大肠杆菌常见的类型你知道多少

合集下载

各种大肠杆菌菌株特点

各种大肠杆菌菌株特点1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr 4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac －proAB）/F’5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-17：M110或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC 序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。

大肠杆菌菌株类型

大肠杆菌菌株类型
大肠杆菌有多种菌株类型，其中一些是常用于科研和工业应用的典型菌株，比如DH5a和BL21(DE3)。

此外，大肠杆菌也有一些特殊的病型，这些病型主要根据大肠杆菌的感染性状进行分类，包括肠道致病性的大肠杆菌（EPEC）、肠道产毒素性的大肠杆菌（ETEC）、肠道侵袭性的大肠杆菌（EIEC）、肠道出血性的大肠杆菌（EHEC）和肠集聚性的大肠杆菌（EAEC）。

此外，还有一些新近发现的菌株，如肠产志贺样毒素同时具有一定侵袭力的大肠杆菌（ESIES）。

以上信息仅供参考，如有需要，建议查阅专业生物书籍或文献。

大肠杆菌

第 7 页
南理工·教育实验学院 College of Elite Education
分子生物学中的应用
第 8 页
优势方面
大肠杆菌的优势遗传背景清楚
南理工·教育实验学院 College of Elite Education
重组子稳定
载体受体系统完备
生长迅速培养简单
第 9 页
不足之处
大肠杆菌的不足
型的菌株表现出不同的特性。这些不同基因型特性的菌株在基因工
程的研究和生产中具有广泛的应用价值。
第 13 页
大肠杆菌的主要基因型
南理工·教育实验学院 College of Elite Education
与基因重组相关的基因型（如recA、recB和recC等）与甲基化相关的基因型（如mcrA、mcrB和C等）与点突变相关的基因型（如mutS、mutT、uvrB等）与核酸内切酶相关的基因型（如hsdR、hsdS和endA等）与终止密码子相关的基因型（如supE和supF）与抗药性相关的基因型（gyrA、rpsl等）
第 3 页
有益菌群
南理工·教育实验学院 College of Elite Education
• 在不致病的情况下（正常状况下）可认为是互利共生；
• 能合成维生素B和维生素K，对人体有益；
• 能发酵多种糖类，产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，婴儿出生后即随哺乳进入肠道，与人终身相伴。
第 4 页
pET 系统。
第 11 页
pET28载体系统简图
南理工·教育实验学院 College of Elite Education
第 12 页
基因型
南理工·教育实验学院 College of Elite Education

大肠杆菌致病类型ppt课件

ppt课件.
4
病原性大肠杆菌种类
肠毒素性大肠杆菌
•（ETEC）
•
肠毒素：LT、ST
肠致病性大肠杆菌（EPEC）
肠粘附性大肠杆菌（EAEC）
肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）
ppt课件.
肠出血性大肠杆菌（EHEC）
5
致病物质:
• 大肠杆菌具有很多毒力因子，包括内毒素，荚膜，〣型分泌系统，黏附素和外毒素等。（〣型分泌系统是指能向真核靶细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统。约由20余种蛋白质组成。）
• 黏附素能使细菌紧密黏着在泌尿道和肠道的细胞上，避免因排尿时尿液的冲刷和肠道的蠕动作用而被排除。大肠杆菌黏附素的特点是具有高特异性。包括：定植因子抗原〡，〢，〣；集聚黏附菌毛〡和〣；束形成菌毛；紧密黏附素；P菌毛；侵袭质粒抗原蛋白和Dr菌毛等。
• 外毒素大肠杆菌能产多种的外毒素，包括：志贺毒素〡和〢；耐热肠毒素〡和〢；不耐热肠毒素〡和〢。此外，溶血素A在尿路致病性大肠杆菌所致疾病中有重要作用。
ppt课件.
6
大肠杆菌导致疾病
• 仔猪黄痢常见病原大肠杆菌的血清型为O2、O8、O45、O60、O115、
O138、O139、O141、O149、O157等。多数能溶血。
多见于新建场和头胎母猪所产仔猪；多发于1-3日龄仔猪，7日龄以上少发；
带菌母猪是传染源，仔猪生后几小时至十几小时即发生；死亡率高。
•毒素型大肠杆菌产生的肠毒素，可分为耐热毒素和不耐热毒素。前者加热至100℃经30 分尚不破坏，后者加热60℃仅1分即被破坏。
ppt课件.
3
大肠杆菌病
• 大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌所引进的多种动物的一种急性传染病，常见于新生畜及幼畜，表现为肠炎、肠毒血症、败血症或组织器官炎症等，使畜禽生长发育受阻和死亡，造成较大经济损失。

