《显微镜直接计数法》课件
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《显微镜直接计数法》课件
计数微生物的数量。
数据处理
根据观察到的微生物数 量，进行数据处理和分 析，推算样品中微生物
的数量。
03
显微镜直接计数法的应用
在生物学中的应用
微生物计数
显微镜直接计数法常用于 微生物计数，如细菌、酵 母和原生动物等。
细胞计数
在细胞生物学研究中，显 微镜直接计数法可用于细 胞计数，如血细胞、组织 细胞等。
定义与特点
定义
显微镜直接计数法是通过显微镜 直接观察微生物的数量并进行计 数的方法。
特点
该方法具有操作简便、快速、准 确等优点，但也存在一定的局限 性，如需要经验丰富的操作人员 和较高的样品浓度。
02
显微镜直接计数法的原理
原理概述
显微镜直接计数法是一种利用显 微镜直接观察和计数微生物数量
的方法。
对观察者要求较高
显微镜直接计数法需要观察者具备较高的专业知识和技能，否则容易 出现误差和误判。
05
显微镜直接计数法的改进和发展趋势
பைடு நூலகம்
技术改进
自动化技术
通过引入自动化技术，减少人工 操作，提高计数准确性和效率。
高分辨率成像
采用高分辨率成像技术，提高显 微镜的分辨率和清晰度，使计数
更加准确。
图像处理算法
显微镜直接计数法可以直接观察样本，能 够直观地看到微生物的数量和形态，有助 于快速判断和识别。
显微镜直接计数法通过直接观察样本，能 够较为准确地计算出微生物的数量，避免 了间接计数法的误差。
灵活性
操作简便
显微镜直接计数法可以根据需要选择不同 的观察区域和样本，灵活性较高，适用于 多种不同类型的微生物计数。
涂片法
将样品涂抹在载玻片上， 利用显微镜观察和计数微 生物的数量。
数据处理
根据观察到的微生物数 量，进行数据处理和分 析，推算样品中微生物
的数量。
03
显微镜直接计数法的应用
在生物学中的应用
微生物计数
显微镜直接计数法常用于 微生物计数，如细菌、酵 母和原生动物等。
细胞计数
在细胞生物学研究中，显 微镜直接计数法可用于细 胞计数，如血细胞、组织 细胞等。
定义与特点
定义
显微镜直接计数法是通过显微镜 直接观察微生物的数量并进行计 数的方法。
特点
该方法具有操作简便、快速、准 确等优点，但也存在一定的局限 性，如需要经验丰富的操作人员 和较高的样品浓度。
02
显微镜直接计数法的原理
原理概述
显微镜直接计数法是一种利用显 微镜直接观察和计数微生物数量
的方法。
对观察者要求较高
显微镜直接计数法需要观察者具备较高的专业知识和技能，否则容易 出现误差和误判。
05
显微镜直接计数法的改进和发展趋势
பைடு நூலகம்
技术改进
自动化技术
通过引入自动化技术，减少人工 操作，提高计数准确性和效率。
高分辨率成像
采用高分辨率成像技术，提高显 微镜的分辨率和清晰度，使计数
更加准确。
图像处理算法
显微镜直接计数法可以直接观察样本，能 够直观地看到微生物的数量和形态，有助 于快速判断和识别。
显微镜直接计数法通过直接观察样本，能 够较为准确地计算出微生物的数量，避免 了间接计数法的误差。
灵活性
操作简便
显微镜直接计数法可以根据需要选择不同 的观察区域和样本，灵活性较高，适用于 多种不同类型的微生物计数。
涂片法
将样品涂抹在载玻片上， 利用显微镜观察和计数微 生物的数量。
微生物的显微直接计数PPT课件
计算
每一个大方格边长为1毫米，则每一大方格 面积为1平方毫米。盖上盖玻片后，载玻片计数 室与盖玻片之间的高度为0.1毫米，所以每个计数 室（大方格）的体积为0.1立方毫米。
在计数时，通常数五个中方格的总菌数，求 得平均值。再乘上16或25就得一大方格中的总菌 数。然后再换算成1毫升菌液中的总菌数。 （1毫升＝1立方厘米＝1,000立方毫米）
实验四
微生物的显微直接计数
目的要求 实验原理 实验材料 实验程序 思考题
目的要求
• 了解血球计数板的构造和使用方法。 • 学习使用血球记数板测定微生物数量的方
法。
实验原理
血球计数板通常是一块特制的厚载玻片，载玻 片上有四条槽而构成三个平台。中间的平台较 宽，其中间又被一短横槽而隔成两半，每个半 边上面各刻有一个方格网，每个方格网共分九 大格，其中间的一大格又称为计数室，微生物 的计数就在此大格中进行。
1. 取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加盖玻片。
2. 取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴（ 不宜过多），使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。
3. 静置5分钟后，将血球计数板置于显微镜载物台上， 先用低倍镜找到计数板的大方格网位置。寻找时光圈要 缩小，光线要偏暗些，并将计数室移至视野中央。
4. 在高倍镜下计数：随机地计数五个中格内的菌数， 然后求得每个中格的平均值。乘上16（或25）就得出 一大格中的总菌数，最后再换算到每毫升菌液中的含 菌数量。由于菌体细胞在血球计数板上处于不同的空 间位置，要在不同的焦距下才能看到，故观察时必须 不断调节微调节器，方能数到全部菌体，以免遗漏。
5. 计算方法： 酵母菌细胞数／毫升=[（X1+X2+X3+X4+X5）/5]*25 （或16）×10×1000×稀释倍数
实验六 微生物的显微直接计数一等奖公开课ppt课件
出芽菌计数
压线菌计数
（5）清洗血球计数板
使用完毕后，将血球计数板在水龙头 上用水柱冲洗，切勿用硬物洗刷，洗完后 自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察每 小格内是否有残留菌体或其化沉淀物。若 不干净，则必须重复洗涤至干净为止。
五、实验报告
1. 将结果记录于下表中。
第一室
各个中格中菌数 1 2 34 5
血球计数板正面结构图Leabharlann 4-2计数室放大图
计数板结构
计菌器高度 0.02mm
血球计数板 高度0.1mm
（二）区分酵母菌死活细胞基本原理
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型 呈蓝色，还原型是无色。
用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，由于 细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原 能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成无色的还 原型。
(2)将标本片放3分钟后，先用低倍镜然后用
