实验室常用的细菌作用及其选择
微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)
微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜（油镜）的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜（油镜）的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形（包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等）杆菌：杆状（包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等）螺旋菌：螺旋状（包括螺旋菌、弧菌等）2．细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊结构荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌（白念）生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜（比菌体大1-3倍）致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1）球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌（子弹形）、脑膜炎双球菌（蚕豆形）、四联菌2）杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌（异染颗粒）、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3）螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌（Clostridium Tantenus）；霍乱弧菌（vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛（flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图，已交。
消毒和灭菌——精选推荐
消毒和灭菌消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是至关重要的。
由于严重污染的物品不能迅速地消毒或灭菌，因此了解预清洁的基本原理也同样重要。
关于消毒和灭菌，以下基本原则适用于所有已知不同级别的微生物病原体。
关于清除污染的特殊要求，要根据实验工作的类型以及所操作的感染性物质的特性来决定。
这里所提供的一般性资料，可用于建立标准的和更专门的程序，以处理特定实验室中所涉及的生物危害。
消毒剂的作用时间因具体的品种和生产商而不同。
因此，所有消毒剂使用的推荐意见均必须遵守生产商的说明。
一、定义关于消毒和灭菌有许多不同的术语，下面是生物安全中较常用的：抗菌剂（antimicrobial）能够杀死微生物或抑制它们生长和繁殖的制剂。
防腐剂（antiseptic）能够抑制微生物生长和繁殖但不足将其杀灭的物质。
防腐剂经常应用于体表。
生物杀灭剂（biocide）所有能够杀死生物体的制剂的统称。
化学杀菌剂（chemicalgermcide）用于杀死微生物的化学品或化学混合物。
清除污染（decontamination）去除和／或杀死微生物的任何过程。
该词也用于去除或中和有危害的化学品和放射性物质。
消毒剂（disinfectant）用于杀死微生物的化学品或化学混合物，但不一定杀死其孢子。
消毒剂常用于非生命物体或其表面。
消毒（disinfection）杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其孢子。
灭菌剂（microbicide）能够杀死微生物的化学品或化学混合物。
该词常常可以代替“生物杀灭剂”、“化学杀菌剂”或“抗菌剂”。
杀孢子剂（sporocide）用于杀死微生物和孢子的化学品或化学混合物。
灭菌（sterilization）杀死和／或去除所有微生物及其孢子的过程。
二、实验室材料的清洁清洁是指去除污垢、有机物和污渍。
清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿墩布拖擦。
尘土、污物以及有机物是微生物的栖身之所，并可能影响除污染剂（抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂）的杀菌作用。
实验室如何灭菌，灭菌方法汇总！
实验室如何灭菌，灭菌方法汇总！实验室如何灭菌，灭菌方法汇总！食品论坛昨天消毒和灭菌是微生物实验技术中最基本的操作技术，因此从事药品生产、检验的人员均应了解消毒和灭菌的基本概念、两者的关系，各自的应用方法及其意义，操作时应严格执行相关的操作规程，一方面确保生产与检验工作的效果，另一方面也是对自身安全的保护。
消毒和灭菌的概念：1、消毒：指对病原微生物的繁殖体的致死作用，但不能杀死芽孢等全部微生物，因此消毒是不彻底的，不能代替灭菌。
凡用于消毒的化学药品称为消毒剂，因此人们也常称消毒剂为化学消毒剂。
2、灭菌：杀灭物体中所有活的微生物（含芽孢）的作用，灭菌是采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
通常用物理方法来达到灭菌的目的。
二、消毒和灭菌的关系1、共性：杀灭微生物以控制其污染和防止传播。
2、区别：消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1.干热灭菌法干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC~150ºC的高热，并保持90~120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一。