大肠杆菌—搜狗百科

大肠杆菌—搜狗百科大肠杆菌是人和动物肠道中最著名的一种细菌，主要寄生于大肠内，约占肠道菌中的1%。

是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。

大肠杆菌能合成维生素B和K，正常栖居条件下不致病；若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。

在水和食品中检出，可认为是被粪便污染的指标。

大肠菌群数常作为饮水、食物或药物的卫生学标准。

大肠杆菌大肠杆菌O157：H7血清型属肠出血性大肠杆菌，自1982年在美国首先发现以来，包括中国等许多国家都有报道，且日见增加。

日本近年来因食物污染该菌导致的数起大暴发，格外引人注目。

在美国和加拿大通常分离的肠道致病菌中，目前它已排在第二或第三位。

大肠杆菌O 157：H7引起肠出血性腹泻，约2%～7%的病人会发展成溶血性尿毒综合征，儿童与老人最容易出现后一种情况。

致病性大肠杆菌通过污染饮水、食品、娱乐水体引起疾病暴发流行，病情严重者，可危及生命。

大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。

周身鞭毛，能运动，无芽孢。

能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，婴儿出生后即随哺乳进入肠道，与人终身相伴，其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质的微生物生长，减少蛋白质分解产物对人体的危害，还能合成维生素B和K，以及有杀菌作用的大肠杆菌素。

正常栖居条件下不致病。

但若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。

在肠道中大量繁殖，几占粪便干重的1/3。

在环境卫生不良的情况下，常随粪便散布在周围环境中。

若在水和食品中检出此菌，可认为是被粪便污染的指标，从而可能有肠道病原菌的存在。

因此，大肠菌群数（或大肠菌值）常作为饮水和食物（或药物）的卫生学标准。

（国家规定，每升饮用水中大肠杆菌数不应超过3个）大肠杆菌的抗原成分复杂，可分为菌体抗原（O）、鞭毛抗原（H）和表面抗原（K），后者有抗机体吞噬和抗补体的能力。

根据菌体抗原的不同，可将大肠杆菌分为150多型，其中有16个血清型为致病性大肠杆菌，常引起流行性婴儿腹泄和成人肋膜炎。

肠杆菌科细菌归纳总结

肠杆菌科细菌归纳总结肠杆菌科（Enterobacteriaceae）是一类常见的革兰氏阴性菌，它包括了许多与人类和动物相关的致病菌，同时也包括了许多与环境和食品卫生相关的菌株。

肠杆菌科细菌的特点是在普通培养基上能够产生气体，并且在革兰染色中呈现棒状。

1. 肠杆菌属（Enterobacter）肠杆菌属是肠杆菌科中的一个重要属，常见的菌株包括粪肠杆菌（Enterobacter cloacae）和黄色肠杆菌（Enterobacter aerogenes）等。

这些菌株广泛存在于土壤、水体以及人及动物的肠道中，有些种类具备耐药性，并且可能引发医院感染。

2. 大肠杆菌属（Escherichia）大肠杆菌属是肠杆菌科中的另一个重要属，其中最著名的是大肠杆菌（Escherichia coli），它一般存在于人和动物的肠道中。

