分子病毒及生物制药实验室一整套操作规程汇编
分子试验室的操作流程
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准备所需的试剂、耗材和仪器设备。
生物安全实验室操作规程
生物安全实验室操作规程1.个人防护：1.1进入实验室前，必须佩戴个人防护装备，包括实验外套、眼镜、手套、口罩等。
根据实验的具体要求佩戴相应的防护用具。
1.2在实验室工作期间，不得吃、喝、吸烟或化妆。
使用化学品和生物制品时，要避免直接接触皮肤或进入眼睛。
1.3在完成实验后，应将个人防护装备以及实验被污染的衣物和器材彻底清洁和消毒。
2.实验室操作：2.1在进行任何实验前，必须事先详细阅读实验方案，并确保理解和掌握相关操作要点。
2.2根据实验要求，准备所需的试剂和器材，并确保其在有效期限内。
2.3使用实验室设备时，必须遵循操作手册中的操作步骤，谨慎操作并避免可能存在的风险。
2.4操作过程中，要注意避免发生实验室意外事故，如溅入眼、皮肤或吸入可燃、有毒或有害物质等。
2.5在进行细菌培养或病毒研究时，必须遵循无菌操作和严格隔离措施，并确保实验台面和仪器设备的清洁和消毒。
2.6在实验结束后，必须将实验台面、仪器设备和试剂清理干净，并妥善处理实验废弃物。
3.实验室安全：3.1实验室内应设置明显的安全警示标识，并确保实验室环境卫生、通风良好，并保证安全出口畅通。
3.2在进行高度危险的实验时，应有专门的安全防护装置和设备，如生物安全柜、抗辐射眼镜等。
3.3定期检查实验室设备和安全设施的工作状态，并及时修复或更换出现问题的部件。
3.4建立实验室应急预案，对紧急情况进行及时、有效的应对，并进行定期演练以确保实验室安全。
4.实验结果与数据：4.1在进行实验前，应确定实验记录表的格式和内容，并按照规定的方法和时间记录实验过程和结果。
4.2对实验结果和数据要进行详细的分析和整理，确保数据的准确性和可靠性。
4.3在编写实验报告和论文时，必须遵守科学研究的伦理规范，不得歪曲实验结果或剽窃他人成果。
5.实验废弃物处理：5.1实验过程中产生的废弃物，包括生物制品、化学废液和实验纸巾等，必须按照相关规定进行分类和妥善处理。
5.2包装并储存废弃物时，必须采取防漏、避光和防腐蚀等措施，确保废弃物不对环境和人员产生威胁。
生物实验室操作规程
生物实验室操作规程一、实验室准备工作1.1 实验室环境准备生物实验室应保持整洁，避免灰尘和杂物的积累。
所有工作台、操作区域和仪器设备应定期清洁和消毒，以确保实验的可靠性和安全性。
实验室应保持适宜的温湿度，并配备规范垃圾处理设施。
1.2 安全措施生物实验室操作需遵循严格的安全规范。
在进行实验前，所有操作人员必须穿戴个人防护装备，如实验服、手套、护目镜和口罩等。
实验室应配备必要的安全设施，如应急淋浴、安全柜和气体检测报警装置等，以便处理突发情况。
1.3 试剂与材料准备在进行生物实验前，必须充分准备所需的试剂和材料，并确保其质量符合要求。
试剂的存放应严格按照要求进行，在使用过程中应避免直接接触皮肤和吸入有毒气体，防止导致身体伤害。
二、实验操作步骤2.1 校准与准备仪器在进行生物实验前，必须校准所使用的仪器设备，以确保其精度和可靠性。
校准应严格按照仪器使用说明进行，并记录下校准结果。
使用仪器前需检查其工作状态和安全性能，确保所有连接、电源和传感器等都正常运行。
2.2 生物实验前的操作准备在进行实验前，必须清洗操作台面、试管架和实验仪器，并进行消毒处理。
确保所有操作材料和试剂已准备就绪，按照实验流程进行分装和标识，避免交叉感染和误用。
实验人员应事先阅读实验操作手册，并了解实验所需的生物安全等级级别，采取相应的防护措施。
2.3 实验操作步骤在进行实验操作时，必须按照实验操作手册的要求进行，严格控制时间、温度、PH值和试剂用量等。
实验过程中，应注意观察实验现象的变化，并按照要求准确记录实验数据。
实验操作结束后，必须彻底清洁和消毒操作台面、试管架和仪器设备等。
三、实验安全与废弃物处理3.1 实验安全控制在进行生物实验时，要严格控制实验操作的风险，并按照实验室安全规程进行操作。
实验人员应经常检查和维护实验设备的安全性能，并确保自身健康和个人防护装备的完好。
所有不熟悉实验操作的人员都不得进入实验室。
3.2 废弃物处理实验室产生的废弃物必须按照相关规定妥善处理。
分子生物学实验室安全操作规范
分子生物学实验室安全操作规范分子生物学实验室是进行生物大分子制备和分析常用技术、蛋白质与核酸的提取与分离、PCR技术、分子杂交与印迹技术、分子克隆技术、外源基因转移技术、蛋白质表达技术、分子标记技术、分子改造技术、测序及人工合成技术、基因组学技术、蛋白质组学技术、生物芯片技术、生物信息学技术、RNA研究技术和电泳检测等的场所，所有进入实验室的工作人员均应遵守必要的操作规范，现在就让未名雷蒙特带您来了解一下:1. 配制有毒挥发性溶液必须在通风橱内进行。
2. 使用实验室仪器设备要严格遵守操作规程，认真填写仪器设备使用记录。
使用精密贵重仪器设备，必须预约，并由专门负责的工作人员上机操作。
3. 实验室产生的工作废液及有毒有害物质，应在安全负责人的指导下妥善处理。
4. 在进行凝胶成像时，必须用保鲜膜把胶包好或用保鲜膜将胶和透照台隔开，确保不污染成像系统。
5. 实验过程中必须穿着工作服。
进行有毒、有害、有刺激性物质或有腐蚀性物质操作时，应戴好防护手套。
6. 由于实验过程中使用溴化乙锭(EB)、丙烯酰胺等有害物质，所有与此有关的操作必须带手套，在特定区域内完成，严禁将接触过此类物质的手套或其他杂物带出工作区。
7. 实验人员未经许可，不得随意动用专用实验的物品。
不得私自配制实验室各房门、抽屉、柜子钥匙，不得私自在实验室内安装其它设备。
8. 爱护仪器设备，节约实验材料，仪器设备如有损坏，要及时报告登记。
如发生意外事故，应立即采取必要措施，并及时报告实验室负责人、值班人员和报警。
9. 实验完毕后做好整理工作，关闭电源、水源、气源和门窗。
10. 工作结束后，清理使用过的台面及区域, 保持整洁。
实验室要保持安静、卫生，严禁在室内吸烟、饮食，严禁随地吐痰、大声喧哗。
分子生物学整体服务安全操作及保养规程
分子生物学整体服务安全操作及保养规程一、前言分子生物学已经成为生命科学的重要组成部分，它可以从分子水平研究生命现象。
随着生命科学技术的不断进步，分子生物学实验已经成为生物科学研究的重要工具。
为保障实验室成员的健康、安全，减少实验操作的风险，本文介绍分子生物学整体服务的操作规程及保养规程，以期营造安全、健康的实验环境。
二、操作规程2.1 实验前准备在进行分子生物学实验之前，应先对实验室进行设备、环境的检查和保养，并确保每位实验人员均已经过培训并掌握相关操作技能。
