实验五微生物数量和大小测定霉菌的观察演示课件
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3.放线菌、酵母菌、霉菌的观察及微生物大小的测量ppt课件
21
1.形态观察
（1）放线菌的形态观察
①插片法：将菌接入平板→插盖玻片后培养→ 取片，观察。
②玻璃纸法：将灭菌玻璃纸覆盖于平板→接菌 →培养后观察。
③印片法：将带有菌苔的琼脂块印在玻片上，
观察。
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2
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3
直型孢子丝
螺旋型孢子丝
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4
（2）酵母菌的细胞观察及死、活细胞的鉴定 ➢常使用美兰染色法观察和鉴定。 ➢美兰：氧化型为蓝色，还原型为无色； ➢活细胞：具有较强还原能力，可还原美兰； ➢死细胞：无还原能力，不能还原美兰；
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15
②将镜台测微尺有刻度的一面朝上，放在载物台上。先 用低倍镜观察，调节使目镜测微尺与镜台测微尺的刻 度平行，找出两尺的两条刻度线完全重合的区域。
③记录两重合区间目镜与镜台测微尺分别占的格数 ④换成高倍镜。用同样方法进行校正，并记录数据。
目镜测微尺每小 格长度（μm）
两重合线间镜台测微尺格数×10
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14
3.根霉压片的制作 在干净载玻片上加一滴乳酚油→→用接种针挑取少量 带孢子的菌种置于染液中→→盖上盖玻片，备用观察 （孢子囊、假根及匍匐枝），绘图。
注：可用解剖镜观察根霉自然生长状态。 4.微生物大小的测量（以酵母菌为例） （1）校正目镜测微尺
①取出目镜，将透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放 在目镜镜筒内的隔板上后，旋上透镜插入目镜筒内。
两重合线间目镜测微尺格数
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16
校正示意：
最新课件
16×410
17
（2）菌体大小测量 移去镜台测微尺，放上酵母菌玻片，用目镜测微尺 测量10个菌体的长宽并记录。
（3）注： ➢ 取酵母菌时，接种环务必冷却，防止烫死酵母菌。 ➢ 每人一套测微尺，小心使用，损坏赔偿。
1.形态观察
（1）放线菌的形态观察
①插片法：将菌接入平板→插盖玻片后培养→ 取片，观察。
②玻璃纸法：将灭菌玻璃纸覆盖于平板→接菌 →培养后观察。
③印片法：将带有菌苔的琼脂块印在玻片上，
观察。
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2
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3
直型孢子丝
螺旋型孢子丝
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4
（2）酵母菌的细胞观察及死、活细胞的鉴定 ➢常使用美兰染色法观察和鉴定。 ➢美兰：氧化型为蓝色，还原型为无色； ➢活细胞：具有较强还原能力，可还原美兰； ➢死细胞：无还原能力，不能还原美兰；
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15
②将镜台测微尺有刻度的一面朝上，放在载物台上。先 用低倍镜观察，调节使目镜测微尺与镜台测微尺的刻 度平行，找出两尺的两条刻度线完全重合的区域。
③记录两重合区间目镜与镜台测微尺分别占的格数 ④换成高倍镜。用同样方法进行校正，并记录数据。
目镜测微尺每小 格长度（μm）
两重合线间镜台测微尺格数×10
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14
3.根霉压片的制作 在干净载玻片上加一滴乳酚油→→用接种针挑取少量 带孢子的菌种置于染液中→→盖上盖玻片，备用观察 （孢子囊、假根及匍匐枝），绘图。
注：可用解剖镜观察根霉自然生长状态。 4.微生物大小的测量（以酵母菌为例） （1）校正目镜测微尺
①取出目镜，将透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放 在目镜镜筒内的隔板上后，旋上透镜插入目镜筒内。
两重合线间目镜测微尺格数
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校正示意：
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16×410