大肠杆菌是一种常见的致病菌，可以引起腹泻、尿路感染等疾病。

此外，某些大肠杆菌菌株还产生毒素，如致命的肠毒性大肠杆菌产生的毒素可以引起严重的食物中毒。

3. 鲍曼不动杆菌属（Klebsiella）鲍曼不动杆菌属是肠杆菌科中的另一个重要属，常见的菌株包括肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）等。

这类菌株是常见的医院感染病原菌，可以引起肺炎、尿路感染以及败血症等严重疾病。

而产超强粘多糖的黏质性肺炎克雷伯菌更是具有高度的传染性和致病性，是医疗环境中的重要威胁之一。

4. 沙门氏菌属（Salmonella）沙门氏菌属是肠杆菌科中的一类重要致病菌，它包括众多血清型，其中一些血清型可以引起食物中毒和沙门氏菌感染。

这些菌株主要存在于动物及其产品中，比如家禽、牛奶和蛋等。

如果不注意食品的卫生状况，摄入被污染的食物可能导致人体感染引起胃肠炎等症状。

5. 艰难梭菌属（Clostridium）虽然肠杆菌科主要是指肠道相关的菌属，但在其中也包括一些与人体肠道无关或者少数与肠道关联不紧密的菌株。

艰难梭菌属是其中之一，该属的细菌广泛存在于土壤和水体中。

肠道杆菌有哪些种类以及它们的共同特性

肠道杆菌有哪些种类以及它们的共同特性肠道杆菌（Enterobacteriaceae）是一类常见的革兰氏阴性菌，存在于动物和人类的肠道中。

它们被广泛研究，并且对人类健康有重要影响。

在这1200字以上的文章中，我将介绍几种常见的肠道杆菌及其共同特性。

1. 大肠杆菌（Escherichia coli）大肠杆菌是肠道中最常见的细菌之一，也是一种最重要的肠道菌。

它们在人体健康中起着重要作用，同时也可能导致一些感染性疾病。

大肠杆菌是一种革兰阴性的杆状细菌，可以使用乳糖，产生酸和气体。

它们通常是肠道中产生维生素K和B群维生素的重要细菌。

2. 沙门氏菌（Salmonella）沙门氏菌是另一种肠道常见的革兰阴性菌，致病性沙门氏菌可引起食物中毒和肠道感染。

与大肠杆菌类似，沙门氏菌也可以使用乳糖。

沙门氏菌通过进食受污染的食物或饮水而感染人体。

感染症状包括腹泻、恶心、呕吐、腹痛和发热等。

3. 肠球菌（Klebsiella）肠球菌是肠道中的细菌，同时也是一种常见的人体病原体。

肠球菌可以严重感染人体呼吸道、泌尿系统和消化系统等器官，导致严重的感染性疾病。

肠球菌是革兰氏阴性杆菌，呈肠道形式生长。

它们可以产生β-内酰胺酶，这是一种常见的耐药性机制。

4. 黏质沙雷菌（Klebsiella oxytoca）黏质沙雷菌与肠球菌属同属于肠道杆菌科，也是人体肠道常见的细菌。

它们可以引起多种感染，包括泌尿道、肺部和血液感染。

黏质沙雷菌与肠球菌相似，同样可以产生β-内酰胺酶，具有多重耐药性。

5. 耶尔森氏菌（Yersinia）耶尔森氏菌是一类革兰氏阴性杆菌，被广泛存在于土壤、植物、水中和动物肠道中。

其中一种耶尔森氏菌（Yersinia pestis）是引起鼠疫的主要病原体。

耶尔森氏菌也可以引起人类感染，导致腹泻、淋巴结肿大和发热等症状。

这些肠道杆菌具有一些共同的特性：1.都是革兰氏阴性菌：革兰氏阴性菌的外层结构相对硬朗，细胞壁包含脂多糖和脂类，这些物质可以引起炎症反应，并有助于其在宿主体内定殖和生存。