在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2.湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0～1.1kg/cm2，维持20～30min即可达到灭菌效果。
微生物的培养与应用
3g
1g 0．5 g 0．5 g 0．01 g 30 g 1 000 mL 0．1万单位
(1)依物理状态，该培 液体 养基属于________培 养基；依用途划分， 选择 则属于________培养 基。 (2)根据培养基的配方 可判断出，该培养基 所培养微生物的同化 作用的类型是 异养型 ________，培养的微 生物可能是 酵母菌或霉菌 ________ 。
水不仅是优良溶剂，而且可维
持生物大分子的稳定；无机盐 是细胞内成分和调节物质 外界摄入
2．培养基的种类
(1)按物理状态分类： 培养基种类 特点 用途
液体培养基
固体培养基
不加凝固剂
加凝固剂 (如琼脂)
工业生产
微生物分离、鉴定， 活菌计数，菌种保藏
(2)按功能分类：
种类 制备方法 原理 依据某些微 选择培 培养基中加入 生物对某些 养基 某些化学物质 物质的抗性 而设计 鉴别培 养基 培养基中加入 产生特定的 用途 举例
一、微生物的实验室培养
1．培养基 (1)培养基即人们按照 微生物对营养物质的不同需求 ， 配制出供其生长繁殖的基质。 (2)按物理状态，可将培养基划分为液体 培养基和 固体培 养基(如琼脂培养基)。 （3）按功能，可将培养基划分为 选择 培养基 和 鉴别 培养基(如琼脂培养基)。 (4)培养基一般都含有的成分是：水、碳源、氮源和无机盐 ， 在此基础上还需满足微生物生长对 pH、特殊营养物质 及氧气 的需求。
2．消毒和灭菌 项目 条件 消毒 使用 较为温和 化方法 的理 灭菌 使用 强烈 的理化因素
结果
杀死物体表面或内部 一部分对人体有害的 杀死物体内外 所有的 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子) 孢子
实验室落菌的种类
实验室落菌种类摘要：归纳了组织培养中污染原因及不同污染原因所造成的表观现象,并概括了解决外植体引发污染的方法。
发现棒杆菌属( Corynebac2terium) 、肠杆菌属( Enterobacter) 、葡萄球菌属( S taphylococus) 、地霉属( Geot richum) 、曲霉属( Aspergillus) 、毛霉属( Mucor) 、根霉属( Rhizopus) 等常见的细菌和真菌是引起组培苗严重污染的主要菌类。
取样测试鉴定表明,大部分的微生物来源于无菌接种室内的空气、超净工作台鼓风机排出的气体。
研究了壳聚糖对该菌的抑制作用，探索了3 种分子量及其6 种浓度的壳聚糖对该菌的抑制效果。
壳聚糖对该污染菌有抑制作用，5 万和25 万分子量的抑菌效果高于3000 分子量，浓度越高，抑菌效果越好。
初步证实了壳聚糖对组培污染菌类有很好的抑制作用，在花卉组织培养污染防治方面具有应用价值。
关键词植物组织培养;污染;外植体;灭菌组织培养；污染；壳聚糖；抑制作用从德国植物生理学家Haberlandt1902 年提出设想到现在,植物组织培养的研究已有100 多年的历史,近几十年来植物组织培养技术发展最为迅速。
然而植物组织培养一些技术环节仍然存在不少问题,其中污染、褐化、玻璃化被认为是组织培养的三大杀手。
与褐化、玻璃化相比污染更易发生,给科研和生产实践带来巨大的危害。
因此采取有效的防控措施,降低污染发生的机率,是组织培养成功的重要保障。
在众多污染途径中,外植体携带微生物污染组织培养是最常见且不易解决的问题。
笔者通过对相关文献的分析,并结合实践,归纳了组织培养过程中引起污染的原因及各种污染的表观现象,提出解决外植体引发污染的措施。
1 污染的原因及其表观现象污染就是在组织培养过程中微生物进入培养体系,在外植体上、外植体周围的培养基以及培养基的其他部位生长。
由于植物组织培养过程中的温度、湿度、营养、pH 值等适宜微生物的生长,因此一旦微生物进入培养容器中就将快速繁殖,通过营养竞争、侵蚀植物材料、分泌有毒代谢产物等途径使植物材料发生病害或死亡,造成组织培养的失败。
医学实验室中的常用技术
医学实验室中的常用技术作为一位现代互联网思维的老师，我深知互联网时代的快速发展和技术的广泛应用。
然而，在我们日常生活中，有一项技术却常常被忽视，那就是医学实验室中的常用技术。
医学实验室是现代医学领域中不可或缺的一环，它们通过各种技术手段为医生提供准确的诊断结果和治疗方案。
在本文中，我将介绍一些医学实验室中常用的技术，以及它们在医学领域中的重要作用。
一、血液分析技术血液分析是医学实验室中最常见的检测项目之一。
通过对血液中各种成分的测量和分析，可以获得许多有关患者健康状况的重要信息。
血液分析技术包括血细胞计数、血红蛋白测定、血小板计数等。
这些技术可以帮助医生判断患者是否存在贫血、感染或其他疾病，并为治疗方案的制定提供依据。
二、细菌培养和药敏试验在临床诊断中，细菌感染是常见的问题。
通过细菌培养和药敏试验，医生可以确定患者体内感染的细菌种类，并测试这些细菌对不同抗生素的敏感性。
这些信息对于选择合适的抗生素治疗非常重要，可以避免抗生素滥用和治疗失败。
三、分子诊断技术分子诊断技术是近年来医学实验室中的重要技术之一。
通过对患者体内的DNA、RNA和蛋白质等分子进行检测和分析，可以实现对疾病的早期诊断和个体化治疗。
例如，PCR技术可以用于检测病毒和细菌的核酸，帮助医生确定感染的类型和病毒载量。
此外，分子诊断技术还可以用于肿瘤标志物的检测和基因突变的筛查，为肿瘤的治疗提供有针对性的方案。
四、免疫学检测技术免疫学检测技术是医学实验室中常用的技术之一。
通过检测和分析患者体内的免疫反应，可以确定患者是否感染了某种病原体，或者是否存在某种自身免疫性疾病。
