浅谈液体菌种设备和技术

浅谈液体菌种设备和技术

益清

省市汉寿县龙阳镇

液体菌种设备和技术已经推广近二十年，拥有液体菌种生产设备的单位和个人应在千家以上，但实际成功长期应用于生产的仍很少，这说明液体菌种设备和技术在生产中存在较大的探讨空间，是设备问题还是技术问题、还是液体菌种与栽培技术的结合问题？

—、对液体菌种设备的认识

液体菌种设备已经基本完善，可以开展规模化生产

食用菌液体菌种设备不论大小原理都一样，培养容器（瓶、罐）加无菌供气系统，看似简单的设备各生产厂家的设计都有不同，如罐的形状、空气的过滤层次、罐液体的循环、灭菌温度的均匀性等。

1、1 液体母种生产设备

电磁摇床和机戒摇床都可以培养优质种子，最好不用固体种子（种子是否染菌难判断）和简易培养的液体种子。

1、2 发酵罐的形状

有的罐高廋、有的则矮胖，前者依据传统理论认为空气从进入液体到冒出的时间越长溶氧越多，后者则采取多供气的方法来弥补空气在液体中运动距离短的缺陷，这两种设计理念都能完全达到培养优质液体菌种的目的，在长期的应用中我们感到矮胖罐也很好用，因为这种罐灭菌时上下温差小，而且夹层与罐的压差在较小的情况下蒸汽就可经过过滤器进入罐，能很好的进行过滤系统的在位（安装位置）灭菌，同时可以用能耗低而供气较大的电磁式气泵供气

1、3 发酵罐的层数

市场上典型的有单层、双层（夹层）、三层（夹层外设保温层），使用单层及双层罐在灭菌时能耗较大，有的罐靠自身热源不另加棉被进行保温温度很难达到120度以上、且要防止烫伤皮肤；三层罐保温性好；单层罐只能自然降温，双、三层罐可以用流水降温。

1、4 发酵罐体设置上的不合理点

罐体夹层应设进排水（汽）口，安全阀、压力表，层应设压力表、温度表、接种口、出种口、进气口、呼吸口、进料口、取样口等。各品牌的发酵罐不合理点有层装安全阀(负压时易吸气污染）、不装压力表(不知道罐压力）、过滤器离罐灭菌（连接时有可能受污染）、呼吸器离罐灭菌（不方便）、接种口过大（火焰圈难控制）、过滤层次少到只一级（不安全、应有粗—精—精三级）、空压机选配不当（电

磁式气泵、无油空压机、有油空压机）能耗相差三五倍、过滤器能力不足（过大压差击破过滤膜）等。

1、5 发酵罐液体的循环

各品牌都以进入罐的无菌压缩空气为动力，个别品牌装有导流装置、气体破啐网等。在菌丝球少时液体都会很好的流动，后期则有差异，特别是痩长罐无导流装置时底部液体几乎不流动，对菌丝生长不利。设备生产厂家应认真考虑让液体很好的循环流动起来。

1、6 空气过滤器

小罐因通气量小，有的用棉花或活性碳做过滤材料，棉花纤维间的空隙一般达到十几微米，它的过滤作用仅仅是靠沉降和粘附，当气流过大时过虑效果不好，几十升以上的罐多用膜过虑器，如粗过虑器用

0.2um聚丙希、精过虑器用0.01um聚四氟乙希膜

1、7 气泵的选用

电磁式气泵的能耗低气量大，但压力低（仅0.03-0.05mpa）,能与大多数罐配用；无油空压机（膜片式）压力中等，活塞式空压机压力大、能耗高；以500升罐为列用电磁式气泵和用活塞式空压机相比能耗相差3-4倍、月电费相差千元以上。