大肠杆菌的基本知识概述

大肠杆菌的基本知识概述作者：肖安庆来源：《中学生物学》2010年第11期大肠杆菌是重要的模式生物,在高中生物学中有.多处知识涉及到,如原核生物的基本结构与分裂、T2’噬菌体侵染细菌实验、基因工程常见运载体、大肠杆菌的鉴定、微生物的酶合成调节等。

这些知识涉及点多,分布零散,缺乏系统性,下面就大肠杆菌的基本知识作简要概述。

1认识大肠杆菌的基本历程大肠杆菌是大肠埃希氏菌的俗称,属肠杆菌科埃希氏菌属,1885年埃舍利希氏首次发现。

在相当长的时间内,人们一直把它当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。

直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼禽,常引起严重腹泻和败血症。

根据不同的生物学特性,将致病性大肠杆菌分为5类:致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。

2大肠杆菌的基本结构2.1细胞壁大肠杆菌的细胞壁厚约11μm,分外膜和肽聚糖层。

外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分,占细胞壁干重80%,位于肽聚糖层的外侧,主要由磷脂、蛋白质和脂多糖组成。

脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素,也是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有成分,主要与抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关。

肽聚糖层由1—2层网状的肽聚糖组成,占细胞壁干重的10%,是细菌特有的成分,由聚糖链、短肽和肽桥三部分组成。

由,脂蛋白将外膜和肽聚糖层连接起来,从而使大肠杆菌的细胞壁形成一个整体结构。

2.2细胞膜大肠杆菌的细胞膜与其他生物细胞膜的结构相似,但上面的蛋白质含量高、种类多,具有选择透性,可控制营养物质进出细胞。

大肠杆菌的细胞膜含有丰富的酶系,是大肠杆菌的能量转化的场所,参与细胞壁的合成。

2.3细胞质大肠杆菌的细胞质含有糖原颗粒、核糖体和质粒等结构。

2.3.1核糖体大肠杆菌的核糖体包含两个亚基,即50S亚基(23S rRNA、5S rRNA、34种蛋白质)和.30S亚基[16SrRNA、21种蛋白质(S1～S21)]。

常用大肠杆菌感受态的区别

常用大肠杆‎菌感受态J‎M109，DH5a，BL21等‎的区别1：DH5a菌‎株DH5a是‎一种常用于‎质粒克隆的‎菌株。

E.coli DH5a在‎使用pUC‎系列质粒载‎体转化时，可与载体编‎码的β－半乳糖苷酶‎氨基端实现‎α－互补。

可用于蓝白‎斑筛选鉴别‎重组菌株。

基因型：F-，φ80dl‎a cZΔM‎15，Δ(lacZY‎A-argF)U169，deoR，recA1‎，endA1‎，hsdR1‎7(rk-，mk+)，phoA，supE4‎4，λ-，thi-1，gyrA9‎6，relA1‎2：BL21(DE3) 菌株该菌株用于‎高效表达克‎隆于含有噬‎菌体T7启‎动子的表达‎载体（如pET系‎列）的基因。

T7噬菌体‎R NA聚合‎酶位于λ‎噬菌体DE‎3区，该区整合于‎B L21的‎染色体上。

该菌适合表‎达非毒性蛋‎白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS‎菌株该菌株含有‎质粒pLy‎s S，因此具有氯‎霉素抗性。