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（2）菌体大小测量 移去镜台测微尺，放上酵母菌玻片，用目镜测微尺 测量10个菌体的长宽并记录。
（3）注： ➢ 取酵母菌时，接种环务必冷却，防止烫死酵母菌。 ➢ 每人一套测微尺，小心使用，损坏赔偿。
霉菌ppt课件完整版
05
霉菌与人类的关系
对人类的有益作用
工业应用
霉菌在发酵工业中广泛应用，如生产酒精、酵母、有机酸等。
医药应用
某些霉菌可用于生产抗生素、酶制剂等药物，对人类健康有重要 作用。
农业应用
霉菌可用于生物防治，对抗植物病原菌，减少化学农药的使用。
对人类的危害作用
食品污染
霉菌可引起食品腐败变质，产生有毒代谢产物，如黄曲霉毒素等， 对人类健康造成威胁。
THANK YOU
霉菌作为分解者，将动植物残体分解为简单的无机物，为其他生 物提供食物来源，是食物链中的重要环节。
维持生态平衡
霉菌通过分解有机物、释放能量等过程，促进自然界中的物质循环 和能量流动，有助于维持生态系统的平衡和稳定。
生物多样性的组成部分
霉菌种类繁多，在生态系统中占据不同的生态位，是生物多样性的 重要组成部分。
鉴定方法
真菌的鉴定主要依据其形态学特征，包括菌落形态、菌丝结构、孢子形态及产 生孢子的方式等。
免疫学检测方法
真菌抗原的检测
用已知真菌特异性抗原检测患者血清及其他体液中的抗体，主要用于深部真菌病的 辅助诊断。常用的真菌抗原检测法有乳胶凝集试验、对流免疫电泳法等。
真菌抗体的检测
用已知真菌抗原检测患者血清中的抗体，常用的真菌抗体检测法有酶联免疫吸附试 验、免疫荧光法等。
疫力。
医疗治疗
对于已经感染霉菌的病人，应 及时就医，采用抗真菌药物进
行治疗。
06
实验诊断与检测技术
直接镜检法
湿片法
取标本置于载玻片上，加10%氢氧化钾1滴，盖上盖玻片，在酒 精灯上微微加热以加速角质软化，然后轻压盖玻片使标本透明， 置显微镜下观察。主要用于检查皮肤癣菌、隐球菌、念珠菌、 孢子丝菌等。
实验微生物大小及量测定资料精品PPT课件
College of Life Sciences, Hubei Normal University
Central Laboratory of Biology
【方法步骤】
1. 目镜测微尺的安装 2. 校正目镜测微尺 3. 菌体大小的测定 4. 测定完毕
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图5-1 镜台测微尺中央部分及镜台测微尺校正目镜测微尺
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Central Laboratory of Biology
【基本原理】
目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精 确的等分刻度，一般有等分为50小格和100小格两种。测量时， 需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微放大后的细胞物 象。由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目 镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。
镜台测微尺格数
目镜放大倍数：
目镜测微尺每格代表的长度/μm
College of Life Sciences, Hubei Normal University
Central Laboratory of Biology
【实验报告】
2）将各菌测定结果记录填入表5-2中。
表5-2 金黄色葡萄球菌大小测定记录
Central Laboratory of Biology
【实验报告】
2. 思考题 1）为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台
测微尺重新对目镜测微尺进行校正？ 2）在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数的物
镜来测定同一细菌的大小时，其测定结果是否相同？为什么？
微生物 霉菌的形态观察实验PPT
霉菌的菌丝是构成霉菌营养体的基本单位。
菌丝的宽度一般为3-10um， 比放线菌菌丝宽很 多倍，其菌可伸长并产生分枝。
部分菌丝存在于培养基质中吸收营养，称为基内 菌线或营养菌丝。另一部分菌丝向空中生长，称为气 生菌丝。气生菌丝一部分形成生殖细胞。
无隔 菌丝
低等霉菌如根霉、毛霉等
有隔 菌丝
高等霉菌如青霉、曲霉等
霉菌的形态观察
验证型
齐鲁师范学院
01 Part
实验目的
1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法 2.初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据
齐鲁师范学院
02 Part
实验原理
霉菌可产生分支的菌丝体，分基内菌丝和气生菌 丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由 繁殖菌丝产生孢子。
菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识 别不同种类霉菌的重要依据。
齐鲁师范学院
03 Part
实验材料
菌种
产黄青霉（Pnicillium chrysogenum） 黑曲霉 (Aspergillus niger） 根霉(Rhizopus) 毛霉(Mucor)
染液
乳酸石炭酸棉兰染液
齐鲁师范学院
04 Part
实验步骤
01 1.于洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸液于载片中央;
02
2.用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝
03
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3.先在50%乙醇中浸润，再在蒸馏水中浸润，洗去分生孢子(仅用于青霉和黑
曲霉)
04 4.置于液滴中，再细心地将菌丝挑散开
05 5.盖上盖玻片，置显微镜下观察。
谢谢 观看
霉菌的菌落
松
由于霉菌的菌丝较粗较长，菌丝体疏松，因而形成的菌落也比较疏松，呈绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状
2019年实验酵母菌形态结构观察微生物大小测定和微生物.ppt
观察目标不在视野内
没有调好焦距 用油镜不能观察到目标 镜头不干净 光线没有调好
注意：在进行微生物显微观察时，一定要 区分微生物和杂质
实验二
酵母菌形态结构的观察（实验16）
微生物大小测定（实验18） 微生物显微镜直接计数（实验19）
酵母菌形态结构的观察（实验16） 实验内容：酵母菌形态结构观察和死活 细胞区分 制片方法：（水浸片-美兰染色法）
酿酒酵母形态结构（40× 10），美蓝染色法
在洁净的载波片上加1小滴美蓝——加酵母菌 悬液1小滴——加盖玻片——静置2分钟左右—— 于10或40倍下观察，区分死活细胞
酵母菌形态结构
芽体
微生物细胞大小的测定（实验18）
分别用10 ×、40 ×物镜对目镜测微尺进行 校正。 取下台尺，换上水浸片法制备的酵母菌。 在高倍镜下测量5-10个酵母菌细胞，求出平 均值。 酵母菌细胞大小表示方法：长×宽 单位：m
Hale Waihona Puke 一、微生物细胞大小的测定1、测定工具
镜台测微尺
目镜测微尺
目 镜 测 微 尺 的 校 正
目镜测微尺
镜台测微 尺
微生物数量的测定（实验19）
• 血球计数板计数 • 平板菌落计数
• 比浊计数
• 重量法 • 体积法
血球计数板计数
计数室
计算：[每中方格平均细胞数×25（16）/10-4] ×稀释倍数
血球计数板计数操作步骤
革兰氏染色结果：
大肠杆菌 革兰氏阴性细菌
苏云金芽孢杆菌
革兰氏阳性细菌
革兰氏染色的要点
涂片务求均匀，切忌太厚
染料必须覆盖所有涂片区域，染料不要干 枯 脱色时间要把握好 必须选用适龄菌体
设置对照
没有调好焦距 用油镜不能观察到目标 镜头不干净 光线没有调好
注意：在进行微生物显微观察时，一定要 区分微生物和杂质
实验二
酵母菌形态结构的观察（实验16）
微生物大小测定（实验18） 微生物显微镜直接计数（实验19）
酵母菌形态结构的观察（实验16） 实验内容：酵母菌形态结构观察和死活 细胞区分 制片方法：（水浸片-美兰染色法）
酿酒酵母形态结构（40× 10），美蓝染色法
在洁净的载波片上加1小滴美蓝——加酵母菌 悬液1小滴——加盖玻片——静置2分钟左右—— 于10或40倍下观察，区分死活细胞
酵母菌形态结构
芽体
微生物细胞大小的测定（实验18）
分别用10 ×、40 ×物镜对目镜测微尺进行 校正。 取下台尺，换上水浸片法制备的酵母菌。 在高倍镜下测量5-10个酵母菌细胞，求出平 均值。 酵母菌细胞大小表示方法：长×宽 单位：m
Hale Waihona Puke 一、微生物细胞大小的测定1、测定工具
镜台测微尺
目镜测微尺
目 镜 测 微 尺 的 校 正
目镜测微尺
镜台测微 尺
微生物数量的测定（实验19）
• 血球计数板计数 • 平板菌落计数
• 比浊计数
• 重量法 • 体积法
血球计数板计数
计数室
计算：[每中方格平均细胞数×25（16）/10-4] ×稀释倍数
血球计数板计数操作步骤
革兰氏染色结果：
大肠杆菌 革兰氏阴性细菌
苏云金芽孢杆菌
革兰氏阳性细菌
革兰氏染色的要点
涂片务求均匀，切忌太厚
染料必须覆盖所有涂片区域，染料不要干 枯 脱色时间要把握好 必须选用适龄菌体
设置对照
《霉菌形态的观察》课件
将观察到的霉菌形态特征，如菌丝粗细、长度、分支情况、孢子形状等详细记录下来。
记录形态特征
根据观察到的形态特征，分析霉菌所处的生长阶段，如生长初期、中期或成熟期。
分析生长阶段
比较不同生长阶段的霉菌样品，找出形态上的差异和变化规律。
比较不同样品
根据观察结果和分析，得出关于霉菌形态特征和生长阶段的结论。
样品放置与定位
观察与记录