二、对液体菌种技术的认识

多品种规模化生产证明液体菌种生产技术已经成熟。

技术是生产应用液体菌种成功与否的关键，相同的设备不同的人员操作结果大不一样，有的可以连续几个月生产不会出现污染，而有的可能罐罐都污染，菌种质量的优劣也相差很大。

2、1 基本现状

培养基的配方、培养条件的控制已有较多的研究报道，各有特点，培养结果也不完全相同，如菌球的大小（1—几mm）、数量（每毫升几百—几千个），用直观的方法即菌丝占液体的百分比列来看（静止2hr)如香菇、双孢菇为50-95、平菇金针菇黑木耳鸡腿菇杏孢菇白灵菇为80-98，很多品种已经在生产中正常应用液体菌种。

2、2 培养基的选择

很多原料可以做液体培养基，如玉米粉、土豆、面粉、麸皮、豆粕、蛋白胨、酵母膏、葡萄糖、蔗糖等，所选原料可以因地制宜，如用量小时主料用土豆、用量大时多用玉米粉，没有蛋白胨时用豆粕或黄豆。不同配方的最终培养液ph值是不会一样的，一般高氮配方ph值高，低氮配方ph值低（如香菇不同配方培养后ph值为3.5-6.5）。粘度高则菌球小，氮多则菌球疏松，生产中注意调节。

2、3 无菌操作过程

这是液体菌种培养的关键，整个过程中不能有一个细菌进入发酵液中。采用电磁式摇床培养液体菌种时可以在接入试管菌种后静止培养3-4天，观察无污染后再摇动培养，可以有效避免菌种带杂菌；发酵罐及空气系统先空消一次再做培养液，摇瓶菌种接入发酵罐的过程是最易被污染的操作过程，操作中必须对罐体的接种口进行严格消毒，火焰圈应该完整控制接种口，摇瓶管口与罐体接种口的对接应在火焰中进行，接种完后迅速关闭接种口；种子罐与下一级培养罐的连接管道最好在使用前再次蒸汽灭菌一次。培养期间应始终预防系统产生负压。

2、4 抗生素的使用问题

抗生素主要用于预防细菌污染，虽有一定的效果但不提倡使用，试验中如果发酵液被污染了再用抗生素来治疗，即使用量加大到一般用量的3-5倍也不可能阻止细菌的繁殖，这说明抗生素不是万能的，而且在生产中某些抗生素在液体菌种培养中曾经引起食用菌遗传性的改变，导致不出菇（如茶薪菇、紫木耳），复合使用或先后使用两种抗生素可能更易使遗传性发生改变，导致不出菇。实验中还发现有些抗生素达到一定浓度可以使鸡腿菇菌丝不生长，某抗生素只要较低浓度就可以抑制黑木耳菌丝的生长，所以应该认识到抗生素对食用菌菌丝生长是有影响的；同时大多数抗生素都有一个代失效的过程，如果不能杀死细菌而只能抑制细菌的话等到抗生素失效时培养液仍然会被污染

三、液体菌种与栽培技术的结合问题

3、1 液体菌种与培养料的含水量等

配料时应考虑准备接入的菌液量减少加水量，避免培养料过湿；液体菌种的液体中含有一定的糖等营养物质，配料时可以不再加糖

3、2 液体菌种生产与菌包生产

液体菌种的保存时间短，生产中最好在培养好后尽早使用，否则必须用冷水降温培养，虽然当温度降到很低时（10度以下）可以保存十多天，但仍应尽早使用，这就要求做液种与做栽培袋按计划进行。3-3 液体菌种优势的利用

如果将菌液喷满料表面，菌种萌发就可以封面，可以有效控制杂菌污染；如果采用插入式接种可以将菌种接到料的深处，可以明显缩短养菌时间；小麦菌种在接入液体菌种后摇动使麦表粘满菌种，几天即可长满菌丝，十天即可使用，可以解决生产急用。

液体菌种的几种接种方法

益清

液体菌种具有方便快捷菌龄短而一致纯度高活力强等优点，越来越受科研工作者和广大食用菌生产者的重视，但如何正确使用液体菌种尚未见系统报道．液体菌种培养好后接种方法直接影响液体菌种优势的发挥，甚至关系到生产的成败．我们在规模应用液体菌种接种