维生素C及其制剂的质量控制研究

关键词：维生素C；质量控制；含量测定；维生素C（vitaminC）又称L-抗坏血酸（L-ascorbic acid），是一种水溶性维生素，能促进骨胶原的生物合成，利于组织创伤口的更快愈合、促进胶原蛋白的合成，防止牙龈出血、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血，防止关节痛、腰腿痛，促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命、同时能改善铁、钙和叶酸的利用、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，能够预防心血管疾病，坚固结缔组织，增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力，其参与体内多种生化反应，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。

最近更有科学研究发现，维生素C在预防癌症、心脏病等都起了很重要的作用。

市场上对VitC的需求量在不断增加，因此生产多种维生素C制剂以应对各种需求，具有一定的必要性，而各种制剂能否更好地发挥相应的医疗保健作用，则与其质量息息相关，故对维生素C及其制剂的质量控制研究势在必行，而又不可马虎松懈。

维生素C常见的剂型主要有注射剂、片剂、颗粒剂、泡腾片及胶囊剂等，由于维生素C特殊的化学特性，对其制剂的生产过程必须严加控制，但总体的控制及含量测定方法大同小异，以下将做详细介绍。

一、性质决定生产，维生素C制剂的生产与其性质息息相关，故在其制剂生产前，应将其性质了解清楚，在生产中才能通过做好相应措施，生产出优质、合格的产品。

、原料概况中文名称：维生素C英文名称：vitamin C其他名称：抗坏血酸(ascorbic acid)分子式：C6H8O6分子量：IUPAC名：2,3,5,6-四羟基-2-己烯酸-4-内酯、性状维生素C是一种水溶性维生素，纯品为白色结晶或结晶性粉末，无臭、味酸，久置色渐变微黄，水溶液呈酸性,具有较强的还原性，加热或在溶液中易氧化分解，在碱性条件下更易被氧化，为己糖衍生物。

易溶于水，能溶于乙醇，而不溶于氯仿或乙醚，熔点为190～192℃，熔融时同时分解。

分子结构中具有二烯醇和内酯环结构，且有两个手性碳原子（C4、C5），不仅使维生素C性质极为活泼，且具有旋光性,比旋度+°至+°。

其分子中的二烯醇基具有极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为去氢抗坏血酸，加氢又可还原为抗坏血酸，在碱性溶液或强酸性溶液中能进一步水解为二酮古罗糖酸[1]。

由于双键使内酯环稳定，和碳酸钠作用可生成单钠盐，不致发生水解，但在强碱中，内酯环可水解，生成酮酸盐。

具有糖类的性质和反应。

本品具有具有共轭结构，在稀盐酸溶液中于243nm波长处有最大吸收，为560，可用于鉴别和含量测定。

若在中性或者碱性条件中，最大吸收波长红移至265nm。

二、优质的产品源于优质的原料药，故生产前应对原料药进行鉴别与检验，唯有合格的原料才可投入生产，根据2010版《中国药典》，维生素C的鉴别方法主要有以下几种。

与硝酸银反应维生素C分子中有烯二醇基，具有强还原性，可被硝酸银氧化为去氢抗坏血酸，同时产生黑色金属银沉淀。

方法：取供试品，加水10ml溶解后，取该溶液5ml，加硝酸银试液即生成银的黑色沉淀。

在另一份中，加2,6-二氯靛酚钠试液1-2滴，它与维生素C反应生成无色的酚亚胺，试液的颜色即消失。

与2，6-二氯靛酚反应2，6-二氯靛酚反应为一染料，其氧化型在酸性介质中为玫瑰红色，碱性介质中为蓝色。

与维生素C作用后生成还原型无色的酚亚胺。

方法：取供试品，加水10ml溶解后，取该溶液5ml，加2,6-二氯靛酚钠试液1-2滴，试液的颜色即消失。

与其他氧化剂反应维生素C可被亚蓝基、高锰酸钾、碱性酒石酸铜试液、磷钼酸等氧化剂氧化为去氢抗坏血酸，同时抗坏血酸可使其试剂褪色，产生沉淀或呈现颜色。

糖类反应维生素C可在三氯化醋酸或盐酸存在下水解、脱羧、生成戊糖，再失水，转化为糠醛，加入吡咯，加热至50℃产生蓝色。

紫外分光光度法维生素C在L盐酸溶液中，在243nm波长处有唯一最大吸收，其吸收系数为545-585nm，可利用此特征进行鉴别。

薄层色谱法从相应制剂中提取维生素C并制成供试品溶液，与维C对照品溶液在相同条件下展开，所显主斑点位置和颜色应相同。

三、质量是保证一个制剂能否发挥相应疗效的关键，相关剂型生产出来后，应对其质量进行检查，只有质量检查合格了，该药品才是有效的，才可投放市场。

维生素C的质量检查主要有杂质检查与含量测定，相关的检步骤如下。

.质量检查《中国药典》规定应检查维生素C及其片剂、注射剂的澄清度与颜色，另外对维生素C原料中铜、铁离子进行检查。

另外还有炽灼残渣，重金属，细胞内毒素等。

注射液和泡腾制剂还需检查酸碱度。

溶液的澄清度与颜色取维生素C供试品，加水15ml，振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在420nm的波长处测定吸光度，不得过。

炽灼残渣炽灼残渣不得过％（附录Ⅷ N）。

草酸含量取本品，加水，振摇使维生素C溶解，加氢氧化钠试液，加稀醋酸1ml，加氯化钙试液，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；另精密称取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1ml，加氯化钙试液，摇匀，放置1小时，作为对照品溶液。