图像采集
结果分析
01
02
03
04
将处理好的样品放置在载玻片上，调整焦距找到观察对象。
仔细观察霉菌形态，记录其特征，如菌丝、孢子、细胞壁等。
使用显微镜自带的摄像功能或拍照功能，采集霉菌形态的图像。
根据观察结果，分析霉菌的形态特征，推断其分类和功能。
霉菌的宏观观察技术
04
常用于观察表面结构，分辨率极高，但仅适用于导电样品。
03
02
01
03
显微镜的调整与校准
确保显微镜处于良好状态，调整焦距、光源和光圈等参数。
01
样品制备
选择适当的固定剂、染色剂和脱水剂，对样品进行固定、染色和脱水处理。
02
载玻片和盖玻片的选择与清洁
选择优质、无划痕的载玻片和盖玻片，使用适当的清洁剂进行清洗。
准备工具与材料
将显微镜、载玻片、盖玻片和霉菌样品准备好。
制作样品
将霉菌样品放置在载玻片上，用盖玻片轻轻覆盖。
安装样品
将制作好的样品放置在显微镜的载物台上，调整焦距，使观察到的图像清晰。
观察记录
观察霉菌的形态特征，如菌丝、孢子等，并记录下来。可以使用显微镜自带的拍照功能，将观察到的图像拍摄下来作为记录。
曲霉属霉菌在食品工业中常被用于生产酱油、食醋、酒类和豆豉等食品的发酵。
微生物学实验-5 酵母菌装片的制作及观察;霉菌装片的制作及观察35页PPT
60、人民的幸福是至高无个的法。— —西塞 罗
谢谢！
51、 天 下 之游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
微生物学实验-5 酵母菌装片的制作及观 察;霉菌装片的制作及观察
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
谢谢！
51、 天 下 之游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
微生物学实验-5 酵母菌装片的制作及观 察;霉菌装片的制作及观察
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
实验五 霉菌的形态结构观察讲解
根霉
应用 有无隔膜
营养菌丝特 化情况
繁殖方式和 结构特征
产淀粉酶等，用 于甜酒的酿制 生产多种有机酸 转化甾体类物质
1
ba
2
1、孢子囊 2、孢子囊壁破裂 3、囊轴(a)和囊托(b)
3
产蛋白酶、淀粉酶等， 用于酱油的酿制 生产多种有机酸 产毒素
生产青霉素
纤维素酶和有机酸等
比较项目 细胞结构
放线菌 原核细胞
霉菌 真核细胞
大小
直径约1微米 直径2~10微米
形态构造
营养菌丝-气生 菌丝-孢子丝
营养菌丝（有 特化）-气生 菌丝-子实体
营 养 菌
营养菌丝 有无隔膜
无
有或无
丝
的
繁殖方式
无性 孢子
无性和（或） 特
有性孢子
化
形
态
气生菌丝特化
子实体
子实体：可形 成有性或无性 孢子的、有一 定形状和构造 的菌丝体组织
3、观察霉菌固定装片 （观察菌丝有无横隔、分生孢子梗和分生孢子头结构）
对每种材料绘图并标明各部分名称。 针对观察过程及结果分析讨论
青霉菌丝 的横隔
青霉的分生孢子 穗-帚状结构
酵母菌的形态观察和四大类微生物类群的菌落形 态观察
分生孢子
果品、物品腐烂
产生毒素
帚
状
小梗
结
梗基
构
分生孢子梗
气生菌丝
营养菌丝
1、用简易制片法制片观察黑曲霉和青霉的形态结构 （观察营养菌丝有无横隔、分生孢子梗着生位置、足细 胞、顶囊、分生孢子着生位置、分生孢子。）
2、用简易制片法和粘片法观察黑根霉形态结构
观察营养菌丝有无横隔、孢囊和孢囊孢子、假根、匍匐枝、囊托和 囊轴。
实验五 微生物的大小和数量的测定优选PPT文档
酵母的直径大小测定结果
（X1+X2+X3+X4+X5） T表示五个中方格中的总菌数；
﹟
学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。
乘上25（或16）就得出一大格中的总菌数，最后再换算到每mL菌液中的含菌数。
× 25（或16） × 10 × 1000 ×稀释倍数
3、菌体大小的测定：取下镜台测微尺，将酵母菌染色标本置于载物台上，然后在高倍镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。
1、目镜测微尺的校正：在高倍镜下，看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使 目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合
（X1+X2+X32+、X4+仔X5）细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微
乘上25（或16）就得出一大格中的总菌数，最后再换算到每mL菌液中的含菌数。
细胞数/ml=[每中方格平均细胞数×25（16）/10-4] ×稀释倍数
二、实验原理---酵母菌大小测定
测量工具及构造
镜台测微尺
目镜测微尺
目镜测微尺的校正