2.2 实验操作在进行实验操作时，应注意以下几点：1.实验人员应掌握操作技能，严格按照实验操作手册进行操作。
2.操作过程中应佩戴适当的个人防护装备，如手套、防护眼镜等。
3.实验液体应密闭保存，并放于防止温度波动、震动和碰撞的设备内。
4.实验完成后及时清洗设备、工具，并将废液、废料正确处理。
2.3 废弃物处理废弃物应按照实验室废弃物管理规定进行处理，确保其不会对环境和人员造成伤害。
2.4 突发事件处理发生突发事件时，应立刻采取应急措施，并及时上报实验室主管或安全负责人，以确保实验室人员的人身安全和实验室设备的完好。
三、保养规程3.1 器材维护为确保分子生物学实验的结果准确可靠，必须保证分子生物学实验室的器材处于良好状态，操作正确、精度稳定。
器材应定期检查和维护，加强日常保养。
3.2 实验环境维护分子生物学实验室的环境对实验结果有很大的影响。
因此，实验环境应定期维护，包括对温度、湿度、洁净度等方面的检查，以确保实验室环境符合要求。
3.3 实验室消毒在实验室中，消毒工作也非常重要。
实验室中的工作区域、器具和仪器每次使用后都应进行消毒处理，包括实验台面、温度恒定仪、离心机等设备。
四、总结分子生物学实验是现代生命科学研究的重要手段，但也是一项高风险实验。
为了保障实验室人员的人身安全和保护实验室设备的完好，每位实验室人员应掌握相关操作技能、严格遵守实验规程，并加强实验室的保养与管理。
生物制药技术的实验室操作指南
生物制药技术的实验室操作指南生物制药技术是一种利用生物学和化学方法来制造药物的技术。
在实验室中进行的各种实验操作对于成功开发和生产高质量药物至关重要。
本文将为您介绍生物制药技术实验室操作的指南，旨在帮助研究人员正确地开展实验，并获得准确和可靠的结果。
首先，实验室操作的准备工作非常重要。
在进行实验之前，必须仔细阅读实验方案和操作手册，并确保准备充足的材料和试剂。
确认所需的设备和实验器具是否齐备，并进行必要的校准和验证。
在操作过程中，正确使用个人防护装备，如实验室大衣、手套和护目镜，以确保实验者的安全。
其次，关于生物反应器的实验操作。
生物反应器是生物制药技术中常用的实验装置，用于容纳和培养生物细胞或微生物。
在使用生物反应器之前，应先清洗和消毒，并严格按照操作手册中的步骤进行操作。
在培养细胞或微生物时，要控制好温度、pH值和氧气供应等参数，以保证生物反应器中的生物过程正常进行。
另外，定期对生物反应器进行维护和清洗，以防止污染和设备损坏。
在生物制药技术中，分离和纯化目标产物是实验操作的关键步骤之一。
通常采用离心、过滤、吸附和层析等技术来实现目标产物的分离纯化。
在离心操作中，应根据样品的性质和目的设定合适的离心速度和时间。
在过滤操作中，选用合适的过滤膜孔径和材料，以去除杂质。
吸附和层析操作需要根据目标产物和分离条件选择合适的吸附剂和层析介质，以实现目标产物的高效分离。
实验操作中还需要进行分析和检测。
通过实验室分析设备和方法，可以对样品中的物质进行定量和定性的分析和测定。
常用的分析测试技术包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、质谱法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）等。
在进行分析和检测之前，要认真准备样品，按照方法要求进行前处理，并在分析过程中严格控制实验条件，以获得准确可靠的分析结果。
最后，数据处理和结果分析是生物制药技术实验操作中不可或缺的一部分。
对于实验数据的处理，需要准确记录和计算实验结果，并进行统计学分析。
生化工程实验室分子生物学操作规范大全
生化工程实验室分子生物学操作规范大全第一篇：生化工程实验室分子生物学操作规范大全生化工程实验室分子生物学操作规范1.手套使用原则上不论什么实验都应带手套操作，特别是： 1）无菌操作；2）与RNA有关的所有操作；3）重要克隆菌的挑单克隆、扩增、保存等；4）与有毒试剂有关的所有操作，比如用EB染胶，用有机溶剂提取（在通风橱内操作）。
2.移液枪及枪头使用 1）在合适量程范围内使用； 2）移液枪定期校对；3）枪头必须插紧，防止脱落以及吸样体积不够；4）不要水平放置带有枪头的枪； 5）使用后挂在枪架上，不可以乱放；6）装枪头时必须戴手套，灭菌后50-70℃烘干后使用；7）加样体积应为枪头最大体积的20-100%，低于该范围的用小一号的枪头。
3.加样1）加用任何试剂前要将试剂混合（除饱和酚或一些特别的有机试剂）；2）加样的枪头应在试剂的中间表层吸收，防止枪头外壁带用过多试剂，改变加样试剂体积（除饱和酚外，一定要伸到饱和酚液的下部吸取）；3）加酶时酶要放置在冰上，应注意体积准确，外壁不带，内壁吹打干净。
注意用枪头从反应体系的管底吸上，反复吹打。
4.混匀1）除上述特殊试剂外，所有试剂在使用前后都要充分混匀；多数分子操作在加样后、反应前都要充分混匀；2）0.2ml和0.5ml管30%体积以下可进行枪混匀和擦边混匀；3）0.5-1.5ml管15-40%体积时，试管30%体积以下时可使用漩涡混匀器混匀；4）0.5-1.5ml管30-70%体积，试管30-70%时可进行颠倒混匀。
5.水浴锅1）需提前10-30分钟调好温度，稳定后才能使用； 2）水位不可以低于水浴锅高度的50%，及时添水或换水；3）使用合适的浮子；4）使用完毕及时关闭电源。
6.离心1）离心如果需要预冷，应至少预冷15min； 2）要质量对称放置；3）不合适的离心管应外套其他型号的离心管；4）离心后如果要移动，应放在离心管架上移动，防止破坏液面；5）短暂离心要在3000-8000rpm范围内，时间应短于30秒； 6）离心完毕应及时清理离心机。
实验室操作规程sop
分子病毒及生物制药实验室操作规程二O 一O 年四月二十四日分子病毒及生物制药实验室研究方向为动物源性病原跨种间传播机制和分子进化、病原微生物与宿主之间相互作用、抗病毒药物（细胞因子）的研究与开发及乙肝病毒侵染机理、致病机制及乙肝治疗的研究。
课题组负责人：刘文军，博士，中国科学院微生物研究所在职研究员，博士生导师。
中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室副主任，分子病毒中心主任，中关村科技园区分子病毒及生物制药开放实验室主任。
主要从事流感病毒跨种间传播的分子机制、病毒的分子进化及病毒结构蛋白与宿主内蛋白相互作用的生物学意义研究，研究开发增强机体免疫和抗病毒的蛋白质药物。
分子病毒及生物制药实验室研究内容为流感等重大传染病病原微生物的分子流行病学、分子进化规律的研究；重大传染病病原微生物与宿主相互作用及跨种间传播机制的研究；肝炎病毒侵染机理、致病机制、免疫应答及免疫防治的研究；新型抗感染治疗药物的研发；新发、突发人畜共患病原微生物（病毒与细菌）基因组、转录组、蛋白组分析；重要免疫分子与病原微生物蛋白结构与功能研究等。