供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照品溶液（%）。

铁离子含量取本品两份，分别置25ml量瓶中，一份中加L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(B)；另一份中加标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀），加L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液(A)。

照原子吸收分光光度法，在的波长处分别测定，应符合规定。

铜离子含量取本品两份，分别置25ml量瓶中，一份中加L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(B)；另一份中加标准铜溶液（精密称取硫酸铜393mg，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀），加L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液(A)。

照原子吸收分光光度法，在的波长处分别测定，应符合规定。

重金属含量取本品，加水溶解成25ml，依法检查（《中国药典》附录Ⅷ H第一法），含重金属不得过百万分之十。

.含量测定维生素C的含量测定大多是基于其具有强的还原性，可被不同氧化剂定量氧化而进行。

因容量分析法简便快速、结果准确，被各国药典所采用，目前测定维生素C含量的主要方法有：碘量法、2，6-二氯靛酚滴定法，而电位滴定法、二甲苯二氯靛酚比色法、2，4-二硝基苯肼比色法、荧光分光光度法、HPLC法、毛细管电泳法、比浊测定法、极谱法等也相继发展，适用于制剂和体液中维生素C的专属测定。

氧化还原滴定法a. 碘量法.(2010版)因维生素C具有强还原性，I2有强氧化性，I2可将维生素C氧化为去氢抗坏血酸，同时依据淀粉溶液变色而指示终点。

方法：取本品20片，精密称定，精密称取适量（约相当于维生素C ），置100mL 量瓶中，加新沸放冷蒸馏水100mL与稀醋酸10mL的混合液适量，振摇使之溶解并定容，摇匀，经干燥滤纸滤过，精密量取续滤液50mL，加淀粉指示剂1mL，用碘滴定液（L）滴定，至溶液显蓝色且持续30s不褪色。

每1mL碘滴定液（L）相当于的维生素C。

注意：①.因维生素C在碱性条件下易被空气中的氧氧化，所以为确保维生素C尽可能不被氧化，应使其处于酸性条件下。

整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。

②.用I2溶液滴定时，速度要缓慢，接近终点时更要放慢速度，滴至微蓝色且在30s 内不褪色，即为滴定终点。

③.因为I2见光易分解及配制I2溶液时未能将其完全溶解的原因，都会使I2溶液的浓度有所变化。

所以在每次测样品之前，都应先用维生素C的标准溶液重新标定I2溶液的浓度。

Δ本法操作简便，几乎适用于所有维生素C制剂的含量测定。

b. 2，6-二氯靛酚滴定法2，6-二氯靛酚为一染料，其颜色反应表现为两种特性，一是取决于其氧化还原状态，氧化态为深兰色，还原态为无色；二是受其介质的酸度影响，在碱性溶液中呈深兰色，在酸性介质中呈浅红色。

用兰色的碱性指示剂标准溶液，对含有维生素C的酸性浸取液进行氧化还原滴定，指示剂被还原为无色，当到达滴定终点时，多余的指示剂在酸性介质中则表现为红色，由指示剂的用量就可以计算样品中还原性抗坏血酸的含量。

方法：称取药物10克，研磨后加入80mL有机溶剂萃取，用脱脂棉过滤，滤液再用滤纸过滤。

将滤液转入100mL量瓶中，用相应有机溶剂定容。

滴定时吸取稀释10倍的样品液三份（10mL）分别置于三个量瓶中，用2,6-二氯靛酚溶液（mL）滴定，记录消耗的体积数。

另吸取相应的有机溶剂三份做空白滴定，方法同上。

滴定度为mL[2]。

为解决2,6-二氯靛酚滴定法不适合用于有色溶液中的抗坏血酸测点问题，可以利用2,6-二氯靛酚能溶于有机溶剂的特点，以1,2-二氯乙烷为有机溶剂，用2,6-二氯靛酚滴定抗坏血酸，当还原性抗坏血酸消耗殆尽，多滴入的2,6-二氯靛酚就会进入有机层呈粉红色，以此来判断滴定终点。

c. 电位滴定法以Pt为指示电极，甘汞为参比电极，根据滴定过程中电池电动势的变化来确定滴定终点。

E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)Δ电位滴定法可以有效解决滴定分析过程中遇到的有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题。

薄层扫描法[3]（1）对照品溶液的配制精密称取维生素C标准品100mg，用缓冲液配成lmg/ml的标准溶液。

精密称取维生素C标准溶液1、2、3、4、5ml，分别置于10ml容量瓶中，用缓冲溶液稀释至刻度。

（2）样品的含量测定取维生素C片1O片，研细，精密称取平均片重一片的粉末，放入l00ml容量瓶中，加缓冲液至刻度，振摇，使维生素C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用缓冲稀释至刻度。

用5μl定量毛细管点样品溶液与不同浓度的标准液于同一试纸上，然后扫描测定峰面积，由工作曲线法计算维生素c片中的维生素C含量。

Δ用薄层扫描法测定维生素C片中的维生素C的含量，结果准确，重现性好，样品中的其它辅料不干扰。

分光光度法a. 紫外分光光度法[4]（1）供试品溶液的准备取本品20片精密称定，研细，精密称取适量(约相当于维生素C g)，置100ml量瓶中，加0．005 mol/L硫酸液适量，振摇使维生素C溶解，加 mol/L硫酸液至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液；精密量取续滤液5 ml置250 ml量瓶中，用0．005 mol/L硫酸液稀释至刻度，摇匀，即得。

（2）样品测定取供试品溶液，照紫外分光光度法在243 nm波长处测定吸光度，按为560 计算含量。