酵母的直径大小测定结果 将显微计数结果记录于下表中。 长颈胶头吸管、盖玻片、擦镜纸等。 学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。 ×稀释倍数 6、计数完毕后，血球计数板要立即清洗干净，并用吸水纸吸干，最后用擦镜纸擦干净，并放回盒内。 T表示五个中方格中的总菌数； 二、实验原理---血球计数板对酵母菌培养液计数： 5、压在方格线上的菌体，以压在底线和右侧线上的菌体计入本格内； 将显微计数结果记录于下表中。 目镜测微尺标定结果： 40×镜下 倍目镜测微尺每格长度是 μm。 学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。 在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？ 遇到有芽体的酵母时，若芽体和母体同等大，就按单个酵母计数。 酵母的直径大小测定结果 （X1+X2+X3+X4+X5）
实验五微生物数量和大小测定霉菌的观察
孢子、菌丝等。
生长条件
霉菌可以在多种环境条 件下生长，如湿度、温
度、pH等。
分布广泛
霉菌在自然界中分布广 泛，可在土壤、空气、
水体等环境中生长。
03 实验步骤
样品采集与制备
样品采集
选择具有代表性的样品，如食品、土壤、水等，采集时要避免污染和交叉感染。
样品制备
将采集的样品进行适当处理，如破碎、稀释、过滤等，以便后续的实验操作。
实验五：微生物数量和大小测定霉菌的观察
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与讨论 • 参考文献
01 实验目的
了解微生物数量和大小的测定方法
01
02
03
显微镜计数法
通过显微镜观察并计数样 品中的微生物数量，根据 视野范围和放大倍数计算 出微生物的数量。
平板计数法
将样品稀释后涂布在培养 基上，培养后统计菌落数 量，计算出样品中的微生 物数量。
流式细胞术
利用流式细胞仪对微生物 进行计数和大小测量，具 有快速、准确和高通量的 特点。
学习观察霉菌的方法和技巧
Hale Waihona Puke 010203
04
培养基制备
选择适合霉菌生长的培养基， 如PDA培养基，按照配方配
制培养基并灭菌。
接种与培养
参考文献
霉菌的形态特征
霉菌在显微镜下呈现丝状或分支状结构，通常为白色或灰色。
观察培养基
选择适合霉菌生长的培养基，如孟加拉红培养基或察氏培养基，以 促进霉菌的生长和观察。
计数方法
采用菌落计数法，通过在显微镜下观察培养基表面上的霉菌菌落数 量，计算出每克或每毫升样品中的霉菌数量。
THANKS FOR WATCHING
生长条件
霉菌可以在多种环境条 件下生长，如湿度、温
度、pH等。
分布广泛
霉菌在自然界中分布广 泛，可在土壤、空气、
水体等环境中生长。
03 实验步骤
样品采集与制备
样品采集
选择具有代表性的样品，如食品、土壤、水等，采集时要避免污染和交叉感染。
样品制备
将采集的样品进行适当处理，如破碎、稀释、过滤等，以便后续的实验操作。
实验五：微生物数量和大小测定霉菌的观察
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与讨论 • 参考文献
01 实验目的
了解微生物数量和大小的测定方法
01
02
03
显微镜计数法
通过显微镜观察并计数样 品中的微生物数量，根据 视野范围和放大倍数计算 出微生物的数量。
平板计数法
将样品稀释后涂布在培养 基上，培养后统计菌落数 量，计算出样品中的微生 物数量。
流式细胞术
利用流式细胞仪对微生物 进行计数和大小测量，具 有快速、准确和高通量的 特点。
学习观察霉菌的方法和技巧
Hale Waihona Puke 010203
04
培养基制备
选择适合霉菌生长的培养基， 如PDA培养基，按照配方配
制培养基并灭菌。
接种与培养
参考文献
霉菌的形态特征
霉菌在显微镜下呈现丝状或分支状结构，通常为白色或灰色。
观察培养基
选择适合霉菌生长的培养基，如孟加拉红培养基或察氏培养基，以 促进霉菌的生长和观察。
计数方法
采用菌落计数法，通过在显微镜下观察培养基表面上的霉菌菌落数 量，计算出每克或每毫升样品中的霉菌数量。
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8
实验(二) 微生物数量的测定
一、目的要求
1、明确血细胞计数板计数的原理。 2、掌握使用血细胞计数板进行微生物计 数的方法。
9
二、实验原理
细胞总数的测定（包括活的和已丧失活力 的细菌）
1、比浊法 2、染色涂片计数法 3、显微直接计数法
10
1、比浊法
比浊法的原理是利用细菌细胞在溶液中数量越多， 浊度越大，在光电比色计中测定时所吸收的光线 越多。
2、染色涂片计数法
取0.01ml的菌悬液放在1cm2 的玻片上，让其干燥， 然后固定染色，再置显微镜下计数每一视野中的 菌数，算出视野面积，按下列公式即可求出每ml 原菌液中的含菌数。
每 ml 原 菌 液 中 的 含 菌 数 = 视 野 中 的 平 均 菌 数 ×1cm2/视野面积×100×稀释倍数