常见的免疫学检测技术包括ELISA、免疫荧光和流式细胞术等。
这些技术可以帮助医生确定诊断和监测疾病的进展，为治疗提供依据。
五、影像学技术影像学技术在医学实验室中也扮演着重要的角色。
通过使用X射线、CT、MRI等设备，医生可以观察和分析患者体内的结构和功能，以诊断和治疗疾病。
好氧池中的菌种类型
好氧池中的菌种类型
好氧池是一种用于废水处理的设施，其中存在着多种类型的微
生物，特别是细菌。
这些微生物在废水处理过程中起着至关重要的
作用。
以下是一些在好氧池中常见的菌种类型：
1. 好氧菌（Aerobic Bacteria），这是一类需要氧气来生存和
繁殖的细菌。
它们通过氧化废水中的有机物质来产生能量，并将其
转化为二氧化碳和水。
好氧菌在好氧池中起着关键作用，帮助降解
废水中的有机物质。
2. 硝化细菌（Nitrifying Bacteria），这些细菌能够将废水
中的氨氮转化为亚硝酸盐和硝酸盐，从而将有毒的氨氮去除，减少
对水体的污染。
硝化细菌通常生长在好氧池的上层，因为它们需要
氧气来进行代谢活动。
3. 硝化脱氮细菌（Denitrifying Bacteria），这些细菌能够
利用硝酸盐和亚硝酸盐作为电子受体，将其还原为氮气，从而完成
脱氮过程。
这有助于减少水体中的氮污染，并维持水体的生态平衡。
4. 铵氧化细菌（Ammonium-Oxidizing Bacteria），这些细菌
能够将废水中的铵盐氧化成硝酸盐，起到类似硝化细菌的作用，帮助净化水体。
好氧池中的这些菌种类型相互配合，共同完成废水处理过程中的氮、磷和有机物质的去除，从而净化水体，保护环境。
因此，了解好氧池中的菌种类型对于废水处理工程至关重要。
微生物学试题及答案
微生物学试题及答案一、名词解释（每小题4分，共5小题20分）1.无菌技术：在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。
2.菌落：固体培养基中，单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团是菌落。
3.平板：是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式，是冷却凝固后固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面称作平板。
4.发酵：发酵是指在无氧条件下，底物脱氢后产生的还原力[H]不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。
5.培养基：人工配制的、适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物用的混合营养基质。
二、填空题（每空0.5分，共6小题12分）1细菌基本形态可以分为、和(本题1.5分)2.霉菌菌丝有两类，一类是，如和，另一类是，例如和(本题3分)3.在某些原核生物细胞壁外，会着生一些特殊的附属物，包括、、、等。
(本题2分)4.根据营养物质在机体中生理功能的不同，可以将它们分为、、、、5大类。
(本题2.5分)5.微生物的系统命名采用法，即加（本题1.5分）6.病毒粒子衣壳对称体制包括：、和（本题1.5分）三、选择题（每小题1分，共10小题10分）1.产生假根是（）的形态特征。
A.根霉B.酵母菌C.青霉D.曲霉2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是（）。
A.蛋白质B.肽聚糖C.脂多糖D.磷壁酸3.微生物从糖酵解途径获得（）ATP分子。
A.2个B.4个C.36个D.38个4.处于对数生长期的细菌其特点是（）。
A.生长缓慢B.生长迅速C.大多数死亡D.繁殖代时长5.深层穿刺接种细菌到试管半固体培养基中（）。
A.可以观察细菌是否能运动B.除去代谢废物的一个机会C.增加氧气D.增加钾和钠离子的数目6.加压蒸汽灭菌锅灭菌参数是（）。
A.100℃,30minB.180℃,10minC.121℃,20～30minD.160℃,60min7.霉菌适宜生长的pH范围为（）。
细菌的纯培养技术—消毒与灭菌
理化因素对微生物作用的方式 理化因素控制微生物生长繁殖的方式包括杀菌、溶菌、抑菌。 OD值
活菌计数
影响理化因子作用效果的因素：理化因子的强度或浓度、 作用时间长短、 微生物种类、 微生物生理状态等。
一、物理因素对微生物生长的控制
常用的物理因素：加热法、过滤法和辐射法
（一）加热灭菌
当温度超过微生 物的最高生长温 度时，就会出现 致死效应。高温 可引起蛋白质、 核酸和脂肪等重 要生物大分子降 解或改变其空间 结构等，从而使 其功能丧失。
（b）膜滤器（不耐热的液体成分，如 酶或维生素溶液、血清等）由硝酸纤维 素或醋酸纤维素制成。
（c）核孔滤器（液 体过滤）
（a）深度滤器（进 入发酵罐的空气） 介质：棉花、玻璃纤 维、石棉、多层滤纸 等。
优点：不破坏营养成 分和物质的化学性质 缺点：病毒除不掉 （0.22um孔径的滤膜）
膜滤器
超净台
防止措施： 1）特殊加热灭菌法 分别灭菌（糖液；磷酸盐等）； 低压灭菌（含糖类等培养基采用115 ℃灭菌15min） 间歇灭菌 2）其他方法 加入0.01％EDTA或0.01％NTA等螯合剂到培养基中，防止 金属离子发生沉淀； 用气体灭菌剂如环氧乙烷等对个别成分进行灭菌； 过滤除菌法
(二) 辐射灭菌
二、化学因素对微生物生长的控制
抗微生物剂 (Antimicrobial agent)
生物合成的天然产物 人工合成的化合物
一类能够杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质
化学物 质的抗 微生物 能力的 测定
液体培养法 最低抑制浓度（MIC）试验 最低抑制浓度：抑制某病原菌生长的最低浓度。
平板培养法 抑菌圈（zone of inhibition）试验
工业生产常用的消毒剂
（整理）各种微生物生化试验方法原理.