实验室操作规程（分子病毒及生物制药实验室操作规程）的制定是为了更好的规范实验室基本操作，使实验室的操作规程化、标准化，为实验室操作及标准化认证提供理论基础和参考依据。
实验室操作规程主要编者：刘文军研究员实验室操作规程审核人员：朱以萍、孙蕾、杨利敏、刘晓玲、贾晓娟实验室操作规程参编人员：王增福、周远成、于茂荣、张珂、许崇凤、孟珊珊、曹帅、王珊珊、张定勇、赵振东、陈才伟、高晟妍、瞿洪仁、李铮、陆鹭、高蕾实验室操作规程编辑及排版：李晶虽然我们在修订过程中力求全面、完整，但由于时间较紧、工作量大，加上笔者的水平和能力有限，归纳成册后疏漏及错误之处肯定不少，殷切希望实验操作人员提出批评指正。
编者2010-4-24血凝抑制试验的标准操作规程（编号：001） (1)酶联免疫吸附（ELISA）试验的标准操作规程（编号：002） (5)聚合酶链式反应（PCR）的标准操作规程（编号：003） (10)引物设计的标准操作规程（编号：004） (14)质粒提取及纯化标准操作规程（编号：005） (17)质粒线性化及纯化的标准操作规程（编号：006） (20)限制性内切酶酶切反应的标准操作规程（编号：007） (21)T载体克隆标准操作规程（编号：008） (23)蓝白斑筛选标准操作规程（编号：009） (25)DNA琼脂糖凝胶电泳标准操作规程（编号：010） (26)CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞标准操作规程（编号：011） (28)核酸连接试验标准操作规程（编号：012） (29)琼脂糖凝胶回收纯化DNA标准操作规程（编号：013） (30)病毒TCID50测定的标准操作规程（编号：014） (31)细胞病变抑制法测定干扰素效价标准操作规程（编号：015） (34)反向遗传技术拯救流感病毒标准操作规程（编号：016） (37)膜结合试验的标准操作规程（编号：017） (38)拓扑结构分析荧光蛋白酶保护试验标准操作规程（编号：018） (39)转染细胞的稳定筛选实验标准操作规程（编号：019） (40)稳定表达细胞系的建立和鉴定的标准操作规程（编号：020） (42)FCM流式细胞术检测细胞表面蛋白的标准操作规程（编号：021） (44)FITC标记抗体的标准操作规程（编号：022） (45)HBV假病毒包装的标准操作规程（编号：023） (47)哺乳动物细胞HepG2 电转化的标准操作规程（编号：024） (49)肝组织总蛋白提取的标准操作规程（编号：025） (50)慢病毒表达系统的标准操作规程（编号：026） (52)人肝组织冰冻切片免疫组化染色的标准操作规程（编号：027） (54)提取纯化细胞和组织膜蛋白的标准操作规程（编号：028） (56)细胞计数试验的标准操作规程（编号：029） (58)细胞冷冻和复苏的标准操作规程（编号：030） (59)PEI转染细胞方法的标准操作规程（编号：031） (61)真核细胞裂解和总蛋白提取试验的标准操作规程（编号：032） (63)ELISA方法确定制备抗体效价的标准操作规程（编号：033） (65)血清-病毒中和试验的标准操作规程（编号：034） (68)淋巴细胞增殖试验的标准操作规程（编号：035） (70)ELISPOT测定小鼠IFN-γ水平试验的标准操作规程（编号：036） (72)MTT法的标准操作规程（编号：037） (76)PCR鉴定目的基因在酵母基因组中的整合标准操作规程（编号：038） (77)SDS-PAGE电泳的标准操作规程（编号：039） (78)毕赤酵母电转化的标准操作规程（编号：040） (85)蛋白质染色（银染法）标准操作规程（编号：041） (88)基因重叠延伸法合成基因的PCR方法标准操作规程（编号：042） (90)目的蛋白抑菌活性检测的标准操作规程（编号：043） (92)重组酵母的诱导表达的标准操作规程（编号：044） (93)提取哺乳动物细胞染色体外DNA 标准操作规程（编号：045） (96)ELISA检测血清及细胞上清中HBsAg和HBeAg的标准操作规程（编号：046） (98)哺乳动物细胞的脂质体转染的标准操作规程（编号：047） (100)重组腺病毒构建的标准操作规程（编号：048） (101)GST Pull-down的标准操作规程（编号：049） (103)免疫共沉淀（CO-IP）的标准操作规程（编号：050） (105)Western Blot的标准操作规程（编号：051） (107)RT-PCR的标准操作规程（编号：052） (109)Real-time RT-PCR 标准操作规程（编号：053） (111)流感病毒的收集与纯化标准操作规程（编号：054） (113)噬斑试验的标准操作规程（编号：055） (114)流式细胞仪标本制备的标准操作规程（编号：056） (115)细胞培养的标准操作规程（编号：057） (116)荧光共定位的标准操作规程（编号：058） (118)流式细胞技术检测流感病毒M1 抗原的标准操作规程（编号：059） (120)FCM流式细胞术检测细胞表面蛋白的标准操作规程（编号：060） (122)Phage-ELISA标准操作规程（编号：061） (123)噬菌体库滴度测定的标准操作规程（编号：062） (126)噬菌体库固相-液相筛选的标准操作规程（编号：063） (128)离子交换层析的标准操作规程（编号：064） (132)化学交联的标准操作规程（编号：065） (134)Ni柱亲和层析纯化poly-his变性重组蛋白的标准操作规程（编号：066） (135)Ni柱亲和层析纯化poly-his可溶性重组蛋白的标准操作规程（编号：067） (137)分子筛层析的标准操作规程（编号：068） (139)亲和层析纯化可溶性GST标签重组蛋白的标准操作规程（编号：069） (141)木瓜蛋白酶酶切IgG的标准操作规程（编号：070） (143)Tricine-SDS PAGE的标准操作规程（编号：071） (145)包涵体纯化的标准操作规程（编号：072） (147)大肠杆菌表达蛋白的标准操作规程（编号：073） (148)附录 (149)附录1 实验室常用技术参数资料 (150)附录2 PAGE凝胶配方表 (168)附录3 蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 (169)附录4 实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 (171)血凝抑制试验的标准操作规程（编号：001）1. 目的该SOP 是利用具有血凝性的病毒凝集动物红细胞的能力可以被相对应的抗体抑制使其不能再凝集红细胞的现象来测定与该病毒相对应的抗体的效价。
