病原概述：
1、病况： ①概念：该病又称犬传染性肠炎（拉稀呈番茄酱样发出特殊 腥臭味）。是由犬细小病毒（CPV）引起的一种急性接触性 致死性传染病。 ②流行特点：多发生于幼犬，病死率10~50%。小于4周龄的 仔犬和大于5岁的老犬发病率低，一般分别为2%和16%。