（整理）各种微⽣物⽣化试验⽅法原理.各种微⽣物⽣化试验⽅法原理通常利⽤⽣化试验的⽅法，检测细菌对各种物质的代谢作⽤及其代谢产物，称为细菌的⽣化反应，常⽤于细菌的鉴别。
1、糖类分解产物（1）糖发酵试验（carbohydrate fermentation test）不同种类的细菌对糖的分解利⽤能⼒不同，⼀般以能否分解某种糖，是否产酸产⽓等现象来鉴别。
例如⼤肠杆菌能分解葡萄糖和乳糖，产酸且产⽓；⽽伤寒杆菌只分解葡萄糖产酸不产⽓，且不分解乳糖。
这是因为⼤肠杆菌分解葡萄糖等产⽣甲酸，经甲酸解氢酶的作⽤⽣成H2和CO2。
⽽伤寒杆菌⽆此酶，故分解葡萄糖只产酸不产⽓。
（2）VP试验（V oges-Proskauer test）产⽓杆菌将分解葡萄糖产⽣的两分⼦丙酮酸脱羧，⽣成⼀分⼦⼄酰甲基甲醇。
⼄酰甲基甲醇在碱性溶液中被空⽓中氧⽓氧化，⽣成⼆⼄酰，⼆⼄酰可与培养液中含胍基的化合物（如蛋⽩胨中的精氨酸）反应，⽣成红⾊的化合物，此为VP试验阳性。
⼤肠杆菌分解葡萄糖不⽣成⼄酰甲基甲醇，故VP试验阴性。
（3）甲基红试验（methyl red test）⼤肠杆菌和产⽓杆菌均属G-短杆菌，且都能分解葡萄糖、乳糖产酸产⽓，⼆者不易区别。
但两者所产⽣的酸类和总酸量不⼀：⼤肠杆菌可产⽣甲酸、⼄酸、乳酸、琥珀酸等，⽽产⽓杆菌只产⽣甲酸、⼄醇及⼄酰甲基甲醇。
故⼤肠杆菌培养液PH在4.5以下，加⼊甲基红指⽰剂呈红⾊，为甲基红试验阳性；产⽓杆菌培养液PH在5.4以上，加⼊甲基红后呈桔黄⾊，为甲基红试验阴性。
（4）枸橼酸盐利⽤试验(citrate utilization test）产⽓杆菌在以枸橼酸盐为唯⼀碳源的培养基上⽣长，分解枸橼酸盐产⽣CO2，并转变为碳酸盐，使培养基由中性变为碱性，含溴麝⾹草酚蓝（BTB）指⽰剂的培养基由淡绿⾊变为深兰⾊，此为枸橼酸盐利⽤试验阳性。
⼤肠杆菌不能利⽤枸橼酸盐，故在此培养基上不能⽣长，培养基仍为绿⾊。
2、蛋⽩质及氨基酸的分解产物（1）硫化氢试验（hydrogen sulfide test）有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸等）产⽣H2S，如遇醋酸铅或硫酸亚铁，能⽣成⿊⾊的硫化物，为硫化氢试验阳性。
专题二 微生物的培养与应用
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养一、培养基1.概念：人们按照对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2.种类（1）按物理状态来分：〃固体培养基：不加凝固剂，用于工业生产。
〃液体培养基：加凝固剂（如琼脂），用于微生物分离、鉴定，活菌数，保藏菌种等。
（琼脂是一种从红藻中提取出的多糖，在98°C 以上熔化，44°C 以下凝固，在常规培养条件下呈固态。
琼脂中的多糖不易被微生物分解，所以一般不用做碳源。
）（2）按功能来分：〃选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物生长。
用于培养、分离出特定的微生物。
常见选择培养基如下：加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞〃鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品。
用于鉴别不同种类的微生物。
（可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌。
若有，菌落呈深紫色并带有金属光泽。
）（3）按成分来分：〃天然培养基〃合成培养基3.培养基的营养要素不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH 、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
例如，乳酸杆菌需添加维生素，霉菌时需将pH 调至酸性，细菌pH 调至中性或微碱性，厌氧微生物需无氧条件。
（1） 碳源：构成生物细胞、生物体及细胞代谢产物，有些为异养生物提供能量。
主要来源与CO2、微生物 病毒细菌放线菌 原核生物界 病毒界NaHCO3等无机化合物和糖类、脂质、花生粉饼、石油等有机化合物。
（2）氮源：用于合成蛋白质核酸及含氮代谢产物，也可为异氧微生物提供能源。
1-2微生物的培养与应用
微生物的培养与应用
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考纲点击 1. 微生 物的 分 离 和培养 2. 培养 基对 微 生 物的选择作用
权威解读 学会对微生物进行培养,并利用平板划线法和稀释涂 布平板法对微生物进行分离 学会配制选择培养基,并尝试从土壤中分离某些细菌 (如分解纤维素的细菌和分解尿素的细菌)
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解析:(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,使用的 培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基,通过控制碳源这种营养成分, 来促进能高效降解原油的菌株的生长,抑制其他微生物的生长。 (2)菌种纯化培养时,常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。 (3)当固体培养基上长出单菌落后,可通过比较菌落周围分解圈的大小, 来判断菌株降解原油能力的大小。 一般来说,分解圈越大说明该菌株的降解 能力越强,反之则越弱。 (4)实验室培养微生物的过程中,常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、 试管口、瓶口等进行灭菌;用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌; 用干热灭菌法对玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等进行灭菌。实验操 作应在酒精灯火焰旁进行,因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境,可防止 微生物的污染。