生物制药实验操作作业指导书
生物制药实验操作作业指导书一、实验目的生物制药实验操作作业旨在使学生掌握生物制药相关实验操作技能，了解生物制药的基本原理和实践应用。
二、实验材料和仪器1. 材料：- 细菌培养基- 酵母- 细胞培养基- 抗生素- 溶液和缓冲液- 蛋白质纯化试剂盒- 电泳试剂- 试剂盒等2. 仪器设备：- 培养皿和培养皿架- 培养箱- 离心机- 超声波处理仪- 十分摄氏计- 离子交换层析仪- 高效液相色谱仪（HPLC）- 电泳仪等三、实验操作步骤1. 细菌培养实验a. 准备培养基：按照实验要求配制细菌培养基。
b. 接种细菌：使用无菌技术将待测的细菌接种到培养基中。
c. 培养细菌：将接种好的培养皿放入培养箱中，设置适当的温度和培养时间。
d. 观察细菌生长：根据培养后的结果进行观察和记录。
2. 酵母发酵实验a. 准备培养基：按照实验要求配制酵母培养基。
b. 接种酵母：使用无菌技术将待测的酵母接种到培养基中。
c. 培养酵母：将接种好的培养皿放入培养箱中，设置适当的温度和培养时间。
d. 观察酵母发酵：根据培养后的结果进行观察和记录。
3. 细胞培养实验a. 准备培养基：按照实验要求配制细胞培养基。
b. 接种细胞：使用无菌技术将待测的细胞接种到培养基中。
c. 培养细胞：将接种好的培养皿放入培养箱中，设置适当的温度、湿度和培养时间。
d. 观察细胞生长：根据培养后的结果进行观察和记录。
4. 抗生素敏感性实验a. 准备培养基：按照实验要求配制含有不同浓度抗生素的培养基。
b. 接种细菌：使用无菌技术将待测的细菌接种到培养基中。
c. 观察菌液浑浊度：根据培养后的结果观察菌液的浑浊程度，判断细菌对抗生素的敏感性。
5. 蛋白质纯化实验a. 细胞破碎：使用超声波处理仪等方法破碎细胞，释放目标蛋白质。
b. 离心分离：使用离心机将细胞碎片和其他杂质分离出来，获得上清液。
c. 层析纯化：使用离子交换层析仪等方法对上清液进行纯化，得到目标蛋白质。
d. 浓缩和储存：使用适当的方法将目标蛋白质浓缩并储存，以便后续的研究或应用。
生物制药技术实验中的实验操作规范与安全措施
生物制药技术实验中的实验操作规范与安全措施生物制药技术实验是一项复杂而重要的工作，其涉及到微生物、细胞培养、基因工程等多个领域。
为了确保实验结果的准确性和研究人员的安全，实验操作必须遵守严格的规范，并采取必要的安全措施。
本文将详细介绍生物制药技术实验中的实验操作规范与安全措施。
实验操作规范1. 实验前准备在进行实验之前，研究人员应仔细阅读实验方案和操作手册，并确认所需的试剂和设备是否齐全。
同时，应检查实验室的安全设施是否正常运作，如防护罩、紫外线杀菌灯等。
2. 实验操作区域与个人卫生实验室应设置明确的实验操作区域，并在实验区域内限制非必要人员入内。
研究人员在进行实验前应认真洗手，并穿戴实验服、帽子、手套等防护用品。
3. 无菌操作在生物制药技术实验中，无菌操作是非常重要的。
实验台面、培养皿、仪器等都必须经过高温高压灭菌处理。
研究人员需要用酒精灯或紫外线杀菌灯对操作区域进行消毒。
同时，无菌操作需要进行在无菌工作台或干净的实验室中进行。
4. 培养基制备制备培养基是生物制药技术实验中常见的操作步骤。
在制备培养基时，研究人员应确保使用无菌的试剂和设备，并遵守正确的操作步骤。
制备好的培养基需要通过高温高压灭菌处理，确保无菌。
5. 微生物培养在进行微生物培养实验时，需要严格控制实验条件，并防止交叉感染。
研究人员应注意合理安排培养皿的密度，避免过度拥挤。
同时，需要定期进行细菌培养物的传代，避免细菌突变。
6. 基因工程实验在进行基因工程实验时，需要遵守相关的操作规范和安全措施。
研究人员应具备相关的操作技能，并使用正确的工具和试剂。
在进行基因转染或转化实验时，需要确保外源基因的稳定转入，并及时检测转化效率。
安全措施1. 个人防护生物制药技术实验中，研究人员应穿戴实验服、手套、护目镜等个人防护用品，确保自身安全。
实验结束后，应及时清洗实验服和手套，并遵守实验室的相关规定。
2. 废弃物处理实验中产生的废弃物，特别是含有生物危险物质的废弃物，需要经过正确的处理。
生物实验室操作规程
生物实验室操作规程一、实验室安全规定1. 实验室出入口处必须明确标识，以便于紧急情况下的疏散。
2. 实验室内应保持干燥、整洁，避免杂物堆积。
3. 实验室内应配备必要的消防设备，并定期进行检查和维护。
4. 实验室内严禁吸烟、饮食和饮水，以防止污染实验样品。
5. 实验室内必须佩戴适当的实验服和个人防护用品，如实验手套、护目镜等。
6. 实验室内应设有紧急出口和应急设备，以应对突发情况。
二、实验前准备1. 实验室内应保持充足的通风，确保空气流通。
2. 实验室操作前应仔细阅读实验手册，了解实验目的、步骤和安全注意事项。
3. 实验室内必须准备好所需的实验器材和试剂，并检查其完整性和有效性。
4. 实验室内的仪器设备应定期进行维护和校准，确保其正常运行。
三、实验操作规范1. 实验操作前应对实验台面进行清洁消毒，以确保实验样品的纯净度。
2. 实验操作时应按照实验手册中的步骤进行，严格控制实验条件和时间。
3. 实验过程中应注意个人安全，避免接触有害物质和高温设备。
4. 实验操作后应及时清理实验台面和实验器材，保持实验室的整洁。
5. 实验结束后，实验样品和废弃物必须按照规定进行处理，以防止污染环境。
四、实验室管理要求1. 实验室内禁止私自携带和使用实验器材和试剂，以防止事故和实验结果的不准确性。
2. 实验室内禁止进行未经批准的实验，以保证实验过程的安全性和合法性。
3. 实验室内应建立实验记录和实验数据的归档制度，以便后续的实验分析和结果验证。
4. 实验室内的实验样品和数据必须严格保密，不得外泄或用于其他非科研目的。
五、实验事故处理1. 发生实验事故时，应立即停止实验操作，确保人员的安全。
2. 发生实验事故后，应及时报告实验室主管人员，并按照事故处理程序进行处理和记录。
3. 实验事故发生后，应对实验室进行检查和整改，以防止类似事故再次发生。
六、违规处理措施1. 对于违反实验室安全规定和操作规范的人员，将依据实验室管理制度进行相应的纪律处分。
分子生物学实验技术与操作规范
分子生物学实验技术与操作规范分子生物学实验技术与操作规范是在分子生物学实验中必须遵循的一系列准则和步骤。
这些规范旨在确保实验的准确性、可重复性和安全性。
本文将介绍分子生物学实验中常用的技术和操作规范。
一、引物设计与合成引物是在PCR反应中用于扩增目标DNA片段的短寡核苷酸序列。
引物的设计应遵循以下原则：引物长度应在18-25个碱基对之间，GC含量应在40-60%之间，避免引物间的互补性和自身互补性。
合成引物时应选择可靠的供应商，并进行质量检测。