高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并
2. 酵母菌液的计数
（1）稀释 将酵母菌悬液进行适当稀释，菌液如
不浓，可不必稀释。 （ 2）镜检计数室
在加样前，先对计数板的计数室进行 镜检。若有污物，则需清洗后用电吹风吹 干后 才能进行计数。
（3）加样品
在血球计数板上盖上盖玻片, 用滴 管将摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽滴 一小滴,菌液会自动进入计数室，静置5分 钟。
实验六 微生物的显微直接计数
一、目的要求
1. 了解血球计数板的计数原理，掌握 血球计数板的计数方法。
2. 观察酵母菌的形态，学习区分酵母 菌死活细胞的方法。
二、基本原理
（一）血球计数板计数原理
血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条 横槽。横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网， 中间大方格为计数室：边长为１ｍｍ，深为0.1mm，容积 为0.1mm3(10-4ml)。计数室有两种规格：一是分为16个中 方格，每中方格中有25个小方格；另一种是分为25个中方 格，每中方格有16个小方格。两种都共有400个小方格。
显微镜的直接计数和大小测量
在40镜下看清镜台测微尺的刻度后转动目镜使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行移动载物台使目镜测微尺的镜下看清镜台测微尺的刻度后转动目镜使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行移动载物台使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合然后仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度
实 验 五
实验四 微生物的显 微镜直接计数法和 大小的测定
问题与讨论
♦ 为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来
校正？ 校正？
♦ 在显微镜下直接测定微生物数量有什么
优缺点？ 优缺点？
本次实验课结束
请确保血球计数板清洗干净！ 请值日生同学留下值日 下周再见！
实验步骤
♦ 测定酵母菌细胞的大小
测定的工具： 测定的工具：目镜测微尺 镜台测微尺
目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍 数而改变，也会因使用不同的显微镜而产生误差， 因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。
♦ 目镜测微尺的校正：在40×镜下，看清镜台测 目镜测微尺的校正： ×镜下，
微尺的刻度后，转动目镜， 微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜 台测微尺的刻度平行，移动载物台， 台测微尺的刻度平行，移动载物台，使目镜测 微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合 点与镜台测微尺的某一刻度重合， 微尺的 点与镜台测微尺的某一刻度重合，然 仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。 后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计 算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的 格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10µm， 格数。由于镜台测微尺的刻度每格长 ， 所以可得 目尺每格长度(µm)=（台尺格数×10）/目尺格数 （台尺格数× ） 目尺格数 目尺每格长度
实验目的
♦ 学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显
微镜下测定微生物大小的方法。 微镜下测定微生物大小的方法。
实 验 五
实验四 微生物的显 微镜直接计数法和 大小的测定
问题与讨论
♦ 为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来
校正？ 校正？
♦ 在显微镜下直接测定微生物数量有什么
优缺点？ 优缺点？
本次实验课结束
请确保血球计数板清洗干净！ 请值日生同学留下值日 下周再见！
实验步骤
♦ 测定酵母菌细胞的大小
测定的工具： 测定的工具：目镜测微尺 镜台测微尺
目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍 数而改变，也会因使用不同的显微镜而产生误差， 因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。
♦ 目镜测微尺的校正：在40×镜下，看清镜台测 目镜测微尺的校正： ×镜下，
微尺的刻度后，转动目镜， 微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜 台测微尺的刻度平行，移动载物台， 台测微尺的刻度平行，移动载物台，使目镜测 微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合 点与镜台测微尺的某一刻度重合， 微尺的 点与镜台测微尺的某一刻度重合，然 仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。 后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计 算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的 格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10µm， 格数。由于镜台测微尺的刻度每格长 ， 所以可得 目尺每格长度(µm)=（台尺格数×10）/目尺格数 （台尺格数× ） 目尺格数 目尺每格长度
实验目的
♦ 学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显
微镜下测定微生物大小的方法。 微镜下测定微生物大小的方法。
教学课件-显微镜直接计数法.