答案:(1)原油 选择 (2)平板划线法 稀释涂布平板法 (3)强 (4) 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
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考点二 微生物的纯化培养技术
1.原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个 菌落就是纯化的细菌菌落。 2.微生物的接种方法 (1)平板划线法:平板划线法中细胞的分离或稀释过程发生在接种环在 固体平板表面上的划线和移动过程中。 在线的开始部分,微生物往往连在一 起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成纯种的单个菌落,几种 平板划线方法示意图如下:
实验室常用的细菌作用及其选择
实验室常用的细菌作用及其选择实验室中常用的细菌有很多种类，它们可以用于不同类型的实验和研究。
这些细菌具有各自独特的作用和选择。
以下是一些常用的细菌以及它们的作用和选择。
1. 大肠杆菌（Escherichia coli）作用：大肠杆菌是实验室中最常用的细菌之一、它被广泛应用于分子生物学、遗传学、微生物学等领域的研究和实验。
大肠杆菌可以被用来产生重组蛋白、提供基因表达的载体和作为宿主细胞。
此外，大肠杆菌也可以用于测定抗生素的敏感性和检测致病菌。
选择：选择适当的大肠杆菌菌株是十分重要的。
一般来说，常用的菌株有DH5α、BL21(DE3)、DH10B等，这些菌株多用于常规实验。
根据实验需要，也可以选择特殊的菌株，如TOP10和Stbl3用于克隆步骤，还有一些菌株是专门用于获得高质量的DNA片段或对毒素敏感的菌株。
2. 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）作用：金黄色葡萄球菌是一种常见的致病菌，可以引起多种感染。
在实验室中，它主要用于研究抗生素的敏感性测试和药物筛选。
此外，金葡菌还可以用于研究细菌生长、病原菌致病机制以及对宿主细胞的侵染。
3. 白色念珠菌（Candida albicans）作用：白色念珠菌是一种常见的真菌，可以引起口腔、阴道和皮肤等部位的感染。
实验室中常用白色念珠菌来研究真菌感染的致病机制以及抗真菌药物的筛选和评估。
4. 绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）作用：绿脓杆菌是一种常见的致病菌，可以引起呼吸道、泌尿道、皮肤等感染。
实验室中常用绿脓杆菌来研究其生长、致病机制以及对抗生素的敏感性。
组培实验室常见消毒方法优劣比较
组培实验室常见消毒方法优劣比较组培实验室是生命科学及相关学科实验室建设中必备的实验室。
组培实验室的消毒是实验室日常管理工作的重要环节，直接关系着组培实验的成功与否和组培幼苗的质量高低。
组培实验室的消毒一般又可分为环境消毒、培养基消毒和外植体的消毒。
培养基的消毒主要是在高压灭菌锅中进行，在此不再赘述。
环境消毒和外植体的消毒则有多种方法，这些方法各有优劣，使用不当时还会对人体产生伤害，为此，笔者特对这些典型方法进行分析比较，为组培实验室的科学管理提供一些参考。
1 组培实验室的环境消毒保持组培实验室的空气清洁度是减少组培污染的重要条件，用于实验室消毒的常规消毒方法包括紫外线照射法、甲醛熏蒸法、新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)法等，比较新的方法有中草药消毒法。
1.1 紫外线照射法紫外线是波长在10-400 nm之间辐射光的总称，能引起细菌、病毒等微生物遗传物质的结构发生变化，从而影响DNA复制、RNA转录和蛋白质的翻译，导致病菌或病毒死亡。
此外，紫外线辐射所产生的臭氧和各种自由基可损伤蛋白质和酶分子，导致功能改变。
紫外线消毒具有广谱性，可杀灭细菌、病毒、真菌、支原体等各种微生物。
紫外消毒具有较高的杀菌效率，且由于未使用化学药剂，消毒过程中不会产生对人体和环境有害的副产物。
该技术运行维护简单，费用较低。
采用室内悬吊式紫外线消毒时，室内安装紫外消毒灯的数量为每平方不少于1. 5 W，照射时间不少于30 min。
但需要指出的是，过量的紫外线照射对人体有一定的危害乃至致癌作用。
紫外线作用于中枢神经系统，可出现头痛、头晕、体温升高等症状。
过量辐射会诱发皮肤癌。
紫外辐射对眼睛的损伤特别明显，严重时可能诱发白内障。
因此，当组培实验室在用紫外消毒期间，工作人员不要呆在正消毒的空间内，切忌用眼睛注视紫外灯。
特别的，如超净工作台内的紫外灯打开消毒时，应避免将手长时间暴漏于紫外灯下。
一般在接种室用紫外线消毒后，不要立即进入接种室，此时室内充满高浓度的臭氧，会对人体，尤其是呼吸系统造成伤害。
探究抗生素对细菌的选择作用实验注意事项
探究抗生素对细菌的选择作用实验注意事项抗生素对细菌的选择作用是指抗生素在体内杀灭或抑制对细菌的生长和繁殖，但对人体细胞造成较小或无害的影响。
为了探究抗生素对细菌的选择作用，需要进行一系列实验。
以下是进行这类实验时需要注意的事项：1.实验室安全措施：在进行实验前，必须熟悉实验室的安全措施，并正确佩戴个人防护设备，如实验室白大褂、手套和护目镜等，以防止接触和感染细菌。
2.培养基制备：选择合适的培养基来培养细菌。
培养基应该是无菌的，以避免其他细菌的污染。
同时，需要严格控制培养基的成分和pH值，以确保实验的准确性和重复性。
3.抗生素选择：根据实验目的选择合适的抗生素。
不同抗生素对不同细菌有不同的选择性，因此选用适当的抗生素可以更好地展示抗生素对细菌的选择作用。
同时，要确保抗生素是新鲜的，以避免其效果受到降解或失活的影响。
4.细菌培养：在实验中使用纯种细菌进行培养。
细菌应从冷冻保存物或已培养的菌群中提取，并储存于无菌条件下，以确保其纯度和活性。
5.抗生素浓度：确定合适的抗生素浓度以进行实验。
在初始实验中可以使用不同浓度的抗生素，并观察细菌在不同浓度下的生长和存活情况。
如果抗生素浓度过高，可能无法观察到对细菌的选择性作用，反之亦然。
6.控制实验组和对照组：在实验设计中，应该设立对照组来进行比较。
对照组是没有抗生素添加的培养基，用于观察细菌在没有抗生素存在的情况下的生长情况。
另外，可以设置不同浓度的抗生素实验组，以观察细菌对不同浓度的抗生素的敏感性。
7.实验时间和温度：确定实验进行的时间和温度条件。
细菌培养时间和温度应根据具体实验目的和细菌种类进行选择，以确保实验结果的准确性和可重复性。