二、核酸提取核酸提取是从生物样本中提取目标DNA或RNA的过程。
常用的核酸提取方法包括酚-氯仿法、盐析法和商用试剂盒法。
在进行核酸提取前，必须严格遵守实验室的安全操作规范，佩戴手套和口罩，避免污染。
三、PCR扩增PCR（聚合酶链式反应）是一种体外扩增DNA片段的技术。
在进行PCR反应时，应注意以下几点：准备反应液时要避免污染，使用无菌的试剂和器具；设置阳性对照和阴性对照以验证实验结果的准确性；选择合适的PCR条件，包括温度和时间参数。
四、凝胶电泳凝胶电泳是一种常用的分离和检测DNA或RNA片段的方法。
在进行凝胶电泳前，应先准备好琼脂糖凝胶和电泳缓冲液。
电泳时要注意以下几点：将样品加入凝胶孔中时要避免气泡的产生；设置适当的电压和电泳时间以获得清晰的电泳带；使用DNA分子量标记物来确定目标片段的大小。
五、蛋白质表达与纯化蛋白质表达与纯化是研究蛋白质功能和结构的重要步骤。
在进行蛋白质表达时，应选择合适的宿主细胞和表达载体，并进行优化实验条件。
在蛋白质纯化过程中，常用的方法包括亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析。
在进行蛋白质表达与纯化实验时，应注意操作的无菌性和安全性。
六、基因克隆基因克隆是将目标基因插入到载体中的过程。
常用的基因克隆方法包括限制性内切酶切割、连接反应和转化。
在进行基因克隆实验时，应注意以下几点：选择适当的限制性内切酶和连接酶，并进行酶切和连接的优化实验；使用无菌的试剂和器具，避免污染；进行正反向测序以验证插入的正确性。
生物制药技术的操作步骤和注意事项
生物制药技术的操作步骤和注意事项生物制药技术是指利用生物学、分子生物学等相关知识和技术研发、生产和应用药物的一种方法。
它通过利用生物体内的细胞或生物大分子，如蛋白质、核酸等，来合成药物。
本文将介绍生物制药技术的操作步骤和注意事项，以帮助读者更好地理解和应用这一技术。
操作步骤：1.选择合适的宿主细胞：生物制药技术首先需要选择合适的宿主细胞，作为基因工程药物生产的载体。
常见的宿主细胞包括细菌、酵母、昆虫细胞、人类细胞等。
选择宿主细胞的时候需要考虑其对目标基因的表达能力、生长速度、工艺可行性等因素。
2.构建表达系统：将目标基因（生物大分子）与表达载体结合，构造出含有目标基因的表达系统。
表达载体通常是基于质粒、病毒等，能够有效传递目标基因到宿主细胞中。
在构建过程中，要注意选择适当的启动子、选择子、信号序列等元件，以确保目标基因的高效表达。
3.转染宿主细胞：将构建好的表达系统转染到选定的宿主细胞中。
转染方法有多种，例如化学法、电穿孔法、冲击法等。
转染过程中需注意选取适当的转染方法，控制转染条件，以提高转染效率和减少细胞损伤。
4.培养和扩大宿主细胞：转染成功后，需要进行细胞培养和扩大。
培养条件应尽可能接近宿主细胞的适宜生长环境，包括温度、pH值、培养基等。
控制培养过程中的环境因素，定期观察细胞状态和生长情况，确保宿主细胞的健康和稳定生长。
5.收获和提取目标产物：当宿主细胞达到一定规模后，可以进行收获和提取目标产物。
收获宿主细胞时，通常通过离心、滤膜等手段分离宿主细胞和培养基。
之后，通过化学、物理、生物等方法对目标产物进行提取和纯化，以获得高纯度的药物。
注意事项：1.良好的实验室操作规范：生物制药技术操作过程中需要严格遵守实验室操作规范，做好个人防护。
保持实验室整洁，及时清理和处理生物废弃物，避免交叉感染的发生。
2.严格控制环境条件：生物制药过程中，细胞对环境条件（如温度、pH值）的敏感性较高，因此需要严格控制环境条件，确保细胞的健康生长和药物的产量。
分子遗传实验室操作规程
分子遗传实验室操作规程
《分子遗传实验室操作规程》
一、实验室准入规定
1. 所有使用实验室设施、器材和试剂的人员必须接受实验室操作规程的培训和考核，获得实验室准入资格方可进行实验操作。
2. 未经培训和考核的人员不得擅自进入实验室进行任何生物学实验操作。
二、实验室安全规定
1. 实验室内禁止食品饮料，严禁在实验室内吸烟。
2. 实验室操作时必须佩戴实验室指定的个人防护装备，包括实验服、手套、护目镜等。
3. 实验室操作时必须遵守实验室内的各项安全规定，严禁擅自更改实验室设施器材的设置。
4. 实验室操作结束后，必须对实验室进行清洁和消毒，避免污染和交叉感染。
三、实验操作规定
1. 实验室操作人员必须按照实验方案进行实验操作，不得擅自更改实验步骤或数据处理方法。
2. 实验室操作人员在操作过程中必须严格遵守实验室内的操作规程，不得违反实验室内的各项操作规定。
3. 实验室操作人员在使用实验室设施和试剂时必须遵守规定的用量和使用方法，不得超量使用或浪费。
4. 实验室操作人员在实验操作结束后必须对实验室进行清洁和整理，保证实验室设施器材的整洁和安全。
以上为《分子遗传实验室操作规程》的部分规定，所有实验室操作人员必须严格遵守实验室内的各项规定，做到安全、准确、高效地进行实验操作。
生物制药技术的实验室操作步骤详解
生物制药技术的实验室操作步骤详解生物制药是利用生物学技术制造药物的过程。
这项技术在医药领域有着广泛的应用，可以用于生产各种药品，包括蛋白质药物、抗体药物、基因工程药物等。
在实验室中进行生物制药技术的操作是非常关键的，下面将详细介绍生物制药技术的实验室操作步骤。
1. 培养细胞系生物制药技术中最常用的是细胞作为药物的生产工具。
首先需要培养细胞系，通常使用培养基和培养器具进行培养。
培养基是一种含有营养物质的液体或固体，提供给细胞生长所需的营养物质和生长因子。
培养器具通常是培养皿或生物反应器，用于容纳和提供适宜的环境给细胞生长。
2. 细胞扩增在培养细胞系的过程中，需要不断地进行细胞扩增。
细胞扩增是指通过增加细胞数量来增加药物的生产量。
在扩增过程中，需要控制培养条件，如温度、气体组成、搅拌等，以保证细胞的生长和繁殖。
3. 收获细胞当细胞达到一定数量和生长状态时，需要进行收获。
收获过程包括细胞离心、细胞去除培养基等步骤。
离心是使用离心机将培养液中的细胞沉淀到底部，去除上层的培养基。
然后通过洗涤和离心的方法，去除残留的培养基和杂质，准备进行下一步的操作。
4. 蛋白质提取在生物制药中，蛋白质是重要的药物成分之一。
提取蛋白质的步骤包括破碎细胞和分离蛋白质。
破碎细胞是通过破坏细胞膜来释放细胞内的蛋白质。
破碎细胞的方法包括超声波破碎、高压破碎等。
分离蛋白质的方法通常使用色谱技术，如离子交换色谱、凝胶过滤色谱等。
5. 质量控制在生物制药技术的实验室操作中，质量控制是非常重要的一环。
质量控制包括对产物的纯度、活性、稳定性等进行检测和确认。
常用的质量控制方法包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、高效液相色谱等。
这些方法可以评估药物的质量并确保其符合要求。