微生物生长量的测定 -显微镜直接测定法
酵母菌细胞的镜检计数
原理：主要采用显微镜直接计数法，该方法是将小量待测 样品的悬浮液置于一种特别的具有特定面积和容积的载玻 片上(又称计菌器），于显微镜下直接计数的一种简便、快 速、直观的方法。目前国内常用的计菌器：血细胞计数板
血球计数板的构造
四条槽构成三个平台， 中间较宽的平台被一短
0.1毫米，所以计数室的容积为0.1mm3（万分之一毫升）
计数方法
数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值， 再乘上25或16，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换 算成毫升菌液中的总菌数。设五个中方格中总菌数A，菌液 稀释倍数B，如果是25个中方格的计数板，则
1ml菌液中的总菌数=A/5×25×104×B=50000AB 同理，如果是16个中方格的计数板，则
1ml菌液中的总菌数=A/4×16×104×B=50000AB
操作步骤见视频
①、菌悬液的制备 ②、镜检计数室
பைடு நூலகம்
③、加样品：
④、显微镜计数(记录结果） ⑤、清洗血细胞计数板
横槽隔成两半。
计数室的刻度一般有两种规格 大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格
一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25 个小方格
无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方
格400个，每一个大方格边长为1毫米，则每一个大方格的 面积为1mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为
酵母菌细胞的镜检计数
原理：主要采用显微镜直接计数法，该方法是将小量待测 样品的悬浮液置于一种特别的具有特定面积和容积的载玻 片上(又称计菌器），于显微镜下直接计数的一种简便、快 速、直观的方法。目前国内常用的计菌器：血细胞计数板
血球计数板的构造
四条槽构成三个平台， 中间较宽的平台被一短
0.1毫米，所以计数室的容积为0.1mm3（万分之一毫升）
计数方法
数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值， 再乘上25或16，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换 算成毫升菌液中的总菌数。设五个中方格中总菌数A，菌液 稀释倍数B，如果是25个中方格的计数板，则
1ml菌液中的总菌数=A/5×25×104×B=50000AB 同理，如果是16个中方格的计数板，则
1ml菌液中的总菌数=A/4×16×104×B=50000AB
操作步骤见视频
①、菌悬液的制备 ②、镜检计数室
பைடு நூலகம்
③、加样品：
④、显微镜计数(记录结果） ⑤、清洗血细胞计数板
横槽隔成两半。
计数室的刻度一般有两种规格 大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格
一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25 个小方格
无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方
格400个，每一个大方格边长为1毫米，则每一个大方格的 面积为1mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为
显微镜直接计数法
……………………………………………………………最新资料推荐…………………………………………………血球计数板计数法利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法。
此法的优点是直观、快速。
将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。
由于计数室的容积是一定的（0.1㎜3），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。
由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。
血球计数板，通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。
中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格，总共也是400小格。
所以无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的。
每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积为1㎜2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜3。
其计算方法如下：1．16×25的计数板计算公式细胞数/ml=(100小格内的细胞数/100)×400×1000×稀释倍数2．25×16的计数板计算公式细胞数/ml=(80小格内的细胞数/80)×400×1000×稀释倍数器材酵母菌悬液，血球计数板，显微镜，盖玻片，无菌毛细管等。