PLysS‎含有表达T‎7溶菌酶的‎基因，能够降低目‎的基因的背‎景表达水平‎，但不干扰目‎的蛋白的表‎达。

该菌适合表‎达毒性蛋白‎和非毒性蛋‎白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS‎，Camr4：JM109‎菌株该菌株在使‎用pUC系‎列质粒载体‎进行DNA‎转化或用M‎13 phage‎载体进行转‎染时，由于载体D‎N A产生的‎L acZa‎多肽和JM‎09编码的‎L acZΔ‎M15进行‎α－互补，从而显示β‎－半乳糖苷酶‎活性，由此很容易‎鉴别重组体‎菌株基因型：recA1‎，endA1‎，gyrA9‎6，thi－1，hsdR1‎7，supE4‎4，relA1‎，Δ（lac－proAB‎）/F’[traD3‎6，proAB‎+，lacIq‎，lacZΔ‎M15]5：TOP10‎菌株该菌株适用‎于高效的D‎N A克隆和‎质粒扩增，能保证高拷‎贝质粒的稳‎定遗传。

各种大肠杆菌菌株特点

各种大肠杆菌菌株特点1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU ，galK ，rps，(Strr) endA1，nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-17：M110或SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。

大肠杆菌(词条)

大肠杆菌的作用是：（一）、作为cDNA的载体；（二）、保持cDNA的完整性。
五、研究细菌遗传变异的重要材料
六、
大肠杆菌细胞中的遗传物质分布于大型环状的拟核和小型共价闭合环状的质粒中。
大肠杆菌常作为外源基因表达的宿主，外源基因进入大肠杆菌细胞后与大肠杆菌基因进行整合，形成的重组子可用蓝白斑实验进行筛选。
细胞膜（又称质膜）的成分是：蛋白质、磷脂、糖类和少量核酸等。细胞膜结构呈液态镶嵌模型。主要参与细胞内外物质交换和运送，而且参与生物氧化和能量产生。细胞膜是鞭毛的着生点。
细胞质包括：核糖体、内含物（包括贮藏物、气泡）、间体、质粒等。细胞质是原核生物细胞核区以外、细胞膜以内的区域，含水量约为80%。主要储存细胞营养物质，并且是细胞生理生化反应的场所。
大肠杆菌
大肠杆菌
##代谢类型##
大肠杆菌代谢类型是兼性厌氧型，营养类型是化能异氧型。可以在无氧条件下生存，比如人或动物肠道，主要进行无氧呼吸或发酵产能。也可以在微量氧环境下生存，可以进行有氧呼吸产能。在自然界中属于分解者，在人或动物肠道中属于消费者。
##鉴别方法##
一、伊红美蓝染色法
伊红美蓝染色呈深紫色，具有金属光泽。
核区：又称为拟核、原核或核质体。是由大型环状DNA不规则卷曲或缠绕而成，无核膜、无核仁的区域。是主要遗传信息的载体。
鞭毛结构是：基体、鞭毛钩和鞭毛丝。呈毛发状。一般长约15～20微米，最长可达70微米。直径约0.01～0.02微米。鞭毛通过摆动或者转动提供大肠杆菌运动的动力，鞭毛由质膜上能量代谢和物质代谢提供能量。
##关键词##
革兰氏阴性
Esherichia coli
兼性厌氧菌
伊红美蓝
鞭毛
二分裂
##相关链接##

大肠杆菌基因工程菌常用类型

1、大肠杆菌DH5a菌株DH5a是世界上最常用的基因工程菌株之一。

由于DH5α是DNA酶缺陷型菌株，有利于基因克隆，保存质粒，但该菌株的蛋白酶没有缺陷，表达的蛋白容易被降解，因此通常不作为表达菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12、大肠杆菌BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3、大肠杆菌BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4、大肠杆菌JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补，从而显示β-半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株。

基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5、大肠杆菌TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

大肠杆菌的基本知识概述

⼤肠杆菌的基本知识概述2019-08-31⼤肠杆菌是重要的模式⽣物,在⾼中⽣物学中有.多处知识涉及到,如原核⽣物的基本结构与分裂、T2’噬菌体侵染细菌实验、基因⼯程常见运载体、⼤肠杆菌的鉴定、微⽣物的酶合成调节等。