6. 药物制备最后一步是药物的制备。
根据实验结果和质量控制的要求，可以进行药物的制备。
制备药物的方法包括液体培养法、固体发酵法、单克隆抗体生产法等。
药物的制备过程需要严格控制各种参数，以确保药物的质量和稳定性。
生物实验室操作规程
生物实验室操作规程生物实验室操作规程1. 实验室进入和离开规定a) 进入实验室前，必须穿戴实验室规定的个人防护装备，包括实验服、实验鞋、手套、护目镜等。
b) 离开实验室前，必须确保实验台上的试剂、设备等整齐摆放，垃圾袋和废液容器处理妥当。
c) 离开实验室时，必须将实验台、设备、试剂等进行清洁，确保实验室的整洁和安全。
2. 试剂和设备的使用和储存规定a) 使用试剂和设备时，必须严格按照实验操作规程进行操作，并遵循实验室安全操作要求。
b) 使用完毕的试剂必须放回指定位置，并妥善保存，避免日光直射和潮湿。
c) 每天结束实验后，必须对所有使用过的设备进行清洗和消毒，并妥善存放，确保设备的正常使用寿命。
3. 实验台的使用规定a) 使用实验台前，必须清理干净，并确保试剂、设备放置整齐。
b) 实验台上禁止存放食品、饮料等个人物品，禁止吸烟。
c) 公用实验台上禁止放置私人物品，如有需要，请事先咨询实验室管理员。
4. 废弃物的处理规定a) 废弃液体必须倒入专用容器，并按照实验室规定的方法进行处理。
b) 废弃试剂和废弃物必须分类存放，并放入指定的垃圾袋中。
c) 废弃物必须定期清理，必要时应立即清理，避免对实验室环境和人员的危害。
5. 紧急事故和应急措施的规定a) 在发生火灾、泄漏、爆炸等紧急情况时，应立即按照实验室应急预案采取措施，并迅速报告实验室管理员。
b) 在实验过程中出现意外伤害或不良反应时，应立即停止实验，寻求医疗救助并报告实验室管理员。
6. 实验室文明用语和行为规定a) 在实验室内，严禁使用粗言秽语或进行不文明行为，保证实验室的秩序和良好的工作氛围。
b) 遇到问题需要寻求帮助时，应礼貌地向实验室管理员或老师提问，遵守实验室的规定。
7. 实验室安全设备的使用规定a) 实验室内的安全设备，如洗眼器、安全淋浴器等，必须保持畅通，并熟悉使用方法。
b) 在实验室内必须常备急救箱和紧急电话，以备不时之需。
c) 熟悉灭火器的使用方法，并定期进行检查和充装。
分子实验室试验操作
分子实验室行为规则分子生物学实验室，首先要保持一个整洁的环境。
微小的污染就有可能影响整个实验结果。
1.保持个人及环境整洁2.每种仪器和材料使用完后要归位3.实验材料不要放在书桌台上，以免污染个人学习空间4.试验结束后，不用的材料要及时处理，有毒物质特殊处理，不要随便倒入水槽中，保持操作台的干净整洁5.本实验室所用的许多试剂如酶类等都需要低温保藏，拿取注意尽量快速，并放置于冰盒使用，不要在外部环境停留过久。
6.很多试剂比较昂贵，使用时不要污染，每取一次要换取样匙或枪头等7.希望大家珍惜使用各种实验仪器和物品在实验过程中，遇到问题及时向周围的老师和同学请教。
我们要为自己创造一个团结和谐的工作环境。
实验室基本仪器和使用注意事项微波炉：由于经常在其中溶化凝胶，可能污染有EB，请勿在其中加热其他物品光学显微镜：使用前后将镜头搽干净，勿忘关闭电源，盖上罩布冰箱：使用时请注意将冰箱门关紧，如有过多结霜及时处理离心机：样品管要平衡好后使用天平：请勿超过量程，使用后保持清洁，称量匙使用后清洗干净电泳槽：使用后清洗干净复日成像系统：使用前后将台面用酒精棉搽洗，使用后及时将UV 灯关闭，以延长其使用寿命超净台：使用时可将操作用品放置其上，使用后请保持台面清洁，并清理出自己物品，以防影响其他人员使用水槽：请勿将固体垃圾倒入其中，平时注意保持其干净。
总之，好的工作环境要大家共同创造和维护，希望各位能尽自己一份力量。
本实验室保藏的基因工程菌株和载体菌株有关特征来源大肠杆菌（E. coli C600）常用于制备裂解物和增殖λgt10的琥珀抑制型菌株染色体上具有nal基因上海来益生物药物研发中心大肠杆菌（E. coli JM 110）一种琥珀抑制型F’菌株，该菌株对GATC序列的腺嘌呤不甲基化，支持M13噬菌体载体的生长。
该菌株中的F’带有lac ZΔM15，后者可使得与再λZAP中编码的β-半乳糖苷酶的氨基端进行α-互补。
上海来益生物药物研发中心大肠杆菌（E. coli BL21(DE3)）该菌株用于高效表达T7噬菌体启动子控制下的基因表达。
生物制药实验常用操作规程
生物制药实验常用操作规程生物制药实验是一项极其复杂的工作，涉及到繁多的实验操作和规范。
下面是关于常用操作规程的一些建议，以帮助实验人员进行高质量的实验工作。
1. 实验室准备：a. 实验室的卫生应保持良好，工作区域应经常进行消毒。
b. 所有实验室工具和设备都应保持干净和整洁。
c. 所有药品和试剂应按照规定的温度和湿度存放。
2. 个人防护：a. 在进行任何实验之前，实验人员应穿戴合适的个人防护用品，如实验服、手套和护目镜。
b. 所有实验人员应知晓相关安全操作，并遵循标准操作程序。
3. 实验样品准备：a. 实验样品应按照指定的程序进行制备和保存。
b. 实验样品应按照要求进行标记，以便于识别和追踪。
4. 实验仪器操作：a. 在使用任何仪器之前，应进行必要的校准和测试。
b. 遵循仪器操作指南，正确使用和维护仪器。
c. 定期清洁和消毒仪器，以确保其正常运行。
5. 实验记录：a. 在进行实验之前，准备好实验记录本。
b. 记录所有实验相关的数据，包括实验条件、操作步骤、观察结果等。
c. 实验记录应清晰、准确、完整，并根据要求进行签名和日期确认。
6. 废物处理：a. 实验废弃物应按照相关规定进行妥善处理。
b. 废弃物应分类收集，并在指定的容器中进行储存。
c. 废弃物交付到指定单位处置。
7. 实验安全：a. 在进行实验之前，应详细了解实验物质的危害性和安全操作要求。
b. 遵循实验安全操作规程，并确保安全设备的正常运行。
c. 在实验过程中立即报告任何事故、事故或异常情况。
8. 质量控制：a. 所有实验室操作应符合质量控制要求。
b. 定期校准和验证实验仪器，并记录结果。
c. 监测实验过程中的质量参数，并作出必要的调整。
9. 数据分析：a. 所有实验数据应进行统计和分析。
b. 使用合适的统计工具和方法进行数据处理。
c. 对实验结果进行合理解释，撰写实验报告或提供相关建议。
10. 合规要求：a. 在进行实验之前，了解并遵守相关的法规和法规。
实验室分子生物学实验基本操作要求规范及注意事项
实验室分子生物学实验基本操作要求规范及注意事项实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项一、酶与载体的分装酶类与载体：T载体(50 ng/μl)用灭菌水稀释4倍（12.5 ng/μl）后分装成10 μl或20 μl；连接酶（solutionΙ）按5 μl分装；dNTP（10 mM）分装成50 μl；无菌水分装成1 ml；注意：（1）所有分装都必须用已灭菌的管。