操作步骤1．稀释：将酵母菌悬液进行适当稀释，菌液如不浓，可不必稀释。
2．镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。
若有污物，则需清洗后才能进行计数。
3．加样品：将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴（不宜过多），使菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室，一般计数室均能充满菌液。
微生物学显微镜直接计数法课件
精品
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4.显微镜计数
静置几分钟, 将计数板放在显微镜 下, 先用低倍镜找到计数室, 再换成 高倍镜进行计数
5.清洗血球计数板
计数完毕, 将计数板在水龙头下冲
洗干净后自行晾干, 镜检观察每小格
内无残留物为止。精品
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注意事项
1、加样时先摇匀菌液，计数室中不可 有气泡产生；
2、菌液浓度以每小格有5-10个菌体为 宜。
第一室 第二室
二室
B 菌数/ml 平均值
1100 1100
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四 实验方法
1.检查计数板 检查计数板是否有破损。
2.镜检计数室 在加样前, 先对计数板的计数室进行 镜检。若有污物, 则需清洗后才能进 行计数。
精品
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3. 加样品
将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用细 口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘点 一小滴（不宜过多），让菌液沿缝隙靠毛细渗 透作用自行进入计数室，一般计数室均能充满 菌液。注意不可有气泡产生。
9ml
1ml 1ml
×2 ×2
1ml
×2
最平板或涂布在平板表面，经保 温培养后，每个细胞形成一个菌落，即菌落形成单 位。以平板上出现的菌落数乘以稀释度就可以计算 出原菌液的含菌量。
精品
3
干重法 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分
离出来，然后烘干至恒重(干燥温度可采用 105℃、100℃或80℃)、称重。一般干重 为湿重的10%—20%。 注: 该法适合菌浓度较高的样品。
5个方格的总菌数
稀释倍数
▪ 计算: 1个计数室的总菌数=A/5×25×B
▪ 1g（ml）样品中的总菌数=A/5×25×10×1000×B
《显微镜直接计数法》PPT课件
版权所有 未经作者同意 请勿使用
实验十 显微镜直接计数技术
三、实验材料：
1.实验菌种及培养基：酿酒酵母菌细胞稀释 液； 2. 实验设备及器材：恒温培养箱；恒温干燥 箱；高压蒸汽灭菌锅；显微镜；酒精灯；接 种环；滴瓶；试剂瓶；双层瓶；镊子；载玻 片；φ90mm培养皿；500ml标本缸；15×150 试管；火柴（或打火机）；吸水纸；镜头纸； 棉花；
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实验十 显微镜直接计数技术
计数室是一个边长为1mm的正方形，其面积 为1mm2。每个计数室被辅助线划分为25 （中格）×16（小格）个小格，以方便计数。 图10-2为计数室（红色双线围成的即为由25 个中格组成的计数室。）
＋
加样处
＋
图10-1 计数板俯视图
二、基本原理：
显微镜直接计数技术可以对含菌样品所含的 总菌数做出统计，是常用的、较快捷的一种 统计微生物数量的方法和技术。 显微镜直接计数技术使用一特制的、专用的 计数工具——血球计数板进行计数操作。 血球计数板上有四条槽，把计数板分为三个 平台，两侧的平台用于搭放盖玻片，中间的 平台又被分为两个较小的、每个平台上各有 一个计数室的平台。如图10-1
1.将统计、计数结果填入下表：
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实验十 显微镜直接计数技术
2.影响显微镜直接计数结果的因素有哪些， 如何避免？ 3. 整理实验设备，清理实验台。
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1、快乐总和宽厚的人相伴，财富总与诚信的人相伴，聪明总与高尚的人相伴，魅力总与幽默的人相伴，健康总与阔达的人相伴。 2、人生就有许多这样的奇迹，看似比登天还难的事，有时轻而易举就可以做到，其中的差别就在于非凡的信念。 3、影响我们人生的绝不仅仅是环境，其实是心态在控制个人的行动和思想。同时，心态也决定了一个人的视野和成就，甚至一生。 4、无论你觉得自己多么了不起，也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸，永远有人比你更不幸。 5、也许有些路好走是条捷径，也许有些路可以让你风光无限，也许有些路安稳又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我会觉得，那些路不是自己想要的。 