微生物实验报告 微生物形态观察 分布 灭菌消毒

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微生物实验

微生物实验

细菌形态观察

细菌分布

消毒灭菌

细菌形态观察

一、实验目的

1.掌握光学显微镜(油镜)的使用及日常维护

2.掌握细菌的三种形态

3.掌握临床常见细菌的形态及染色

4.掌握细菌的特殊结构

5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点

二、实验原理

1. 普通光学显微镜(油镜)的使用

1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油,然后转换油镜头

2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器,使油镜头浸没在油滴内,当油镜头几乎接触玻片时停止转动,

以免碰撞玻片,用双眼观察目镜,同时调节细调节器,直至细菌清晰

3. 根据需要调节显微镜亮度

2. 普通光学显微镜的维护

1.移动显微镜时,用右手持镜壁,左手托镜座,平端于胸前

2.油镜用毕后,要立即用擦镜纸擦去香柏油;再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头;最后,用干

净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去,以免损伤油镜头

3.镜头擦净后,降低接物镜并将其转成八字形,罩好镜罩放入柜内

4.做好使用记录

3.微生物知识

1.细菌按形态分类:

球菌:球形(包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等)

杆菌:杆状(包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等)

螺旋菌:螺旋状(包括螺旋菌、弧菌等)

2.细菌的基本结构

细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体

3.细菌的特殊结构

荚膜:如肺炎双球菌

鞭毛:又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。如:变形杆菌为周毛菌

菌毛

芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌

4.微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类。

原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体

真核类:真菌、原生动物、显微藻类

非细胞类:病毒、亚病毒

5.真菌

单细胞:圆形、芽生孢子。如:酵母菌

多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。如:霉菌

6.白假私酵母菌(白念)

生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落

厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定

致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染

微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝

7.新型隐球菌

生物学性状:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜(比菌体大1-3倍)

致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性

三、实验材料

记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个

四、实验内容

1. 观察细菌三种形态

1)球菌

链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌(子弹形)、脑膜炎双球菌(蚕豆形)、四联菌

2)杆菌

破伤风杆菌、白喉杆菌(异染颗粒)、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌

3)螺形菌

弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌

2. 观察细菌的特殊结构

芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌

3. 绘图

葡萄球菌(staphyloccocus);肺炎双球菌(pneumo coccus);脑膜炎球菌(meningococcus);破伤风杆菌(Clostridium Tantenus);霍乱弧菌(vibrio cholera);芽胞(spore);鞭毛(flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)

五、实验结果

绘8幅细菌镜下图,已交。

六、思考与讨论

1.显微镜高倍镜使用时看不清楚的常见原因

(1)未滴加镜油

(2)镜头不干净

(3)标本放置反了,所以达不到对焦平面

(4)制片问题:标本太厚、染色误差等

细菌分布

一、实验目的

1. 掌握固体培养基的制备

2. 掌握机体常见部位及环境中的细菌采样、培养、及初步鉴定

3. 掌握革兰氏染色方法及结果判定

二、实验原理

1. 培养基:

1.细菌生长所需营养物质:水、碳源、氮源、无机物和生长因子

2.培养基分类:

(1)根据营养物质:营养培养基、选择培养基、鉴别培养基

(2)根据物理性质:液体培养基、固体培养基和半固体培养基

3.细菌在培养基中的生长状况:表面生长、均匀浑浊生长、沉淀生长

2. 革兰氏染色:

革兰阳性细菌细胞壁的肽聚糖(peptidoglycan)层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,通道弯曲,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后孔径仍可使结晶紫与碘的复合物通过,因而将染料洗去而被脱色。

三、实验材料

咽拭子、羊血培养皿:1套/人;大号普通培养皿:1块/2人;载玻片:1片/人;A、B菌:6套/桌;NS:1份/人;滤纸:1张/人;消毒液:4套/桌;三角瓶、电天平、营养琼脂、称药纸、称药勺、量筒:1套/桌

四、实验内容

1. 培养基制备

1)按产品要求称取营养琼脂

2)每实验桌制备200ml

3)高压蒸汽灭菌后,在洁净工作台内倒平皿

4)所制备的普通平皿用于空气培养

2. 机体不同部位的细菌采样、培养

1)咽部正常菌群的采样、培养

咽拭子擦拭咽部,平行划线法接种于羊血平皿。

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