新实验药物合成实验报告

新实验药物合成实验报

告

Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】

实验一 TLC铺板、干燥、活化、色谱用硅胶柱的填装

1．硅胶薄层色谱板的制备、干燥和活化

薄层色谱中的吸附剂是铺在玻璃、塑料或金属片或薄板上的较薄的、均匀的一层细粉状物质，因支持剂的种类、制备方法和选用溶剂的不同，可按吸附、分配或二者结合的方式达到分离化合物的目的。可以通过比较斑点的R f值，或将未知样品与对照品在同一板上展开至同样高度，对样品进行初步的鉴定。还可通过比较可见斑点的大小进行半定量的判断。还可以通过光密度测量法实现定量测定。

TLC中涂布的物质与柱色谱用的吸附剂非常相似，如硅胶、氧化铝、聚酰胺等，只是它们的颗粒更细一些，一般直径为5～40μm。有些还含有石膏、淀粉等粘合剂以增强涂层与薄板的粘合力。有时里面还含有荧光指示剂(如硅酸锌等)，在254或365nm的紫外光下能显示荧光，可借此对分离的斑点进行检测。到目前为止，硅胶是最常用的薄层色谱吸附剂。

在涂布吸附剂时，用于排列和放置薄板的排列盘和具有平整表面的薄板是必需的。而涂布器也很常用，当它从玻璃板上移过时，会在板的表面均匀铺上所需厚度的吸附剂涂层。

（1）实验目的

掌握硅胶薄层色谱板的制备方法。

（2）仪器和试剂

①玻璃板(5×10cm或10×20cm，洁净且干燥)；

②薄层色谱用硅胶G；

③％羧甲基纤维素钠水溶液；

（3）实验步骤

①把玻璃板在排列盘中依次相邻放好，置涂布器于其中一端。

②在具塞锥形瓶中把一份硅胶G和2～3份CMC-Na溶液混合，并用力振摇30

秒。

③把混好的糊倒入涂布器中，均匀地移动涂布器至排列盘的另一端后，移开涂

布器。

④铺好的板静置5分钟，然后把它们面朝上移至一个水平的平面上，阴干。

⑤把阴干后的板在105℃的烘箱中烘30分钟。

⑥待板凉至室温后，置干燥器中保存。

2．色谱用硅胶柱的填装

液相柱色谱可以是液-固色谱或液一液色谱。如果固定相是吸附剂，也称为液相吸附色谱.若为离子交换物质，就称为离子交换色谱；若为非离子的聚合物，如聚苯乙烯或hadex,则称为凝胶渗透色谱、凝胶过滤色谱或分子排阻色谱。在柱中或纸上的液一液分配色谱可以进一步分为正相分配色谱(极性固定液)和反相分配色谱(固定相非极性)。

对于液相吸附色谱来说，固定相是填入柱中的表面活性固体(如氧化铝、硅胶和活性炭等),流动相由一种或几种有机溶剂混合组成。混合物中的不同组分由于与固定相吸附程度的不同而得以分离。被弱吸附的物质移动得快而被强吸附的物质移动受到阻滞。与吸附力相关的分子间作用因表面吸附剂、被吸附物质和溶剂的性质(极性)不同可有多种形式。

硅胶和氧化铝是目前为止最常用的液相吸附色谱的吸附剂。

吸附剂的吸附能力用活度来衡量。活度可分为五级(表1)，广泛认为其与

吸附剂、被吸附物质和能产生这种吸附的位置的个数有关。一级活度是最高的，对硅胶来说可以在不超过300℃的温度下加热数小时达到。向其中加入适

量的水可以进一步降低其活度到二级.可以用特定染料的色谱行为来判断吸附剂的活度等级。

表1硅胶的活度与含水量之间的关系

吸附柱包谱中常用的填充方法有湿法填充和干法填充。

（1）实验目的

①了解测定硅胶的活度及硅胶减活的方法；

②掌握硅胶色谱柱的填充方法。

（2）仪器和试剂

①色谱用玻璃柱

② 2 3x105mm玻璃管

③层析用硅胶

④ %～0．05％对二甲基偶氮苯

⑤苯

（3）实验步骤

测定硅胶的活度：

①取一个3mm×5mm 玻璃管，用棉花封住一端，从另一端向内加入待测活度的硅胶，同时轻敲玻璃管，使管内充满吸附剂。

②配制%～0．05％对二甲基偶氮苯的苯溶液。

③将上述溶液滴于棉花上，置玻璃管于一小试管中，用苯展开。

④当溶剂到达管的顶端时取出玻璃管，观察色带位置并计算染料的R

f 值。

⑤根据表2计算硅胶的活度。

表2硅胶活度的测定

硅胶的减活：

①用上法测定所用硅胶的活度。

②根据硅胶的重和要达到的活度计算减活所需加入水的体积。

③把水加入到盛有硅胶的三角烧瓶中，密封，不时用力振摇。

④l小时后测定减活后的硅胶的活度。

色谱用硅胶柱的填装：

①将一小团玻璃丝或脱脂棉放于柱底部使形成一个较松的垫层。

②一边轻敲柱子的外侧，一边将硅胶慢慢倒入柱子中。

③打开活塞，让一种非极性的烃类溶剂流过柱体，直至整个柱床全部润湿。关闭活塞

备用。

（4）思考题

①为何在铺板之前，色谱用的玻璃板要完全洗净并干燥

②为何铺好的TLC板用前要在烘箱中干燥

③实验过程中总是尽量避免使流动相液面低于色谱柱中吸附剂的上端，为什么

实验二烟酸的制备

1.实验目的

掌握烟酸的制备反应原理及制备的操作方法

2.实验原理

3-甲基嘧啶在水溶液中，甲基可被高锰酸钾氧化形成烟酸钾盐，在酸化制成烟酸。

N CH3

N

COOK

N

COOH KMnO

3.主要仪器和试药

（1）主要仪器

仪器规格或型号数量

电热套500ml1只

搅拌机1台

三颈瓶500ml/24mm*31只球形冷凝管290mm/24mm*21支

蒸馏弯管24mm*21只

真空接受管24mm*21只圆底瓶250ml/241只

吸滤瓶250ml1只

布氏漏斗40mm1只烧杯500ml1只

（2）试药

试药规格摩尔数（mol）用量

3-甲基嘧啶CP5g 高锰酸钾CP21g 浓盐酸CP适量