6、在别人肆意说你的时候，问问自己，到底怕不怕，输不输的起。不必害怕，不要后退，不须犹豫，难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己，你是不是已经为了梦想而竭尽全力了? 7、人往往有时候为了争夺名利，有时驱车去争，有时驱马去夺，想方设法，不遗余力。压力挑战，这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。 8、真想干总会有办法，不想干总会有理由;面对困难，智者想尽千方百计，愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠，但可靠的必定是老实人;时间，抓起来是黄金，抓不起来是流水。 9、成功的道路上，肯定会有失败;对于失败，我们要正确地看待和对待，不怕失败者，则必成功;怕失败者，则一无是处，会更失败。1、快乐总和宽厚的人相伴，财富总与诚信的人相伴，聪明总与高尚的人相伴，魅力总与幽默的人相伴，健康总与阔达的人相伴。 2、人生就有许多这样的奇迹，看似比登天还难的事，有时轻而易举就可以做到，其中的差别就在于非凡的信念。 3、影响我们人生的绝不仅仅是环境，其实是心态在控制个人的行动和思想。同时，心态也决定了一个人的视野和成就，甚至一生。 4、无论你觉得自己多么了不起，也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸，永远有人比你更不幸。 5、也许有些路好走是条捷径，也许有些路可以让你风光无限，也许有些路安稳又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我会觉得，那些路不是自己想要的。 6、在别人肆意说你的时候，问问自己，到底怕不怕，输不输的起。不必害怕，不要后退，不须犹豫，难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己，你是不是已经为了梦想而竭尽全力了? 7、人往往有时候为了争夺名利，有时驱车去争，有时驱马去夺，想方设法，不遗余力。压力挑战，这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。 8、真想干总会有办法，不想干总会有理由;面对困难，智者想尽千方百计，愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠，但可靠的必定是老实人;时间，抓起来是黄金，抓不起来是流水。14、成长是一场和自己的比赛，不要担心别人会做得比你好，你只需要每天都做得比前一天好就可以了。 15、最终你相信什么就能成为什么。因为世界上最可怕的二个词，一个叫执着，一个叫认真，认真的人改变自己，执着的人改变命运。只要在路上，就没有到不了的地方。 16、你若坚持，定会发光，时间是所向披靡的武器，它能集腋成裘，也能聚沙成塔，将人生的不可能都变成可能。 17、人生，就要活得漂亮，走得铿锵。自己不奋斗，终归是摆设。无论你是谁，宁可做拼搏的失败者 9、成功的道路上，肯定会有失败;对于失败，我们要正确地看待和对待，不怕失败者，则必成功;怕失败者，则一无是处，会更5、别着急要结果，先问自己够不够格，付出要配得上结果，工夫到位了，结果自然就出来了。 6、你没那么多观众，别那么累。做一个简单的人，踏实而务实。不沉溺幻想，更不庸人自扰。 7、别人对你好，你要争气，图日后有能力有所报答，别人对你不好，你更要争气望有朝一日，能够扬眉吐气。 8、奋斗的路上，时间总是过得很快，目前的困难和麻烦是很多，但是只要不忘初心，脚踏实地一步一步的朝着目标前进，最后的结局交给时间来定夺。 9、运气是努力的附属品。没有经过实力的原始积累，给你运气你也抓不住。上天给予每个人的都一样，但每个人的准备却不一样。不要羡慕那些总能撞大运的人，你必须很努力，才能遇上好运气。 10、你的假装努力，欺骗的只有你自己，永远不要用战术上的勤奋，来掩饰战略上的懒惰。 11、时间只是过客，自己才是主人，人生的路无需苛求，只要你迈步，路就在你的脚下延伸，只要你扬帆，便会有八面来风，启程了，人的生命才真正开始。 12、不管做什么都不要急于回报，因为播种和收获不在同一个季节，中间隔着的一段时间，我们叫它为坚持。失败。11、学会学习的人，是非常幸福的人。——米南德 12、你们要学习思考，然后再来写作。——布瓦罗 13、在寻求真理的长河中，唯有学习，不断地学习，勤奋地学习，有创造性地学习，才能越重山跨峻岭。——华罗庚 14、许多年轻人在学习音乐时学会了爱。——莱杰 15、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基 16、我们一定要给自己提出这样的任务：第一，学习，第二是学习，第三还是学习。——列宁 17、学习的敌人是自己的满足，要认真学习一点东西，必须从不自满开始。对自己，“学而不厌”，对人家，“诲人不倦”，我们应取这种态度。——毛泽东 18、只要愿意学习，就一定能够学会。——列宁 19、如果学生在学校里学习的结果是使自己什么也不会创造，那他的一生永远是模仿和抄袭。——列夫· 托尔斯泰 20、对所学知识内容的兴趣可能成为学习动机。——赞科夫 21、游手好闲地学习，并不比学习游手好闲好。