11
3、显微直接计数法
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮 液置于一种特别的具有确定面积和容积的载 玻片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数 的一种方法。
显微镜直接计数法的优点是直观、快速。缺 点是所测得的结果通常是死菌体和活菌体的 总和。目前已有一些方法可以克服这一缺点， 如结合活菌染色，微室培养等方法来达到只 计数活菌体的目的。
12
血细胞计数板由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横 槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分 为九个大方格，中间的大方格即为计数室。计数室是由一个大方格 分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格；共计400个小 方格。每一个大方格的面积为1 mm2，盖玻片与计数区之间的高度
中格
细胞 记数
记数 1 2 3 4 5
中格
细胞 记数
2、计算酵母菌（以及大肠杆菌）悬液的浓度。稀释 倍数为1
四、思考题
1、根据你的体会，说明用血细胞计数板计数的误差主 要来自哪些方面？应如何尽量减少误差、力求准确？
17
实验（三）霉菌的形态观察
一、实验目的
观察霉菌的形态结构特征 学习掌握霉菌染色的基本方法
3
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片， 一般是将l mm等分为100格，每格长0.01 mm(即10 um) ，用于校正目镜测微尺每格的相对长度。
目镜测微尺是一块中央有精确的等分刻度的圆形小 玻片，置于接目镜中的隔板上。目镜测微尺每小格所 代表的实际长度不一样，测量前，必须先用镜台测微 尺进行校正。20 Nhomakorabea青霉
属于半知菌亚门,分生 孢子梗基部无足细胞， 孢子梗顶端不膨大成 囊，而是多次分枝形 成扫帚状，小梗末端 形成分生孢子。
21
根霉
横向生长的菌丝产生假 根，附着在基质上。
菌丝无隔、无性生殖产 生孢囊孢子，有性生 殖产生接合孢子。
22
三、实验材料
1. 黑曲霉、青霉示范片。
23
四、实验步骤
主要观察黑曲霉菌丝分生孢 子着生情况（辨认顶囊、 分生孢子梗、足细胞和分 生孢子）
15
三、实验步骤
1、在10×和40×下找到计数室。
2、盖上盖玻片将摇匀的酿酒酵母菌（或大肠杆菌）悬 液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用 自动进入计数室。如滴入过多，溢出并流入两侧槽内，使 盖玻片浮起，体积改变，会影响计数结果，需用滤纸把多 余的溶液吸出，以槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少， 经多次充液，易产生气泡，应洗净计数室，干燥后重做。
4
目镜测微尺 镜台测微尺
利用镜台测微尺测 定目镜测微尺的每 格绝对值
目镜测微尺测定微 生物大小
5
三、实验器材
1、菌种： 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）
2、器材： 显微镜、镜台测微尺、目镜测微尺
6
三、实验步骤
1、目镜测微尺的校正
镜台测微尺有刻度的一面朝上，置显微镜载物台上， 先在低倍镜下，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野 中央。转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的 刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某 一区域内两线完全重合，分别数出两重合线之间镜台 微尺和目镜微尺所占的格数。计算10x、40x 、油镜 下目镜测微尺的校正值。
实验五 微生物大小和数量 测定、霉菌的形态观察
1
实验(一) 微生物大小的测定
一、目的要求
学习使用镜台测微尺和目镜测微尺在 显微镜下测定微生物大小的方法。
2
二、实验原理
• 对于病毒、细菌、放线菌、真菌和原生动物等不同类型的微 生物来说，它们的大小存在很大的差异。
• 在同一类型中不同种类的微生物，或同一种类中不同时期的 微生物个体，它们的大小也存在很大的差异。
为0.1 mm，所以计数室的容积为0.1 mm3 。
计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均 值，以及大方格中的总菌数，再换算成1 ml菌液中的总菌数。
13
１个计数室＝１×１mm 包含５×５个中方格
１个中方格＝４×４个小方格 14
三、实验器材
1、菌种： 酿酒酵母
2、器材： 显微镜、血球计数板
主要观察青霉菌丝分生孢子 着生情况（辨认分生孢子 梗和分生孢子）