8.结果记录和数据分析：实验过程中应该记录实验条件、操作步骤和结果。
实验结果可通过观察菌落的数量、大小或形态等来进行定性或定量分析。
数据分析可以使用统计学方法，如方差分析和t检验等。
9.伦理道德：在进行实验时，应遵循伦理原则和实验规范。
探究抗生素对细菌的选择作用实验注意事项
在进行抗生素对细菌的选择作用实验时，需要注意以下几点：
1. 实验室安全：确保实验室环境的安全，遵守实验室操作规范，佩戴适当的个人防护装备，如实验手套和实验室外套。
2. 消毒操作：在进行实验前，对实验器材、培养基和培养皿进行彻底的消毒处理，以防止细菌的交叉污染。
3. 抗生素选择：选择适当的抗生素，确保其对目标细菌具有高效的杀菌作用。
可以参考已有的文献或实验室经验进行选择。
4. 抗生素浓度：确定合适的抗生素浓度，以确保能够有效地抑制或杀死细菌。
可以进行一系列浓度梯度的实验，以确定最低有效浓度。
5. 细菌培养条件：细菌的培养条件应符合其生长要求，包括适当的培养基、温度和氧气浓度等。
确保细菌在实验过程中能够正常生长。
6. 对照组设置：在实验中设置适当的对照组，如阳性对照（细菌在无抗生素存在下的生长情况）和阴性对照（无细菌存在
的培养基），以便对实验结果进行比较和分析。
7. 实验重复：进行足够的实验重复，以确保实验结果的可靠性和统计学意义。
建议至少进行三次独立实验。
8. 数据分析：对实验结果进行准确的数据记录和分析，包括细菌生长情况、抗生素浓度和细菌存活率等指标。
可以使用适当的统计方法进行数据处理和结果呈现。
9. 实验废弃物处理：实验结束后，将实验废弃物进行适当的处理，遵守实验室废物管理规定，以防止对环境和人体造成污染和伤害。
10. 文献参考：在进行实验前，建议查阅相关的文献和研究，了解已有的实验方法和注意事项，以便更好地设计和执行实验。
细菌的培养法实验心得体会
细菌的培养法实验心得体会细菌的培养法实验心得体会细菌的培养法是微生物实验室中常用的技术之一，在研究细菌的生长、代谢、繁殖等方面起着重要的作用。
通过细菌的培养，我们可以了解细菌的特性和行为，为细菌相关研究提供实验基础。
在进行细菌的培养法实验后，我有以下一些心得体会。
首先，细菌的选取要慎重。
在实验中，选择适合自己研究目的的细菌株非常重要。
不同的细菌对培养条件的要求各不相同，所以需要根据自己的实验目的来选择合适的细菌株。
在选择细菌株时，要考虑到其特性、生长速度、适宜温度和培养基等因素。
同时，保证选取的细菌株纯度也是必须的，否则可能会影响实验结果的准确性。
其次，培养基的制备要注意卫生和配比。
培养基是细菌生长和繁殖的基础，因此制备培养基时要注意卫生。
实验操作时要注意手部卫生和实验器材的消毒。
在配比培养基时，要确保配方的准确性，以满足细菌生长的营养需求。
此外，培养基的pH值也是需要注意的，因为不同细菌对pH值有不同的适应能力，要根据细菌株的特性来调整培养基的pH值。
再次，培养条件的控制要严谨。
培养条件是影响细菌生长繁殖的重要因素，因此在进行细菌培养实验时要严格控制培养条件。
温度是培养条件中最基本的一个因素，要根据选取的细菌株来调整培养温度。
不同细菌对温度的适应范围不同，因此需要根据细菌株的要求来进行温度调控。
此外，光照、氧气和湿度等因素也需要进行适当的控制。
在培养箱中，要确保光照强度适中，避免细菌受过强光线的影响；氧气的供给要充足，但也要注意不同细菌对氧气的需求不同；湿度应该保持在适宜的范围内，过高或过低都会对细菌的生长产生不利影响。
最后，对培养结果的观察要仔细。
细菌的培养需要一定的时间，而在此期间要对培养结果进行仔细的观察。
细菌的生长状态、群落形状、色素变化等都是可以观察的指标。
需要注意的是，观察时要避免对细菌产生不必要的干扰，一些不必要的操作可能会导致细菌群落的破坏或质量的下降。
通过细菌的培养法实验，我对细菌的生长与繁殖有了更深入的了解。
微生物学实验室常用试剂与培养基
微生物学实验室常用试剂与培养基第一节常用试剂及其使用方法一、诊断用纸片⑴杆菌肽纸片（0.04U/片）：抑菌圈>10mm为敏感。
质控菌株: D群链球菌阴性, A群链球菌阳性。
⑵ SMZ纸片（1.25μg/片、23.75μg/片）：出现抑菌圈即为敏感。
质控菌株：D群链球菌阳性， A群链球菌阴性。
⑶新生霉素纸片（5.0μg/片）：抑菌圈≥16mm为敏感。
质控菌株：表皮葡萄球菌阳性，腐生葡萄球菌阴性。
⑷O129纸片、奥普托欣（Optochin）纸片：参见第五节《生化试验培养基》。
二、诊断用血清1.沙门菌属诊断血清⑴ A-F群O多价诊断血清。
⑵特异O群因子诊断血清：常用的有O2，O4，O7，O9，O10诊断血清。
⑶特异H因子诊断血清常用的有Ha，Hb，Hc，Hd，Hgm，Hi，Hf、Vi 因子诊断血清。
2.志贺菌属诊断血清志贺菌属4种多价血清：痢疾志贺菌Ⅰ、Ⅱ血清，福氏志贺菌多价血清及分型血清（1～6型），宋内志贺菌诊断血清，鲍氏志贺菌多价血清及分型血清。
3.致病性大肠埃希菌诊断血清肠致病性大肠埃希菌（EPEC）诊断血清，产肠毒素大肠埃希菌（ETEC）诊断血清，肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）诊断血清，肠出血性大肠埃希菌（EHEC）诊断血清O157： H 7。
4.霍乱弧菌O1、O139混合多价诊断血清及稻叶、小川、彦岛O139分型血清5.脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群血清6.链球菌分类诊断血清7.肺炎链球菌诊断血清8.耶尔森菌诊断血清三、常用染色液1.革兰染色液⑴结晶紫溶液A液：结晶紫20g，95%乙醇20 ml； B液：草酸铵0.8g，蒸馏水80 ml。
染色前24h将A液、 B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。
⑵碘液:碘1g，碘化钾2g，蒸馏水300ml。
将碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升蒸馏水, 使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至碘、碘化钾完全溶解。
最后补足水量。
也可用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。
噬菌体的富集培养原理