——约翰· 贝勒斯 22、读史使人明智，读诗使人灵秀，数学使人周密，自然哲学使人精邃，伦理学使人庄重，逻辑学使人善辩。——培根 23、我们在我们的劳动过程中学习思考，劳动的结果，我们认识了世界的奥妙，于是我们就真正来改变生活了。——高尔基 24、我们要振作精神，下苦功学习。下苦功，三个字，一个叫下，一个叫苦，一个叫功，一定要振作精神，下苦功。——毛泽东 25、我学习了一生，现在我还在学习，而将来，只要我还有精力，我还要学习下去。——别林斯基、学习外语并不难，学习外语就像交朋友一样，朋友是越交越熟的，天天见面，朋友之间就亲密无间了。——高士其 2、对世界上的一切学问与知识的掌握也并非难事，只要持之以恒地学习，努力掌握规律，达到熟悉的境地，就能融会贯通，运用自如了。——高士其 3、学和行本来是有联系着的，学了必须要想，想通了就要行，要在行的当中才能看出自己是否真正学到了手。否则读书虽多，只是成为一座死书库。——谢觉哉、你的假装努力，欺骗的只有你自己，永远不要用战术上的勤奋，来掩饰战略上的懒惰。 11、时间只是过客，自己才是主人，人生的路无需苛求，只要你迈步，路就在你的脚下延伸，只要你扬帆，便会有八面来风，启程了，人的生命才真正开始。 12、不管做什么都不要急于回报，因为播种和收获不在同一个季节，中间隔着的一段时间，我们叫它为坚持。 13、你想过普通的生活，就会遇到普通的挫折。你想过最好的生活，就一定会遇上最强的伤害。这个世界很公平，想要最好，就一定会给你最，取平均值； 6.计算样品所含总菌数：根据统计、计数结 果，计算样品所含的总菌数； 7.清洗处理计数板：实验完成后，及时按 规定清洁处理技术板。 本实验所用计数板，可用清水清洁处理后， 吸干水分，妥善保存。
实验十 显微镜直接计数技术
三、实验材料：
1.实验菌种及培养基：酿酒酵母菌细胞稀释 液； 2. 实验设备及器材：恒温培养箱；恒温干燥 箱；高压蒸汽灭菌锅；显微镜；酒精灯；接 种环；滴瓶；试剂瓶；双层瓶；镊子；载玻 片；φ90mm培养皿；500ml标本缸；15×150 试管；火柴（或打火机）；吸水纸；镜头纸； 棉花；
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实验十 显微镜直接计数技术
计数室是一个边长为1mm的正方形，其面积 为1mm2。每个计数室被辅助线划分为25 （中格）×16（小格）个小格，以方便计数。 图10-2为计数室（红色双线围成的即为由25 个中格组成的计数室。）
＋
加样处
＋
图10-1 计数板俯视图
二、基本原理：
显微镜直接计数技术可以对含菌样品所含的 总菌数做出统计，是常用的、较快捷的一种 统计微生物数量的方法和技术。 显微镜直接计数技术使用一特制的、专用的 计数工具——血球计数板进行计数操作。 血球计数板上有四条槽，把计数板分为三个 平台，两侧的平台用于搭放盖玻片，中间的 平台又被分为两个较小的、每个平台上各有 一个计数室的平台。如图10-1
1.将统计、计数结果填入下表：
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实验十 显微镜直接计数技术
2.影响显微镜直接计数结果的因素有哪些， 如何避免？ 3. 整理实验设备，清理实验台。
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1、快乐总和宽厚的人相伴，财富总与诚信的人相伴，聪明总与高尚的人相伴，魅力总与幽默的人相伴，健康总与阔达的人相伴。 2、人生就有许多这样的奇迹，看似比登天还难的事，有时轻而易举就可以做到，其中的差别就在于非凡的信念。 3、影响我们人生的绝不仅仅是环境，其实是心态在控制个人的行动和思想。同时，心态也决定了一个人的视野和成就，甚至一生。 4、无论你觉得自己多么了不起，也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸，永远有人比你更不幸。 5、也许有些路好走是条捷径，也许有些路可以让你风光无限，也许有些路安稳又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我会觉得，那些路不是自己想要的。 6、在别人肆意说你的时候，问问自己，到底怕不怕，输不输的起。不必害怕，不要后退，不须犹豫，难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己，你是不是已经为了梦想而竭尽全力了? 7、人往往有时候为了争夺名利，有时驱车去争，有时驱马去夺，想方设法，不遗余力。压力挑战，这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。 8、真想干总会有办法，不想干总会有理由;面对困难，智者想尽千方百计，愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠，但可靠的必定是老实人;时间，抓起来是黄金，抓不起来是流水。 9、成功的道路上，肯定会有失败;对于失败，我们要正确地看待和对待，不怕失败者，则必成功;怕失败者，则一无是处，会更失败。1、快乐总和宽厚的人相伴，财富总与诚信的人相伴，聪明总与高尚的人相伴，魅力总与幽默的人相伴，健康总与阔达的人相伴。 2、人生就有许多这样的奇迹，看似比登天还难的事，有时轻而易举就可以做到，其中的差别就在于非凡的信念。 3、影响我们人生的绝不仅仅是环境，其实是心态在控制个人的行动和思想。