这些知识涉及点多,分布零散,缺乏系统性,下⾯就⼤肠杆菌的基本知识作简要概述。

1　认识⼤肠杆菌的基本历程⼤肠杆菌是⼤肠埃希⽒菌的俗称,属肠杆菌科埃希⽒菌属,1885年埃舍利希⽒⾸次发现。

在相当长的时间内,⼈们⼀直把它当作正常肠道菌群的组成部分,认为是⾮致病菌。

直到20世纪中叶,才认识到⼀些特殊⾎清型的⼤肠杆菌对⼈和动物有病原性,尤其对婴⼉和幼禽,常引起严重腹泻和败⾎症。

根据不同的⽣物学特性,将致病性⼤肠杆菌分为5类:致病性⼤肠杆菌(EPEC)、肠产毒性⼤肠杆菌(ETEC)、肠出⾎性⼤肠杆菌(EHEC)、肠侵袭性⼤肠杆菌(EIEC)、肠黏附性⼤肠杆菌(EAEC)。

2　⼤肠杆菌的基本结构2.1　细胞壁⼤肠杆菌的细胞壁厚约11µm,分外膜和肽聚糖层。

外膜是⼤肠杆菌细胞壁的主要成分,占细胞壁⼲重80%,位于肽聚糖层的外侧,主要由磷脂、蛋⽩质和脂多糖组成。

脂多糖是⾰兰⽒阴性细菌的内毒素,也是⾰兰⽒阴性细菌细胞壁的特有成分,主要与抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关。

肽聚糖层由1―2层⽹状的肽聚糖组成,占细胞壁⼲重的10%,是细菌特有的成分,由聚糖链、短肽和肽桥三部分组成。

由,脂蛋⽩将外膜和肽聚糖层连接起来,从⽽使⼤肠杆菌的细胞壁形成⼀个整体结构。

2.2　细胞膜⼤肠杆菌的细胞膜与其他⽣物细胞膜的结构相似,但上⾯的蛋⽩质含量⾼、种类多,具有选择透性,可控制营养物质进出细胞。

⼤肠杆菌的细胞膜含有丰富的酶系,是⼤肠杆菌的能量转化的场所,参与细胞壁的合成。

2.3　细胞质⼤肠杆菌的细胞质含有糖原颗粒、核糖体和质粒等结构。

2.3.1　核糖体⼤肠杆菌的核糖体包含两个亚基,即50S亚基(23S rRNA、5S rRNA、34种蛋⽩质)和.30S亚基[16SrRNA、21种蛋⽩质(S1～S21)]。

大肠杆菌的原理、危害、检测与预防

大肠杆菌的原理、危害、检测与预防大肠杆菌是什么肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，认为是非致病菌。

直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，它是一种普通的原核生物，根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。

大肠杆菌属于细菌。

大肠杆菌的原理大肠杆菌是人和动物肠道中最著名的一种细菌，主要寄生于大肠内，约占肠道菌中的1%。

是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。

大肠杆菌能合成维生素B和K，正常栖居条件下不致病；若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。

在水和食品中检出，可认为是被粪便污染的指标。

大肠菌群数常作为饮水、食物或药物的卫生学标准。

大肠杆菌的危害大肠杆菌是原核生物，构造相对简单，遗传背景清晰，培养操作容易，因此也常常被作为基因工程的对象加以利用：研究者常常将外源基因导入质粒，将质粒整合入大肠杆菌基因，这样，大肠杆菌就能够表达基因重组后的蛋白（例如胰岛素，某些疫苗等）了。