噬菌体的富集培养原理噬菌体是一种可以寄生于细菌并繁殖的病毒，它具有选择性地感染特定种类的细菌。
在实验室中，噬菌体的富集培养是一种常用的技术手段，用于从复杂的细菌混合物中富集出特定的噬菌体。
本文将详细介绍噬菌体的富集培养原理及其相关技术。
一、噬菌体的富集培养原理噬菌体的富集培养是基于噬菌体与细菌的宿主范围选择性感染的原理。
噬菌体通过识别宿主细菌表面的特定受体结构，使其与细菌细胞结合并侵入宿主细胞内部。
一旦噬菌体进入宿主细胞，它会利用宿主细胞的代谢机制来复制自己的遗传物质，并最终导致宿主细胞的溶解释放。
在噬菌体的富集培养过程中，首先需要选择一种已知的宿主细菌，该细菌具有特定的受体结构，可以与目标噬菌体发生特异性相互作用。
然后，将含有目标噬菌体的混合物与宿主细菌共同培养在含有适当营养物质和温度的培养基中。
由于噬菌体对宿主细菌具有高度选择性感染作用，只有与目标噬菌体相互作用的宿主细菌才能被感染并产生噬菌体。
随着培养的进行，目标噬菌体会逐渐增多，而其他细菌则会被限制生长或被噬菌体感染并溶解。
通过适当的处理方法，如离心、过滤或凝胶电泳等，可以将细菌残渣和细菌碎片从培养物中分离出来，最终获得纯净的目标噬菌体。
二、噬菌体的富集培养技术噬菌体的富集培养技术主要包括三个步骤：预处理、感染和富集。
1. 预处理：将待检样品进行预处理，如离心、过滤或加热等，以去除杂质和不需要的细菌。
2. 感染：将预处理后的样品与已知宿主细菌一起共同培养在含有适当营养物质和温度的培养基中。
噬菌体会选择性地感染与其具有相应受体结构的细菌，从而产生新的噬菌体。
3. 富集：通过适当的处理方法，如离心、过滤或凝胶电泳等，将细菌残渣和细菌碎片从培养物中分离出来，最终获得纯净的目标噬菌体。
噬菌体的富集培养技术在微生物学研究、生物药品生产和基因工程等领域具有广泛的应用。
通过富集培养，可以从复杂的细菌混合物中快速、高效地获得目标噬菌体，并进一步研究其寄生机制、基因组结构和功能等。
探究.实践 抗生素对细菌的选择作用
探究·实践探究抗生素对细菌的选择作用一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。
在实验室连续培养细菌时，如果向培养基中添加抗生素，耐药菌有可能存活下来。
目的要求通过观察细菌在含有抗生素的培养基上的生长状况，探究抗生素对细菌的选择作用。
材料用具经高温灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基及固体培养基平板，细菌菌株（如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等），含有抗生素（如青霉素、卡那霉素等）的圆形滤纸片（以下简称“抗生素纸片”），不含抗生素的纸片，镊子，涂布器，无菌棉签，酒精灯，记号笔，直尺等。
方法步骤1．用记号笔在培养皿的底部画2条相互垂直的直线，将培养皿分为4个区域，分别标记为①~④。
2．取少量细菌的培养液，用无菌的涂布器（或无菌棉签）均匀地涂抹在培养基平板上。
3．用无菌的镊子先夹取1张不含抗生素的纸片放在①号区域的中央，再分别夹取1张抗生素纸片放在②~④号区域的中央，盖上皿盖。
4．将培养皿倒置于37 ℃的恒温箱中培养12~16 h。
5．观察培养基上细菌的生长状况。
纸片附近是否出现了抑菌圈？如果有，测量和记录每个实验组中抑菌圈的直径，并取平均值。
6．从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌，接种到已灭菌的液体培养基中培养，然后重复步骤2~5。
如此重复几代，记录每一代培养物抑菌圈的直径。
注意：实验结束后，应将耐药菌、培养基、纸片等进行高温灭菌处理。
结果和结论1. 在培养基上是否有细菌生长？在放有抗生素纸片的区域呢？2. 在连续培养几代后，抑菌圈的直径发生了什么变化？这说明抗生素对细菌产生了什么作用？讨论1. 为什么要从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌？2. 你的数据是否支持“耐药菌是普遍存在的”这一说法？说说你的理由。
3. 在本实验的培养条件下，耐药菌所产生的变异是有利还是有害的？你怎么理解变异是有利还是有害的？4. 你认为你的数据和结论是有效的吗？（提示：将你的数据和结论与其他同学的进行比较。
）5．滥用抗生素的现象十分普遍。
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第一篇：JM109，DH5a，BL21这些感受态有何区别1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac －proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1第二篇：JM110或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。
常用的菌株都会产生dam,dcm，从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割，如FbaI和MboI等，一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。
大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响，如XbaI, BclI等。
而且甲基化只发生在特定序列，以XbaI为例，只有在位点序列旁出现GA或TC，该XbaI位才会被甲基化。
而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法：（1）选用上述酶的同功酶，如Sau3AI，DNA识别切割位点与MboI相同；但不受甲基化影响；（2）利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备，如E.coli JM110和链霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。
E.coli JM110要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化.第三篇：各种感受态细胞的区别用途特征Xl1-Blue菌株基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。