（2）所有工具酶和载体的使用过程均在冰浴中进行。
（3）工具酶、载体以及试剂盒等实验室共用物品，用完后必须及时放回原处，以免耽误他人使用。
（4）当你发现你使用的是最后一管（盒）公用物品时，请马上告知负责人购买，以免耽误使用。
（5）感受态，氨苄青霉素和IPTG由研究生轮流负责制备。
每人负责六个月。
其他试剂则由第一位使用新包装的同学分装。
由于分子实验工具酶比较容易失活，必须在冰上进行分装。
二、常见抗生素及IPTG的配置以氨苄青霉素为例：1．准备足够量的1.5 ml的EP管、两个100 ml的离心管、0.22 μm水系滤器、注射器、蒸馏水，以上用品均要进行高压灭菌。
2. 洁净工作台紫外灭菌，然后进行以下操作。
3．称取2 g的氨苄青霉素粉末于离心管中，加入灭菌水至总体积为20 ml，轻摇离心管，至氨苄青霉素粉末完全溶解，以免过滤时堵塞滤膜。
4．用注射器吸取配制好的溶液，然后把滤器安在注射器上，缓缓推动注射器活塞，把溶液经滤膜推至100 ml的离心管中。
注意：动作要缓和，使滤出液出口正对着离心管，还要防止染菌。
5．把100 ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到1.5 ml的EP管中，每管0.5 ml。
在EP管上做好标记，包括名称、浓度、日期等。
6．把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存。
注意：当你发现你使用的是最后一管抗生素时，请马上告知有关人员及时配制，以免耽误使用。
表1.常见抗生素的储存浓度及工作浓度名称储存浓度工作浓度氨苄青霉素（ampicillin）100 mg/ml 50 μg/ml～100 μg/ml卡那霉素（kanamycin）10 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml氯霉素（chloramphenicol）25 mg/ml 12.5 μg/ml～25 μg/ml链霉素（streptomycin）50 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml四环素（tetracyyline）10 mg/ml10 μg/ml～50 μg/mlIPTG 1 M 0.05-0.6 mM三、分子生物学实验中各种试剂与溶液的配制分子生物学实验中各种试剂与溶液的配制参见《分子克隆》。
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分子病毒及生物制药实验室操作规程目录血凝抑制试验的标准操作规程（编号：001） (1)酶联免疫吸附（ELISA）试验的标准操作规程（编号：002） (5)聚合酶链式反应（PCR）的标准操作规程（编号：003） (10)引物设计的标准操作规程（编号：004） (14)质粒提取及纯化标准操作规程（编号：005） (17)质粒线性化及纯化的标准操作规程（编号：006） (20)限制性内切酶酶切反应的标准操作规程（编号：007） (21)T载体克隆标准操作规程（编号：008） (23)蓝白斑筛选标准操作规程（编号：009） (25)DNA琼脂糖凝胶电泳标准操作规程（编号：010） (26)CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞标准操作规程（编号：011） (28)核酸连接试验标准操作规程（编号：012） (29)琼脂糖凝胶回收纯化DNA标准操作规程（编号：013） (30)病毒TCID50测定的标准操作规程（编号：014） (31)细胞病变抑制法测定干扰素效价标准操作规程（编号：015） (34)反向遗传技术拯救流感病毒标准操作规程（编号：016） (37)膜结合试验的标准操作规程（编号：017） (38)拓扑结构分析荧光蛋白酶保护试验标准操作规程（编号：018） (39)转染细胞的稳定筛选实验标准操作规程（编号：019） (40)稳定表达细胞系的建立和鉴定的标准操作规程（编号：020） (42)FCM流式细胞术检测细胞表面蛋白的标准操作规程（编号：021） (44)FITC标记抗体的标准操作规程（编号：022） (45)HBV假病毒包装的标准操作规程（编号：023） (47)哺乳动物细胞HepG2电转化的标准操作规程（编号：024） (49)肝组织总蛋白提取的标准操作规程（编号：025） (50)慢病毒表达系统的标准操作规程（编号：026） (52)人肝组织冰冻切片免疫组化染色的标准操作规程（编号：027） (54)提取纯化细胞和组织膜蛋白的标准操作规程（编号：028） (56)细胞计数试验的标准操作规程（编号：029） (58)PEI转染细胞方法的标准操作规程（编号：031） (61)真核细胞裂解和总蛋白提取试验的标准操作规程（编号：032） (63)ELISA方法确定制备抗体效价的标准操作规程（编号：033） (65)血清-病毒中和试验的标准操作规程（编号：034） (68)淋巴细胞增殖试验的标准操作规程（编号：035） (70)ELISPOT测定小鼠IFN-γ水平试验的标准操作规程（编号：036） (72)MTT法的标准操作规程（编号：037） (76)PCR鉴定目的基因在酵母基因组中的整合标准操作规程（编号：038） (77)SDS-PAGE电泳的标准操作规程（编号：039） (78)毕赤酵母电转化的标准操作规程（编号：040） (85)蛋白质染色（银染法）标准操作规程（编号：041） (88)基因重叠延伸法合成基因的PCR方法标准操作规程（编号：042） (90)目的蛋白抑菌活性检测的标准操作规程（编号：043） (92)重组酵母的诱导表达的标准操作规程（编号：044） (93)提取哺乳动物细胞染色体外DNA 标准操作规程（编号：045） (96)ELISA检测血清及细胞上清中HBsAg和HBeAg的标准操作规程（编号：046） (98)哺乳动物细胞的脂质体转染的标准操作规程（编号：047） (100)重组腺病毒构建的标准操作规程（编号：048） (101)GST Pull-down的标准操作规程（编号：049） (103)免疫共沉淀（CO-IP）的标准操作规程（编号：050） (105)Western Blot的标准操作规程（编号：051） (107)RT-PCR的标准操作规程（编号：052） (109)Real-time RT-PCR 