同时，心态也决定了一个人的视野和成就，甚至一生。 4、无论你觉得自己多么了不起，也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸，永远有人比你更不幸。 5、也许有些路好走是条捷径，也许有些路可以让你风光无限，也许有些路安稳又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我会觉得，那些路不是自己想要的。 6、在别人肆意说你的时候，问问自己，到底怕不怕，输不输的起。不必害怕，不要后退，不须犹豫，难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己，你是不是已经为了梦想而竭尽全力了? 7、人往往有时候为了争夺名利，有时驱车去争，有时驱马去夺，想方设法，不遗余力。压力挑战，这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。 8、真想干总会有办法，不想干总会有理由;面对困难，智者想尽千方百计，愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠，但可靠的必定是老实人;时间，抓起来是黄金，抓不起来是流水。14、成长是一场和自己的比赛，不要担心别人会做得比你好，你只需要每天都做得比前一天好就可以了。 15、最终你相信什么就能成为什么。因为世界上最可怕的二个词，一个叫执着，一个叫认真，认真的人改变自己，执着的人改变命运。只要在路上，就没有到不了的地方。 16、你若坚持，定会发光，时间是所向披靡的武器，它能集腋成裘，也能聚沙成塔，将人生的不可能都变成可能。 17、人生，就要活得漂亮，走得铿锵。自己不奋斗，终归是摆设。无论你是谁，宁可做拼搏的失败者 9、成功的道路上，肯定会有失败;对于失败，我们要正确地看待和对待，不怕失败者，则必成功;怕失败者，则一无是处，会更5、别着急要结果，先问自己够不够格，付出要配得上结果，工夫到位了，结果自然就出来了。 6、你没那么多观众，别那么累。做一个简单的人，踏实而务实。不沉溺幻想，更不庸人自扰。 7、别人对你好，你要争气，图日后有能力有所报答，别人对你不好，你更要争气望有朝一日，能够扬眉吐气。 8、奋斗的路上，时间总是过得很快，目前的困难和麻烦是很多，但是只要不忘初心，脚踏实地一步一步的朝着目标前进，最后的结局交给时间来定夺。 9、运气是努力的附属品。没有经过实力的原始积累，给你运气你也抓不住。上天给予每个人的都一样，但每个人的准备却不一样。不要羡慕那些总能撞大运的人，你必须很努力，才能遇上好运气。 10、你的假装努力，欺骗的只有你自己，永远不要用战术上的勤奋，来掩饰战略上的懒惰。 11、时间只是过客，自己才是主人，人生的路无需苛求，只要你迈步，路就在你的脚下延伸，只要你扬帆，便会有八面来风，启程了，人的生命才真正开始。 12、不管做什么都不要急于回报，因为播种和收获不在同一个季节，中间隔着的一段时间，我们叫它为坚持。失败。11、学会学习的人，是非常幸福的人。——米南德 12、你们要学习思考，然后再来写作。——布瓦罗 13、在寻求真理的长河中，唯有学习，不断地学习，勤奋地学习，有创造性地学习，才能越重山跨峻岭。——华罗庚 14、许多年轻人在学习音乐时学会了爱。——莱杰 15、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基 16、我们一定要给自己提出这样的任务：第一，学习，第二是学习，第三还是学习。——列宁 17、学习的敌人是自己的满足，要认真学习一点东西，必须从不自满开始。对自己，“学而不厌”，对人家，“诲人不倦”，我们应取这种态度。——毛泽东 18、只要愿意学习，就一定能够学会。——列宁 19、如果学生在学校里学习的结果是使自己什么也不会创造，那他的一生永远是模仿和抄袭。——列夫· 托尔斯泰 20、对所学知识内容的兴趣可能成为学习动机。——赞科夫 21、游手好闲地学习，并不比学习游手好闲好。——约翰· 贝勒斯 22、读史使人明智，读诗使人灵秀，数学使人周密，自然哲学使人精邃，伦理学使人庄重，逻辑学使人善辩。——培根 23、我们在我们的劳动过程中学习思考，劳动的结果，我们认识了世界的奥妙，于是我们就真正来改变生活了。——高尔基 24、我们要振作精神，下苦功学习。下苦功，三个字，一个叫下，一个叫苦，一个叫功，一定要振作精神，下苦功。——毛泽东 25、我学习了一生，现在我还在学习，而将来，只要我还有精力，我还要学习下去。——别林斯基、学习外语并不难，学习外语就像交朋友一样，朋友是越交越熟的，天天见面，朋友之间就亲密无间了。——高士其 2、对世界上的一切学问与知识的掌握也并非难事，只要持之以恒地学习，努力掌握规律，达到熟悉的境地，就能融会贯通，运用自如了。——高士其 3、学和行本来是有联系着的，学了必须要想，想通了就要行，要在行的当中才能看出自己是否真正学到了手。否则读书虽多，只是成为一座死书库。——谢觉哉、你的假装努力，欺骗的只有你自己，永远不要用战术上的勤奋，来掩饰战略上的懒惰。 11、时间只是过客，自己才是主人，人生的路无需苛求，只要你迈步，路就在你的脚下延伸，只要你扬帆，便会有八面来风，启程了，人的生命才真正开始。 12、不管做什么都不要急于回报，因为播种和收获不在同一个季节，中间隔着的一段时间，我们叫它为坚持。 13、你想过普通的生活，就会遇到普通的挫折。你想过最好的生活，就一定会遇上最强的伤害。这个世界很公平，想要最好，就一定会给你最，取平均值； 6.计算样品所含总菌数：根据统计、计数结 果，计算样品所含的总菌数； 7.清洗处理计数板：实验完成后，及时按 规定清洁处理技术板。 本实验所用计数板，可用清水清洁处理后， 吸干水分，妥善保存。