3、静止5 min（为什么），先用低倍镜将计数室移至 视野中央。
4、在高倍下计数：每个计数室选5个中格(4个角和中央 的一个中格)中的菌体进行计数。对于分布在刻线上的细菌， 依照“数上不数下，数左不数右“的原则进行计数。
16
三、实验结果
1、统计每个计数室（五个中格）的细胞数量
记数 1 2 3 4 5
18
霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛
网形二丝、状菌实体验的真原菌理，统称为霉菌。霉菌包括分
类学上许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻 状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。霉菌 菌丝分为有隔菌丝和无隔菌丝两类.
19
黑曲霉
属于半知菌亚门, 菌丝有隔,细 胞多核；部分气生菌丝细胞 形成特化的厚壁、膨大的足 细胞，由足细胞的中间稍呈 垂直地向上延长，形成分生 孢子梗。
目镜测微尺每格长度（um）＝两重合线间镜台测微尺 格数×10/两重合线间目镜测微尺格数
2、细胞大小的测量
酵母菌悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片，置显微镜
载物台上。用目镜测微尺测量细胞宽和长。
7
三、实验结果
计算出目镜测微尺校正结果以及酵母菌大小测 定结果
四、思考题 p51 2(2)
1、在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大 倍数的物镜来测定同一细菌的大小时，其测定结 果是否相同？为什么？
实验(二) 微生物数量的测定
一、目的要求
1、明确血细胞计数板计数的原理。 2、掌握使用血细胞计数板进行微生物计 数的方法。
9
二、实验原理
细胞总数的测定（包括活的和已丧失活力 的细菌）
1、比浊法 2、染色涂片计数法 3、显微直接计数法
10
1、比浊法
比浊法的原理是利用细菌细胞在溶液中数量越多， 浊度越大，在光电比色计中测定时所吸收的光线 越多。
2、染色涂片计数法
取0.01ml的菌悬液放在1cm2 的玻片上，让其干燥， 然后固定染色，再置显微镜下计数每一视野中的 菌数，算出视野面积，按下列公式即可求出每ml 原菌液中的含菌数。
每 ml 原 菌 液 中 的 含 菌 数 = 视 野 中 的 平 均 菌 数 ×1cm2/视野面积×100×稀释倍数
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3、显微直接计数法
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮 液置于一种特别的具有确定面积和容积的载 玻片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数 的一种方法。
显微镜直接计数法的优点是直观、快速。缺 点是所测得的结果通常是死菌体和活菌体的 总和。目前已有一些方法可以克服这一缺点， 如结合活菌染色，微室培养等方法来达到只 计数活菌体的目的。
12
血细胞计数板由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横 槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分 为九个大方格，中间的大方格即为计数室。计数室是由一个大方格 分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格；共计400个小 方格。每一个大方格的面积为1 mm2，盖玻片与计数区之间的高度
中格
细胞 记数
记数 1 2 3 4 5
中格
细胞 记数
2、计算酵母菌（以及大肠杆菌）悬液的浓度。稀释 倍数为1
四、思考题
1、根据你的体会，说明用血细胞计数板计数的误差主 要来自哪些方面？应如何尽量减少误差、力求准确？
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实验（三）霉菌的形态观察
一、实验目的
观察霉菌的形态结构特征 学习掌握霉菌染色的基本方法
3
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片， 一般是将l mm等分为100格，每格长0.01 mm(即10 um) ，用于校正目镜测微尺每格的相对长度。
目镜测微尺是一块中央有精确的等分刻度的圆形小 玻片，置于接目镜中的隔板上。目镜测微尺每小格所 代表的实际长度不一样，测量前，必须先用镜台测微 尺进行校正。20 Nhomakorabea青霉
属于半知菌亚门,分生 孢子梗基部无足细胞， 孢子梗顶端不膨大成 囊，而是多次分枝形 成扫帚状，小梗末端 形成分生孢子。
21
根霉
横向生长的菌丝产生假 根，附着在基质上。
菌丝无隔、无性生殖产 生孢囊孢子，有性生 殖产生接合孢子。
22
三、实验材料
1. 黑曲霉、青霉示范片。
23
四、实验步骤