标准操作规程（编号：053） (111)流感病毒的收集与纯化标准操作规程（编号：054） (113)噬斑试验的标准操作规程（编号：055） (114)流式细胞仪标本制备的标准操作规程（编号：056） (115)细胞培养的标准操作规程（编号：057） (116)荧光共定位的标准操作规程（编号：058） (118)流式细胞技术检测流感病毒M1抗原的标准操作规程（编号：059） (120)FCM流式细胞术检测细胞表面蛋白的标准操作规程（编号：060） (122)噬菌体库滴度测定的标准操作规程（编号：062） (126)噬菌体库固相-液相筛选的标准操作规程（编号：063） (128)离子交换层析的标准操作规程（编号：064） (132)化学交联的标准操作规程（编号：065） (134)Ni柱亲和层析纯化poly-his变性重组蛋白的标准操作规程（编号：066） (135)Ni柱亲和层析纯化poly-his可溶性重组蛋白的标准操作规程（编号：067） (137)分子筛层析的标准操作规程（编号：068） (139)亲和层析纯化可溶性GST标签重组蛋白的标准操作规程（编号：069） (141)木瓜蛋白酶酶切IgG的标准操作规程（编号：070） (143)Tricine-SDS PAGE的标准操作规程（编号：071） (145)包涵体纯化的标准操作规程（编号：072） (147)大肠杆菌表达蛋白的标准操作规程（编号：073） (148)附录 (149)附录1实验室常用技术参数资料 (150)附录2 PAGE凝胶配方表 (168)附录3蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 (169)附录4实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 (171)血凝抑制试验的标准操作规程（编号：001）1.目的该SOP是利用具有血凝性的病毒凝集动物红细胞的能力可以被相对应的抗体抑制使其不能再凝集红细胞的现象来测定与该病毒相对应的抗体的效价。
2.适用范围该SOP适用于具有血凝性的病毒类疫苗免疫动物后血清抗体的检测并依此进行疫苗的效力检验，可用于猪流感疫苗、禽流感疫苗、猪细小病毒疫苗、鸡减蛋综合症灭活疫苗等的效力检验；免疫后及时监测，辅助诊断病毒性疾病。
3.主要仪器1000～5000rpm台式离心机、冰箱、微量振荡器、96孔V型血凝板、八道加样器、200μL单通道加样器、积液槽4.试剂4.1 生理盐水、柠檬酸三钠、重铬酸钾、硫酸、蒸馏水4.2抗凝剂的制备用天平称量3.8g柠檬酸三钠，溶入100mL生理盐水中，待溶解完全后即可使用。
4.3 红细胞悬液的制备4.3.1 红细胞的采集：选1～2只健康鸡，将血液采集到等量抗凝液中混匀，置4℃冰箱保存。
4.3.2红细胞悬液的制备：以800～1000rpm离心5min，用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜，将沉淀的红细胞加生理盐水，慢慢混合均匀，再在离心机中800rpm离心5min，弃去上清液，再加生理盐水混匀，如此反复离心4～5次，最后一次离心后的红细胞，弃去上清液。
放入4℃冰箱中可保存2～3d。
使用时用1mL吸管吸取0.1mL红细胞，然后加入9.9mL的生理盐水，此即1%红细胞悬液。
4.4 清洁液的制备4.4.1 1%的稀硫酸溶液：水10kg，硫酸100mL，将硫酸慢慢倒入水中，不断搅拌。
4.4.2 96孔V型板和微量滴头清洁液的配制：重铬酸钾79g，水1000mL，硫酸100mL，将重铬酸钾磨碎，溶解于水中，然后慢慢加入硫酸100mL，不断搅拌。
5.操作步骤5.1血凝试验（HA）步骤5.1.1用微量移液器向反应板的每孔加生理盐水25μL。
5.1.2用微量移液器吸取待测抗原25μL于第1孔中并挤压6次混合，后吸出25μL至第2孔，依次倍比稀释到第11孔，弃去25μL。
5.1.3微量移液器再吸取1%红细胞悬液依次加入各孔，每孔25μL。
5.1.4 置于微量振荡器上振荡1min，室温静置30min后观察结果。
5.1.5 结果判定：将反应板倾斜成45°，沉于孔底的红细胞沿着倾斜面向下呈线状流动者为沉淀，表明红细胞未被或不完全被病毒凝集；如果孔底的红细胞铺平孔底，凝成均匀薄层，倾斜后红细胞不流动，表明红细胞被病毒所凝集。
能使鸡红细胞完全凝集的抗原的最高稀释倍数，称为该抗原滴度红细胞凝集效价。
即沉淀的前一孔即为该抗原的效价。
5.2 抗原校正5.2.1 根据抗原效价结果配制相应比例的抗原稀释液：即4单位抗原。
5.2.2首先用微量移液器向反应板的第2孔至第6孔加生理盐水25μL，第1孔不加。
5.2.3用微量移液器吸取4单位抗原25μL分别加入第1孔、第2孔中，从第2孔开始挤压6次混合，后吸出25μL至第3孔，依次倍比稀释到第5孔，弃去25μL。
5.2.4 用微量移液器再吸取1%红细胞悬液依次加入1～6孔，每孔25μL。
5.2.5置微量振荡器上振荡1min，室温静置30min后观察结果。
5.2.6 结果观察：第1、2、3孔为完全凝集，第4孔红细胞为50%沉淀，第5孔为对照完全沉淀，如果出现以上结果，表明所配4单位抗原准确，校正成立。
5.3 血凝抑制（HI）试验步骤5.3.1 用微量移液器先加25μL生理盐水于各孔中。
5.3.2 用微量移液器吸取待检血清25μL置于第1孔中，然后倍比稀释至第11孔，弃去25μL。
最后1孔不稀释，为红细胞对照。
5.3.3 用微量移液器吸取配制好的抗原，每孔25μL。
5.3.4 置于微量振荡器上振荡1min，混合均匀，室温静置20min。
5.3.5 用微量移液器吸取1%红细胞悬液于每孔各加25μL。
5.3.6 置于微量振荡器上振荡1min，混合均匀，室温静置40min后观察结果。
5.3.7 结果观察：以完全抑制红细胞凝集的血清最大稀释度为该血清的血凝抑制试验滴度，以2的指数表示。
5.4 结果判定“－”表示不凝集，红细胞沉积于管底，呈边缘整齐的圆盘状。
“+”表示微量凝集。
红细胞沉积于管底，呈边缘不清晰的圆盘状。
“++”表示凝集，红细胞沉积于管底呈环状，四周有凝集的小块。
“+++”大部凝集，红细胞呈颗粒状凝集，边缘不整齐，有下垂趋势。
“++++”完全凝集，红细胞均匀铺于管底。
以能完全阻止血球凝集（“－”）的血清最高稀释度为血凝抑制效价。
5.5 试验用具处理5.5.1 96孔V型反应板的清洗：新反应板可直接放入清洁液中浸泡24h，用过的反应板先用流水冲净孔中的反应物，然后泡在清洁液中，24h后捞出，甩掉清洁液，放入流水中冲洗干净后，在蒸馏水中冲洗一遍，甩干，摆放在恒温箱中，烤干备用。
5.5.2 微量滴头的清洗：新滴头直接放入清洗液中浸泡，用过的用清水冲洗掉滴头中的血清后浸泡在清洁液中，最少浸泡24h，捞出后用流动水冲洗掉滴头内外的清洁液，然后在蒸馏水中冲洗一遍，甩干，放入恒温箱中烤干，备用。