此外，大肠杆菌还常常作为模型生物参与细胞学实验。

虽然绝大多数大肠杆菌与人类有着良好合作，但是仍有少部分特殊类型的大肠杆菌具有相当强的毒力，一旦感染，将造成严重疫情。

其中最具代表性的就是代号为O157:H7的大肠杆菌，它是EHEC （肠出血性大肠杆菌）家族中的一员。

大肠杆菌的传播途径O157H7大肠杆菌主要是通过污染食物而引起人的感染，O157H7大肠杆菌的致病能力和对胃酸的抵抗力均较强，对细胞的破坏性大。

因此很多国家将O157H7大肠杆菌引起的感染性腹泻归为食源性疾病。

在世界各地报告的爆发中，约有70%以上与进食可疑食物有关。

大肠杆菌属

婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可死；成人少见。
病变部位：十二指肠、空肠和回肠上段。致病机制：细菌粘附于绒毛，导致刷状缘破坏、绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损，造成严重腹泻。
（3）肠侵袭性大肠杆菌（enteroinvasive.coli EIEC）
• 侵犯较大儿童和成人。 • 疾病似菌痢，呈脓血便，有里后重。 • 侵袭结肠上皮细胞并在其中生长繁殖。 • 死亡后释放内毒素，破坏细胞形成炎症和溃疡，导致腹泻。
③由正常菌群转变而来的致病菌：如引起胃肠炎的大肠埃希菌，即是由于获得位于质粒、噬菌体或毒力岛上的毒力因子基因后而成为致病菌。
肠杆菌科细菌共同生物学特性：
1.形态与结构中等大小G－杆菌。大多有菌毛，多数有周鞭毛，少数有荚膜，不产生芽胞。
2.培养兼性厌氧或需氧。 3.生化反应乳糖发酵试验可初步鉴别志贺菌、
大肠杆菌属
肠杆菌科（Enterobacteriaceae）细菌
是一大群生物学性状相似的革兰阴性杆菌，常寄居在人和动物的肠道内，亦存在于土壤、水和腐物中。
目前已有44个属，170多个种。但该科引起人类95％以上感染的菌种却不到20个。
肠杆菌科的细菌与医学的关系可分为三种情况：
致病因素；
①致病菌：有少数细菌总是引起人类疾
H抗原至少有50种，与大肠杆菌的粘附作用有关，表明大肠杆菌血清型的方式是按O：K：H排列，例如 O111：K58（B4）：H2。
二、致病性与免疫性
（一）致病物质
1.黏附素（adhesine）包括定植因子抗原（CFA）、集聚黏附菌毛（AAF）、束形成菌毛（bundle forming pili, Bfp）、紧密粘附素（intimin）、P菌毛、I型菌毛和侵袭质粒抗原（invasion plasmid antigen, Ipa）蛋白等。 2.外毒素志贺毒素（Stx）、耐热肠毒素（ST）、不耐热肠毒素（LT）；还有内毒素、荚膜、载铁蛋白和III型分泌系统（type III secretion systems）等。

【微生物及免疫】大肠杆菌

3 抗原构造
主要有O、K和H三种，O抗原174种，K抗原80种， H抗原53种。用O:K:H表示菌株的血清型。
4 致病性及毒力因子
肠道致病性大肠杆菌和肠道外致病性大肠杆菌。腹泻、败血症以及尿道、生殖道、乳腺等感染毒力因子：粘附素、肠毒素、贺毒素（Stx)、LEE毒力岛等
5 微生物学诊断
（1）采样：败血症病例可取内脏组织；幼畜腹泻与水肿病例可取各
段小肠内容ห้องสมุดไป่ตู้ （2）方法：
可分别接种麦康凯平板和血平板培养，进一步做生化鉴定、毒力因子鉴定、动物试验、血清学试验等。
感谢观看
大肠杆菌
1 形态与染色特性
直杆菌，大小为0.4-0.7 μm×2-3μm，两端钝圆，无芽胞，大多数以周生鞭毛运动。某些致病菌株有荚膜或微荚膜。
2 培养
要求不高，
麦康凯琼脂
红色菌落；
伊红美蓝琼脂
黑色带金属闪光的菌落；
SS琼脂（强选择培养基）不生长或生长较差，生长者呈红色。
麦康凯平板：红色菌落
伊红美蓝平板：紫黑色，具有金属光泽菌落