主要观察黑曲霉菌丝分生孢 子着生情况（辨认顶囊、 分生孢子梗、足细胞和分 生孢子）
15
三、实验步骤
1、在10×和40×下找到计数室。
2、盖上盖玻片将摇匀的酿酒酵母菌（或大肠杆菌）悬 液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用 自动进入计数室。如滴入过多，溢出并流入两侧槽内，使 盖玻片浮起，体积改变，会影响计数结果，需用滤纸把多 余的溶液吸出，以槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少， 经多次充液，易产生气泡，应洗净计数室，干燥后重做。
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目镜测微尺 镜台测微尺
利用镜台测微尺测 定目镜测微尺的每 格绝对值
目镜测微尺测定微 生物大小
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三、实验器材
1、菌种： 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）
2、器材： 显微镜、镜台测微尺、目镜测微尺
6
三、实验步骤
1、目镜测微尺的校正
镜台测微尺有刻度的一面朝上，置显微镜载物台上， 先在低倍镜下，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野 中央。转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的 刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某 一区域内两线完全重合，分别数出两重合线之间镜台 微尺和目镜微尺所占的格数。计算10x、40x 、油镜 下目镜测微尺的校正值。
实验五 微生物大小和数量 测定、霉菌的形态观察
1
实验(一) 微生物大小的测定
一、目的要求
学习使用镜台测微尺和目镜测微尺在 显微镜下测定微生物大小的方法。
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二、实验原理
• 对于病毒、细菌、放线菌、真菌和原生动物等不同类型的微 生物来说，它们的大小存在很大的差异。
• 在同一类型中不同种类的微生物，或同一种类中不同时期的 微生物个体，它们的大小也存在很大的差异。
为0.1 mm，所以计数室的容积为0.1 mm3 。
计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均 值，以及大方格中的总菌数，再换算成1 ml菌液中的总菌数。
13
１个计数室＝１×１mm 包含５×５个中方格
１个中方格＝４×４个小方格 14
三、实验器材
1、菌种： 酿酒酵母
2、器材： 显微镜、血球计数板
主要观察青霉菌丝分生孢子 着生情况（辨认分生孢子 梗和分生孢子）
3、静止5 min（为什么），先用低倍镜将计数室移至 视野中央。
4、在高倍下计数：每个计数室选5个中格(4个角和中央 的一个中格)中的菌体进行计数。对于分布在刻线上的细菌， 依照“数上不数下，数左不数右“的原则进行计数。
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三、实验结果
1、统计每个计数室（五个中格）的细胞数量
记数 1 2 3 4 5
18
霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛
网形二丝、状菌实体验的真原菌理，统称为霉菌。霉菌包括分
类学上许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻 状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。霉菌 菌丝分为有隔菌丝和无隔菌丝两类.
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黑曲霉
属于半知菌亚门, 菌丝有隔,细 胞多核；部分气生菌丝细胞 形成特化的厚壁、膨大的足 细胞，由足细胞的中间稍呈 垂直地向上延长，形成分生 孢子梗。
目镜测微尺每格长度（um）＝两重合线间镜台测微尺 格数×10/两重合线间目镜测微尺格数
2、细胞大小的测量
酵母菌悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片，置显微镜
载物台上。用目镜测微尺测量细胞宽和长。
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三、实验结果
计算出目镜测微尺校正结果以及酵母菌大小测 定结果
四、思考题 p51 2(2)
1、在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大 倍数的物镜来测定同一细菌的大小时，其测定结 果是否相同？为什么？