微生物计数-PPT
（二者原理和部件相同，只是厚薄不同而已）
直接计数法（总菌数测定法）
显微镜直接计数法操作（视频）
1、优点：所需设备简单，可迅速得到结果，能 同时观察微生物形态特征； 2、缺点：难以计数微小的细菌；难与区分死、 活 3、适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计 数
血球计数板
血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片 上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽， 其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边 上面各有一个方格网。每个方格网共分9大 格，其中间的一大格(又称为计数室)常被用 作微生物的计数。
左上、左下、右上、右下、中格 （80小格）
6中格× 25小格计数室
25中格 × 16小格计数室
操作步骤
l.菌悬液制备 以无菌生理盐水制成浓度适当的菌悬液。每小格内
约有3~5个菌体为宜。 2.镜检计数室 在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物， 则需清洗，吹干后才能进行计数。 3.加样品 将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛 细滴管将摇匀菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿 缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，一般计数室均能 充满菌液。取样时先要摇匀菌液；加样时计数室不可有 气泡产生。
用稀释平板计数时，待测菌稀释度的选择应 根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多 时，稀释度应高，反之则低。
通常测定细菌菌剂含菌数时，10-7、10-8、10-9 土壤细菌数量，采用10-4、10-5、10-6 放线菌数量，采用l0-3、10-4、10-5 真菌数量，采用10-2、10-3、10-4
基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平 皿－－培养48小时－－计数报告。
结果计算
计算结果时，常按下列标准从接种后的3个稀 释度中选择一个合适的稀释度，求出每克菌剂 中的含菌数。
直接计数法（总菌数测定法）
显微镜直接计数法操作（视频）
1、优点：所需设备简单，可迅速得到结果，能 同时观察微生物形态特征； 2、缺点：难以计数微小的细菌；难与区分死、 活 3、适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计 数
血球计数板
血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片 上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽， 其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边 上面各有一个方格网。每个方格网共分9大 格，其中间的一大格(又称为计数室)常被用 作微生物的计数。
左上、左下、右上、右下、中格 （80小格）
6中格× 25小格计数室
25中格 × 16小格计数室
操作步骤
l.菌悬液制备 以无菌生理盐水制成浓度适当的菌悬液。每小格内
约有3~5个菌体为宜。 2.镜检计数室 在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物， 则需清洗，吹干后才能进行计数。 3.加样品 将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛 细滴管将摇匀菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿 缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，一般计数室均能 充满菌液。取样时先要摇匀菌液；加样时计数室不可有 气泡产生。
用稀释平板计数时，待测菌稀释度的选择应 根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多 时，稀释度应高，反之则低。
通常测定细菌菌剂含菌数时，10-7、10-8、10-9 土壤细菌数量，采用10-4、10-5、10-6 放线菌数量，采用l0-3、10-4、10-5 真菌数量，采用10-2、10-3、10-4
基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平 皿－－培养48小时－－计数报告。
结果计算
计算结果时，常按下列标准从接种后的3个稀 释度中选择一个合适的稀释度，求出每克菌剂 中的含菌数。