特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。
用途：分子克隆和质粒提取。
BL21(DE3)菌株基因型：F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])。
特点：该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。
T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合于非毒性蛋白的表达。
用途：蛋白质表达。
BL21(DE3)ply菌株基因型：F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。
特点：该菌株带有pLysS，具有氯霉素抗性。
此质粒还有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达。
适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
用途：蛋白质表达DH5α菌株基因型：F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZ ΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ–特点：一种常用于质粒克隆的菌株。
其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC 载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。
recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
JM109菌株基因型：endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proA e14- [F ‘ traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。
特点：部分抗性缺陷，适合重复基因表达, 可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。
用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
第四篇：E.coli Electro-CellsE.coli Electro-Cell JM109制品名 TaKaRa Code 包装量价格(人民币元)E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300■ GenotypeE.coli JM109recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1,Δ(lac-proA/F'[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]■细胞浓度1～2×1010 Bacteria/ml■保存-80℃■制品说明用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌，从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。
电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一，比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高，在转化少量DNA时，特别能发挥其特有的威力。
TaKaRa使用独自开发的菌体培养法，制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。
■细胞种类α-互补性选择宿主E.coli JM109E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F'编码的lacZΔM15的结合，显示β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)。
利用这一特性，可以很容易鉴别重组体菌株。
因为具有F'质粒，除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外，也可作为M13载体DNA的宿主，调制单链DNA。
■质量标准使用10 pg的质粒DNA进行转化时：50 μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmidF'质粒的稳定性检测对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后，在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上，产生的白色菌落在1%以下。
50 μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。
--------------------------------BL21（DE3）pLysS细菌菌株BL21（DE3）pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。
BL21（DE3）pLysS对λDE3（1）是溶源性的。
λDE3含有T7噬菌体基因I，编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。
BL21（DE3）pLysS含有pLysS质粒，他携带编码T7溶菌酶基因。
在T7启动子控制下，T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。
包装：P9811 500μl/tbs/tb095/tb095.pdf第五篇：JM109，DH5a，BL21感受态有何区别1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac －proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。