分子生物学考试复习题及答案

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第一章绪论

一.简述分子生物学的主要内容。

1.DNA重组技术(又称基因工程)

2.基因表达调控研究

3.生物大分子的结构功能的研究——结构分子生物学

4.基因组、功能基因组与生物信息学研究

二.什么是遗传学的中心法则和反中心法则?

遗传学中心法则:描述从一个基因到相应蛋白质的信息流的途径。遗传信息贮存在DNA中,DNA被复制传给子代细胞,信息被拷贝或由DNA转录成RNA,然后RNA翻译成多肽。

反中心法则:由RNA逆转录到DNA,再由DNA转录到RNA,然后RNA翻译成多肽、蛋白质。

第二章染色体与DNA

一、名词解释

半保留复制:DNA复制时,以亲代DNA的每一条链作为模版,合成完全相同的两个双链自带DNA分子,每个子代DNA分子中都含有一条亲代DNA链的复制方式。

冈崎片段:在DNA复制过程中,前导链能连续合成,而滞后链只能是断续的合成5 3 的多个短片段,这些不连续的小片段称为冈崎片段。

复制子:从复制原点到终点,组成一个复制单位,叫复制子。

插入序列:最简单的转座子,不含有任何宿主基因,它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。

DNA的变性和复性:变性:指DNA双链的氢键断裂,完全变成单链。复性:指热变性的DNA缓慢冷却,单链恢复成双链。

双向复制:复制从一个固定的起始点开始,同时向两个方向等速进行。

引物酶:一种特殊的RNA聚合酶,在DNA模版上合成一段RNA链,这段RNA链是DNA复制起始时必需的引物。

转座子:存在与染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。

碱基切除修复:首先由糖苷水解酶识别特定受损核苷酸上的N-β糖苷键,在DNA上形成AP位点,由AP核酸内切酶把受损的核苷酸的糖苷-磷酸键切开,移去包括AP位点在内的小片段DNA,由聚合酶Ⅰ合成新片段,DNA连接酶最终把两者连接成新的DNA链。

DNA重组修复:即“复制后修复”。机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA部位可先复制再修复。在复制时,先跳过损伤部位,在和成链中留下一个缺口。对该缺口的修复即“DNA重组修复”:先从同源DNA母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处,然后再用新合成的序列补上母链空缺。

解旋酶:通过水解ATP获得能量来解开双链DNA的酶。

单链结合蛋白:与解开的DNA单链紧密结合,防止重新形成双链,并免受核酸酶降解。在复制中维持模板处于单链状态。

DNA连接酶:连接DNA链3'-OH末端和相邻DNA链5'-P末端,形成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连接成完整的链。

转座子:一段DNA顺序可以从原位上单独复制或断裂下来,环化后插入另一位点,并对其后的基因起调控作用。

P转座子:是一种能够诱发杂种不育的果蝇转座子,果蝇中几乎所有的杂种不育都由P转座子引起。

二、理解题

1.DNA和RNA分子的基本组成成分。

1、DNA由4种主要的脱氧核苷酸(dAMP、dGMP、dCMT和dTMP)通过3′,5′-磷酸二酯键连接而成。

2、RNA是由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA 的碱基主要有4种,即A腺嘌呤,G鸟嘌呤,C胞嘧啶,U尿嘧啶。

2.DNA分子的一级结构:定义、组成和表示方法。

1、定义:指DNA分子中多个脱氧核苷酸的排列顺序。即数目庞大的四种碱基的排列顺序。

2、DNA的碱基组成符合Chargaff定则:(1)在所有的DNA中,A=T,G=C 即A+G=T+C

(2)DNA的碱基组成具有种的特异性,即不同生物物种的DNA具有自己独特的碱基组成,但没有组织和器官的特异性。

表示方法:(1)结构式表示法:

(2)线条式表示法:

(3)字母式表示法:

3.DNA双螺旋结构的基本特点?

1、螺旋直径2nm;螺旋周期包含10对碱基;螺距3.4nm;相邻碱基对平面的间距0.34nm。

2、嘌呤和嘧啶碱基对层叠于双螺旋的内侧。顺着螺旋轴心从上向下看,可见碱基平面与纵轴垂直,且螺旋的轴心穿过氢键的中点。

3、两链上的碱基以氢键相连,C与G,A与T配对。

4、由两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手螺旋结构。一条由5’端到3’端,另一条从3’端到5’端。链间有螺旋形的凹槽,其中一个较浅的叫小沟(约1.2nm)一个较深的叫大沟(约2.2nm)。4.DNA复制体系包括哪些要素?

底物:dNTP (dATP、dGTP 、 dCTP 、dTTP) ;

聚合酶(polymerase):依赖DNA的DNA聚合酶, 简写为DNA-pol;

模板(template):解开成单链的DNA母链;

引物(primer):提供3´-OH末端的寡核苷酸;

其他的酶和蛋白质因子

5.原核生物DNA聚合酶的种类和异同?

原核生物DNA聚合酶种类的比较

修复合成

去除引物填补空隙校对复制校对

6.DNA复制的基本过程和终止机理?

1、DNA双螺旋的解旋:

DNA在复制时,其双链首先解开,形成复制叉,这是一个有多种蛋白质以及酶参与复制的过程。

2.DNA复制的引发:所有的DNA聚合酶都从3’羟基端起始DNA合成。DNA复制时,往往先由引发每在DNA 复制时,往往先由引发酶在DNA模版上合成一段RNA链,它提供引发末端(即引物),接着由DNA聚合酶从RNA聚合酶从RNA引物3’端开始合成新的DNA链。

3、在DNA聚合酶的作用下,水解切除RNA引物,填补空缺。

4、在DNA连接酶的作用下,连接相邻DNA片段。

5、终止机理:当复制叉前移遇到22个碱基的重复性终止序列(TER)时,Ter-Tus复合物能使DnaB不再将DNA解链,阻挡复制叉的继续迁移,等到相反方向的复制叉到达后,停止复制。期间,人后50~100bp未被复制,由修复方式填补空缺,而后两条链解开。

7.DNA复制保真信的原理?

至少依赖三种机制:1. 遵守严格的碱基配对规律;2. 聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能;3. 复制中的即时校读功能。

8.什么是RNA反转录,以及他的生物学意义?

定义:以RNA为模版以四种dNTP为原料,在PBA指导的DNA聚合酶的催化下,按照碱基互补配对的原则合成DNA的过程。

意义:对分子生物学的中心法则进行了修正和补充;在实际工作中,有助于基因工作的实施,可用于目的基因的制备。

9.什么是DNA自发性损伤?

复制过程中碱基配对时产生的误差,经DNA聚合酶校正和SSB等综合校对,任未被校正的DNA损伤。包括:DNA复制中的错误;DNA的自发性化学变化(碱基的异构互变、碱基的脱氨基作用、脱嘌呤与嘧啶、碱基修饰与链断裂);

10.DNA修复包括哪些类型?

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